• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553多類型再生植株的獲得

    2009-03-27 03:36:20張德雙張鳳蘭徐家炳
    長江蔬菜 2009年6期
    關(guān)鍵詞:蕓薹異源大白菜

    張德雙 張鳳蘭 徐家炳

    (北京蔬菜研究中心,100097)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553多類型再生植株的獲得

    張德雙 張鳳蘭 徐家炳

    (北京蔬菜研究中心,100097)

    應(yīng)用游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)對(duì)兼具有A,B,C染色體組的蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553(AABBCC,n= 27)材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。結(jié)果表明,供試材料具有胚胎發(fā)生能力,并獲得DH再生植株。220份馴化后的再生植株定植于日光溫室中自交留種,其中12株獲得自交種子。分別將DH植株與3份大白菜品種正、反交授粉雜交,得到4份雜交種F1代。經(jīng)田間植物學(xué)鑒定,獲得的雜交種為真正的雜種。目前,4份雜交種的染色體組成、倍性、育性等正在研究中。所獲得的DH植株為今后構(gòu)建遺傳圖譜,標(biāo)記和定位重要的基因等后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553 游離小孢子培養(yǎng) 再生株 大白菜 雜種一代

    在蕓薹屬作物中,3個(gè)二倍體基本種 (或原始種)分別是:蕓薹(Brassica campestris,2n=20,AA)、甘藍(lán)(Brassica oleracea,2n=18,CC)、黑芥(Brassica nigra,2n=16,BB)。由3個(gè)基本種衍生的3個(gè)異源四倍體(雙二倍體)復(fù)合種(或次生種)分別是:甘藍(lán)型 油 菜 (Brassica napus,2n=38,AACC)、 芥 菜(Brassica junceae,2n=36,AABB)和埃塞俄比亞芥(Brassica carinata,2n=34,BBCC)。蕓薹屬作物3個(gè)二倍體基本種和3個(gè)異源四倍體復(fù)合種之間的遺傳關(guān)系已經(jīng)研究得非常清楚。早在1935年,日本科學(xué)家就提出禹氏三角(U’triangle)表示它們之間的關(guān)系[1]。正確理解蕓薹屬不同種各單染色體組之間的關(guān)系,不僅有助于解釋蕓薹屬各個(gè)種之間的進(jìn)化關(guān)系,而且將加快蕓薹屬種間的基因轉(zhuǎn)移,創(chuàng)造蕓薹屬的新資源。研究表明,A,C基因組來源于相同或相似的基因型,B基因組可能來自另一個(gè)地理生境,因此,A,C基因組間的親緣關(guān)系要比它們與B基因組的關(guān)系密切[2~5]。Attia等[2]研究不同雙單倍體雜種中染色體配對(duì)和交叉頻率,發(fā)現(xiàn)A和C基因組染色體之間的配對(duì)情況遠(yuǎn)好于A,B和B,C,這說明A和C基因組之間可能具有較近的親緣關(guān)系。但是,白菜與甘藍(lán)無法通過常規(guī)育種手段直接雜交獲得雜交后代,通常采用體細(xì)胞雜交或原生質(zhì)體融合和胚拯救等技術(shù)獲得二者種間雜種,而白菜(Brassica campestrisL.ssp.pekinensis,2n=20,AA)與甘藍(lán)型油菜(Brassica napus,2n=38,AACC)極易雜交,這些都表明A,B,C染色體組間既存在相似性,又存在復(fù)雜性。

    北京蔬菜研究中心引進(jìn)了一份蕓薹屬異源六倍體復(fù)合種CGMCC No.2553材料,該材料兼具有A,B和C染色體基因組。研究表明,應(yīng)用常規(guī)的方法,蕓薹屬異源六倍體復(fù)合種CGMCC No.2553可以與大白菜雜交,但結(jié)實(shí)率極低。由于蕓薹屬異源六倍體基因組組成較為復(fù)雜,所以先采用游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)快速純合重要性狀,創(chuàng)造更多能與大白菜雜交的蕓薹屬新種質(zhì),將獲得的多類型DH單株與大白菜品種雜交,獲得二者的雜交后代。

