HPV-DNA檢測和液基細胞學(xué)檢查與宮頸病變的相關(guān)性分析

譚躍 陳鵬志

人乳頭瘤病毒(HPV)已經(jīng)被確認為引起宮頸癌的根本原因。近年來，宮頸癌發(fā)病率上升并呈年輕化趨勢，每年全球新增病例約50萬，其中我國就超過10萬[1]。因為篩查方法技術(shù)相對落后，普查率偏低，從而相對的宮頸癌發(fā)病率和死亡率偏高，并且有年輕化的趨向[2]。本文為此將宮頸液基細胞學(xué)檢查(TCT)與HPV檢測技術(shù)聯(lián)合進行宮頸病變篩查，并進行對比分析，探討宮頸病變早期篩查手段，以利于患者早診斷、早治療及早康復(fù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年5月～2012年3月在本院行宮頸病變篩查的573例患者，年齡(36.5±6.8)歲。孕次(4.3±1.2)次，產(chǎn)次(1.7±0.3)次。所有患者均無宮頸物理治療史，半年內(nèi)無陰道炎病史和宮頸用藥史。

1.2 檢測方法

1.2.1 TCT (1)標(biāo)本采集:受檢者采用“戟”型刮板或毛刷插入宮頸管內(nèi)，圍繞子宮頸旋轉(zhuǎn)2周,刮出頸口和頸管內(nèi)的上皮細胞，將收集的細胞洗入盛有ThinPrep保存液的液基瓶中,制成直徑2cm的薄層細胞涂片,95%酒精固定,巴氏染色。(2)細胞學(xué)診斷方法采用TBS分類法:即正常范圍、意義不明的不典型鱗狀細胞(ASCUS)、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(LSIL、即鱗狀上皮輕度非典型增生CINⅠ)、高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(HSIL分為鱗狀上皮中度非典型增生CINⅡ、鱗狀上皮重度非典型增生CINⅢ)、鱗狀細胞癌(SCC)。

1.2.2 HPV-DNA檢測 HPV-DNA檢測采用中山大學(xué)達安人乳頭瘤病毒基因分型測試劑盒。由醫(yī)生用專用取樣拭子（滅菌，一次性）采集樣本，進行DNA抽取40min，PCR基因擴增122min，PCR擴增產(chǎn)物98℃變性8min，然后在水浴箱進行雜交60min，顯色10min，結(jié)果分析。檢測19種HPV亞型，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304、6、11、43型，各型HPV探針顯示一藍點就表明該分型陽性。

1.2.3 宮頸活檢 用電子陰道鏡進行檢查,對可疑病灶進行鏡下定位活檢，若鏡下未發(fā)現(xiàn)病灶或圖像不滿意，則在宮頸管口鱗柱交界處3、6、9、12點處多點取材或頸管搔刮，所有病理標(biāo)本由專門病理醫(yī)師閱片，作出病理診斷,分為正?；?qū)m頸慢性炎癥、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ級和SCC。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 以組織病理學(xué)檢查結(jié)果為確診標(biāo)準(zhǔn)，計算并比較CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC和HPV-DNA檢測篩查與病理學(xué)結(jié)果的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度。對結(jié)果進行統(tǒng)計，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，2組間進行對比分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV-DNA檢測結(jié)果 573例患者中，HPV-DNA檢測陽性標(biāo)本為94例，479例為陰性。

2.2 宮頸細胞學(xué)檢查結(jié)果 573例患者中，正?；蜓装Y38例，ASCUS 280例，LSIL 178例，HSIL 72例，SCC 5例。

2.3 病理學(xué)檢查結(jié)果 573例患者中，均行宮頸活檢，以病理學(xué)診斷為最終診斷：正?；蜓装Y73例，CINI 418例，CINII 50例，CINⅢ 27例，SCC 5例。

2.4 HPV-DNA檢測陽性標(biāo)本在TCT檢查結(jié)果中分布情況見表1。

表1 HPV-DNA檢測陽性標(biāo)本在TCT檢查結(jié)果中分布情況

表1結(jié)果顯示HPV-DNA檢測陽性率：其中CINⅠ6.1%(17/280)、CINⅡ15.7%(28/178例)、CINⅢ57.1%(44/72例)、SCC100%(5/5例)。經(jīng)統(tǒng)計分析，HPV感染率CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ組間比較有顯著性差異(P<0.01)。

