威靈仙的研究進展

王云賀 韓 梅 楊利民

【摘要】 對藥用威靈仙的研究狀況,包括品種資源、威靈仙藥材及其類同品、易混品、偽品的鑒別研究及質(zhì)量評價、化學成分、藥理研究現(xiàn)狀等方面的研究進行綜述,并對藥用威靈仙今后研究發(fā)展的方向作了展望。

【關(guān)鍵詞】 威靈仙 品種資源研究 質(zhì)量評價 化學成分 藥理作用

威靈仙(Clematis chinensis Osbeck),又稱粉靈仙、靈仙、黑須公、鐵靈仙等,為毛茛科植物威靈仙的根。威靈仙味辛咸,性溫,有微毒,具有祛風濕,通絡(luò)止痛之功效,主產(chǎn)江蘇、安徽、浙江等地[1]。臨床上主要用于治療風濕痹痛,肢體麻木,筋脈攣急,屈伸不利等癥狀[2]。中藥威靈仙的研究進展概述如下。

1.品種資源研究

自古以來威靈仙品種非常復雜。黃穎雅結(jié)合對有關(guān)文獻的考證發(fā)現(xiàn):全國有9個科23種商品的根以“威靈仙”之名入藥。其中有威靈仙、東北鐵線蓮、棉團鐵線蓮、柱果鐵線蓮、山木通、鐵線蓮、毛蕊鐵線蓮、太行鐵線蓮、錐花鐵線蓮、單葉鐵線蓮、兩廣鐵線蓮、毛柱鐵線蓮、小木通、草珊瑚等[3]。然而,2005年版的《中國藥典》[2]規(guī)定正品威靈仙的原植物為毛茛科鐵線蓮屬威靈仙(Clematis chinensis Osbeck)、棉團鐵線蓮(Clematis hexapetala Pall.)、東北鐵線蓮(Clematis manshurica Rupr.)的根及根莖。

2.威靈仙藥材及其類同品、易混品、偽品的鑒別研究及質(zhì)量評價

長期以來,威靈仙藥材原植物來源混亂,所以在藥材鑒別,質(zhì)量評價等方面的研究較多[4—9]。隨著科學技術(shù)的提高,人們發(fā)明了更加簡便、準確的方法。2002年程存歸等人采用傅里葉變換紅外光譜(FTIR)法,借助OMNI采樣器直接測定了中藥材威靈仙及其偽品華東蒺藜、山木通和毛柱鐵線蓮的紅外光譜,結(jié)果發(fā)現(xiàn)正偽品的紅外光譜差別較大,所以認為FTIR法可以直接、快速、準確地對威靈仙藥材及其偽品進行區(qū)別鑒定[10]。隨著中藥研究的發(fā)展,中藥的質(zhì)量研究逐漸從單一有效成分或指標性成分的定性、定量分析轉(zhuǎn)向有效成分群體分析,并建立了相應(yīng)的指紋圖譜。2006年曾映旭[11]等人采用氣相—質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC—MS)對24個來源不同的威靈仙樣品中的揮發(fā)油進行指紋圖譜分析,并運用主成分分析法及K—均值聚類法對其進行化學模式識別研究。結(jié)果表明,所研究的24個威靈仙樣品可分為兩類,其中19個威靈仙藥材樣品化學成分相近,聚為一類;另外5個威靈仙藥材化學成分與主體威靈仙藥材成分間存在著一定差異,被聚為另一類,這為威靈仙的質(zhì)量控制提供了理論依據(jù)。建立的主體威靈仙藥材的指紋圖譜化學模式可作為中藥威靈仙的質(zhì)量評價標準。2007年方洪壯等人運用遞歸漸進光譜投影法,探索中藥材東北鐵線蓮與棉團鐵線蓮石油醚提取物的色譜指紋特征化學成分的異同。經(jīng)比較發(fā)現(xiàn),東北鐵線蓮和棉團鐵線蓮的色譜指紋特征中,至少分別有8種和6種單獨的化學成分存在,兩者共有的化學成分有14種,這一結(jié)果為威靈仙內(nèi)在的質(zhì)量評價和不同產(chǎn)地、不同品種樣品之間的鑒別提供科學依據(jù)[12]。2009年謝樂[13]等人采用HPLC測定不同產(chǎn)地威靈仙中齊墩果酸的含量,為中藥威靈仙的深入開發(fā)研究和質(zhì)量控制提供了科學依據(jù)。

3.化學成分

2005年版中藥大辭典記載威靈仙的根含白頭翁素、白頭翁內(nèi)酯、甾醇糖類、皂苷類、內(nèi)酯、酚類、氨基酸等化合物。葉含內(nèi)酯、酚類、三萜、氨基酸和有機酸等物質(zhì)。棉團鐵線蓮葉含香精類、山奈酚等黃酮類及生物堿、揮發(fā)油、樹脂等,不含皂苷、鞣質(zhì)或強心苷類。東北鐵線蓮的根含三萜皂苷:鐵線蓮苷A(Clematoside A)、鐵線蓮苷A′、鐵線蓮苷B、鐵線蓮苷C[2]。

3.1 三萜皂苷類化合物威靈仙的根中含有極其豐富的皂苷。He Ming等從水蒸氣蒸餾提取后的藥渣中分得一種新的皂苷clemaphenol A[14]。Mimaki Y從威靈仙根的甲醇提取液中分得8種皂苷,其中五種為新的齊墩果酸型三萜皂苷等[15]。Shao Bao—ping 等從威靈仙根的乙醇提取液中分得13種皂苷,其中得三種新的皂苷和一已知化合物[16,17]。

