中圖分類號:X832 文獻標識碼:A 文章編號:1008-9500(2025)04-0035-03
DOI: 10.3969/j.issn.1008-9500.2025.04.008
Study on Application of Microbial Detection Technology in Water Environment Monitoring
GAO Chuan ,GAOJun’,WANG Xiaoyan3,SUNShuquan
,SUNFuhao',YANGChenhuil (1.Yellow River Conservancy Technical University;
2.Kaifeng Engineering Technology Research Center of Aquatic Environmental Pollution Monitoring;
3.Kaifeng Jinming High School,Kaifeng 475004,China)
Abstract: In recent years,global water polutionhas become increasinglysevere,and traditional waterquality testing methodscannot timelyand accurately reflectthestateof water polution.Microbial detection technology hasbecomean importanttoolinthefieldfwaterqualitymontoringduetoitsigheficiency,sensitivityandreal-timeperformane.This paperintroduces severalcommonlyusedmicrobiological testing techniques,analyzes thefactors thatafectthequalityof microbiological testing,such as testing equipmentandtesting environment,and proposes coresponding qualitycontrol measures.Overall,itisesarytrictlyotrolteualityfmplecollectiosureprofessonalismofting operationproces,and strengthenthequalitycontrolof waterqualitytesting results.Research hasshownthatthescientific useof microbialdetection technologycanefectively improve theacuracyof waterqualitymicrobial detection,providing scientific support for water environment monitoring and water pollution control.
Keywords:water environment monitoring;microbial detection technology; quality control
近年來,全球環(huán)境污染問題愈發(fā)突出,水體污染問題也變得愈發(fā)嚴重。我國面臨的環(huán)境問題同樣不容樂觀,工業(yè)廢水、農(nóng)業(yè)污水及生活污水未經(jīng)處理或處理不徹底即排入自然水體,導致水質(zhì)惡化,微生物群落失衡,自凈能力受損。在此背景下,微生物檢測技術作為水環(huán)境監(jiān)測的重要手段,通過科學分析水體中微生物的種類、數(shù)量及活性,能夠準確反映水質(zhì)狀況,預警潛在污染風險,為水污染防治提供科學依據(jù)。因此,深人探究微生物檢測技術在水環(huán)境監(jiān)測中的應用背景及其理論依據(jù),對于推動水質(zhì)監(jiān)測技術創(chuàng)新、確保水質(zhì)安全、促進環(huán)境可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。
