自擬祛疣方聯(lián)合二氧化碳激光治療尖銳濕疣臨床觀察及外周血IL-2、IL-10及IFN-γ 的監(jiān)測(cè)

樊磊強(qiáng)，張艷峰，劉智君

（河北省承德市中心醫(yī)院，承德067000）

尖銳濕疣（Condyloma acuminatum, CA）是人類(lèi)乳頭瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染所引起的一種常見(jiàn)的性傳播疾病，復(fù)發(fā)率較高。細(xì)胞免疫功能參與CA 的發(fā)生、消退及復(fù)發(fā)，Th1/Th2 細(xì)胞平衡及其各自分泌的細(xì)胞因子對(duì)細(xì)胞免疫功能具有重要的調(diào)控作用。筆者于2012 年6 月—2013 年6 月采用自擬祛疣方聯(lián)合CO2激光治療尖銳濕疣獲得理想療效，并檢測(cè)CA 患者治療前后外周血白細(xì)胞介素（IL）-2、IL-10 及干擾素（IFN）-γ 水平變化，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)中國(guó)衛(wèi)生部疾病控制司指定的《尖銳濕疣診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》[1]，納入標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）年齡≥18 歲；（2）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，具有典型的臨床表現(xiàn)，疣體主要呈乳頭狀、菜花狀；（3）近1 個(gè)月內(nèi)未接受過(guò)系統(tǒng)治療或近2 周內(nèi)局部未使用過(guò)抗病毒藥物、免疫調(diào)節(jié)劑或其他外用藥物；（4）治療和隨訪(fǎng)期間無(wú)再感染史；（5）能提供詳細(xì)個(gè)人信息且按要求用藥及復(fù)診或隨訪(fǎng)者。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）既往對(duì)已知治療藥物成分過(guò)敏者；（2）合并有心腦血管、肝、腎、造血系統(tǒng)疾病及先天性疾病者；（3）合并有自身免疫性疾病，長(zhǎng)期服用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑史；（4）治療期間合并應(yīng)用其他藥物者；（5）孕婦、哺乳期婦女；（6）入選前4周內(nèi)接受過(guò)系統(tǒng)治療，2 周內(nèi)行局部抗病毒治療者；（7）不能按要求用藥、復(fù)診或隨訪(fǎng)者，記錄不全或患者自動(dòng)終止治療者。

1.3 一般資料 100 例CA 病人，其中男62 例，女38 例。均選自2012 年6 月—2013 年6 月我院皮膚性病科門(mén)診患者，入選年齡18～52 歲，平均（32.0±2.8）歲；病程7 d～22 個(gè)月，平均（4.2±1.3）個(gè)月。所有CA患者按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為2 組，其中祛疣方組60 例，CO2激光組40 例。并選取我院同期健康體檢者，且無(wú)免疫性疾病、嚴(yán)重系統(tǒng)疾病及其他感染性疾病者為正常對(duì)照組，共50 例。各組之間性別、年齡差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），具有可比性。

1.4 方法

1.4.1 血清標(biāo)本制備 祛疣方組及CO2激光組入選病例分別于治療前及治療后3 個(gè)月于空腹抽取靜脈血5.0 mL，離心（2 000 r/min），收集血清，分裝后置-80 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)。正常對(duì)照組僅于體檢時(shí)抽一次血備用。

1.4.2 細(xì)胞因子濃度檢測(cè) 對(duì)CA 患者外周血清中的IFN-γ，IL-2、IL-10 水平進(jìn)行檢測(cè)。按照ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，采用雙抗體夾心ELISA 方法，ELISA 試劑盒為上海西唐生物工程有限公司產(chǎn)品。

1.4.3 治療方法 祛疣方組常規(guī)消毒疣體及疣體周?chē)つw黏膜，利多卡因注射液局部浸潤(rùn)麻醉后，用CO2激光治療儀去除疣體。再用自擬祛疣方坐浴。祛疣方由土茯苓、板藍(lán)根、木賊、紫草、香附、苦參、萆薢組成。每藥各30 g，加水(共約600 mL)，文火煎20 min，倒出藥汁，再如法煎20 min 取汁，兩汁合一。藥汁溫度以感溫?zé)崾孢m為宜，變冷可再加熱，坐浴，每次30～40 min，2 次/d，1 付/d，14 d 為1 個(gè)療程；治療至創(chuàng)面完全愈合后再用4 個(gè)療程即停藥，停藥3 個(gè)月后評(píng)價(jià)療效。CO2激光組僅用CO2激光祛除疣體，3 個(gè)月后評(píng)價(jià)療效。

1.5 療效判定 肉眼可見(jiàn)疣體完全被清除，且治療后3 個(gè)月內(nèi)原病損處未再出現(xiàn)新生疣體，醋酸白試驗(yàn)陰性即為臨床治愈；治療后3 個(gè)月內(nèi)又在原病變區(qū)及周?chē)霈F(xiàn)新的疣體者為復(fù)發(fā)。

1.6 安全性觀察指標(biāo) 所有患者詳細(xì)登記個(gè)人信息及聯(lián)系方式，均能按要求隨訪(fǎng)，用藥后每次隨訪(fǎng)或就診時(shí)，詢(xún)問(wèn)并記錄患者可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)，主要是局部不良反應(yīng)，如局部刺激癥狀及過(guò)敏反應(yīng)等。1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組IL-2、IL-10、IFN-γ 含量檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。祛疣方組與CO2激光組治療前、后血清中IL-2、IL-10、IFN-γ 含量與健康組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t 值見(jiàn)表2，P<0.05），祛疣方組與CO2激光組治療前后3 項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著變化（P>0.05）。

