• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553多類型再生植株的獲得

    2009-03-27 03:36:20張德雙張鳳蘭徐家炳
    長江蔬菜 2009年6期
    關(guān)鍵詞:蕓薹異源大白菜

    張德雙 張鳳蘭 徐家炳

    (北京蔬菜研究中心,100097)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553多類型再生植株的獲得

    張德雙 張鳳蘭 徐家炳

    (北京蔬菜研究中心,100097)

    應(yīng)用游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)對(duì)兼具有A,B,C染色體組的蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553(AABBCC,n= 27)材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。結(jié)果表明,供試材料具有胚胎發(fā)生能力,并獲得DH再生植株。220份馴化后的再生植株定植于日光溫室中自交留種,其中12株獲得自交種子。分別將DH植株與3份大白菜品種正、反交授粉雜交,得到4份雜交種F1代。經(jīng)田間植物學(xué)鑒定,獲得的雜交種為真正的雜種。目前,4份雜交種的染色體組成、倍性、育性等正在研究中。所獲得的DH植株為今后構(gòu)建遺傳圖譜,標(biāo)記和定位重要的基因等后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553 游離小孢子培養(yǎng) 再生株 大白菜 雜種一代

    在蕓薹屬作物中,3個(gè)二倍體基本種 (或原始種)分別是:蕓薹(Brassica campestris,2n=20,AA)、甘藍(lán)(Brassica oleracea,2n=18,CC)、黑芥(Brassica nigra,2n=16,BB)。由3個(gè)基本種衍生的3個(gè)異源四倍體(雙二倍體)復(fù)合種(或次生種)分別是:甘藍(lán)型 油 菜 (Brassica napus,2n=38,AACC)、 芥 菜(Brassica junceae,2n=36,AABB)和埃塞俄比亞芥(Brassica carinata,2n=34,BBCC)。蕓薹屬作物3個(gè)二倍體基本種和3個(gè)異源四倍體復(fù)合種之間的遺傳關(guān)系已經(jīng)研究得非常清楚。早在1935年,日本科學(xué)家就提出禹氏三角(U’triangle)表示它們之間的關(guān)系[1]。正確理解蕓薹屬不同種各單染色體組之間的關(guān)系,不僅有助于解釋蕓薹屬各個(gè)種之間的進(jìn)化關(guān)系,而且將加快蕓薹屬種間的基因轉(zhuǎn)移,創(chuàng)造蕓薹屬的新資源。研究表明,A,C基因組來源于相同或相似的基因型,B基因組可能來自另一個(gè)地理生境,因此,A,C基因組間的親緣關(guān)系要比它們與B基因組的關(guān)系密切[2~5]。Attia等[2]研究不同雙單倍體雜種中染色體配對(duì)和交叉頻率,發(fā)現(xiàn)A和C基因組染色體之間的配對(duì)情況遠(yuǎn)好于A,B和B,C,這說明A和C基因組之間可能具有較近的親緣關(guān)系。但是,白菜與甘藍(lán)無法通過常規(guī)育種手段直接雜交獲得雜交后代,通常采用體細(xì)胞雜交或原生質(zhì)體融合和胚拯救等技術(shù)獲得二者種間雜種,而白菜(Brassica campestrisL.ssp.pekinensis,2n=20,AA)與甘藍(lán)型油菜(Brassica napus,2n=38,AACC)極易雜交,這些都表明A,B,C染色體組間既存在相似性,又存在復(fù)雜性。

    北京蔬菜研究中心引進(jìn)了一份蕓薹屬異源六倍體復(fù)合種CGMCC No.2553材料,該材料兼具有A,B和C染色體基因組。研究表明,應(yīng)用常規(guī)的方法,蕓薹屬異源六倍體復(fù)合種CGMCC No.2553可以與大白菜雜交,但結(jié)實(shí)率極低。由于蕓薹屬異源六倍體基因組組成較為復(fù)雜,所以先采用游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)快速純合重要性狀,創(chuàng)造更多能與大白菜雜交的蕓薹屬新種質(zhì),將獲得的多類型DH單株與大白菜品種雜交,獲得二者的雜交后代。

