EGFR家族蛋白表達(dá)與食管癌預(yù)后的臨床研究進(jìn)展

權(quán) 明， 李蘇宜

表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)家族屬于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，包括EGFR、Her-2、Her-3、Her-4四個(gè)成員，分別是原癌基因C-erbB-1～4的表達(dá)產(chǎn)物。該家族成員在人類多種實(shí)體腫瘤如結(jié)直腸癌、頭頸部腫瘤、食管癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等均有過度表達(dá)[1-4]，這種現(xiàn)象與腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、血管生長及細(xì)胞凋亡的抑制等有關(guān)[5]。因此，EGFR家族過表達(dá)與腫瘤疾病較差的預(yù)后有關(guān)。

食管癌組織穩(wěn)定過表達(dá)EGFR家族。其中，食管鱗癌、腺癌表達(dá)EGFR及Her-2及對其臨床意義的研究相對較多，Her-3的過表達(dá)、Her-4的表達(dá)情況的文獻(xiàn)較少。本文在復(fù)習(xí)有關(guān)文獻(xiàn)后，就食管癌組織EGFR家族蛋白表達(dá)情況及對其臨床意義研究的進(jìn)展綜述如下。

1 EGFR家族在食管癌組織的表達(dá)情況

1.1 食管鱗癌EGFR、Her-2的表達(dá) 食管鱗癌(squamous cell carcinomas of the esophagus，ESCC)EGFR過表達(dá)率40%～80%[6-10]。國內(nèi)付建華等[6]發(fā)現(xiàn)正常食管黏膜上皮(距腫瘤邊緣至少5 cm)EGFR的表達(dá)均為陰性；食管上皮輕、中、重度不典型增生EGFR的陽性率分別為18.8%、57.9%、60.0%；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級分化ESCC的EGFR陽性率分別為63.6%、75.0%、81.3%，因此認(rèn)為EGFR陽性表達(dá)率隨食管黏膜惡變的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程而明顯增加。Hanawa等[7]對106例ESCC的研究結(jié)果顯示，53例(50%)患者EGFR過表達(dá)，其中18例免疫組化染色為3+，35例2+；并且EGFR過表達(dá)(2+，3+)只出現(xiàn)在癌細(xì)胞中，正常食管上皮基底細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞僅見低水平染色(1+)(41例)，和EGFR無表達(dá)(12例)。熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ish)分析顯示，EGFR過表達(dá)的53例中，15例有基因擴(kuò)增現(xiàn)象，EGFR無過表達(dá)病例中未發(fā)現(xiàn)基因擴(kuò)增。Miyawaki等[8]報(bào)道39例患者中有28例(71.8%)EGFR過表達(dá)，并具隨腫瘤病理分期及組織學(xué)分級升高而增加的傾向。Carneiro等[9]報(bào)道，30例ESCC患者中19例顯示EGFR強(qiáng)陽性表達(dá)(免疫染色為3+)，其中12例有基因擴(kuò)增的現(xiàn)象；另外11例患者中，僅2例基因擴(kuò)增，EGFR過表達(dá)與基因擴(kuò)增發(fā)生一致?，F(xiàn)有文獻(xiàn)未見正常食管上皮組織EGFR過表達(dá)的報(bào)道，僅有弱陽性表達(dá)(染色程度不超過1+)的描述記載。ESCC組織具有較為穩(wěn)定的EGFR過表達(dá)率，與食管上皮組織惡變程度正性相關(guān)，也與基因擴(kuò)增比率相一致。

ESCC過表達(dá)Her-2的研究存在爭議，文獻(xiàn)報(bào)道其過表達(dá)率為7.7%～65.0%，多數(shù)作者認(rèn)為在30%以內(nèi)[11-15]。Wei等[11]報(bào)道，39例ESCC患者中，23例未表達(dá)Her-2。原發(fā)腫瘤病灶只發(fā)現(xiàn)3例Her-2過表達(dá)，其中1例染色為3+，并在轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中也有Her-2的過表達(dá)，免疫染色同是3+。Sato-Kuwabara等[14]報(bào)道185例ESCC患者中，68例(36.8%)表達(dá)Her-2，其中56例(30.3%)免疫染色為2+，12例(6.5%)為3+。在47名可用Fish分析的患者中發(fā)現(xiàn)38例(80.9%)沒有基因擴(kuò)增，9例(19.1%)有基因擴(kuò)增。Her-2表達(dá)免疫組化檢測陰性和弱陽性的患者沒有發(fā)現(xiàn)基因擴(kuò)增，所有染色為3+和50%2+的病例有基因擴(kuò)增的現(xiàn)象，而且所有有基因擴(kuò)增的ESCC，其免疫組化染色均為3+。

ESCC的Her-2過表達(dá)率較低，但較為穩(wěn)定，與臨床分期和惡性程度似乎存在一致性，是潛在的放化療敏感預(yù)測因子[13]。Her-2的過表達(dá)狀態(tài)與基因擴(kuò)增存在明確的一致性，而Her-2基因擴(kuò)增是ESCC患者預(yù)后不良的提示因子[14]。

