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    癲癇全面強直-陣攣發(fā)作患者的氧化應激水平

    2011-08-04 11:33:50尹義軍
    微循環(huán)學雜志 2011年4期
    關鍵詞:癲癇氧化應激自由基

    吳 琴 左 芳 尹義軍

    吳 琴,左 芳,尹義軍

    湖北省黃石市中心醫(yī)院檢驗科,黃石435000

    癲癇發(fā)作是大腦神經(jīng)元異常放電引起的一過性腦功能障礙,可導致腦部神經(jīng)元的壞死或凋亡及神經(jīng)生化等改變[1]。全面強直-陣攣發(fā)作(Generalized Tonic-Clonic Seizure,GTCS)是臨床常見的癲癇發(fā)作形式,主要特征為意識喪失、雙側強直后出現(xiàn)陣攣。研究[2]發(fā)現(xiàn),癲癇發(fā)作導致機體氧耗增加、呼吸暫停和血管舒縮功能異常而繼發(fā)腦缺血、缺氧反應,氧化性損傷參與癲癇的神經(jīng)組織損傷。8-羥 基 脫 氧 鳥 苷 酸 (8-Hydr oxy-Guanine,8-OHd G)是羥自由基在DNA堿基位置上與脫氧鳥嘌呤核苷酸殘基結合并進一步氧化生成的,通過檢測血清8-OHd G可以間接反映氧化應激的水平[3]。本研究通過測定GTCS患者的血清8-OHd G以及超氧化物歧化酶(Superoxide Distamuse,SOD)、丙二醛(Malondial dehyde,MDA)、總抗氧化力(Total Anti-Oxidation Capacity,T-AOC)水平,探討氧化應激在癲癇發(fā)作期神經(jīng)組織損傷過程中可能的作用。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選擇2010年1月~2011年6月在我院神經(jīng)內科初診住院的30例癲癇GTCS患者(癲癇組),其中男18例,女12例,年齡19~62歲,平均年齡40.30±11.40歲,均符合1981年國際抗癲癇聯(lián)盟(ILAE)制定的癲癇發(fā)作癥狀學分類標準。病程4~25年,每年發(fā)作2~12次。其中癥狀性癲癇15例,特發(fā)性癲癇3例,隱源性癲癇12例。同期從本院體檢中心健康體檢人員中選擇30例健康者作為對照組,其性別和年齡與癲癇組相匹配。入選者均知情同意。

    1.2 檢測方法

    1.2.1 標本采集:采集靜脈血5 ml,室溫靜置1h凝固,然后4℃4 000r/min離心10 min,取上層血清,分裝于聚丙烯EP管中,立即凍存于-80℃保存。癲癇組采血時間為癲癇發(fā)作12h內,對照組為清晨空腹。

    1.2.2 檢測方法:檢測前從-80℃取出樣本,常溫解凍,所有檢測血清均1次凍融。ELISA檢測血清8-OHd G、SOD、MDA、T-AOC含量。8-OHd G試劑盒購自美國Cay man Chemical Company,SOD、MDA、T-AOC試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。標本均為同批測定,各項操作嚴格按試劑盒說明進行,RT6000型酶標儀為深圳霄杜生命科學有限公司生產。

    1.3 統(tǒng)計學處理

    2 結 果

    癲癇組和對照組血清8-OHd G、SOD、MDA和T-AOC水平的比較結果見表1。癲癇組血清8-OHd G、MDA水平高于對照組(t值分別為3.62和3.07,P<0.01);而血清SOD、T-AOC水平低于對照組(t值分別為2.44和3.09,P<0.01)。