    游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于蕓薹屬作物中,國內(nèi)已成功將甘藍(lán)型油菜、大白菜等作物的小孢子培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于育種實(shí)踐中,并選育出品種。利用小孢子培養(yǎng)獲得的DH再生植株不僅可以縮短常規(guī)育種周期,而且應(yīng)用DH永久群體構(gòu)建的遺傳圖譜可以用來標(biāo)記重要性狀,定位、克隆重要基因等。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553(AABBCC,n=27)兼具有A,B和C染色體基因組,雖為同一株采收的種子,但蕓薹屬異源六倍體CGMCCNo.2553個(gè)體間差異較大。表現(xiàn)為:有的植株葉片有缺刻,有的植株葉片為板葉;花色有黃花和白花等;莖部有紫色,淺紫色,淺綠色帶蠟粉等。蕓薹屬異源六倍體苗期照片如圖1,抽薹、現(xiàn)蕾期照片如圖2。

    1.2 試驗(yàn)方法

    ①游離小孢子培養(yǎng) 10月中旬,將蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553萌動(dòng)種子放于4℃冰箱中人工春化15~20 d,11月初播種于日光溫室,待長到一定苗齡后定植到日光溫室。在第2年盛花期取材,參考已發(fā)表的綠菜花游離小孢子培養(yǎng)方法[6],對(duì)供試材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。

    ②DH再生植株的獲得、留種暗培養(yǎng)20 d后,小孢子胚發(fā)育到子葉期,將子葉胚轉(zhuǎn)接到裝有B5固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,然后再轉(zhuǎn)移根、莖、葉分化良好的幼苗到三角瓶中,多次繼代后獲得發(fā)育健壯的再生苗,馴化后,定植于日光溫室中,人工蕾期自交留種。

    ③DH再生植株與大白菜雜交種的獲得、鑒定 在DH再生植株自交留種的同時(shí),取DH再生植株的花粉分別涂抹到3份大白菜品種柱頭上或取大白菜的花粉涂抹到DH再生植株上,獲得二者間的雜交種子。播種收獲的種子,通過田間性狀觀察的方法,鑒定雜種的真實(shí)性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 DH再生植株的獲得

    圖1 蕓薹屬異源六倍體的苗期

    圖2 蕓薹屬異源六倍體抽薹、現(xiàn)蕾期

    圖3 蕓薹屬異源六倍體的子葉胚和胚誘導(dǎo)成苗

    圖4 蕓薹屬異源六倍體的再生苗

    圖5 蕓薹屬異源六倍體再生植株的不同類型

    圖6 蕓薹屬異源六倍體的再生植株群體(抽薹、開花)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553材料具有胚胎發(fā)生能力,可以獲得胚狀體和再生植株。圖3為獲得的子葉胚、子葉胚轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中誘導(dǎo)成苗。由圖3可見,一次培養(yǎng)獲得的胚狀體數(shù)量不多,說明基因型明顯影響胚胎發(fā)生能力。轉(zhuǎn)移健壯的幼苗到三角瓶中繼續(xù)生長、分化,形成再生苗(圖4)。圖4為定植前的再生植株。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)一個(gè)有趣的現(xiàn)象,供試材料的子葉胚極易分化出多個(gè)再生苗或再生植株,表現(xiàn)為“一胚多苗”的現(xiàn)象,這不僅有利于獲得同一基因型的多個(gè)再生植株,而且提高了再生株定植成活率。圖5為蕓薹屬異源六倍體再生植株的不同表現(xiàn)。由圖5可見,再生植株主要表現(xiàn)為葉片缺刻的深、淺,紫色的有無等區(qū)別。圖6為蕓薹屬異源六倍體再生植株群體。由圖6可見,DH植株花期長勢(shì)旺,植株高,分枝多。圖7為蕓薹屬異源六倍體再生植株的花。由圖7可見,花瓣顏色有黃色、白色,雄蕊有的可育,有的不育,雄蕊的長短不同等。圖8為蕓薹屬異源六倍體再生植株的花穗、結(jié)實(shí)。由圖8可見,DH再生植株的花較大,結(jié)實(shí)性好,但每莢中種子數(shù)量較少。圖9為蕓薹屬異源六倍體的再生植株的分枝和根部狀況。由圖9可見,由根部萌發(fā)的主枝較多,最多可以達(dá)到3~4個(gè)。DH再生植株經(jīng)過一定的低溫處理,可以獲得一些葉片皺縮突變體(圖10)。圖11為再生植株與大白菜的雜交種。由圖11可見,雜交種表現(xiàn)為中間類型,性狀更偏向于大白菜。

