玉露香梨組培快繁體系建立研究

摘 " "要：【目的】針對(duì)梨品種間組培繁殖差異大、玉露香梨組培快繁體系也尚未建立的問題開展了相關(guān)研究，旨在建立玉露香梨的組培快繁技術(shù)體系，為深入開展玉露香梨的分子生物學(xué)研究和培育脫毒苗提供技術(shù)支撐。【方法】以玉露香梨（Pyrus bretschneideri ‘Yuluxiang’）組培苗為試材，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選影響繼代增殖和生根的因素，如基本培養(yǎng)基及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑；設(shè)置暗培養(yǎng)和活性炭處理，對(duì)繼代苗的生根條件進(jìn)行優(yōu)化。【結(jié)果】適宜玉露香梨組培苗繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+1.00 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA，繁殖系數(shù)為3.57，平均有效新梢數(shù)為1.17；適宜玉露香梨組培苗生根的培養(yǎng)基為1/2MS+2.00 mg·L-1 NAA，生根率為60.00%，生根條數(shù)為3.40。暗培養(yǎng)和活性炭處理均不適于玉露香梨組培苗生根，其中，暗培養(yǎng)0～20 d對(duì)玉露香生根無顯著促進(jìn)作用，且隨暗培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，根部愈傷增大，莖尖枯死情況加重；活性炭對(duì)玉露香梨組培苗生根有顯著抑制作用，低質(zhì)量濃度活性炭（0.5 g·L-1）可促進(jìn)地上部生長(zhǎng)，高質(zhì)量濃度活性炭（1.0～4.0 g·L-1）對(duì)地上部有明顯抑制作用，部分組培苗的葉片出現(xiàn)褐化現(xiàn)象。移栽于溫室60 d后，玉露香成活率為32.57%，植株生長(zhǎng)良好?！窘Y(jié)論】建立了玉露香梨組培快繁體系，篩選出適宜玉露香的繼代增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基及生根條件，并成功進(jìn)行了玉露香梨生根苗的馴化移栽。

關(guān)鍵詞：玉露香梨；組織培養(yǎng)；繼代增殖；生根；馴化移栽

中圖分類號(hào)：S661.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1009-9980（2025）01-0227-10

Propagation of of Yuluxiang pear （Pyrus bretschneideri Rehd.） through tissue culture

CHENG Xiaohua1， ZHAO Shuliang2， ZHANG Ying3， ZHANG Yuxing1， 4*

（1College of Horticulture， Hebei Agricultural University， Baoding 071000， Hebei， China; 2College of Landscape and Ecological Engineering， Hebei University of Engineering， Handan 056038， Hebei， China; 3Institute of Biotechnology and Food Science， Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences， Shijiazhuang 050050， Hebei， China; 4Pear Technology Innovation Center of Hebei Province， Baoding 071000， Hebei， China）