    游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于蕓薹屬作物中,國內(nèi)已成功將甘藍(lán)型油菜、大白菜等作物的小孢子培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于育種實(shí)踐中,并選育出品種。利用小孢子培養(yǎng)獲得的DH再生植株不僅可以縮短常規(guī)育種周期,而且應(yīng)用DH永久群體構(gòu)建的遺傳圖譜可以用來標(biāo)記重要性狀,定位、克隆重要基因等。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553(AABBCC,n=27)兼具有A,B和C染色體基因組,雖為同一株采收的種子,但蕓薹屬異源六倍體CGMCCNo.2553個(gè)體間差異較大。表現(xiàn)為:有的植株葉片有缺刻,有的植株葉片為板葉;花色有黃花和白花等;莖部有紫色,淺紫色,淺綠色帶蠟粉等。蕓薹屬異源六倍體苗期照片如圖1,抽薹、現(xiàn)蕾期照片如圖2。

    1.2 試驗(yàn)方法

    ①游離小孢子培養(yǎng) 10月中旬,將蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553萌動(dòng)種子放于4℃冰箱中人工春化15~20 d,11月初播種于日光溫室,待長到一定苗齡后定植到日光溫室。在第2年盛花期取材,參考已發(fā)表的綠菜花游離小孢子培養(yǎng)方法[6],對(duì)供試材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。

    ②DH再生植株的獲得、留種暗培養(yǎng)20 d后,小孢子胚發(fā)育到子葉期,將子葉胚轉(zhuǎn)接到裝有B5固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,然后再轉(zhuǎn)移根、莖、葉分化良好的幼苗到三角瓶中,多次繼代后獲得發(fā)育健壯的再生苗,馴化后,定植于日光溫室中,人工蕾期自交留種。

    ③DH再生植株與大白菜雜交種的獲得、鑒定 在DH再生植株自交留種的同時(shí),取DH再生植株的花粉分別涂抹到3份大白菜品種柱頭上或取大白菜的花粉涂抹到DH再生植株上,獲得二者間的雜交種子。播種收獲的種子,通過田間性狀觀察的方法,鑒定雜種的真實(shí)性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 DH再生植株的獲得

    圖1 蕓薹屬異源六倍體的苗期

    圖2 蕓薹屬異源六倍體抽薹、現(xiàn)蕾期

    圖3 蕓薹屬異源六倍體的子葉胚和胚誘導(dǎo)成苗

    圖4 蕓薹屬異源六倍體的再生苗

    圖5 蕓薹屬異源六倍體再生植株的不同類型

    圖6 蕓薹屬異源六倍體的再生植株群體(抽薹、開花)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553材料具有胚胎發(fā)生能力,可以獲得胚狀體和再生植株。圖3為獲得的子葉胚、子葉胚轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中誘導(dǎo)成苗。由圖3可見,一次培養(yǎng)獲得的胚狀體數(shù)量不多,說明基因型明顯影響胚胎發(fā)生能力。轉(zhuǎn)移健壯的幼苗到三角瓶中繼續(xù)生長、分化,形成再生苗(圖4)。圖4為定植前的再生植株。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)一個(gè)有趣的現(xiàn)象,供試材料的子葉胚極易分化出多個(gè)再生苗或再生植株,表現(xiàn)為“一胚多苗”的現(xiàn)象,這不僅有利于獲得同一基因型的多個(gè)再生植株,而且提高了再生株定植成活率。圖5為蕓薹屬異源六倍體再生植株的不同表現(xiàn)。由圖5可見,再生植株主要表現(xiàn)為葉片缺刻的深、淺,紫色的有無等區(qū)別。圖6為蕓薹屬異源六倍體再生植株群體。由圖6可見,DH植株花期長勢(shì)旺,植株高,分枝多。圖7為蕓薹屬異源六倍體再生植株的花。由圖7可見,花瓣顏色有黃色、白色,雄蕊有的可育,有的不育,雄蕊的長短不同等。圖8為蕓薹屬異源六倍體再生植株的花穗、結(jié)實(shí)。由圖8可見,DH再生植株的花較大,結(jié)實(shí)性好,但每莢中種子數(shù)量較少。圖9為蕓薹屬異源六倍體的再生植株的分枝和根部狀況。由圖9可見,由根部萌發(fā)的主枝較多,最多可以達(dá)到3~4個(gè)。DH再生植株經(jīng)過一定的低溫處理,可以獲得一些葉片皺縮突變體(圖10)。圖11為再生植株與大白菜的雜交種。由圖11可見,雜交種表現(xiàn)為中間類型,性狀更偏向于大白菜。