    圖7 蕓薹屬異源六倍體不同再生植株的花

    圖8 蕓薹屬異源六倍體的再生植株花穗、結(jié)實(shí)

    綜上所述,獲得的DH再生植株性狀差異較大,表現(xiàn)為類型多樣、性狀各異等。性狀主要表現(xiàn)為:花色有黃色、白色和淺黃色;花粉有的多,有的少,有的全無;同一朵花的雄蕊有的可育,有的不育,6個(gè)雄蕊的長短也不同等。可見,對(duì)蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng),可以獲得多種類型的中間材料,而且也可以獲得與大白菜雜交的中間類型材料。

    2.2 DH再生植株的自交結(jié)實(shí)

    2007-2008年,在日光溫室中共定植220株DH再生植株。在蕾期,采用人工剝蕾的方法自交留種。目前僅獲得12株DH再生植株的自交種子,其余208株再生株因?yàn)榍捌跓o花粉、花粉少,染色體基因型不配對(duì)等內(nèi)在原因,自交后沒有得到種子。但是,在208株DH再生植株中,部分沒有套袋的枝條可以獲得若干種子,這些種子是自交種子還是雜交種子還有待進(jìn)一步鑒定。另外,有的DH再生植株初花期花粉量較多,后期逐漸減少,而且多次重復(fù)授粉很難得到自交種子,其原因有待于進(jìn)一步研究。

    圖9 蕓薹屬異源六倍體再生植株的分枝和根部狀況

    圖10 再生植株葉片皺縮突變體

    更有意義的是,將再生植株置于4~5℃低溫條件下處理15~20 d或自然慢慢通過低溫處理30~40 d后,定植到日光溫室中生長,在生育后期可以獲得一些葉片皺縮突變體 (圖10)。試驗(yàn)證明,2007-2008年,采用上述方法重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn),每次都能獲得一定數(shù)量的葉片皺縮突變體。

    2.3 大白菜與DH再生株雜交F1代的獲得及鑒定

    采用3份大白菜 (08-784,08-786和08-916)分別與DH再生株正反交雜交,部分雜交可以正常結(jié)實(shí),目前,已經(jīng)得到4份雜交F1代種子,并獲得了幼苗。通過田間植物學(xué)性狀鑒定,認(rèn)為是真正雜種。同時(shí),正在采用SSR等分子標(biāo)記技術(shù)鑒定雜交種的真?zhèn)涡浴?/p>

    3 小結(jié)與討論

    3.1 游離小孢子培養(yǎng)

    蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553的游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程與綠菜花的培養(yǎng)技術(shù)相似,熱激處理溫度為32.5℃1 d,蔗糖濃度以10%為宜。因蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553花蕾較大,取材時(shí)健康花蕾長度在2.0~3.5 mm為宜。蕓薹屬異源六倍體的胚胎發(fā)生率較低,因?yàn)闆]有詳細(xì)地研究影響供試材料胚胎發(fā)生的各種因素,從而優(yōu)化培養(yǎng)條件,因此,沒有獲得較高的胚胎發(fā)生率。供試材料單個(gè)胚的成苗率較高,一般一個(gè)胚可以分化成3株或更多的再生苗,這種現(xiàn)象在大白菜品種的游離小孢子培養(yǎng)中很少發(fā)現(xiàn)。“一胚多苗”的優(yōu)點(diǎn)首先是能夠提高DH再生株的成活率,其次有利于獲得基因型相同而某些性狀不同的突變型和野生型材料,如本研究中獲得的葉片皺縮突變體。由于它們只在葉片皺縮單一性狀上表現(xiàn)差異,而其他的遺傳性狀完全一致,因此它們是很好的野生型和突變型材料,為研究葉片皺縮的遺傳規(guī)律,定位、克隆和分離葉片皺縮基因,并探討葉片皺縮性狀在育種中作為標(biāo)記性狀的應(yīng)用等提供了可能。