1.2 食管腺癌EGFR、Her-2的表達(dá) 食管腺癌(esophageal adenocarcinoma，EAC)在白種人群中近年來呈現(xiàn)發(fā)病上升趨勢，Barrett食管炎是其癌前病變。

Wang等[16]報(bào)道103例食管及與胃交界處腺癌，33例(32%)過表達(dá)EGFR，且與晚病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及高TNM分期有關(guān)，與腫瘤分化無關(guān)。Li等[17]觀察了104例Barrett食管炎病例進(jìn)展過程中EGFR表達(dá)率的變化，從食管正常鱗狀上皮被特殊柱狀上皮取代到食管癌發(fā)生，EGFR過表達(dá)率呈現(xiàn)逐步上升狀態(tài)(r=0.97,P<0.001)，還與癌組織的惡性程度正性相關(guān)。Langer等[18]報(bào)道137例EAC患者中72例(55%)表達(dá)EGFR。Wei等[11]認(rèn)為EGFR過表達(dá)(2+)在EAC原發(fā)病灶與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)之間有較好的一致性。Rygiel等[19]認(rèn)為EGFR是EAC組織細(xì)胞最常見的基因擴(kuò)增位點(diǎn)之一，總擴(kuò)增率為11%，且基因擴(kuò)增率隨著不典型增生程度的增加以及臨床腫瘤分期增高而增加。

EAC存在穩(wěn)定的EGFR過度表達(dá)狀態(tài)，與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。低分化EAC過表達(dá)EGFR的發(fā)生頻度高，基因擴(kuò)增率也增高，原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)之間的EGFR過表達(dá)率基本一致。

食管腺癌Her-2過表達(dá)率約為10%～20%，個(gè)別研究結(jié)果高達(dá)50%。Langer等[18]報(bào)道137例EAC患者中的22例(16%)過表達(dá)Her-2。Reichelt等[20]發(fā)現(xiàn)110例EAC患者Her-2過表達(dá)率為7%， 16例(15%)基因擴(kuò)增；在基因擴(kuò)增的16例EAC患者中14例(88%)過表達(dá)Her-2，顯示Her-2基因擴(kuò)增與蛋白過表達(dá)一致(P<0.000 1)。43例轉(zhuǎn)移患者，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶Her-2表達(dá)與基因擴(kuò)增完全吻合(P<0.000 1)，原發(fā)部位與局部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的吻合率為54%(P<0.001)。Rossi等[21]報(bào)道21例食管腺癌患者中有8例(38%)Her-2過表達(dá)，且與Barrett 食管惡化呈正相關(guān)。Rossi等[22]還認(rèn)為EAC的Her-2蛋白表達(dá)與基因擴(kuò)增呈正相關(guān)，在Barrett食管階段無Her-2過表達(dá)，異性增生及食管腺癌Her-2過表達(dá)率超過50%，Her-2過表達(dá)似可作為Barrett食管向食管腺癌進(jìn)展的分子標(biāo)志。

1.3 食管癌組織中Her-3、Her-4的表達(dá) Her-3定位于染色體12q13上，其酪氨酸激酶活性較EGFR和Her-2大為降低，直接參與跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用可能不大，目前認(rèn)為其重要性在于通過調(diào)節(jié)EGFR和Her-2的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而影響基因表達(dá)。Friess等[23]報(bào)道食管癌組織中Her-3過表達(dá)率高達(dá)64%。Wei等[11]報(bào)道39例ESCC中有19例(49%)發(fā)現(xiàn)Her-3表達(dá)，其中3例(8%)屬于過表達(dá)；6例EAC中有4例表達(dá)Her-3，2例屬于過表達(dá)，總過表達(dá)率11.1%。國內(nèi)葛棣等[24]對54例食管鱗癌組織中Her-3的表達(dá)進(jìn)行研究，其中5例(9.3%)不表達(dá)，16例(29.6%)弱陽性表達(dá)，22例(40.7%)陽性表達(dá)，11例(20.4%)強(qiáng)陽性表達(dá)，總的陽性表達(dá)率為61.1%；癌旁正常組織陰性表達(dá)48例，弱陽性表達(dá)6例。提示Her-3過表達(dá)與食管癌分化程度及局部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有相關(guān)關(guān)系，與年齡，性別，腫瘤的大小、部位和浸潤深度之間的關(guān)系不大。