表1 3 組IL-2、IL-10、IFN-γ 含量檢測(cè)結(jié)果 （x±s,pg/mL）

表2 健康對(duì)照組與祛疣方組及CO2 激光組IL-2、IL-10、IFN-γ 含量比較t 值

2.2 祛疣方組與CO2激光組復(fù)發(fā)率比較 2 組患者復(fù)發(fā)率比較，祛疣方組復(fù)發(fā)率明顯低于CO2激光組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.143，P=0.008）。見(jiàn)表3。治療組患者未出現(xiàn)局部刺激癥狀及過(guò)敏反應(yīng)等不良反應(yīng)。

表3 祛疣方組與CO2 激光組復(fù)發(fā)情況 例

3 討論

尖銳濕疣是由乳頭瘤病毒引起的一種性傳播疾病，呈逐年上升的趨勢(shì)，其發(fā)病率及復(fù)發(fā)率居高不下。國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究結(jié)果表明，CA 的復(fù)發(fā)與Th1/Th2 細(xì)胞因子失衡有關(guān)，CA 患者外周血Th1 細(xì)胞因子分泌減少，而Th2 細(xì)胞因子分泌增多[2]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，尖銳濕疣是由于房事不潔或接觸污穢之物品，使?jié)駸嵋厩秩胪怅幤つw黏膜，導(dǎo)致肝經(jīng)郁熱，氣血不和，濕熱毒邪搏結(jié)而成。由于濕毒為陰邪，其性黏滯，故纏綿難愈，且易耗傷正氣。一般分濕熱下注、濕濁互結(jié)、陰虛濁結(jié)、氣虛邪復(fù)等證進(jìn)行治療。故本方以“清熱除濕，涼血解毒”為治則。祛疣方由土茯苓、板藍(lán)根、木賊、紫草、香附、苦參、萆薢組成。板藍(lán)根能清熱解毒利濕，促進(jìn)尖銳濕疣贅生物消散；木賊草有疏散風(fēng)熱之功，香附具有理氣散結(jié)、疏肝解郁、行氣止痛作用。由于尖銳濕疣易在溫暖潮濕環(huán)境中發(fā)生，針對(duì)此特點(diǎn)在原方基礎(chǔ)上加入清熱利濕力較強(qiáng)的苦參、土茯苓、萆薢，共奏清熱解毒、燥濕瀉火、軟堅(jiān)散結(jié)之功?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究顯示，板藍(lán)根、木賊、香附、紫草、苦參具有較強(qiáng)的抗病毒作用，能抑制尖銳濕疣病毒復(fù)制[3]。土茯苓兼具調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫作用，且對(duì)細(xì)菌感染有一定抑制作用[4]。本治療方法是運(yùn)用CO2激光去除疣體后進(jìn)行坐浴，發(fā)揮了局部抗病毒作用，防止繼發(fā)感染，促進(jìn)創(chuàng)口愈合，同時(shí)有效清除原病灶及周?chē)M織正常皮膚的潛伏病毒[5]，兼顧“治已病”及“治未病”，提高治愈率，減少?gòu)?fù)發(fā)。

IFN-γ 又稱(chēng)免疫干擾素，主要由激活的Th1 細(xì)胞分泌，主要作用是通過(guò)激活單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞而調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，參與對(duì)細(xì)胞內(nèi)寄生微生物的抗感染免疫，在拮抗細(xì)胞內(nèi)病毒感染中起重要作用[6]。IL-2 主要由Th1 細(xì)胞分泌，能夠刺激T 細(xì)胞增殖，提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能[7]。IL-10 主要是由Th2 細(xì)胞分泌，通過(guò)抑制Th1 細(xì)胞分泌IL-2而抑制Th1 細(xì)胞增殖，進(jìn)而抑制Th1 合成IL-2、IL-3、IFN-γ 和TNF 等細(xì)胞因子，抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)[8]。IL-10 水平高于正常對(duì)照水平，說(shuō)明機(jī)體Th2 型細(xì)胞功能處于亢進(jìn)狀態(tài)。

筆者發(fā)現(xiàn)，CA 患者外周血IFN-γ 水平低于正常對(duì)照組水平，說(shuō)明機(jī)體Th1 型細(xì)胞功能受到抑制。同時(shí)發(fā)現(xiàn)患者血清中IL-2 水平下降，且與IFNγ 水平下降有一致性，進(jìn)一步反映出Th1 細(xì)胞受到抑制，其分泌細(xì)胞因子的能力減弱，Th1 亞群處于低表達(dá)狀態(tài)。提示可能HPV 抑制機(jī)體的細(xì)胞免疫應(yīng)答，Th1 型炎性因子IL-2、IFN-γ 水平下降，導(dǎo)致誘導(dǎo)并激活T 細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等進(jìn)行細(xì)胞免疫應(yīng)答的能力下降。

本研究結(jié)果顯示，祛疣方組患者其復(fù)發(fā)率明顯低于CO2激光治療組，2 組患者外周血清IFN-γ、IL-2 和IL-10 水平較治療前有所變化，但變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），反映出隨著病毒的逐漸清除，病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞因子水平有所改善，Th1/Th2 逐漸趨于正常，但該變化可能是機(jī)體自身發(fā)生的免疫調(diào)節(jié)改變所致。本方劑對(duì)患者IFN-γ、IL-2 和IL-10水平無(wú)顯著影響，患者復(fù)發(fā)率降低可能是由于本方劑可以促進(jìn)皮膚愈合，改善皮膚局部的免疫變化所致，但需要大樣本研究進(jìn)一步證實(shí)。

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