    3.2 再生株自交結(jié)實(shí)

    在游離小孢子培養(yǎng)過程中,蕓薹屬異源六倍體CGMCC No.2553的染色體會(huì)發(fā)生隨機(jī)重組、交換等,出現(xiàn)A,B,C染色體間的多種組合,隨后有的自然加倍,成為二倍體、異源四倍體或其他多種倍性,因此,DH再生株會(huì)出現(xiàn)許多類型,表現(xiàn)在葉片缺刻、莖部顏色、花瓣顏色、花藥多少、育性、倍性等性狀的不同。在盛花期,有的DH植株由于無花粉、花粉干或花粉不穩(wěn)定、染色體不配對(duì)等,導(dǎo)致自交不結(jié)實(shí),在本研究中,220株再生植株僅獲得12株再生株的自交種子。

    3.3 大白菜與DH再生植株雜交種的獲得

    所獲得的DH單株可以與3份大白菜正反交雜交的F1部分雜交結(jié)實(shí)正常。目前,已經(jīng)驗(yàn)證了獲得的F1代為真正的雜交種??梢姡允|薹屬異源六倍體CGMCC No.2553為材料進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng),不僅拓寬了蕓薹屬的種質(zhì)資源,而且獲得的部分DH再生株可以與大白菜品種雜交,為今后獲得大白菜DH永久作圖群體,構(gòu)建遺傳圖譜,開展相關(guān)基因的研究奠定了基礎(chǔ),也為研究蕓薹屬A,B和C染色體的共線性提供了依據(jù)。

    [1]U N.Genome analysis inBrassicawith special reference to the experimental formation ofB.napusand its peculiar mode of fertilization[J].Jap J Bot,1935,7:389-452.

    [2]Attia T,R?bbelen G.Cytogenetic relationship within cultivatedBrassicaanalyzed in amphidiploid from the three diploid ancestors[J].Can J Genet Cytol,1986,28:323-329.

    [3]栗茂騰,張椿雨,劉列釗,等.蕓薹屬A,B和C基因組之間關(guān)系研究進(jìn)展[J].遺傳,2005,24(7):671-676.

    [4]孟金陵.蕓薹屬植物遠(yuǎn)緣雜交不親和性的研究進(jìn)展[J].中國油料,1987(4):71-77.

    [5]馮午,陳耀華.甘藍(lán)與白菜種間雜交的雙二倍體后代[J].園藝學(xué)報(bào),1981,8(2):37-40.

    [6]張德雙,曹鳴慶,秦智偉.綠菜花游離小孢子培養(yǎng)、胚胎發(fā)生和植株再生[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào),1998,13(3):102-106.

    Regeneration of Plant with Multiple Types from Allohexaploid CGMCC No.2553 in Brassica

    ZHANG Deshuang,ZHANG Fenglan,XU Jiabing
    (Beijing Vegetable Research Center,Beijing 100097)

    Crossing with Chinese cabbage (Brassica campestrisL.ssp.Pekinensis),Brassicaallohexaploid CGMCC No. 2553 (AABBCC,n=27),which owns A,B and C chromosomes simultaneously,was used for isolated microspore culture. The results showed that it could form embryoid and could get regenerated plants.220 regenerated plants were grown at the greenhouse without heating apparatus.12 DH plants got seeds by self-pollination.Through crossing DH lines with 3 Chinese cabbage pure lines,4 F1hybrids were obtained.These hybrids were genuine hybrids by field checkup.They will be used for linkage map construction,locating and cloning the important genes in the future.

