胃腸道腫瘤微轉(zhuǎn)移灶的檢測及意義

王忠津　馬紀江

腫瘤的轉(zhuǎn)移情況與腫瘤患者的疾病分期、治療及預后密切相關(guān)?，F(xiàn)就胃腸道腫瘤微轉(zhuǎn)移灶的檢測及意義作一綜述。

近20年來，胃癌根治術(shù)的方法不斷改進，但總的來說最近20年來胃癌患者的預后并未改善。結(jié)腸癌患者大約50%死于局部復發(fā)或轉(zhuǎn)移疾病，這可能與這可能與腫瘤患者在手術(shù)時未能清掃淋巴結(jié)、骨髓及腹腔內(nèi)的微小轉(zhuǎn)移灶有關(guān)。因此，腫瘤患者微轉(zhuǎn)移灶的檢測具有重要意義。

1 微轉(zhuǎn)移灶的檢測方法

1．1 免疫組化

抗體的特異性的選擇與檢測方法的敏感性同樣重要。目前所有的抗體主要有抗癌胚抗原（CEA）、細胞角蛋白（CK）、上皮細胞膜抗原（EMA）等抗體，而近來研究較多的是抗細胞角蛋白單抗。細胞角蛋白是一組蛋白，共有20個組份。細胞角蛋白多肽是正常上皮細胞和惡性上皮細胞骨架的基本成分。有報道結(jié)腸癌、胃癌、卵巢癌、乳腺導管癌等均能被CK1~CK4單抗染色。而Haboubi等報道一些抗上皮細胞的抗體與正常的淋巴結(jié)成分，如樹突細胞和漿細胞反應。還有報道細胞角蛋白組分8．18在一些非上皮細胞組織和細胞系的異常表達。因此抗體的特異性有待提高。

1．2 聚合酶鏈反應（PCR） 最近檢測微轉(zhuǎn)移灶的技術(shù)取得很大進步。PCR方法具有敏感性高、特異性強、快速、樣本量大等優(yōu)點、目前PCR檢測微轉(zhuǎn)移灶的方法主要有兩種：①檢測突變或重組的改變了的DNA；②檢測“組織特異”基因的mRNA。所謂“組織特異”基因即所需測定的基因必須是在惡性細胞中轉(zhuǎn)錄活化，而不是在惡性腫瘤組織所在的正常細胞中活化。Hayashi等通過檢測突變的K-ras或p53基因來診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。這種方法的缺點是原發(fā)腫瘤必須具有一個能進行PCR擴增的異?；?，而Hayashi等只在120例重的71例獲得擴增基因。另外，用PCR方法在淋巴結(jié)中測到的可能是降解的含有重要序列的腫瘤DNA片段，而非活的腫瘤細胞。但如果能找到各種腫瘤的共同突變的致癌或抑癌基因，則這種方法將具有很廣泛的應用價值。有報道用CEAmRNA作為腫瘤標志物檢測骨髓中的微轉(zhuǎn)移灶。Noguchi 等用Keratin19 mRNA作為腫瘤標志物檢測胃癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移灶，而Soeth等用CK20 mRNA作為特異目標mRNA，用于結(jié)腸癌患者骨髓微小轉(zhuǎn)移灶的檢測，此方法的關(guān)鍵在于獲得“特異”基因的mRNA。

2 微轉(zhuǎn)移灶在胃腸道腫瘤的意義

2．1 胃癌 由于先進診斷技術(shù)的應用，早期胃癌的診斷不斷提高，預后不斷改進，但早期胃癌根治術(shù)后的患者仍有復發(fā)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢測是預測早期胃癌患者生存率的一個重要因素，而常規(guī)染色有遺漏轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)檢出的可能。Machara等用抗CK單抗檢測34例死于復發(fā)的早期胃癌患者的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移，其中8例患者（23．5%）測得CK陽性細胞，CK陽性組患者的平均生存時間為3．5年，CK陰性組為6．6年。Babo等報道淋巴結(jié)陰性的早期胃癌患者行R1根治術(shù)比行R2根治術(shù)復發(fā)率高，認為這些患者可能存在淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移灶。Schlimok等用抗細胞角蛋白單抗檢測97例胃癌患者的骨髓，其中34例骨髓中測到CK陽性細胞，并且CK陽性細胞患者的復發(fā)顯著高于CK陰性者，他認為骨髓中測到CK陽性細胞，可認為有單個腫瘤細胞體內(nèi)轉(zhuǎn)移，其具有獨立的預后意義。Jauch等也認為，骨髓中出現(xiàn)播散的腫瘤細胞則可認為有腫瘤全身化的可能，可作為預后指標，特別有助于制定輔助治療方案。Letter認為，根據(jù)Pagets的“種子與土壤”理論，播散的單個細胞只是實體瘤轉(zhuǎn)移形成的一個前提，而局部環(huán)境因素和宿主的免疫狀態(tài)則決定是否出現(xiàn)明顯的臨床轉(zhuǎn)移及其轉(zhuǎn)移方式。

然而，Juhl等認為，臨床上消化道腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移較少見，檢測腹腔中游離的腫瘤細胞意義更大。胃癌、結(jié)腸癌及胰腺癌常發(fā)生腹腔復發(fā)和轉(zhuǎn)移，腹腔中出現(xiàn)游離的癌細胞表明患者的預后差，腹腔中出現(xiàn)游離的癌細胞與肉眼可見的腹腔轉(zhuǎn)移具有同樣重要的意義。

2．2 結(jié)腸癌 Greenson等應用抗細胞角蛋白單抗免疫組化方法檢測常規(guī)染色陰性的結(jié)腸周圍進八戒，55例（568個淋巴結(jié)）中檢測到14例（33個淋巴結(jié)）出現(xiàn)CK陽性細胞，其中6例（43%）于66個月內(nèi)死亡，而CK陰性組只有1例于同期內(nèi)死亡。因此他推薦對所有Duke B期結(jié)腸癌患者用抗CK單抗檢測結(jié)腸周圍淋巴結(jié)。Hayashi等認為，基因診斷加傳統(tǒng)的病理檢查將使淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷更準確，而通過基因診斷檢測到陽性淋巴結(jié)并不一定表明腫瘤復發(fā)的可能性大。

同樣有人用抗CK單抗檢測結(jié)腸癌患者骨髓中微轉(zhuǎn)移灶，認為這提供了一個直接估計全身腫瘤細胞播散的技術(shù)，骨髓中出現(xiàn)腫瘤細胞，表明這些腫瘤細胞可能已達到肝臟、腹腔、肺臟等，因此可作為一個比腫瘤大小和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移更強的預測腫瘤轉(zhuǎn)移或局部復發(fā)的指標。最緊有學者以CK20 mRNA作為特異目標mRNA，通過RT-PCR檢測結(jié)腸癌患者中的骨髓微小轉(zhuǎn)移灶，其陽性率隨著腫瘤分期的提高而提高，而對照組中除1例FAP病例顯示陽性外，其余均為陰性。

總之，微小轉(zhuǎn)移灶的檢測可以為臨床進行腫瘤分期、判斷預后、擬定治療計劃等提供指導性或建議性意見。

參 考 文 獻

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