2.5 HPV-DNA檢測陽性標(biāo)本在病理活檢結(jié)果中分布情況見表2。

表2 HPV-DNA檢測陽性標(biāo)本在病理活檢結(jié)果中分布情況

表2結(jié)果顯示HPV-DNA檢測陽性率：其中CINⅠ10.0%(42/418例)、CINⅡ46.0%(23/50例)；CINⅢ88.89%(24/27例)、SCC100%(5/5例)。經(jīng)統(tǒng)計分析，HPV感染率SCC組與CINⅠ、CINⅡ組比較有顯著性差異(P<0.01)。

3 討論

本文通過HPV-DNA檢測、液基細胞學(xué)與宮頸組織活檢病理結(jié)果進行對比分析，結(jié)果顯示，宮頸組織從低、中、高度病變3組間比較有顯著性差異，HPV感染與宮頸癌前病變有密切關(guān)系，并隨著病理學(xué)級別的增高而上升，且病毒感染率與病變程度成正相關(guān)。HPV-DNA聯(lián)合TCT檢測結(jié)果中LSIL、HSIL檢出率均高于同期單純TCT性檢出率。

宮頸癌篩查的重點是宮頸高度病變，宮頸組織發(fā)生癌變要經(jīng)過一個由量變到質(zhì)變的漫長過程，而癌前病變就處于向癌細胞轉(zhuǎn)化的量變過程中[3]。如能早期診斷及時治療，早期宮頸癌的治愈率可以接近100%，使宮頸癌死亡率明顯降低[4]。對于無臨床癥狀且病理診斷低度病變的普查人群，可不予任何治療，但需定期復(fù)診。對于多數(shù)有臨床癥狀且低度病變婦科門診患者，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀給予相應(yīng)的治療。因此，采用高靈敏度的分子診斷學(xué)技術(shù)聯(lián)合細胞學(xué)檢測對宮頸病變的進行篩查，可以減少漏診[5]。

HPV感染是導(dǎo)致CIN及宮頸癌的直接因素，HPV病毒基因型有200種以上，有些基因型明顯與腫瘤發(fā)展密切相關(guān)[6]。采用分子生物學(xué)技術(shù)進行對HPV-DNA檢測，技術(shù)成熟，重復(fù)性好，可以避免細胞學(xué)診斷受閱片醫(yī)師主觀影響。各人細胞學(xué)認識水平不同，使細胞學(xué)的可重復(fù)性較差。細胞學(xué)檢查或分子生物學(xué)檢測都各具優(yōu)點和局限性，將其聯(lián)合應(yīng)用，將能夠最大限度地提高宮頸病變診斷的準(zhǔn)確性，降低漏診率。HPV-DNA檢測是預(yù)防宮頸癌的重要手段，聯(lián)合TCT檢查，作為宮頸癌和癌前病變的初篩手段，將更有利于預(yù)測受檢者的發(fā)病風(fēng)險度，并可決定其篩查間隔。本文通過HPV-DNA檢測、液基細胞學(xué)分別與宮頸組織活檢病理結(jié)果進行對比分析，顯示TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測對于及時發(fā)現(xiàn)和確定宮頸癌高危人群、研究宮頸癌的發(fā)病機制，以及預(yù)防和早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌及癌前病變都有重要意義。

[1]張曉金,歸綏琪.宮頸癌發(fā)病機制的研究進展[J].中國婦幼健康研究,2008(1):56-59.

[2]Li LY,Qiao ZQ,Zhang MF,et a1.Study on the value assessment of various screening programs regarding cervial cancer screening strategy in the rural areas of China[J].ZhonghuaLiuXingaingXueZaZhi，2008,28(10)：964-967.

[3]蔣蓉.對宮頸癌患者的健康教育指導(dǎo)[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011,19(25):114.

[4]Krambeck WM，Cadide RM，Dalmarco EM，et a1.HPV detection and genotyping asan earlier approach in cervical cancer screening of the female genital tract[J].Clin Exp Obstet GynecoL，2008，35(3)：175-178.

[5]蘇光，錢莉蕓，劉陽，等.多重入乳頭瘤病毒感染檢測在官頸病變診斷中的價值[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2007，23(9)：706-707.

[6]Hamada K,Shirakawa T.Adenovirus2mediated transfer of human papilloma virus 16 E6/E7 antisense RNA and induction of apoptosis in cervical cancer[J].J Cell Biochem,2007,100(5):1191.