    圖7 蕓薹屬異源六倍體不同再生植株的花

    圖8 蕓薹屬異源六倍體的再生植株花穗、結(jié)實(shí)

    綜上所述,獲得的DH再生植株性狀差異較大,表現(xiàn)為類型多樣、性狀各異等。性狀主要表現(xiàn)為:花色有黃色、白色和淺黃色;花粉有的多,有的少,有的全無;同一朵花的雄蕊有的可育,有的不育,6個(gè)雄蕊的長短也不同等。可見,對(duì)蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng),可以獲得多種類型的中間材料,而且也可以獲得與大白菜雜交的中間類型材料。

    2.2 DH再生植株的自交結(jié)實(shí)

    2007-2008年,在日光溫室中共定植220株DH再生植株。在蕾期,采用人工剝蕾的方法自交留種。目前僅獲得12株DH再生植株的自交種子,其余208株再生株因?yàn)榍捌跓o花粉、花粉少,染色體基因型不配對(duì)等內(nèi)在原因,自交后沒有得到種子。但是,在208株DH再生植株中,部分沒有套袋的枝條可以獲得若干種子,這些種子是自交種子還是雜交種子還有待進(jìn)一步鑒定。另外,有的DH再生植株初花期花粉量較多,后期逐漸減少,而且多次重復(fù)授粉很難得到自交種子,其原因有待于進(jìn)一步研究。

    圖9 蕓薹屬異源六倍體再生植株的分枝和根部狀況

    圖10 再生植株葉片皺縮突變體

    更有意義的是,將再生植株置于4~5℃低溫條件下處理15~20 d或自然慢慢通過低溫處理30~40 d后,定植到日光溫室中生長,在生育后期可以獲得一些葉片皺縮突變體 (圖10)。試驗(yàn)證明,2007-2008年,采用上述方法重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn),每次都能獲得一定數(shù)量的葉片皺縮突變體。

    2.3 大白菜與DH再生株雜交F1代的獲得及鑒定

    采用3份大白菜 (08-784,08-786和08-916)分別與DH再生株正反交雜交,部分雜交可以正常結(jié)實(shí),目前,已經(jīng)得到4份雜交F1代種子,并獲得了幼苗。通過田間植物學(xué)性狀鑒定,認(rèn)為是真正雜種。同時(shí),正在采用SSR等分子標(biāo)記技術(shù)鑒定雜交種的真?zhèn)涡浴?/p>

    3 小結(jié)與討論

    3.1 游離小孢子培養(yǎng)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553的游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程與綠菜花的培養(yǎng)技術(shù)相似,熱激處理溫度為32.5℃1 d,蔗糖濃度以10%為宜。因蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553花蕾較大,取材時(shí)健康花蕾長度在2.0~3.5 mm為宜。蕓薹屬異源六倍體的胚胎發(fā)生率較低,因?yàn)闆]有詳細(xì)地研究影響供試材料胚胎發(fā)生的各種因素,從而優(yōu)化培養(yǎng)條件,因此,沒有獲得較高的胚胎發(fā)生率。供試材料單個(gè)胚的成苗率較高,一般一個(gè)胚可以分化成3株或更多的再生苗,這種現(xiàn)象在大白菜品種的游離小孢子培養(yǎng)中很少發(fā)現(xiàn)。“一胚多苗”的優(yōu)點(diǎn)首先是能夠提高DH再生株的成活率,其次有利于獲得基因型相同而某些性狀不同的突變型和野生型材料,如本研究中獲得的葉片皺縮突變體。由于它們只在葉片皺縮單一性狀上表現(xiàn)差異,而其他的遺傳性狀完全一致,因此它們是很好的野生型和突變型材料,為研究葉片皺縮的遺傳規(guī)律,定位、克隆和分離葉片皺縮基因,并探討葉片皺縮性狀在育種中作為標(biāo)記性狀的應(yīng)用等提供了可能。