    Brassicaallohexaploid CGMCC No.2553;Isolated microspore culture;Regeneration of plants;Chinese cabbage;Hybrid F1

    10.3865/j.issn.1001-3547(x).2009.06.005

    北京市農(nóng)林科學(xué)院青年基金資助

    張德雙(1969-),男,博士,副研究員,主要從事大白菜育種等研究工作,電話:010-51503038

    2008-12-15

    猜你喜歡
    蕓薹異源大白菜
    Hechi:A Land of Natural Endowment
    近岸水體異源遙感反射率產(chǎn)品的融合方法研究
    基于EM-PCNN的果園蘋果異源圖像配準(zhǔn)方法
    不同濃度赤·吲哚·蕓薹對(duì)多肉植物桃之卵和黛比葉插繁殖的影響
    臉譜與假面 異源而殊流
    中華戲曲(2020年2期)2020-02-12 05:17:58
    早熟大白菜新品種新早59
    蔬菜(2016年8期)2016-10-10 06:49:14
    蕓薹根腫菌侵染過程及影響因子研究
    大白菜
    5.001%蕓薹素內(nèi)酯·胺鮮酯水分散粒劑調(diào)節(jié)大白菜生長田間藥效試驗(yàn)
    上海蔬菜(2016年5期)2016-02-28 13:18:11
    解脂耶氏酵母異源合成番茄紅素的初步研究
    人人妻人人澡人人看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 乱人伦中国视频| 国产免费av片在线观看野外av| 国产av精品麻豆| 欧美日韩视频精品一区| 91大片在线观看| av电影中文网址| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日韩视频在线欧美| 国产成人精品无人区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 美女福利国产在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 宅男免费午夜| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产亚洲欧美精品永久| 97人妻天天添夜夜摸| 搡老岳熟女国产| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 日韩欧美三级三区| 日本av免费视频播放| 搡老乐熟女国产| 欧美日韩av久久| 日本欧美视频一区| 天天操日日干夜夜撸| 一本色道久久久久久精品综合| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久久久久人人人人人| 午夜福利免费观看在线| 日韩大片免费观看网站| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久久久精品国产欧美久久久| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产精品一区二区免费欧美| 蜜桃国产av成人99| 天堂动漫精品| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 精品国产国语对白av| 老熟妇仑乱视频hdxx| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲国产av影院在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产野战对白在线观看| 久久国产精品大桥未久av| 色在线成人网| 国产av又大| 嫁个100分男人电影在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 女警被强在线播放| 在线观看免费午夜福利视频| 两性夫妻黄色片| 一区在线观看完整版| 久久久久久久久免费视频了| 麻豆乱淫一区二区| 久久久久精品人妻al黑| 亚洲人成电影免费在线| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产福利在线免费观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| av不卡在线播放| 国产精品久久久av美女十八| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 色在线成人网| 国产福利在线免费观看视频| 两个人看的免费小视频| 妹子高潮喷水视频| 91成年电影在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 高清欧美精品videossex| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费观看人在逋| 最新在线观看一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 男女无遮挡免费网站观看| 欧美精品一区二区大全| 在线播放国产精品三级| 国产一区二区三区视频了| 十八禁网站网址无遮挡| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 91九色精品人成在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精华国产精华精| 男女高潮啪啪啪动态图| 动漫黄色视频在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 精品国产国语对白av| 亚洲成人免费av在线播放| 免费观看人在逋| 亚洲综合色网址| 下体分泌物呈黄色| 久久久久精品人妻al黑| 精品久久蜜臀av无| 午夜两性在线视频| 91成年电影在线观看| 人人妻人人澡人人看| 亚洲伊人久久精品综合| 在线观看免费视频网站a站| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产一区二区三区视频了| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 日韩欧美三级三区| 久久中文字幕人妻熟女| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲国产欧美在线一区| 黄色a级毛片大全视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 日本黄色视频三级网站网址 | 一个人免费看片子| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲五月婷婷丁香| 