新型微生物源農(nóng)藥申嗪霉素對水稻紋枯病菌的毒力測定及田間藥效

溫廣月　張　穗　張紅艷　許煜泉　楊　曉

摘要在室內(nèi)離體條件下，申嗪霉素對水稻紋枯病菌的毒力回歸方程為y=O.200 9x-2.90 4(r²-O.968 1)，其EC₅₀為0.08μg/mL。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，在水稻植株噴施申嗪霉素有效成分劑量6.45μg/mL后第1、8、15天接種水稻紋枯病菌，其對水稻紋枯病的防治效果分別為100.00％、99.37％和81.23％；噴施申嗪霉素3.23μg/mL后第1、8、15天接種水稻紋枯病菌，其對水稻紋枯病的防治效果分別為100.00％，60.54％和64.58％，且與噴施井岡霉素有效成分劑量50μg/mL的防治效果94.43％、64.17％和30.49％差異均不顯著。

關(guān)鍵詞申嗪霉素；水稻紋枯?。皇覂?nèi)毒力；田間效果

中圖分類號S 476.1

水稻紋枯病是水稻產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的重要病害之一。20世紀(jì)70年代以來井岡霉素一直是我國防治水稻紋枯病的重要生物農(nóng)藥。但是，長時間、大面積應(yīng)用同一種農(nóng)用抗生素防治同一種病害存在一定的弊端。出于對人類、動植物健康和環(huán)境安全的考慮，歐盟第2076/2002號法規(guī)規(guī)定2003年12月31日起正式禁止井岡霉素在歐盟境內(nèi)銷售。因此，開展井岡霉素替代藥劑的研究迫在眉睫。

申嗪霉素是我國自主開發(fā)的原創(chuàng)性農(nóng)藥，是熒光假單胞菌株M18分泌的一種微生物源抗菌素，其主要的有效成分是吩嗪－1－羧酸。目前的研究結(jié)果表明，該抗生素對多種植物病原菌都有很強(qiáng)的抑制作用，對蜜蜂、鵪鶉、家蠶、家兔、豚鼠、大鼠、小鼠等的毒性很低，環(huán)境相容性好，可被微生物降解。申嗪霉素的研制成功是“十五”國家科技攻關(guān)項(xiàng)目“新農(nóng)藥的創(chuàng)制和關(guān)鍵技術(shù)研究”的重要成果之一。本研究旨在前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，確定申嗪霉素在室內(nèi)離體條件下和田間對水稻紋枯病(菌)的抑制作用，以明確其田間實(shí)際應(yīng)用的劑量和持效期，為其大面積推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1．1申嗪霉素對水稻紋枯病菌的室內(nèi)毒力測定

1．1．1供試菌種和藥劑

水稻紋枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1IA)由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所分離并鑒定。1％申嗪霉素懸浮劑由上海農(nóng)樂生物制品股份有限公司提供。20％井岡霉素可溶粉劑由浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)。

1．1．2試驗(yàn)方法

采用平皿生長速率法測定藥劑對病菌的抑制效果。1％申嗪霉素懸浮劑共設(shè)有效成分劑量0.03、0.06、0.10、0.13、0.14μg/mL共5個濃度梯度。將供試藥劑與溶化后的PDA培養(yǎng)基混合，然后倒入9 cm的培養(yǎng)皿中，配成一定濃度藥液的PDA平板，以不添加藥液的PDA平板為空白對照，每濃度重復(fù)5次(5皿)?；罨? d后的水稻紋枯病菌用打孔器打成5 mm的菌餅，然后把菌餅接種于上述PDA平板中，28℃恒溫培養(yǎng)箱全黑暗培養(yǎng)48 h，待對照菌落長滿全皿后用十字交叉法測量菌落直徑，求出毒力回歸方程，并計(jì)算供試藥劑對病原菌的有效中濃度(EC₅₀)。

