劉傳琴 吳 紅 夏艷濤 靳學(xué)慧 李洪林
摘要采用菌絲生長速率法測定了9種殺菌劑對水稻稻瘟病菌絲的抑制效果,并進(jìn)行室內(nèi)毒力測定。結(jié)果表明:稻艷的毒力最高,其次為稻瘟靈和病毒克星。稻艷、稻瘟靈、病毒克星3種藥劑的毒力回歸方程依次為Y=1.155x+7.382 7、Y=2.674 5x+9.367 8和Y=2.160 9x+6.865 9,相關(guān)系數(shù)r依次為0.894 3、0.935 2、0.997 7,EC50依次為0.008 6μg/mL、0.023 2μg/mL、0.136 9μg/mL。
關(guān)鍵詞稻瘟?。粴⒕鷦?;毒力測定;抑制效果
中圖分類號S481+.9文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號 1007-5739(2009)01-0125-01
稻瘟病又名稻熱病、火燒瘟、磕頭瘟,是世界性真菌病害[1],每年都有不同程度的發(fā)生,嚴(yán)重時(shí)可造成絕產(chǎn)。在1975~1990年的16年間,由稻瘟病引起的全球糧食損失高達(dá)1.57億噸[2],年平均超過0.1億噸[3]。20世紀(jì)90年代以來,我國稻瘟病的年發(fā)生面積均在380萬公頃以上,年損失稻谷達(dá)數(shù)億千克[4]。1993年為我國稻瘟病特大發(fā)生年,發(fā)病面積543.2萬公頃[5],損失稻谷高達(dá)數(shù)十億千克。其中,黑龍江省的稻瘟病發(fā)病面積為12.83萬公頃,約占種植面積的20%,尤以穗莖瘟危害嚴(yán)重,全省稻谷損失達(dá)4.3萬噸[5]。本試驗(yàn)旨在通過室內(nèi)生物測定篩選出對稻瘟病菌具有高效、低毒、低殘留的殺菌劑,為田間防病提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1供試材料
1.1.1供試菌株。采用震落分離方法和眉毛挑單孢法,從建三江農(nóng)業(yè)科研所試驗(yàn)地的稻瘟病穗頸瘟標(biāo)樣中分離稻瘟病菌,本試驗(yàn)所用菌株經(jīng)致病性測定和單分生胞子的分離,保存在PDA培養(yǎng)基上備用。
1.1.2培養(yǎng)基。PDA培養(yǎng)基(1 000mL):馬鈴薯200g,葡萄糖17g,瓊脂17g。
1.1.3供試殺菌劑。共有9種,分別為40%富士一號乳油(天津市中農(nóng)化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司)、50%多菌靈可濕性粉劑(江陰凱江農(nóng)化有限公司)、25%施??巳橛?德國拜耳作物科學(xué)公司)、70%甲基托布津可濕性粉劑(江蘇龍燈化學(xué)有限公司)、40%稻瘟靈乳油(南京立派化工有限公司)、25%病毒克星乳油(山東成武縣有機(jī)化工廠)、75%三環(huán)唑可濕性粉劑(浙江龍灣化工有限公司)、45%咪鮮胺乳油(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)、75%稻艷可濕性粉劑(美國陶氏益農(nóng)公司)。
1.2試驗(yàn)方法
采用菌絲生長速率抑制法。將供試殺菌劑分別稀釋成系列濃度梯度的母液,按一定比例加入到融化好的PDA培養(yǎng)基中,混合后倒入滅菌的培養(yǎng)皿中,制成系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基平板。供試的稻瘟病菌株,先在PDA培養(yǎng)基上,置于25℃下培養(yǎng)7~10d,菌落長至培養(yǎng)皿邊緣時(shí),用直徑為5mm的打孔器在菌落邊緣打取菌餅,然后將菌餅移到上述含藥的培養(yǎng)基平板中央。以不加藥的平板培養(yǎng)基為對照。每平板接種1 塊,每種藥劑為1個(gè)處理,每處理3次重復(fù),25℃全黑暗培養(yǎng)10d,用“十”字交叉法測定各處理的菌落增長直徑。按以下公式計(jì)算藥劑對菌絲生長的抑制率。
菌絲生長抑制率=(對照菌落擴(kuò)展直徑-處理菌落擴(kuò)展直徑)/對照菌落擴(kuò)展直徑×100%。
將菌絲生長抑制率轉(zhuǎn)換成幾率值(y)、藥劑濃度(μg/mL)轉(zhuǎn)換成以10為底的對數(shù)值(x),做回歸直線,求出毒力回歸方程(y=a+bx)和相關(guān)系數(shù)(r),計(jì)算殺菌劑對水稻稻瘟病菌菌絲生長抑制的有效中濃度(EC50),以此表示殺菌劑對稻瘟病菌抑制作用的強(qiáng)弱。
2結(jié)果與分析
測定的結(jié)果表明,供試的所有化學(xué)藥劑對稻瘟病菌菌絲生長均有一定的抑制作用,但抑制程度略有不同,其中稻艷、稻瘟靈和病毒克星3種藥劑對稻瘟病菌的菌絲生長具有較強(qiáng)的抑制作用。毒力回歸方程依次為:Y=1.155x+7.382 7、Y=2.674 5x+9.367 8和Y=2.160 9x+6.865 9,相關(guān)系數(shù)(r)依次為0.894 3、0.935 2、0.997 7。3種藥劑中,稻艷的毒力最高,EC50為0.008 6μg/mL,明顯低于其他2種殺菌劑,病毒克星的毒力最低,EC50為0.136 9μg/mL。
3討論
本研究只是做了供試9種藥劑單劑對稻瘟病菌菌絲生長的抑制情況,篩選出稻艷、稻瘟靈、病毒克星、富士一號、多菌靈等對水稻稻瘟病菌絲生長均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。其有效成分也有所區(qū)別,所得結(jié)果能夠反映不同類型殺菌劑對水稻稻瘟病菌的抑制作用。對于這9種藥劑對稻瘟病菌孢子萌發(fā)有影響、藥劑的耐雨水沖刷、田間的藥效抑制等還需要進(jìn)一步地研究。為防止抗藥性的產(chǎn)生,今后的研究中還應(yīng)對不同類型藥劑混合的藥效進(jìn)行必要的研究。
4參考文獻(xiàn)
[1] 方中達(dá).植病研究方法(第三版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1996.
[2] 裴華,凌中專.遼寧丹東地區(qū)稻瘟病菌生理小種的研究[J].植物病理學(xué)報(bào),1986,16(4):197-203.
[3] BAKER B,ZAMBRYSKI P,STAKAWICZ B,et al.Dinesh-Kumar SP(1997) Signaling in plant-microbe interactions[J].Science,1997(276):726-733.
[4] 周光召.面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展[M].北京:中國科技出版社,1999.
[5] 孫漱元,孫國昌.我國稻瘟病研究的現(xiàn)狀和展望[J].植保技術(shù)與推廣,1996(3):39-40.
[6] 商世吉,李明賢,樸明皓,等.黑龍江省稻瘟病菌生理小種的鑒定[J].植物保護(hù),1996(4):11-14.
[7] 林代福.單孢分離的眉毛挑針法[J].山東農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào),2003,22(5):462-463.