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    Folin-Ciocalteu法測定水果中多酚含量

    2017-01-04 10:52:26李啟彭寸鏡楠趙仲霞羅家剛沈燕瓊
    浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年12期
    關(guān)鍵詞:昭通法測定果皮

    李啟彭,寸鏡楠,趙仲霞,羅家剛,沈燕瓊

    (1.昭通學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,云南省昭通 657000;2.昭通市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心,云南省昭通 657000)

    Folin-Ciocalteu法測定水果中多酚含量

    李啟彭1,寸鏡楠1,趙仲霞1,羅家剛1,沈燕瓊2*

    (1.昭通學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,云南省昭通 657000;2.昭通市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心,云南省昭通 657000)

    采用超聲波法提取昭通特色水果中的多酚,并用Folin-Ciocaltue法測定其含量。試驗(yàn)結(jié)果表明,紅玫瑰葡萄、紅富士蘋果、雪花梨和山楂的果皮和果實(shí)中多酚含量分別為11.1624、10.1081、26.3451、67.1485 mg·g-1和1.7511、3.7478、15.7872、19.7410 mg·g-1。該試驗(yàn)可為昭通特色水果的開發(fā)及深加工提供理論依據(jù)。

    超聲波法;Folin-Ciocaltue法;水果;多酚

    多酚(polyphenol)又稱為植物單寧,廣泛存在于植物的皮、葉、果實(shí)以及根中[1-2]。該類化合物具有抗氧化、清除機(jī)體自由基、預(yù)防高血壓和冠心病等功效,被廣泛應(yīng)用于食品、藥品和醫(yī)藥等領(lǐng)域[3-6]。目前,多酚的提取方法主要有溶劑萃取法、超聲波法、微波法和超臨界萃取法等[7-9]。此外,多酚含量的測定方法有福林酚法、酒石酸亞鐵法和高錳酸鉀法等[10-12]。各種提取和測定方法均有利弊,需要根據(jù)不同的研究目的而采用不同的提取及測定方法。昭通市地處滇東北,素有“鎖鑰南滇,咽喉西蜀”之稱,該地區(qū)屬于高原季風(fēng)干燥型氣候,日照充足,有利于水果的生長,很多昭通水果聞名省內(nèi)外,深受人們的喜愛。目前,只有少量的報(bào)道關(guān)于昭通特色水果中多酚的研究,然而系統(tǒng)研究各種特色水果中多酚的含量仍然需要[13-14]。因此,系統(tǒng)研究昭通各種特色水果中多酚的提取及含量測定方法,為昭通特色水果的開發(fā)利用、深加工以及合理選擇膳食提供理論依據(jù),具有重要的研究意義。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試水果有紅玫瑰葡萄、紅富士蘋果、山楂和雪花梨,均為昭通特色水果,購買自昭通市農(nóng)貿(mào)市場。

    1.2 標(biāo)準(zhǔn)液配制

    準(zhǔn)確稱取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品5.0 mg,溶解于8.0 m L甲醇中,以蒸餾水定容至100 m L,搖勻備用,可得50.0 mg·L-1沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。準(zhǔn)確吸取上述標(biāo)準(zhǔn)液1 m L于25 m L的容量瓶中,加入1 m L Folin-Ciocaltue試劑充分震蕩,再加入8 mL 50 g·L-1的Na2CO3溶液,充分搖勻,靜置45 min[13-14]。用紫外分光光度計(jì)在500~900 nm波長范圍內(nèi)掃描測定其吸光度,并繪制其吸光度與波長的關(guān)系圖,選擇最大吸收波長。

    1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    分別吸取50 mg·L-1的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9 m L于25 m L的容量瓶中,依次加入80%甲醇1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2和0.1 m L,搖勻,再分別加入1 m L的Folin-Ciocaltue試劑充分震蕩后,依次加入8.0 m L的50 g·L-1Na2CO3溶液充分搖勻,靜置45 m in,在765 nm波長處測定其吸光度[13-14]。

    1.4 待測樣品的制備

    將紅玫瑰葡萄、紅富士蘋果、山楂和雪花梨洗凈,分離果皮和果肉,然后在80℃恒溫烘箱中干燥24 h,冷卻后粉碎。分別稱取粉碎的4種水果的果皮樣品50 mg于圓底燒瓶中,加入5 mL 80%甲醇,在25~40℃及53 kHz超聲波提取40 min后過濾,在同等條件下重復(fù)2次,合并濾液,并用蒸餾水定容至100 m L備用[13-14]。分別稱取粉碎的4種水果的果肉1 000 mg于圓底燒瓶中,加入15 m L 80%甲醇,在25~40℃及53 kHz超聲提取40 m in后過濾,在相同條件下重復(fù)2次,合并濾液并用蒸餾水定容至250 m L備用。分別取上述4種水果的果皮和果肉提取液1 m L加入1 m L Folin-Ciocaltue試劑,充分震蕩,加入8.00 m L的50 g·L-1Na2CO3溶液,充分搖勻靜置45 min后,在765 nm波長處測定其吸光度[13-14]。按上述方法重復(fù)3次,計(jì)算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 最大吸收波長的選擇

    用紫外分光光度計(jì)在波長500~900 nm范圍內(nèi)掃描測定吸光度。圖1表明,標(biāo)準(zhǔn)液顯色反應(yīng)后最大吸收峰在765 nm左右。因此,以765 nm作為最大吸收波長。

    圖1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)液的最大吸收波長

    2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

    在765 nm處測定系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,然后根據(jù)沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將上述數(shù)據(jù)進(jìn)行線性處理,得到回歸方程為:Y=0.126 46 X+0.055 42,R2=0.999 24(圖2)。

    2.3 水果中多酚含量的測定

    采用超聲波法提取昭通特色水果中的多酚,并以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)溶液,F(xiàn)olin-Ciocaltue做顯色劑,在765 nm處測定其吸光度,代入線性回歸方程,計(jì)算出樣品中多酚的含量。表1顯示,紅玫瑰葡萄、紅富士蘋果、雪花梨和山楂的果皮和果肉中多酚含量分別為11.162 4、10.108 1、26.345 1、67.148 5 mg·g-1和1.751 1、3.747 8、15.787 2、19.741 0 mg·g-1。試驗(yàn)結(jié)果表明,不同水果的果肉和果皮中多酚的含量各不相同,且果皮的多酚含量高于果肉[13-15]。

    圖2 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)液的標(biāo)準(zhǔn)曲線

    表1 不同水果中多酚含量

    3 小結(jié)

    采用超聲波法和Folin-Ciocaltue法系統(tǒng)提取及測定昭通特色水果中的多酚。試驗(yàn)結(jié)果表明,昭通特色水果中都含有一定量的多酚,不同水果的果皮和果肉中多酚的含量各不相同。該方法可為昭通特色水果的開發(fā)、深加工及合理選擇膳食提供理論依據(jù)。

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    (責(zé)任編輯:張瑞麟)

    O657.3

    :B

    :0528-9017(2016)12-2094-02

    文獻(xiàn)著錄格式:李啟彭,寸鏡楠,趙仲霞,等.Folin-Ciocalteu法測定水果中多酚含量[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,57(12):2094-2096.

    10.16178/j.issn.0528-9017.20161254

    2016-06-01

    昭通學(xué)院校級(jí)課題(2016xj35)

    李啟彭(1987—),男,云南會(huì)澤人,講師,博士,研究方向?yàn)闊o機(jī)及分析化學(xué),E-mail:83064313@qq.com。

    沈燕瓊,E-mail:184696105@qq.com。

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