Abstract： 【Objective】 Yuluxiang （Pyrus bretschneideri Rehd.） is an excellent mid-late repening variety with thin skin， delicate flesh， sweet taste aroma， and other excellent characteristics， which is widely recognized by the domestic and foreign fruit markets. In view of the large differences in tissue culture propagation among pear varieties and there was no rapid propagation system through tissue culture for Yuluxiang pear， the study aimed to establish the tissue culture technology for Yuluxiang pear， and provide technical support for further molecular biology research and production of virus-free nursery trees of Yuluxiang pear. 【Methods】 The experimental materials were prepared as follows： firstly， the new shoots of Yuluxiang pear were collected from the specimen garden of Hebei Agricultural University 5-10 days after flowering. Secondly， the blades of the leaves were removed， and only the petioles were kept on the stem. The single bud stem segments were cut in about 1 cm with pruning scissors and placed in a clean triangular bottle. They were rinsed with running water for 30 min， sterilized with 0.1% HgCl2 for 6 min， then sterilized with 75% alcohol for 1 min. After three times of rinsing with sterile water， they were dried using sterile filter paper. The explants were inoculated on the medium MS， with 1.00 mg·L-1 6-BA， 0.10 mg·L-1 IBA， 30.0 g·L-1 sucrose， 6.0 g·L-1 agar， and 2.0 g·L-1 PVA. Factors affecting proliferation and rooting， such as basic medium and plant growth regulator， were screened by completely randomized experiment design; the way of gradient for dark culture time and activated carbon concentration were used to optimize rooting conditions. 【Results】 The medium of MS+1.00 mg·L-1 6-BA +0.10 mg·L-1 NAA +30.0 g·L-1 sucrose +6.0 g·L-1 agar was suitable for the proliferation of Yuluxiang pear， and the propagation coefficient was 3.57 and the number of effective shoots was 1.17. The suitable medium for rooting of Yuluxiang pear was 1/2MS+2.0 mg·L-1 NAA +20.0 g·L-1 sucrose +6.0 g·L-1 agar. The rooting rate was 60.00%， and the average number of roots was 3.40. There was no significant difference in rooting rate and average number of roots between dark culture of 0 day， 5 days， and 15 days. The rooting rate and average number of roots of the treatments with 10 days and 20 days dark culture was significantly lower than that of the treatments with 0 day on the rooting rate and average rooting number. With the increase of dark culture time， the root became thinner， the stem tip dieback rate of the explants significantly increased， and the root callus became larger. Therefore， the dark culture had no promotion effect on rooting. 0.5 g·L-1 activated carbon could promote the aboveground growth of Yuluxiang shoots. However， when the concentration of activated carbon was increased to 1.0-4.0 g·L-1， there was an obvious inhibitory effect on the aboveground parts， and the leaves of some plantlets turned brown. After 40 days culture after rooting， 132 Yuluxiang tissue culture seedlings were domesticated in the greenhouse for 10 days and transplanted into the nutrient pots. It was observed that Yuluxiang exhibited a mortality phenomenon 10 days after transplantation. The survival rate of Yuluxiang plantlets was 32.57% 60 days after transplantation， and the overall growth of the plants was robust and healthy. 【Conclusion】 This study screened out the optimal media for proliferation and rooting of Yuluxiang pear in vitro， successful acclimation and transplantation process for plantlets in glasshouse.

Key words： Pyrus bretschneideri ‘Yuluxiang’; Tissue culture; Subculture proliferation; Rooting; Acclimation and transplanting

關(guān)于不同品種梨組培快繁體系的研究已有很多報(bào)道，但品種間差異較大。李昌珠等[1]發(fā)現(xiàn)歐洲梨Koporeka繼代培養(yǎng)28 d后繁殖系數(shù)達(dá)5.60，生根培養(yǎng)14 d后，生根率達(dá)88.65%，而Vila連續(xù)培養(yǎng)60 d后只形成少量愈傷組織，無芽、根的分化；宋梅等[2]研究表明，與碭山酥梨相比，誘導(dǎo)庫(kù)爾勒香梨莖尖分化更難，且繁殖系數(shù)較?。粍⑿》嫉萚3]發(fā)現(xiàn)庫(kù)爾勒香梨的繁殖系數(shù)最高為1.30，生根誘導(dǎo)效果較差，僅有一株組培苗在1/2MS+1.00 mg·L-1 IBA+0.05 g·L-1活性炭生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出一條根；其他品種如中梨1號(hào)在1/2MS+1.00 mg·L-1 IBA中生根率為44.80%[4]，黃冠梨生根率最高為33.33%[5]。綜上所述，不同梨品種間組培快繁效率的差異較大，有必要針對(duì)具體品種開展相關(guān)研究，建立適合某一品種的組培快繁體系。