1．2申嗪霉素對水稻紋枯病的田間防治作用

1．2．1供試品種

水稻品種武育粳3號由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所提供。

1．2．2試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)。設(shè)1％申嗪霉素懸浮劑有效成分劑量分別為0.06、0.32、1.61、3.23、6.45 μg/mL，20％井岡霉素可溶粉劑有效成分劑量50μg/mL以及清水對照7個處理。對分蘗期的水稻進(jìn)行全株噴霧，噴藥后第1、8、15、22天分別將培養(yǎng)2 d的水稻紋枯病菌菌餅(直徑5 mm)夾在水稻上數(shù)第3個葉鞘內(nèi)，并用保鮮袋保濕5 d。每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)30～50株水稻，接種后第7天測量各處理病斑的擴(kuò)展長度(cm)，計(jì)算相對防治效果(％)，并對各處理之間的防治效果進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2結(jié)果與分析

2．1申嗪霉素對水稻紋枯病室內(nèi)毒力測定結(jié)果

水稻紋枯病菌在含有0.03 tLg/mL申嗪霉素的PDA平板上，其生長速率和對照的菌絲生長速率之間差異不顯著(p=0.05)。藥劑濃度達(dá)到0.06 μg/mL以上對病菌出現(xiàn)顯著抑制作用。申嗪霉素抑菌率幾率值與濃度對數(shù)之間的線性方程為y=0.200 9x-2.090 4(r²-0.968 1)，EC₅₀=0.08 μg/mL(表1和圖1)。

2．21％申嗪霉素懸浮劑防治水稻紋枯病田間效果

從表2看出，0.06、0.32、1.61、3.23、6.45μg/mL申嗪霉素在噴藥后第1、8、15天對水稻紋枯病的防治效果隨著濃度的增高而提高；田間試驗(yàn)結(jié)果表明，6.45μg/mL申嗪霉素在水稻植株噴藥后第1、8、15天接種對水稻紋枯病的防治效果分別為100.00％、99.37％和81.23％，在噴藥后第22天防治效果明顯下降；3.23 μg/mL申嗪霉素在噴藥后第1、8、15天接種對水稻紋枯病的防治效果分別為100.00 ％，60.54％和64.58％，且與50μg/mL井岡霉素的防治效果94.43％、64.17％和30.49％之間差異均不顯著；1.61μg/mL申嗪霉素在噴藥后第8、15天接種對水稻紋枯病的防治效果分別為60.06％和30.99％，且與50 μg/mL井岡霉素的防治效果64.17％和30.49％之間差異亦均不顯著。0.06μg/mL和0.32μg/mL申嗪霉素對水稻紋枯病的防治效果較低。通過1％申嗪霉素懸浮劑田間使用濃度與抑菌率的關(guān)系，可計(jì)算出：在田間條件下施藥后第1、8和15天的EC₅₀分別為0.59、1.46 μg/mL和2.05μg/mL；從以上結(jié)果可以看出，隨著施藥后時間增加，1％申嗪霉素懸浮劑對水稻紋枯病的防治能力逐漸下降；在試驗(yàn)所采用的濃度下，1％申嗪霉素懸浮劑防治水稻紋枯病的持效期為20 d。

3結(jié)論與討論

由本試驗(yàn)可以看出，申嗪霉素對水稻紋枯病有較高的防治效果。在相同濃度下該藥劑與井岡霉素的防治效果差異不顯著，可以作為井岡霉素的替代藥劑。

在室內(nèi)離體條件下，申嗪霉素對水稻紋枯病菌的EC₅₀為0.08 μg/mL，即該藥劑對水稻紋枯病菌有很強(qiáng)的抑制作用，但是從田間應(yīng)用效果顯示，1％申嗪霉素懸浮劑田間的EC₅₀遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于室內(nèi)離體條件下測定的EC₅₀，因此申嗪霉素還有很大的潛力可以發(fā)掘，例如研發(fā)出更為合適的劑型，篩選更為合適的助劑等等。

從本試驗(yàn)結(jié)果還可以看出，掌握正確的施藥時機(jī)也是十分必要的，0.06、0.32μg/mL申嗪霉素在施藥后第1天接種后的防效達(dá)到40％以上，3.23 μg/mL的防效達(dá)到了73.88％。因此，掌握合適的用藥時間可以節(jié)省大量的藥劑，可以大幅度降低田間用藥成本。

本研究認(rèn)為，應(yīng)用1％申嗪霉素懸浮劑防治水稻紋枯病，田間施用有效成分劑量在1.61～3.23 μg/mL之間，藥效可持續(xù)20 d。