    3.2 再生株自交結(jié)實(shí)

    在游離小孢子培養(yǎng)過程中,蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553的染色體會(huì)發(fā)生隨機(jī)重組、交換等,出現(xiàn)A,B,C染色體間的多種組合,隨后有的自然加倍,成為二倍體、異源四倍體或其他多種倍性,因此,DH再生株會(huì)出現(xiàn)許多類型,表現(xiàn)在葉片缺刻、莖部顏色、花瓣顏色、花藥多少、育性、倍性等性狀的不同。在盛花期,有的DH植株由于無花粉、花粉干或花粉不穩(wěn)定、染色體不配對(duì)等,導(dǎo)致自交不結(jié)實(shí),在本研究中,220株再生植株僅獲得12株再生株的自交種子。

    3.3 大白菜與DH再生植株雜交種的獲得

    所獲得的DH單株可以與3份大白菜正反交雜交的F1部分雜交結(jié)實(shí)正常。目前,已經(jīng)驗(yàn)證了獲得的F1代為真正的雜交種??梢姡允|薹屬異源六倍體CGMCC No.2553為材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng),不僅拓寬了蕓薹屬的種質(zhì)資源,而且獲得的部分DH再生株可以與大白菜品種雜交,為今后獲得大白菜DH永久作圖群體,構(gòu)建遺傳圖譜,開展相關(guān)基因的研究奠定了基礎(chǔ),也為研究蕓薹屬A,B和C染色體的共線性提供了依據(jù)。

    [1]U N.Genome analysis inBrassicawith special reference to the experimental formation ofB.napusand its peculiar mode of fertilization[J].Jap J Bot,1935,7:389-452.

    [2]Attia T,R?bbelen G.Cytogenetic relationship within cultivatedBrassicaanalyzed in amphidiploid from the three diploid ancestors[J].Can J Genet Cytol,1986,28:323-329.

    [3]栗茂騰,張椿雨,劉列釗,等.蕓薹屬A,B和C基因組之間關(guān)系研究進(jìn)展[J].遺傳,2005,24(7):671-676.

    [4]孟金陵.蕓薹屬植物遠(yuǎn)緣雜交不親和性的研究進(jìn)展[J].中國油料,1987(4):71-77.

    [5]馮午,陳耀華.甘藍(lán)與白菜種間雜交的雙二倍體后代[J].園藝學(xué)報(bào),1981,8(2):37-40.

    [6]張德雙,曹鳴慶,秦智偉.綠菜花游離小孢子培養(yǎng)、胚胎發(fā)生和植株再生[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào),1998,13(3):102-106.

    Regeneration of Plant with Multiple Types from Allohexaploid CGMCC No.2553 in Brassica

    ZHANG Deshuang,ZHANG Fenglan,XU Jiabing
    (Beijing Vegetable Research Center,Beijing 100097)

    Crossing with Chinese cabbage (Brassica campestrisL.ssp.Pekinensis),Brassicaallohexaploid CGMCC No. 2553 (AABBCC,n=27),which owns A,B and C chromosomes simultaneously,was used for isolated microspore culture. The results showed that it could form embryoid and could get regenerated plants.220 regenerated plants were grown at the greenhouse without heating apparatus.12 DH plants got seeds by self-pollination.Through crossing DH lines with 3 Chinese cabbage pure lines,4 F1hybrids were obtained.These hybrids were genuine hybrids by field checkup.They will be used for linkage map construction,locating and cloning the important genes in the future.