玉露香梨是山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所通過庫(kù)爾勒香梨×雪花梨雜交選育出的優(yōu)新品種，該品種具有果皮薄、果肉細(xì)膩、口感香甜、石細(xì)胞少等優(yōu)點(diǎn)，受到國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的普遍認(rèn)可[6-7]，是農(nóng)業(yè)農(nóng)村部主推的中晚熟梨優(yōu)良品種，且已在山西、河北等地進(jìn)行大面積推廣[8]。目前，玉露香梨研究主要集中在生理及栽培方面[7-9]，尚未建立它的組培快繁體系。筆者旨在建立玉露香梨高效、穩(wěn)定的組培快繁體系，為深入開展玉露香梨的分子生物學(xué)研究和培育脫毒苗提供理論和技術(shù)支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料為實(shí)驗(yàn)室保存的繼代30 d的玉露香梨組培苗。常規(guī)培養(yǎng)條件：溫度（25±2）℃，光照度2000～3000 lx，光周期（晝/夜）=16 h/8 h。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 材料獲得 盛花5～10 d后，于河北農(nóng)業(yè)大學(xué)標(biāo)本園采集玉露香梨新梢外植體。將外植體去掉葉片，留下葉柄，用枝剪刀剪為1 cm單芽莖段，放于干凈三角瓶中，流水沖洗30 min。在超凈臺(tái)上用0.1% HgCl2消毒6 min，75%乙醇消毒1 min，無菌水沖洗3次，無菌濾紙吸干水分后，接種于MS+1.00 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 IBA+30.0 g·L-1蔗糖+6.0 g·L-1瓊脂+2.0 g·L-1 聚乙烯醇（PVA）（pH值為5.8～6.0）培養(yǎng)基上，擴(kuò)繁到一定數(shù)量后開展試驗(yàn)。

1.2.2 基本培養(yǎng)基對(duì)玉露香梨組培苗繼代的影響 以MS、1/2MS、1/4MS、NN69、WPM為基本培養(yǎng)基，附加1.00 mg·L-1 6-BA、0.10 mg·L-1 NAA、30.0 g·L-1蔗糖、6.0 g·L-1瓊脂、2.0 g·L-1 PVA（pH值為5.8～6.0），共5個(gè)處理開展試驗(yàn)，每個(gè)處理接6瓶，每瓶接5個(gè)1 cm單芽莖段，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，3次重復(fù)，常規(guī)培養(yǎng)40 d后，調(diào)查統(tǒng)計(jì)繁殖系數(shù)及平均有效新梢數(shù)（繁殖系數(shù)=調(diào)查總株數(shù)/接種株數(shù)；有效新梢為繼代苗中株高≥1.5 cm且可用于生根的嫩梢；平均有效新梢數(shù)=調(diào)查有效新梢數(shù)/接種株數(shù)；玻璃苗發(fā)生率/%=發(fā)生玻璃化的株數(shù)/接種株數(shù)×100；下同）。

1.2.3 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)玉露香梨組培苗繼代的影響 以MS+0.10 mg·L-1 NAA為基本培養(yǎng)基，附加0.50、1.00、1.50和2.00 mg·L-1 6-BA；以MS+1.00 mg·L-1 6-BA為基本培養(yǎng)基，附加0.05、0.10、0.15和0.20 mg·L-1 IBA或NAA（pH值為5.8～6.0），共11個(gè)處理用于試驗(yàn)。

1.2.4 基本培養(yǎng)基對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響 以MS、1/2MS、1/4MS、NN69、1/2NN69、1/4NN69為基本培養(yǎng)基，附加2.00 mg·L-1 NAA、20.0 g·L-1蔗糖、6.0 g·L-1瓊脂（pH值為5.8～6.0），共6個(gè)處理用于試驗(yàn)，每個(gè)處理接9瓶，每瓶接5個(gè)1 cm單芽莖段，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，3次重復(fù)，常規(guī)培養(yǎng)40 d后，調(diào)查統(tǒng)計(jì)生根率及平均生根數(shù)（生根率/%=生根株數(shù)/接種株數(shù)×100；平均生根數(shù)/條=主根發(fā)生總數(shù)/接種株數(shù)；莖尖枯死率/%=莖尖枯死的株數(shù)/接種株數(shù)×100；下同）。

1.2.5 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響 以1/2MS為基本培養(yǎng)基，附加0.20、0.50、1.00、2.00、5.00 mg·L-1 IBA或NAA（pH值為5.8～6.0），共10個(gè)處理用于試驗(yàn)。

1.2.6 暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響 以1.2.4、1.2.5篩選到的生根培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，設(shè)置暗培養(yǎng)時(shí)間為0、5、10、15、20 d，共5個(gè)處理用于試驗(yàn)。