国产黄色免费在线视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久久国产一区二区| 亚洲成人手机| 黄色成人免费大全| 午夜激情av网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 久热爱精品视频在线9| 欧美日韩亚洲高清精品| h视频一区二区三区| 嫩草影视91久久| av在线播放免费不卡| 露出奶头的视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 少妇的丰满在线观看| av天堂久久9| 99国产精品一区二区三区| h视频一区二区三区| 青草久久国产| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲欧美色中文字幕在线| 人成视频在线观看免费观看| 日日夜夜操网爽| 丁香六月天网| 欧美日韩成人在线一区二区| 无限看片的www在线观看| 两个人免费观看高清视频| 久久性视频一级片| 一本大道久久a久久精品| 久久亚洲精品不卡| 国产国语露脸激情在线看| 日韩免费高清中文字幕av| 久热这里只有精品99| 91国产中文字幕| 午夜福利视频精品| avwww免费| 日本av免费视频播放| netflix在线观看网站| 啦啦啦免费观看视频1| 超色免费av| 美女福利国产在线| 国产不卡av网站在线观看| 久9热在线精品视频| 在线观看舔阴道视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产av又大| 精品久久久精品久久久| 欧美午夜高清在线| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲国产欧美在线一区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 制服人妻中文乱码| 色在线成人网| 又大又爽又粗| 欧美人与性动交α欧美软件| 岛国毛片在线播放| 色尼玛亚洲综合影院| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日韩欧美免费精品| 欧美大码av| 99国产极品粉嫩在线观看| a级毛片在线看网站| 99精品在免费线老司机午夜| 久热这里只有精品99| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产精品免费视频内射| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产男女内射视频| 老熟女久久久| 男女边摸边吃奶| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩成人在线观看一区二区三区| 美女主播在线视频| a级毛片黄视频| 在线天堂中文资源库| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 一级黄色大片毛片| 亚洲av电影在线进入| 夫妻午夜视频| 亚洲 国产 在线| 国产成人精品久久二区二区91| 人人澡人人妻人| 一个人免费看片子| 成人手机av| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲av美国av| 国产成人啪精品午夜网站| 久久久久久久国产电影| 久久99一区二区三区| 免费在线观看日本一区| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产色视频综合| 一区二区三区乱码不卡18| 国产欧美日韩一区二区三| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲三区欧美一区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲专区字幕在线| 岛国毛片在线播放| 国产在线精品亚洲第一网站| 日韩精品免费视频一区二区三区| 操美女的视频在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 在线 av 中文字幕| 午夜福利免费观看在线| 一级毛片女人18水好多| 日韩视频在线欧美| 桃花免费在线播放| 日本黄色视频三级网站网址 | 免费黄频网站在线观看国产| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲黑人精品在线| 久久99一区二区三区| av一本久久久久| av天堂在线播放| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一本综合久久免费| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美大码av| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲专区国产一区二区| 91精品三级在线观看| 一区二区三区精品91| 国产97色在线日韩免费| 满18在线观看网站| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产单亲对白刺激| 国产深夜福利视频在线观看| 日本av免费视频播放| 手机成人av网站| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产野战对白在线观看| 国产成人av教育| 亚洲三区欧美一区| 亚洲精华国产精华精| 美国免费a级毛片| 老汉色av国产亚洲站长工具| 久久久精品94久久精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 黄色 视频免费看| 电影成人av| 一本综合久久免费| 成人亚洲精品一区在线观看| 啦啦啦在线免费观看视频4| 两个人免费观看高清视频| 操出白浆在线播放| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲av片天天在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 岛国毛片在线播放| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品熟女久久久久浪| 人妻 亚洲 视频| 视频在线观看一区二区三区| 欧美国产精品一级二级三级| 9191精品国产免费久久| 国产日韩欧美视频二区| 精品国产一区二区三区四区第35| 精品免费久久久久久久清纯 | 久久影院123| 免费少妇av软件| 黄色片一级片一级黄色片| 日韩中文字幕欧美一区二区| a级毛片在线看网站| 中文字幕精品免费在线观看视频| 丝袜美腿诱惑在线| 99久久99久久久精品蜜桃| 十八禁网站网址无遮挡| 午夜免费鲁丝| 久久av网站| 国产精品久久电影中文字幕 | 国产不卡一卡二| 在线看a的网站| 亚洲avbb在线观看| netflix在线观看网站| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 夜夜爽天天搞| 国产精品一区二区在线不卡| www.