1常用的微生物檢測技術
1.1生物傳感技術
作為一種尖端的微生物檢測手段,生物傳感技術依托生物傳感器,融合微生物學、電磁學等領域的先進技術,極大地提高水體環(huán)境中微生物檢測的精確度,并在防治水體污染方面起到關鍵作用。在日常應用中,該技術能夠借助生物傳感器準確掌握微生物的分布情況,確保檢測工作的效率與便利性。目前,生物傳感技術已成為一種普遍采用的微生物檢測方法,甲烷乙醇生物傳感器的敏感性較高,在水體檢測中可以發(fā)現(xiàn)微生物,快速完成微生物種類的鑒定,有效縮短檢測周期,提高檢測效率。
1.2酶免疫檢測技術
酶免疫檢測技術可以精準檢測特定抗體,在水體污染治理領域發(fā)揮重要作用。該技術依托生物催化劑對目標抗體實施標記,借助微生物檢測手段對水體中的微生物種類進行鑒別,進而識別并篩選出污染物質(zhì)。依據(jù)抗體反應的具體情況,此法能夠?qū)ξ⑸锓N類做出準確判斷。在微生物識別過程中,可加入合適的抗體,并通過專門的觀測手段來獲取檢測結果,實現(xiàn)對特定抗原的精確檢測[1]??贵w在保持免疫酶活性的同時,確保微生物檢測效率。酶免疫檢測技術的精確度較高,并且十分穩(wěn)定,已成為微生物檢測領域的主流技術。
1.3 DNA重組技術
脫氧核糖核酸(DeoxyriboNucleicAcid,DNA)重組技術亦被稱作基因重組技術,其在生物醫(yī)藥與生命科學領域扮演重要的角色,堪稱當代生物科學進步的核心技術,同時也是分子遺傳學的拓展應用。DNA重組技術與聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR)技術結合,能夠?qū)崿F(xiàn)對特定微生物基因序列的快速擴增與分析,極大提高檢測效率。對于水體中的致病性細菌、病毒或藻類,DNA重組技術可以實現(xiàn)實時監(jiān)控,不僅可以檢測到微生物的存在,還能進一步分析其抗藥性、致病性等重要信息。這些微生物群落可以實現(xiàn)對水體微生物種群及污染情況的逆向監(jiān)控,收集水質(zhì)狀況的相關信息,如微生物存活率、分布狀況等,這對于水污染的有效治理及提供科學治理理論支持具有重要意義。
1.4PCR技術
PCR技術以模板DNA為介質(zhì),促使DNA片段在特定酶的催化下于高溫環(huán)境實現(xiàn)變性,并在較低溫度下引發(fā)鏈的斷裂,進而復制出眾多模板DNA分子。該技術以其簡潔、高效、高靈敏度和高特異性著稱,能顯著提升微生物檢測速度。在 高溫下,PCR可引發(fā)物質(zhì)的變性,隨后在溫度降至
時實施退火,此過程使得變性后的生物酶與新生成的核酸鏈實現(xiàn)互補配對。在適宜條件下,DNA聚合酶將啟動鏈的延伸,構建出雙鏈DNA,以此加快微生物檢測速度。在具體應用中,要依據(jù)實際需求調(diào)整PCR操作流程,以實現(xiàn)更精準有效的微生物檢測[2]。
2水環(huán)境監(jiān)測中微生物檢測質(zhì)量的影響因素
2.1檢測設備因素
微生物檢測是一項復雜的任務,需要用到多種精密儀器,如顯微鏡、孵化器、高溫消毒柜、紫外線燈具、高壓消毒器以及低溫保存柜等。這些儀器的質(zhì)量直接關系到檢測結果的精確度,所以技術人員必須按時對這些設備進行養(yǎng)護、檢查、修理和校準,保障儀器設備的精確性,進而提高水質(zhì)微生物檢測的精確度。比如,技術人員需要定期對孵化器和冷藏柜進行消毒,以減少檢測設備上的糞大腸菌群、總菌落數(shù)、總大腸菌群等微生物的數(shù)量,確保設備維持無菌狀態(tài),從而確保水質(zhì)微生物檢測結果的準確無誤[3]。
2.2 檢測環(huán)境因素