1.2.7 活性炭對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響 以1.2.4、1.2.5篩選到的生根培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，設(shè)置活性炭質(zhì)量濃度為0.0、0.5、1.0、2.0、4.0 g·L-1，共5個(gè)處理用于試驗(yàn)。

1.2.8 玉露香梨組培生根苗馴化移栽 選取生根誘導(dǎo)40 d的玉露香梨組培苗132棵，于溫室強(qiáng)光（18 000～35 000 lx）閉瓶鍛煉7 d后再開瓶鍛煉3 d，然后移栽到基質(zhì)（草炭土、蛭石體積比為1∶2，121 ℃高壓滅菌20 min后晾涼備用）中。移栽后，噴施0.1%多菌靈預(yù)防病害，扣育苗塑料蓋保溫保濕。移栽7 d后逐漸通風(fēng)，10 d后去掉塑料蓋。調(diào)查移栽10、15、25、40、60 d后玉露香梨組培苗的成活率（移栽成活率/%=成活株數(shù)/移栽株數(shù)×100），并觀察記錄幼苗生長(zhǎng)狀態(tài)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

使用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，利用DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用Duncan’s新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 基本培養(yǎng)基對(duì)玉露香梨組培苗繼代的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，WPM處理的繁殖系數(shù)、平均有效新梢數(shù)及玻璃苗發(fā)生率均顯著高于其他處理。MS、1/2MS、NN69三者間的繁殖系數(shù)無顯著差異，但均顯著高于1/4MS處理；MS、1/2MS、1/4MS、NN69處理間的平均有效新梢數(shù)均無顯著差異（表1）。除了MS處理無玻璃苗出現(xiàn)外，1/2MS、1/4MS、NN69、WPM處理組培苗均有不同程度的玻璃化現(xiàn)象。由圖1可知，MS處理葉片大，葉色濃綠，相對(duì)更加健壯；1/2MS、1/4MS、NN69處理葉片小而黃，輕微玻璃化；而WPM處理葉片較大，葉色發(fā)黃，頂端卷曲，質(zhì)脆，整體玻璃化嚴(yán)重。綜合評(píng)價(jià)認(rèn)為，適合玉露香梨組培苗繼代增殖的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。

2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)玉露香梨組培苗繼代的影響

當(dāng)NAA質(zhì)量濃度為0.10 mg·L-1時(shí)，1.00 mg·L-1 6-BA處理的繁殖系數(shù)顯著高于低質(zhì)量濃度（0.50 mg·L-1 6-BA）和較高質(zhì)量濃度（1.50～2.00 mg·L-1 6-BA）處理，1.00 mg·L-1 6-BA處理與其他處理間的平均有效新梢數(shù)差異不顯著（表2，圖2）。總體而言，當(dāng)NAA質(zhì)量濃度為0.10 mg·L-1時(shí)，培養(yǎng)基中添加1.00 mg·L-1 6-BA較合適，6-BA質(zhì)量濃度過高或過低均抑制玉露香梨繼代增殖。

當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度為1.00 mg·L-1時(shí)，不同質(zhì)量濃度IBA處理間繁殖系數(shù)差異不顯著，0.15 mg·L-1 IBA處理的平均有效新梢數(shù)顯著高于0.05 mg·L-1 IBA處理，但與0.10、0.20 mg·L-1 IBA處理間差異不顯著，說明0.10、0.15、0.20 mg·L-1 IBA均適合玉露香梨繼代增殖。當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度為1.00 mg·L-1時(shí)，不同質(zhì)量濃度NAA處理間平均有效新梢數(shù)差異不顯著，但0.10 mg·L-1 NAA的繁殖系數(shù)顯著高于0.05、0.15、0.20 mg·L-1 NAA處理，表明0.10 mg·L-1 NAA適合玉露香繼代增殖（表2，圖2）。

整體看，1.00 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA處理的繁殖系數(shù)顯著高于其他處理，平均有效新梢數(shù)與其他處理間無顯著差異，更適合玉露香梨組培苗繼代擴(kuò)繁。

