注射用三磷酸胞苷二鈉的處方設(shè)計(jì)及穩(wěn)定性考察

摘 要 目的：研究注射用三磷酸胞苷二鈉的生產(chǎn)處方并考察其穩(wěn)定性。方法：采用單因素輔料篩選和對(duì)比試驗(yàn)法，對(duì)注射用三磷酸胞苷二鈉的處方進(jìn)行優(yōu)化，并采用高效液相色譜法測(cè)定其含量并考察其穩(wěn)定性。結(jié)果：注射用三磷酸胞苷二鈉的處方為三磷酸胞苷二鈉40 mg，甘露醇20 mg，甘氨酸20 mg，注射用水1 mL，冷凍干燥。結(jié)論：該處方設(shè)計(jì)合理，制劑穩(wěn)定性好。

關(guān)鍵詞 三磷酸胞苷二鈉 篩選 對(duì)比試驗(yàn)法 穩(wěn)定性

中圖分類號(hào)：R97 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1006-1533(2008)05-0224-03

三磷酸胞苷二鈉為腺苷酸類藥物，可促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)磷脂、核酸和蛋白質(zhì)的合成代謝，調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞生物膜的合成，增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞抗損傷能力，營養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞，延緩神經(jīng)細(xì)胞凋亡。臨床上主要用于治療腦梗死、充血性心力衰竭、急性腦血管病、新生兒缺氧缺血性腦病和糖尿病周圍神經(jīng)病變等［1～3］。

由于三磷酸胞苷二鈉對(duì)溫度較敏感，在常溫下易分解為二磷酸胞苷二鈉和一磷酸胞苷二鈉。為增強(qiáng)其穩(wěn)定性，筆者將該品經(jīng)過處方優(yōu)化并制成凍干粉針劑，對(duì)注射用三磷酸胞苷二鈉的處方工藝和穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。

1 儀器與試藥 

1.1 儀器

SPD-10Avp高效液相色譜儀(日本島津公司)；pHSJ-3FpH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；Lyo-1真空冷凍干燥機(jī)（上海東富龍科技有限公司）；SHH-250JS恒溫恒濕箱（重慶市永生實(shí)驗(yàn)儀器廠）。

1.2 試藥

三磷酸胞苷二鈉（杭州美亞生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：050402）；甘露醇（上海長征富民藥業(yè)有限公司，批號(hào)：05082701）；右旋糖酐40(六安華源制藥有限公司，批號(hào)：05083002)；甘氨酸（協(xié)和氨基酸有限公司，批號(hào)：K469194）；注射用三磷酸胞苷二鈉（見工藝驗(yàn)證項(xiàng)下，批號(hào)：060301、060302、060303）。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方設(shè)計(jì)

2.1.1 溶劑的確定

根據(jù)三磷酸胞苷二鈉易溶于水的特點(diǎn)，經(jīng)過溶解試驗(yàn)，40 mg三磷酸胞苷二鈉可在0.5 mL的注射用水中完全溶解，且放置數(shù)日不析出。因此，選擇注射用水為本品的溶劑。

2.1.2 凍干體積的確定

為了保證主藥的溶解且凍干易于成型，經(jīng)試驗(yàn)，確定凍干體積為1 mL。

2.1.3賦形劑的篩選

合適的賦形劑可以使制劑易于凍干并能保持較好的外觀性狀。本實(shí)驗(yàn)選擇甘露醇和右旋糖酐40分別制備樣品，考察樣品的干燥失重、外觀性狀、復(fù)溶性，從而篩選出最合適的賦形劑，結(jié)果見表1。

從表1可見，用甘露醇作賦形劑時(shí)，凍干品的干燥失重、外觀性狀及復(fù)溶性均優(yōu)于右旋糖酐40。因此，選擇甘露醇作為本品的賦形劑。

2.1.4 處方篩選

凍干制劑要求骨架成型且較牢固，外觀光平細(xì)密，含水分低，復(fù)溶性好。在確定溶劑、凍干體積、賦型劑的基礎(chǔ)上選用甘氨酸為穩(wěn)定劑。處方組成見表2。

按上述處方組成配成藥液，過濾，灌裝于管制瓶中，每瓶1 mL，半加塞入凍干箱凍干。對(duì)制得的樣品進(jìn)行評(píng)價(jià)，考察外觀性狀、干燥失重、復(fù)溶性、澄清度、含量及有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果見表3。

從表3可見，各處方的外觀性狀無明顯差異；隨著甘露醇用量的增加，干燥失重逐漸降低；而隨著甘氨酸用量的減少，含量逐漸降低。綜合考慮，可選擇處方D作為最優(yōu)處方。