水質(zhì)微生物的分析檢驗對檢驗場所條件有嚴格的規(guī)范要求。因此,檢測人員需要嚴格控制實驗室的潔凈度,實施徹底的無菌化處理,并全面檢查檢測設備以及實驗室的相關輔助設施,以打造符合標準的水質(zhì)微生物檢測環(huán)境,確保檢測數(shù)據(jù)的精確度。不同微生物有其獨特的生長條件需求,一旦脫離適宜的環(huán)境,它們可能會面臨生存危機,從而導致檢測結果的準確性受到影響。監(jiān)測人員需要依據(jù)微生物的生存特性,對實驗室的環(huán)境條件進行相應調(diào)整,對溫度、濕度、空氣流通、照明、紫外線照射以及消毒措施等進行精確控制。此外,實驗室應保持定時通風,以維持室內(nèi)的濕度、光照和空氣流通的穩(wěn)定性,確保水質(zhì)微生物檢測在恒定的氣流條件下進行。同時,要定期對試驗操作臺面、地面以及試驗器材等進行消毒處理以防止檢測過程的交叉污染,從而保障檢測結果的準確無誤。
3水環(huán)境監(jiān)測中微生物檢測質(zhì)量控制措施
3.1嚴格控制樣品采集質(zhì)量
在微生物檢測實驗室中,要準備一套完備的無菌玻璃器皿,專門用來采集微生物樣本。水體狀況會隨時間和空間的變化而波動,規(guī)劃采樣活動時,必須采用嚴謹且科學的方法。為了確保采集的水樣具有高度的代表性,要科學規(guī)劃采樣水域[4。在采集湖泊、水庫及河流等水域的表層樣本時,要用手穩(wěn)握采樣瓶底部,將帶有瓶塞的采樣器垂直沉入水中,保持在水面以下 的位置最為恰當,保證采樣瓶口與水體流向平行。接著,打開瓶塞,待樣本流入瓶中,立即將瓶塞封緊,并將采樣瓶迅速提出水面。
在利用水龍頭進行樣本采集前,必須將水龍頭開至最大流量狀態(tài),并保持水流 ,然后迅速關閉。接著,使用濃度為 7 0 % ~ 7 5 % 的酒精進行水龍頭表面消毒,或者采用火焰消毒 3 m i n 。完成消毒后,重新完全開啟水龍頭,水流 1 m i n ,確保管道內(nèi)的殘留雜質(zhì)被完全沖走。在正式采集樣本時,要精確控制水流速度,并小心將水流導入采樣瓶中。
在采集水體樣本時,應使用具備消毒功能的專用采樣器具。確保采樣瓶中的水量達到其總體積的8 0 % ,以便在檢測過程中徹底攪拌均勻。對于消毒處理的采樣容器,不能直接清洗,同時避免手指或任何物件觸及瓶口,以免造成二次污染。此外,采樣過程中切勿攪動水底沉積物。在采集管網(wǎng)水樣前,要用火焰對水龍頭表面進行 3 ~ 5 : s的灼燒消毒,然后開啟水龍頭放水 5 ~ 1 0 m i n ,完成對水龍頭的消毒程序。
3.2按照專業(yè)操作流程開展檢測
在開展檢測工作之前,要防止微生物沉淀在容器底部。稀釋樣本是首要步驟,以降低微生物的濃度,便于后續(xù)試驗分析。操作時,利用滴管將樣本轉(zhuǎn)移至試驗器血中。在稀釋過程中,務必小心操作,防止滴管與樣本直接接觸,以免污染樣本。在轉(zhuǎn)移樣本至器血的過程中,應保持器皿蓋子閉合,沿著器皿邊緣緩慢注入樣本,同時保持滴管垂直,確保樣本完全排出。檢測過程中,應確保樣本與試劑徹底混合,以降低檢測誤差。
3.3強化水質(zhì)檢測結果質(zhì)量控制
3.3.1評估試驗操作的精確度
從特定類型的水樣中選取前15個呈陽性的樣本進行成對分析。對所得數(shù)據(jù)的對數(shù)值進行處理,若成對樣本存在一個為零的情況,則在數(shù)值上加一重新計算對數(shù)。接著,從常規(guī)水樣中抽取 10 % 進行成對分析。若得出的差異較大,檢測的精確度有所下降,應取消之前的分析結果,并探究原因,然后繼續(xù)檢測。
3.3.2 無菌檢驗
在試驗過程中,必須使用無菌水作為樣本,并檢查培養(yǎng)基、過濾膜、稀釋水、沖洗水、玻璃器血及工具的無菌狀態(tài)。若發(fā)現(xiàn)雜菌污染,則需要廢棄使用該材料進行試驗所得的數(shù)據(jù)。在每次試驗中,至少要對一個樣本進行重復分析,特別是對于每一個陽性樣本,必須進行平行分析,以驗證結果的準確性。
4結論
本研究系統(tǒng)分析水環(huán)境監(jiān)測中用到的微生物檢測技術,并對質(zhì)量控制方法展開探討。近年來,全球水環(huán)境污染問題越來越嚴峻,微生物檢測要求越來越高,現(xiàn)有技術在敏感性、穩(wěn)定性和實時性等方面仍有進一步提升的空間。隨著新型檢測技術和智能化分析工具的不斷發(fā)展,我國水環(huán)境監(jiān)測將朝更高效、精準和自動化的方向發(fā)展。
參考文獻
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