2.3 基本培養(yǎng)基對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響

MS、1/2MS兩處理間生根率、平均生根條數(shù)均無顯著差異，但均顯著高于其他處理，這兩個(gè)處理的植株地上部葉片均較大、較為舒展、葉色油綠，長(zhǎng)勢(shì)好于其他處理（表3、圖3）。在不同濃度NN69處理下，隨NN69濃度降低，生根率顯著下降，1/4NN69處理的生根率、生根數(shù)均為0（表3）；不同NN69處理下玉露香組培苗均出現(xiàn)葉小、卷曲、皺縮、發(fā)黃的情況，整體長(zhǎng)勢(shì)較差。除去1/2MS與NN69處理的莖尖枯死率為0外，其他處理均有不同程度莖尖枯死情況出現(xiàn)。綜合評(píng)價(jià)認(rèn)為，適合玉露香梨組培苗生根的基本培養(yǎng)基為1/2MS（圖3）。

2.4 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響

在0.20～5.00 mg·L-1 NAA范圍內(nèi)，隨質(zhì)量濃度增加，生根率顯著提高；當(dāng)NAA質(zhì)量濃度為5.00 mg·L-1時(shí)，生根率達(dá)到最高，為70.00%；而除5.00 mg·L-1 IBA處理外，其他質(zhì)量濃度IBA處理間的生根率差異均不顯著。當(dāng)NAA質(zhì)量濃度為2.00 mg·L-1時(shí)，平均生根數(shù)為3.40，顯著高于其他處理，此時(shí)生根率為60.00%（表4、圖4）。以上結(jié)果表明，2.00 mg·L-1 NAA更適于玉露香梨組培苗生根。

2.5 暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響

暗培養(yǎng)0、5、15 d處理間生根率、平均生根數(shù)均無顯著差異，但均顯著高于暗培養(yǎng)10、20 d處理。未經(jīng)暗培養(yǎng)處理時(shí)，根系較粗壯；隨暗培養(yǎng)時(shí)間增加，根系變細(xì)，莖尖枯死率顯著增加，根部愈傷變大；暗培養(yǎng)20 d后，莖尖全部枯死，愈傷達(dá)到最大（表5、圖5）。以上結(jié)果表明，玉露香梨組培苗生根的培養(yǎng)條件為常規(guī)光培養(yǎng)，不適宜暗培養(yǎng)。

2.6 活性炭對(duì)玉露香梨組培苗生根的影響

隨活性炭質(zhì)量濃度增加，玉露香梨組培苗生根率及生根數(shù)均顯著降低或減少，根部愈傷也變?。划?dāng)活性炭質(zhì)量濃度等于或高于1.0 g·L-1時(shí)，生根率及生根數(shù)均為0；當(dāng)活性炭質(zhì)量濃度為4.0 g·L-1時(shí)，無愈傷產(chǎn)生（表6）。0.5 g·L-1活性炭可使葉片變綠，但質(zhì)量濃度高于1.0 g·L-1時(shí)，葉片開始變黃，部分出現(xiàn)褐化現(xiàn)象（圖6）。結(jié)果表明，活性炭對(duì)玉露香梨組培苗生根有顯著抑制作用。

2.7 玉露香梨組培生根苗馴化移栽

將生根誘導(dǎo)40 d的玉露香梨組培苗，于溫室馴化10 d后移栽至營(yíng)養(yǎng)缽中。觀察發(fā)現(xiàn)，玉露香梨組培苗在移栽10 d后開始有死亡現(xiàn)象出現(xiàn)，隨著時(shí)間推移死亡增多，移栽60 d后，死亡情況趨于穩(wěn)定，成活率為32.57%，存活的植株生長(zhǎng)良好（圖7）。