    Brassicaallohexaploid CGMCC No.2553;Isolated microspore culture;Regeneration of plants;Chinese cabbage;Hybrid F1

    10.3865/j.issn.1001-3547(x).2009.06.005

    北京市農(nóng)林科學(xué)院青年基金資助

    張德雙(1969-),男,博士,副研究員,主要從事大白菜育種等研究工作,電話:010-51503038

    2008-12-15

    猜你喜歡
    蕓薹異源大白菜
    Hechi:A Land of Natural Endowment
    近岸水體異源遙感反射率產(chǎn)品的融合方法研究
    基于EM-PCNN的果園蘋果異源圖像配準(zhǔn)方法
    不同濃度赤·吲哚·蕓薹對(duì)多肉植物桃之卵和黛比葉插繁殖的影響
    臉譜與假面 異源而殊流
    中華戲曲(2020年2期)2020-02-12 05:17:58
    早熟大白菜新品種新早59
    蔬菜(2016年8期)2016-10-10 06:49:14
    蕓薹根腫菌侵染過程及影響因子研究
    大白菜
    5.001%蕓薹素內(nèi)酯·胺鮮酯水分散粒劑調(diào)節(jié)大白菜生長田間藥效試驗(yàn)
    上海蔬菜(2016年5期)2016-02-28 13:18:11
    解脂耶氏酵母異源合成番茄紅素的初步研究
    欧美成狂野欧美在线观看| 岛国在线观看网站| 波多野结衣高清无吗| 亚洲九九香蕉| 欧美日韩视频精品一区| 91大片在线观看| 国产亚洲精品一区二区www| 日本黄色视频三级网站网址| 久热这里只有精品99| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲黑人精品在线| 免费看十八禁软件| 亚洲五月婷婷丁香| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美日韩乱码在线| 69av精品久久久久久| 日本a在线网址| 国产成人精品无人区| 麻豆av在线久日| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 两人在一起打扑克的视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 免费在线观看日本一区| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 亚洲欧美激情综合另类| aaaaa片日本免费| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产亚洲欧美精品永久| 精品久久久久久久久久免费视频 | 韩国精品一区二区三区| 村上凉子中文字幕在线| 久久亚洲精品不卡| 亚洲,欧美精品.| 色综合站精品国产| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 中文字幕色久视频| 国产精品久久久久成人av| 神马国产精品三级电影在线观看 | 18禁观看日本| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 真人一进一出gif抽搐免费| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲国产精品999在线| av在线天堂中文字幕 | 亚洲一区二区三区色噜噜 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品国产av在线观看| av网站免费在线观看视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲五月天丁香| 亚洲avbb在线观看| 久久香蕉精品热| 国产蜜桃级精品一区二区三区| av网站免费在线观看视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 9191精品国产免费久久| 午夜影院日韩av| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久久久久久中文| 亚洲伊人色综图| 免费高清在线观看日韩| 最新在线观看一区二区三区| 岛国在线观看网站| 亚洲第一青青草原| 久久久国产成人免费| 黄色怎么调成土黄色| 丝袜在线中文字幕| 午夜福利在线免费观看网站| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 99香蕉大伊视频| 欧美最黄视频在线播放免费 | 麻豆av在线久日| 搡老乐熟女国产| 国产亚洲av高清不卡| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 日韩精品青青久久久久久| 亚洲中文av在线| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产成人系列免费观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 亚洲av电影在线进入| 日本wwww免费看| 国产成人精品久久二区二区免费| 99re在线观看精品视频| 十八禁人妻一区二区| 欧美大码av| 日韩中文字幕欧美一区二区| 色综合站精品国产| www国产在线视频色| 99国产精品一区二区三区| 国产真人三级小视频在线观看| 母亲3免费完整高清在线观看| www.精华液| 在线观看66精品国产| 亚洲激情在线av| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费 | 久久久久九九精品影院| 看免费av毛片| 亚洲国产精品sss在线观看 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 美女午夜性视频免费| cao死你这个sao货| 黄色怎么调成土黄色| 精品电影一区二区在线| 丝袜美腿诱惑在线| 男女高潮啪啪啪动态图| 男人舔女人的私密视频| 男女之事视频高清在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 99久久人妻综合| 日韩视频一区二区在线观看| 中文字幕色久视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲人成电影免费在线| 日韩精品中文字幕看吧| 国产一卡二卡三卡精品| 