自偷自拍.com| 啪啪无遮挡十八禁网站| 一级毛片精品| 免费黄频网站在线观看国产| 中亚洲国语对白在线视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜福利欧美成人| 精品熟女少妇八av免费久了| 一边摸一边抽搐一进一出视频| h视频一区二区三区| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 一二三四社区在线视频社区8| 国产单亲对白刺激| 九色亚洲精品在线播放| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产精品九九99| 国产精品久久电影中文字幕 | 午夜激情av网站| 国产免费现黄频在线看| av一本久久久久| av天堂在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产成人系列免费观看| 欧美日韩精品网址| 蜜桃国产av成人99| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久久视频综合| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 欧美日韩黄片免| 亚洲视频免费观看视频| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产91精品成人一区二区三区 | 丁香六月欧美| 成人国产一区最新在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 一进一出抽搐动态| 成人永久免费在线观看视频 | 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲专区中文字幕在线| 免费在线观看完整版高清| 一级片'在线观看视频| 老熟女久久久| 久久香蕉激情| 国产精品1区2区在线观看. | 五月开心婷婷网| 国产一区二区 视频在线| 精品人妻在线不人妻| 日韩有码中文字幕| 国产亚洲一区二区精品| 满18在线观看网站| 久久 成人 亚洲| 两个人免费观看高清视频| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久国产精品影院| 日韩视频一区二区在线观看| av天堂久久9| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 中国美女看黄片| 国产成+人综合+亚洲专区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 欧美日韩福利视频一区二区| 不卡av一区二区三区| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 99热国产这里只有精品6| 91九色精品人成在线观看| 精品视频人人做人人爽| 欧美乱妇无乱码| 亚洲专区字幕在线| 一进一出好大好爽视频| av福利片在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美精品啪啪一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品av久久久久免费| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲五月色婷婷综合| 久久亚洲精品不卡| 大香蕉久久成人网| 欧美乱码精品一区二区三区| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 18禁美女被吸乳视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 欧美在线一区亚洲| 国产日韩欧美视频二区| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产高清视频在线播放一区| aaaaa片日本免费| 日本五十路高清| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 波多野结衣av一区二区av| 最新在线观看一区二区三区| 精品视频人人做人人爽| 最新美女视频免费是黄的| 黄片小视频在线播放| 国产一区二区 视频在线| 99re6热这里在线精品视频| 怎么达到女性高潮| 亚洲人成77777在线视频| 久久精品国产综合久久久| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产精品国产高清国产av | 国产激情久久老熟女| 人妻 亚洲 视频| 91大片在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 国产免费视频播放在线视频| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲一区中文字幕在线| 十八禁人妻一区二区| 亚洲精品国产区一区二| 午夜老司机福利片| 国产又爽黄色视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲欧美一区二区三区久久| cao死你这个sao货| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 人人妻人人澡人人看| 一二三四在线观看免费中文在| 天堂动漫精品| 99久久精品国产亚洲精品| 久久国产精品影院| 天堂中文最新版在线下载| 国产免费视频播放在线视频| 久久中文看片网| 亚洲国产中文字幕在线视频| videos熟女内射| 69精品国产乱码久久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 黄频高清免费视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 色尼玛亚洲综合影院| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 飞空精品影院首页| 黄片大片在线免费观看| www日本在线高清视频| 国产男女超爽视频在线观看| xxxhd国产人妻xxx| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 国产成人啪精品午夜网站| 精品一区二区三卡| 国产日韩一区二区三区精品不卡| av有码第一页| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产黄频视频在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲国产中文字幕在线视频| 