2.2 工藝驗(yàn)證

按上述最優(yōu)處方稱取處方量三磷酸胞苷二鈉、甘氨酸及甘露醇，加入冷的注射用水中攪拌溶解，用2 mol/L 氫氧化納調(diào)pH至5.5~6.5，用冷注射用水定容，用0.22 μm微孔濾膜無菌過濾，凍干，制備3批中試樣品（批號(hào)：060301、060302、060303）。結(jié)果，所制備的3批樣品的性狀均為白色凍干塊狀物，干燥失重分別為3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%；含量分別為98.3%、101.6%和102.1%，含量在95 .0％～105.0％之間；有關(guān)物質(zhì)分別為1.7%、1.5%和1.9%，均小于5.0％。

2.3 質(zhì)量控制

2.3.1 干燥失重

取本品，以五氧化二磷為干燥劑，60 ℃減壓干燥至恒重，失重不得超過7.0%［4］。3批樣品干燥失重分別為3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%。

2.3.2 含量測(cè)定

總核苷酸：用分光光度法測(cè)定［4］，在280 nm波長處測(cè)定吸收度，按C9H14N3Na2O14P3的吸收系數(shù)為243計(jì)算。

三磷酸胞苷二鈉的重量比：用高效液相色譜法測(cè)定［4］。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.2 mol/L 磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉35.8 g，磷酸二氫鉀13.6 g，加水900 mL溶解，用1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，加入四丁基溴化銨1.61 g，加水至1 000 mL搖勻。甲醇∶水（95∶5）為流動(dòng)相；柱溫為35 ℃，檢測(cè)波長為271 nm；理論板數(shù)按三磷酸胞苷二鈉峰計(jì)算應(yīng)大于1 500；各色譜峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定。出峰次序依次為一磷酸胞苷、二磷酸胞苷與三磷酸胞苷。三磷酸胞苷二鈉含量（%）=總核苷酸×三磷酸胞苷二鈉的重量比。結(jié)果，3批樣品的含量分別為98.3%、101.6%和102.1%。

2.3.3 有關(guān)物質(zhì)檢查

按照含量測(cè)定項(xiàng)下三磷酸胞苷二鈉的重量比的方法測(cè)定，有關(guān)物質(zhì)不得超過5.0%。結(jié)果，3批樣品的有關(guān)物質(zhì)分別為1.7%、1.5%和1.9%。

2.4 穩(wěn)定性研究［4］

根據(jù)三磷酸胞苷二鈉對(duì)溫度比較敏感的特點(diǎn)，將3批樣品（批號(hào)：060301、060302、060303）按市售包裝，在溫度為（30±2）℃、相對(duì)濕度（65±5）％的加速試驗(yàn)條件下放置，分別于1、2、3、6個(gè)月取樣分析各項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)果見表4。按市售包裝，在溫度為（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10)％的長期試驗(yàn)條件下放置，分別于3、6、9、12個(gè)月取樣分析各項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)果見表5。

加速及長期試驗(yàn)結(jié)果表明，在溫度為（30±2）℃、相對(duì)濕度（65±5）％加速試驗(yàn)條件下，干燥失重、含量、有關(guān)物質(zhì)等各項(xiàng)指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。在溫度為（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）％長期試驗(yàn)條件下，干燥失重、含量、有關(guān)物質(zhì)等各項(xiàng)指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

3 結(jié)論

三磷酸胞苷二鈉原料藥在常溫條件下具引濕性，易降解。通過制劑處方篩選，得到了一種能顯著改善該品穩(wěn)定性的處方工藝，使注射用三磷酸胞苷二鈉的各項(xiàng)指標(biāo)能達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

采用高效液相色譜法能同時(shí)準(zhǔn)確測(cè)定本品中三磷酸胞苷二鈉的含量及有關(guān)物質(zhì)，具有快速、重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)6個(gè)月加速和12個(gè)月長期穩(wěn)定性考察，本品性狀、干燥失重、含量、有關(guān)物質(zhì)等指標(biāo)均無明顯變化。說明本處方工藝合理，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

參考文獻(xiàn)

1 黃經(jīng)璋，王嗣春，史孟松.三磷酸胞苷二鈉治療急性腦梗塞的臨床療效觀察［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，3(3):155－157.

2 馮永歌，劉建軍，申敏，等.三磷酸胞苷二鈉治療新生兒缺氧缺血性腦病34例［J］.河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，36(4):494－495.

3 武順，孫中安，任冬梅.三磷酸胞苷治療糖尿病周圍神經(jīng)病變的臨床觀察［J］.臨床軍醫(yī)雜志，2003，31(6):30－31.

4 國家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典二部［M］.2005年版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄176.

(收稿日期：2008-02-22)