精品无人区乱码1区二区| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久天堂一区二区三区四区| 99久久国产精品久久久| 真人做人爱边吃奶动态| 久热这里只有精品99| 青草久久国产| 看片在线看免费视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 长腿黑丝高跟| 国产av又大| 两人在一起打扑克的视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 老司机在亚洲福利影院| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品久久久久久,| 国产一区二区在线av高清观看| 久久精品亚洲av国产电影网| 狂野欧美激情性xxxx| 色播在线永久视频| 999久久久精品免费观看国产| 国产一区在线观看成人免费| 久久中文字幕人妻熟女| 99香蕉大伊视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 又紧又爽又黄一区二区| 日韩欧美国产一区二区入口| 啦啦啦 在线观看视频| 午夜免费激情av| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 9191精品国产免费久久| ponron亚洲| 国产精品免费一区二区三区在线| 久久亚洲真实| 午夜久久久在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美激情 高清一区二区三区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲一区二区三区不卡视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产精品久久视频播放| 精品卡一卡二卡四卡免费| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美色视频一区免费| 美国免费a级毛片| 欧美黑人精品巨大| 久久这里只有精品19| 不卡av一区二区三区| 免费av毛片视频| 操出白浆在线播放| 曰老女人黄片| 天天添夜夜摸| 亚洲情色 制服丝袜| 97碰自拍视频| 99riav亚洲国产免费| 国产成人免费无遮挡视频| 国产一区在线观看成人免费| 热99re8久久精品国产| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产91精品成人一区二区三区| 日韩有码中文字幕| 久热爱精品视频在线9| 亚洲中文av在线| 十分钟在线观看高清视频www| 国产精品98久久久久久宅男小说| 五月开心婷婷网| 亚洲欧美精品综合久久99| 一区二区三区激情视频| 午夜亚洲福利在线播放| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 黄色 视频免费看| 欧美激情高清一区二区三区| 久久久久久久久免费视频了| 男女下面进入的视频免费午夜 | 免费高清视频大片| 十分钟在线观看高清视频www| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 1024香蕉在线观看| 国产麻豆69| 午夜激情av网站| 深夜精品福利| 国产精品 欧美亚洲| 欧美一区二区精品小视频在线| 高清黄色对白视频在线免费看| 欧美大码av| 男女午夜视频在线观看| 国产av又大| 757午夜福利合集在线观看| 日本黄色日本黄色录像| av天堂久久9| 国产精品影院久久| 国产熟女午夜一区二区三区| 九色亚洲精品在线播放| 久久中文字幕一级| 一级毛片高清免费大全| 欧美黑人精品巨大| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久热在线av| 在线观看免费视频日本深夜| av视频免费观看在线观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 咕卡用的链子| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 日韩免费av在线播放| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品国产综合久久久| 日韩欧美三级三区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 在线观看www视频免费| 国产一区二区三区综合在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| 伦理电影免费视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产成人精品无人区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 电影成人av| 久久影院123| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品二区激情视频| 久久久久九九精品影院| 午夜免费鲁丝| 成人特级黄色片久久久久久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日本一区二区免费在线视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 母亲3免费完整高清在线观看| 在线国产一区二区在线| 岛国视频午夜一区免费看| 在线av久久热| 中文亚洲av片在线观看爽| 91av网站免费观看| 啦啦啦在线免费观看视频4| av欧美777| 操出白浆在线播放| 色哟哟哟哟哟哟| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美国产精品va在线观看不卡| 五月开心婷婷网| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 欧美在线黄色| 十分钟在线观看高清视频www| 12—13女人毛片做爰片一| 久久精品91无色码中文字幕| 手机成人av网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲精品粉嫩美女一区| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产一区二区激情短视频| 久久久久国内视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产亚洲av高清不卡| 在线天堂中文资源库| 