    3 討 論

    氧化應激是指機體內氧自由基生成增加和清除能力降低,導致活性氧類自由基(Reactive Oxygen Species,ROS)在體內或細胞內蓄積而引起的氧化損傷過程[4]。由于氧自由基具有高度化學反應性,其半衰期短暫,因此直接檢測這些活性氧或自由基水平非常困難。臨床常用其氧化產物水平反映氧化應激水平作為評估機體氧化應激或者活性氧水平的生物標志[5]。DNA損傷是氧化損傷的重要表現(xiàn)之一,當DNA受到氧自由基攻擊時,鳥嘌呤最易被氧化修飾,形成產物8-OHd G[6],已成為DNA 氧化損傷中常用生物標志物。MDA是氧自由基與細胞膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質過氧化反應的終產物之一,其含量可以間接反映體內氧自由基的含量和氧化損傷的程度。體內自由基的清除主要靠內源性自由基清除系統(tǒng),包括SOD等。T-AOC是體內抗氧化物質對抗過氧化損傷能力的總和,代表體內酶性和非酶性抗氧化物的總體水平,可綜合反映組織和體液對抗氧自由基損傷機體能力。當體內氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡,氧自由基過多即形成氧化應激,破壞細胞結構和功能[7]。本研究采用這幾個指標觀察了GTCS患者氧化應激水平的變化。

    表1 癲癇組與對照組氧化應激水平比較(±s,n均=30)

    表1 癲癇組與對照組氧化應激水平比較(±s,n均=30)

    注:與對照組比較,1)P<0.01

    組別 8-OHd G(ng/ml) SOD(U/ml) MDA(n mol/ml) T-AOC(U/ml)0.32±0.08 91.01±12.76 7.21±1.81 10.18±2.33癲癇組 0.41±0.11 1) 80.31±14.19 1) 8.19±1.25 1) 8.94±1.78 1)對照組

    癲癇發(fā)作是大腦神經(jīng)元異常放電引起的一過性腦功能障礙,發(fā)作時大腦神經(jīng)元超同步化放電,因神經(jīng)元缺血缺氧、興奮性氨基酸大量釋放、細胞內Ca2+超載等多重因素而導致相應神經(jīng)元損傷。很早就有病理學研究顯示,癲癇發(fā)作后存在膠質細胞增生、神經(jīng)元損傷、中樞神經(jīng)髓鞘脫失等病理變化[8],進而出現(xiàn)相應的認知、情感等高級神經(jīng)功能的減退。

    本研究觀察到GTCS后外周血清DNA氧化損傷標志物8-OHd G和細胞膜氧化損傷標志物MDA水平較正常對照組升高,而內源性自由基清除系統(tǒng)SOD和體內抗氧化損傷能力指標T-AOC水平較正常對照組降低,證實癲癇發(fā)作后體內氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡,氧化應激參與了癲癇發(fā)作的病理生理過程,但氧化應激與癲癇發(fā)作、神經(jīng)元損傷之間的因果關系,尚需進一步研究。

    1 Fisher RS,vall Erode Boas W,Bl ume W,et al.Epileptie seizures and epilepsy:definitions proposed by the international league against epilepsy(ILAE)and the international bureau for epilepsy(IBE).Epilepsia,2005,46(4):470~472.

    2 Hirseh LJ.Breathing new life into the fight against sudden death in epilepsy.Epilepsy Curt,2009,9(5):137~139.

    3 Wu LL,Chiou CC,Chang PY,et al.Urinary 8-OHd G:a mar ker of oxidative stress to DNA and a risk factor for cancer,atherosclerosis and diabetics.Clin Chi m Acta,2004,339(1~2):1~9.

    4 Singh U,Jialal I.Oxidative stress and atherosclerosis.Pathophysiology,2006,13(1):129~142.

    5 Kehrer JP.Free radicals as mediators of tissue injury and disease.Critical Reviews in Toxicology,1993,23(1):21~48.

    6 Valavanidis A,Vlachogianni T,F(xiàn)iotakis C.8-h(huán)ydroxy-2’-deoxyguanosine(8-OHd G):A critical biomar ker of oxidative stress and carcinogenesis.J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev,2009,27(1):120~139.

    7 Lushchak VI.Free radical oxidation of proteins and its relationship with functional state oforganisms.Biochemistry(Mosc),2007,72(8):809~827.

    8 Sutula TP,Hagen J,Pitkanen A.Do epileptic seizures damage the brain.Curr Opin Neurol,2003,16(2):189~195.

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