十八禁网站网址无遮挡| 日韩免费高清中文字幕av| 丰满少妇做爰视频| 丁香欧美五月| 午夜老司机福利片| av线在线观看网站| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品二区激情视频| 午夜日韩欧美国产| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 国产一区二区在线观看av| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 黑人猛操日本美女一级片| 天堂动漫精品| 成人永久免费在线观看视频 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 日本vs欧美在线观看视频| 精品视频人人做人人爽| 高潮久久久久久久久久久不卡| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久影院123| 久久久国产精品麻豆| www日本在线高清视频| 黄片大片在线免费观看| 日本黄色视频三级网站网址 | 国产精品 国内视频| 日韩免费高清中文字幕av| av有码第一页| 亚洲情色 制服丝袜| 热99久久久久精品小说推荐| 精品欧美一区二区三区在线| 午夜免费成人在线视频| 黄色片一级片一级黄色片| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲中文字幕日韩| 在线观看免费日韩欧美大片| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 一级,二级,三级黄色视频| 精品福利观看| 精品福利永久在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产野战对白在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 免费高清在线观看日韩| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 午夜老司机福利片| 国产av一区二区精品久久| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲av日韩在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 色婷婷av一区二区三区视频| kizo精华| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久免费观看电影| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品免费视频内射| 在线观看免费午夜福利视频| 精品视频人人做人人爽| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲国产欧美一区二区综合| 精品国产亚洲在线| 国产97色在线日韩免费| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 无限看片的www在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 少妇精品久久久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 国产亚洲精品久久久久5区| 激情视频va一区二区三区| 99热网站在线观看| 免费在线观看完整版高清| 一本久久精品| 国产色视频综合| www.自偷自拍.com| 亚洲伊人久久精品综合| tube8黄色片| 国产精品免费大片| 热99久久久久精品小说推荐| 日本av手机在线免费观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 老司机靠b影院| 大片电影免费在线观看免费| 国产午夜精品久久久久久| 搡老熟女国产l中国老女人| 天堂中文最新版在线下载| 水蜜桃什么品种好| 最黄视频免费看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 母亲3免费完整高清在线观看| www.自偷自拍.com| 欧美大码av| 中文字幕人妻丝袜制服| 黄色 视频免费看| 亚洲avbb在线观看| 国产成人精品在线电影| 亚洲成人免费电影在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品少妇黑人巨大在线播放| 老司机亚洲免费影院| 麻豆国产av国片精品| 一区福利在线观看| 9191精品国产免费久久| 国产黄频视频在线观看| 国产xxxxx性猛交| 国产1区2区3区精品| 电影成人av| 午夜免费成人在线视频| 黄片播放在线免费| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 老司机午夜福利在线观看视频 | 两个人看的免费小视频| 男女免费视频国产| 好男人电影高清在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 性色av乱码一区二区三区2| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产精品久久电影中文字幕 | 视频在线观看一区二区三区| 精品亚洲成国产av| 一级毛片女人18水好多| 一级片免费观看大全| 国产日韩欧美亚洲二区| 怎么达到女性高潮| 亚洲精华国产精华精| 精品亚洲成国产av| 亚洲 欧美一区二区三区| 男女边摸边吃奶| 丝袜喷水一区| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产亚洲精品第一综合不卡| 久久青草综合色| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久久国产欧美日韩av| 看免费av毛片| 午夜福利在线观看吧| 欧美av亚洲av综合av国产av| 久久 成人 亚洲| 亚洲人成电影观看| 日韩视频在线欧美| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 成年人黄色毛片网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 一区二区三区乱码不卡18| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| av视频免费观看在线观看| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲av美国av| 欧美精品亚洲一区二区| 一本色道久久久久久精品综合|