在线观看日韩欧美| 一级毛片高清免费大全| 日韩欧美国产一区二区入口| 嫩草影院精品99| 美女扒开内裤让男人捅视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久香蕉国产精品| 精品无人区乱码1区二区| 一本大道久久a久久精品| 久久国产精品男人的天堂亚洲| av网站免费在线观看视频| 9色porny在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲精品一区av在线观看| 久久香蕉激情| 12—13女人毛片做爰片一| 高清黄色对白视频在线免费看| 一区二区三区国产精品乱码| 成人免费观看视频高清| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品国产清高在天天线| 成人18禁在线播放| 丰满的人妻完整版| 免费av中文字幕在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲免费av在线视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产一区在线观看成人免费| 人成视频在线观看免费观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 成人av一区二区三区在线看| 一个人免费在线观看的高清视频| 中文字幕色久视频| 精品人妻1区二区| 99热国产这里只有精品6| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 精品免费久久久久久久清纯| 日韩国内少妇激情av| 午夜福利在线免费观看网站| 91在线观看av| 嫩草影院精品99| 一级毛片高清免费大全| 91成年电影在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 欧美日本中文国产一区发布| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av美国av| 日本三级黄在线观看| 亚洲 国产 在线| 国产成人精品在线电影| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| av欧美777| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲国产看品久久| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久热这里只有精品99| 国产激情久久老熟女| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产成人欧美在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 少妇的丰满在线观看| 国产野战对白在线观看| 在线av久久热| 精品一区二区三卡| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产一区在线观看成人免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| 色在线成人网| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 老司机福利观看| 在线观看一区二区三区激情| 人妻久久中文字幕网| 99re在线观看精品视频| 免费av中文字幕在线| 国产免费av片在线观看野外av| 黑人猛操日本美女一级片| 精品一品国产午夜福利视频| 日本三级黄在线观看| 国产av一区二区精品久久| 黄色丝袜av网址大全| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 在线国产一区二区在线| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| av电影中文网址| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品卡一卡二卡四卡免费| 黑丝袜美女国产一区| 咕卡用的链子| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久热爱精品视频在线9| 99riav亚洲国产免费| 亚洲三区欧美一区| 欧美色视频一区免费| 国产精品综合久久久久久久免费 | av网站在线播放免费| 在线观看免费视频网站a站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 在线永久观看黄色视频| 黄色a级毛片大全视频| 十八禁网站免费在线| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 水蜜桃什么品种好| 99riav亚洲国产免费| 动漫黄色视频在线观看| 女警被强在线播放| 精品久久久久久,| 精品日产1卡2卡| 亚洲国产看品久久| 制服人妻中文乱码| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲情色 制服丝袜| 日本黄色日本黄色录像| 黑人操中国人逼视频| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美日韩av久久| 丝袜人妻中文字幕| 午夜视频精品福利| 精品一区二区三区四区五区乱码| 搡老岳熟女国产| 日韩欧美在线二视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 成人精品一区二区免费| 18禁美女被吸乳视频| 精品福利观看| 久久性视频一级片| 亚洲专区国产一区二区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 后天国语完整版免费观看| 一级片'在线观看视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 18禁美女被吸乳视频| 在线观看免费高清a一片| 亚洲第一青青草原| 亚洲avbb在线观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 青草久久国产| 亚洲一区中文字幕在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 成人精品一区二区免费| 久久中文字幕人妻熟女| 日本黄色视频三级网站网址| 午夜日韩欧美国产| 午夜福利,免费看| 正在播放国产对白刺激| 波多野结衣av一区二区av| 