3.2 揮發(fā)性化合物何明等采用水蒸汽蒸餾法和超臨界萃取技術(shù),從威靈仙中各自提取到揮發(fā)性成分。從蒸餾提取物中鑒定出25種化合物,從超臨界提取物中鑒定出21種化合物[18]。徐濤等[19]對峨眉山的威靈仙進行了分析,發(fā)現(xiàn)其揮發(fā)油含有50種化合物東北鐵線蓮果實的揮發(fā)油含有烷類、酸類、醇類、脂類、酮類化合物50種[20]。另有文獻報道,從這種植物的花分離鑒定到七種化合物[21]。對威靈仙揮發(fā)油成分的分析、總皂苷分離純化的方法及工藝條件方面的研究較多[18,20,22,23],目前最先進的方法是將GC—MS法與交互移動窗口因子分析法(AMWFA)結(jié)合,在二維數(shù)據(jù)和PTRI之上的化學統(tǒng)計學能為復雜威靈仙揮發(fā)油的分析提供一個快速的、精確的、互補的、方便的方法。

3.3 其他Shi She—po等[24,25]從東北鐵線蓮根及根莖中發(fā)現(xiàn)三種新酚苷化合物,和三種新的生物堿。Dong Cai—xia等[26]研究發(fā)現(xiàn)棉團鐵線蓮根及根莖中12種黃酮類化合物。

4.藥理作用

4.1 抗炎鎮(zhèn)痛和松弛平滑肌作用徐先祥等人研究發(fā)現(xiàn),威靈仙總皂苷38、75、150mg/kg能明顯延長小鼠熱板痛閾時間,減少醋酸致小鼠扭體次數(shù)增多,減輕二甲苯致小鼠耳腫脹程度增大,威靈仙總皂苷25、50、100mg/kg對大鼠雞蛋清誘導的足腫脹及棉球誘導的大鼠肉芽腫均有顯著的抑制作用,說明威靈仙總皂苷具有顯著抗炎、鎮(zhèn)痛作用[27] 。威靈仙能夠顯著抑制紙片引起的大鼠肉芽組織生長,證明威靈仙具有抗炎鎮(zhèn)痛和松弛平滑肌作用[28]。

4.2抗腫瘤作用威靈仙中的總皂苷具有較好的抗癌活性。邱光清等人研究總皂甙(CCS)對體外培養(yǎng)的艾氏腹水瘤、肉瘤S180腹水型和肝癌腹水型細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為242 g/ml,193g/ml和130g/ml。CCS 0.25 g/kg、0.5 g/kg和1 g/kg劑量對小鼠移植性肉瘤S180的瘤重抑制率分別為40.3%,55.1%和53.0%。但CCS (0.2 g/kg、0.4 g/kg和0.8 g/kg)對肉瘤小鼠S180A的生存期沒有明顯影響[29]。東北鐵線蓮的乙酸乙酯提取物具有一定的抗腫瘤活性,而且抑瘤作用具有一定的劑量依賴關(guān)系[30]。

4.3抗氧化作用威靈仙多糖具有清除羥基自由基和超氧陰離子自由基的作用,降低H2O2 誘導的紅細胞氧化溶血率,可顯著提高肝損傷小鼠血清和肝臟中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活力,降低丙二醛含量及肝臟指數(shù),證明威靈仙多糖在體內(nèi)外均具有顯著的抗氧化作用,其抗氧化作用與清除氧自由基有關(guān)[31]。

4.4免疫抑制作用威靈仙總皂苷對DN2FB對小鼠遲發(fā)型過敏反應(yīng)耳片腫脹程度有一定的抑制作用,表明了威靈仙總皂苷能夠抑制細胞免疫功能。胸腺和脾臟是機體主要免疫器官。脾臟為次級淋巴器官,是成熟的免疫活性細胞。主要是B淋巴細胞定居的部位,同時也是淋巴細胞接受抗原刺激進一步分化增殖、發(fā)生免疫應(yīng)答的部位,與體液免疫、細胞免疫均有密切關(guān)系。威靈仙總皂苷對胸腺和脾臟的抑制,從而證明了威靈仙總皂苷具有抑制機體特異性免疫功能的作用[32]。

4.5利膽作用有研究表明威靈仙水煎劑具有明顯的預防膽結(jié)石的作用[33]?，F(xiàn)代藥理學研究認為,威靈仙可促進膽汁分泌,并能使奧狄括約肌松弛,起到利膽退黃的作用,故能取得療效[34]。

4.6毒副作用威靈仙所含白頭翁素與原白頭翁素等揮發(fā)性成分為祛風濕止痹痛的主要成分,但其具有刺激性,臨床過量服用或大劑量長時間外敷可引起中毒,使用時應(yīng)從小劑量開始,可在處方中加甘草以調(diào)和藥性,預防中毒[35]。王文英和李祥華研究了部分中藥對腎臟的毒副作用,研究表明,鐵腳威靈仙對腎臟具有毒副作用[36]。

5.問題與展望

從技術(shù)方面來看,目前DNA 分子標記技術(shù)和多方面分子生物學手段還未曾應(yīng)用到威靈仙的研究當中,如在中藥威靈仙的鑒定、分析威靈仙的道地性、中藥質(zhì)量標準化、藥材種子種苗檢測、研究藥用成分的分布規(guī)律等諸多方面。

從研究方向來看,對威靈仙化學成分、藥理作用及活性成分的提取、分離及機理研究較多,但對遺傳基因、栽培和采收加工技術(shù)等方面的研究較少。如開展相應(yīng)方面的研究,可為威靈仙藥材規(guī)范化栽培,建立藥材生產(chǎn)基地,加強生產(chǎn)管理等方面提供可靠的科學依據(jù)。

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王云賀(1984—),女,吉林四平人,碩士研究生,植物生理生態(tài)。