食管癌組織Her-4表達(dá)的研究文獻(xiàn)罕見。Xu等[25]報(bào)道正常食管上皮組織不表達(dá)Her-4，而在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)以及細(xì)胞核均有不同程度的Her-4染色。61例ESCC中有51例(84%)細(xì)胞膜或(和)細(xì)胞質(zhì)表達(dá)Her-4，該51例中有37例(61%)核內(nèi)表達(dá)為陽性，另外10例則核內(nèi)核外均不表達(dá)。Her-4的核外表達(dá)與Her-2及Her-3的表達(dá)呈正相關(guān)，核內(nèi)表達(dá)則沒有相關(guān)關(guān)系。核外表達(dá)陽性的患者較核外不表達(dá)的預(yù)后好，而核內(nèi)表達(dá)陽性的則與其病理分期的增高以及短生存期相關(guān)。該研究提示：Her-4表達(dá)的解剖學(xué)部位不同，其對腫瘤進(jìn)展的作用亦不同。若Her-4表達(dá)定位在核外則其抑制腫瘤的進(jìn)展，若為核內(nèi)則促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

2 與EGFR表達(dá)相關(guān)的臨床意義的探索

2.1 EGFR表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系 EGFR高表達(dá)引起細(xì)胞分化異常，致細(xì)胞間粘附力下降，表現(xiàn)為e-cadherin表達(dá)缺失，腫瘤易發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[26]，因而考慮EGFR家族過表達(dá)與食管癌轉(zhuǎn)移有關(guān)。國內(nèi)李洪勝等[27]觀察42例食管鱗癌患者發(fā)現(xiàn)，局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的EGFR陽性率(56.52%)高于無局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(26.32%)(P<0.05)；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者EGFR陽性率(47.62%)高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者(27.08%)(P<0.05)。Gibault等[28]認(rèn)為EGFR過表達(dá)與食管癌血管侵襲呈正相關(guān)(P=0.023)，與高局部復(fù)發(fā)率(P=0.006)相一致，且血管侵襲患者大都顯示EGFR免疫染色陽性。Kuwabara等[14]認(rèn)為Her-2基因擴(kuò)增與ESCC的預(yù)后明顯相關(guān)，盡管Her-2蛋白表達(dá)與其基因擴(kuò)增之間有顯著的一致性。ESCC過表達(dá)Her-3也與食管癌淋巴道轉(zhuǎn)移存在一定的關(guān)聯(lián)[24]。

2.2 EGFR表達(dá)與放化療的關(guān)系 EGFR家族各成員在食管癌組織中表達(dá)狀況能否作為化放療的預(yù)測因子，目前尚不明確。Gotoh等[29]用5-Fu、順鉑化療同期聯(lián)合放療(常規(guī)分割，總量60Gy)治療62例ESCC，內(nèi)鏡評估放化療反應(yīng)。在21例表達(dá)EGFR的病例中，13例(62%)完全緩解，相比之下，未表達(dá)EGFR的41例患者中僅14例(34%)完全緩解，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.037)，多因素回歸分析也顯示只有EGFR對放化療敏感性具預(yù)測作用。另外一些研究結(jié)果則不支持EGFR表達(dá)狀況作為ESCC放化療敏感性預(yù)測因子的證據(jù)，而認(rèn)為Ki67過表達(dá)可能對放化療敏感有預(yù)測作用[30-31]。Akamatsu等[13]則認(rèn)為Her-2過表達(dá)似與食管癌放化療抵抗有關(guān)(P=0.02)。

2.3 EGFR表達(dá)與食管癌預(yù)后的關(guān)系 EGFR表達(dá)與食管癌預(yù)后的關(guān)系存在爭議。目前傾向認(rèn)為EGFR 家族過表達(dá)可做為食管癌預(yù)后因子。盡管多數(shù)研究者認(rèn)為EGFR過表達(dá)食管癌多提示較短生存期等預(yù)后不良特征[16，32-33]，但是，也有人認(rèn)為EGFR過表達(dá)與食管癌患者生存期無關(guān)[29，34]。因而，至少目前還不能成為食管癌的獨(dú)立預(yù)后因子。

Her-2過表達(dá)與抑制凋亡、促增殖、增強(qiáng)腫瘤轉(zhuǎn)移潛能相關(guān)聯(lián)，它通過誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)，促腫瘤血管形成[35]，Her-2基因擴(kuò)增有望獨(dú)立做為ESCC的預(yù)后不良提示因子[14]。但是，同樣也有人認(rèn)為Her-2的過表達(dá)與食管癌的臨床及病理特征無關(guān)[36]。

3 結(jié)語

EGFR家族在食管鱗、腺癌組織中均穩(wěn)定表達(dá)。EGFR在ESCC及EAC的過度表達(dá)似與不良預(yù)后呈正性關(guān)聯(lián)，也與食管上皮組織惡性程度呈正性關(guān)聯(lián)，并與其基因擴(kuò)增率一致；Her-2在ESCC 和EAC的過表達(dá)率均在30%以內(nèi)，是潛在的化療敏感預(yù)測因子，蛋白過表達(dá)與基因擴(kuò)增明確一致，而且Her-2基因擴(kuò)增與差預(yù)后相關(guān)聯(lián)；初步研究認(rèn)為，食管癌組織Her-3過表達(dá)率約60%，可能與癌細(xì)胞分化及局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，而Her-4過表達(dá)則可能與腫瘤病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及生存相關(guān)。

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