国产极品粉嫩免费观看在线| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 人人妻人人澡人人看| 国产99白浆流出| 99riav亚洲国产免费| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品一区二区三区四区久久 | 男人舔女人下体高潮全视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| av中文乱码字幕在线| 日本a在线网址| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| av在线天堂中文字幕 | 亚洲色图综合在线观看| 在线永久观看黄色视频| 91麻豆av在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 精品高清国产在线一区| 视频区欧美日本亚洲| 久久久久久久久免费视频了| 欧美黑人精品巨大| 国产精品 欧美亚洲| 99久久人妻综合| tocl精华| 又紧又爽又黄一区二区| av网站免费在线观看视频| 一本综合久久免费| 欧美激情 高清一区二区三区| 夜夜夜夜夜久久久久| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产成人av教育| 老熟妇仑乱视频hdxx| 中文欧美无线码| 老司机靠b影院| 精品熟女少妇八av免费久了| 伊人久久大香线蕉亚洲五| x7x7x7水蜜桃| 国产三级在线视频| 国产单亲对白刺激| avwww免费| 伦理电影免费视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| xxxhd国产人妻xxx| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 啦啦啦在线免费观看视频4| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日本a在线网址| 搡老乐熟女国产| 一a级毛片在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲成人久久性| 电影成人av| 麻豆成人av在线观看| 一区二区三区精品91| 欧美成人午夜精品| 18美女黄网站色大片免费观看| 91九色精品人成在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 美女福利国产在线| 啦啦啦 在线观看视频| 国产成人av激情在线播放| av有码第一页| 水蜜桃什么品种好| 99久久国产精品久久久| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 亚洲av成人一区二区三| 日韩人妻精品一区2区三区| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲av成人av| 日韩精品中文字幕看吧| 在线观看免费午夜福利视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 成在线人永久免费视频| 国产精品99久久99久久久不卡| tocl精华| 精品久久久久久,| 黑人欧美特级aaaaaa片| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲熟女毛片儿| 女人精品久久久久毛片| 欧美激情 高清一区二区三区| 99久久99久久久精品蜜桃| a级毛片在线看网站| 精品电影一区二区在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 在线观看免费视频网站a站| xxx96com| 天堂中文最新版在线下载| 国产成人欧美| 精品午夜福利视频在线观看一区| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 成人黄色视频免费在线看| 搡老岳熟女国产| av国产精品久久久久影院| 欧美在线一区亚洲| ponron亚洲| 免费av中文字幕在线| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 99精品久久久久人妻精品| 午夜a级毛片| 久久 成人 亚洲| av网站免费在线观看视频| 97碰自拍视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 十分钟在线观看高清视频www| 99精品欧美一区二区三区四区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 69精品国产乱码久久久| 久热这里只有精品99| netflix在线观看网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品久久久久久,| 脱女人内裤的视频| av网站免费在线观看视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产精品av久久久久免费| 亚洲中文字幕日韩| 婷婷丁香在线五月| 黄色视频不卡| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲一区高清亚洲精品| 男女床上黄色一级片免费看| 美女国产高潮福利片在线看| 精品无人区乱码1区二区| 在线免费观看的www视频| 老司机亚洲免费影院| 欧美日韩一级在线毛片| 精品国产美女av久久久久小说| 精品久久久精品久久久| 国产欧美日韩一区二区精品| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 国产亚洲精品久久久久久毛片| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品九九99| 麻豆成人av在线观看| www国产在线视频色| 国产一区二区在线av高清观看| 在线观看66精品国产| 性欧美人与动物交配| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| aaaaa片日本免费| 十八禁网站免费在线| 九色亚洲精品在线播放| 成人国语在线视频| 美女高潮到喷水免费观看| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲成国产人片在线观看| 黄色视频不卡| 亚洲中文字幕日韩| 成人亚洲精品av一区二区 | 国产精品99久久99久久久不卡| 两人在一起打扑克的视频| 国产黄a三级三级三级人| 欧美成人午夜精品| 成人三级做爰电影| 19禁男女啪啪无遮挡网站|