3 討 論

3.1 基本培養(yǎng)基對(duì)玉露香梨組培苗生長(zhǎng)的影響

基本培養(yǎng)基是繼代增殖及生根的關(guān)鍵因素，梨常用基本培養(yǎng)基有MS、NN69、1/2MS、WPM等[10-11]；其中，WPM有助于木本植物的生長(zhǎng)和分化，在木本植物組織培養(yǎng)中較為常用[12]。本試驗(yàn)通過對(duì)比MS、1/2MS、1/4MS、NN69、WPM等5種基本培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)使用WPM的繁殖系數(shù)顯著高于其余4種培養(yǎng)基，但組培苗的玻璃化程度也顯著增高。郭靜等[13]報(bào)道，與MS相比，WPM培養(yǎng)基可顯著降低蘋果砧木G.11的玻璃化率，但在玉露香梨中得出了相反結(jié)果，具體原因有待進(jìn)一步研究。

3.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)玉露香梨組培苗繼代和生根的影響

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)組培苗繼代增殖及生根有重要影響[14-16]。組培苗繼代增殖中常用激素為6-BA、NAA、IBA、IAA，其中6-BA常與NAA、IBA、IAA配合使用。筆者通過對(duì)比6-BA與NAA、IBA不同組合下玉露香梨的繼代增殖效果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)NAA的質(zhì)量濃度為0.10 mg·L-1時(shí)，添加1.00 mg·L-1的6-BA才會(huì)對(duì)繼代增殖有顯著促進(jìn)作用，添加低質(zhì)量濃度（0.50 mg·L-1）或較高質(zhì)量濃度（1.50～2.00 mg·L-1）6-BA時(shí)，繁殖系數(shù)均較低，不利于玉露香繼代擴(kuò)繁。楊冠宇等[17]研究也發(fā)現(xiàn)，6-BA質(zhì)量濃度過高或過低均不適宜杜梨7-4株系進(jìn)行擴(kuò)繁，當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度為0.30～1.50 mg·L-1時(shí)，杜梨7-4株系組培苗生長(zhǎng)正常，繁殖系數(shù)較高，均在3.90以上；當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度降低到0.10～0.20 mg·L-1或提高到3.00 mg·L-1時(shí)，繁殖系數(shù)均降低。其他品種如西洋梨矮化砧木BA-29[18]、碭山酥梨[19]等也得出了相同的結(jié)論。筆者發(fā)現(xiàn)當(dāng)6-BA質(zhì)量濃度為1.00 mg·L-1時(shí)，添加0.10～2.00 mg·L-1 IBA或NAA均能促進(jìn)玉露香梨組培苗繼代擴(kuò)繁，但6-BA與0.10 mg·L-1NAA組合的擴(kuò)繁效果要好于6-BA與不同質(zhì)量濃度IBA處理的組合，因此適合玉露香梨繼代擴(kuò)繁的激素種類為6-BA與NAA。前人報(bào)道適合津香蜜、巴梨、南果梨繼代擴(kuò)繁的激素也為6-BA與NAA[20-21]。

組培生根常用激素為NAA、IBA、IAA，使用其中一種或兩種以上均可促進(jìn)生根。筆者發(fā)現(xiàn)僅用NAA或IBA便可促進(jìn)玉露香生根，IBA處理生根率最高為46.67%，NAA處理生根率可達(dá)70.00%。前人報(bào)道豐水梨、云南榅桲在僅添加NAA的生根培養(yǎng)基上也可生根，生根率分別為91.30%、62.50%[22-23]。

配合使用IBA、IAA也可促進(jìn)生根，如巴梨在1/2MS+1.00 mg·L-1 IAA+1.00 mg·L-1 IBA生根培養(yǎng)基中生根率為56.70%，津香蜜在1/2MS+1.00 mg·L-1 IAA+3.00 mg·L-1 IBA中生根率為70.30%[20]，杜梨在1/2MS+2.00 mg·L-1 IAA+0.50 mg·L-1 IBA中生根率為86.70%[24]。NAA與IBA配合使用也有較好效果，如西洋梨矮化砧木BA-29在1/2MS+0.50 mg·L-1 NAA+0.50 mg·L-1 IBA中生根率為81.56%[18]。

3.3 影響玉露香梨組培苗生根的其他因素

光照強(qiáng)弱對(duì)梨組培苗生根有重要影響，湯浩茹等[25]發(fā)現(xiàn)前期適當(dāng)暗培養(yǎng)可促進(jìn)早酥和身不知生根；田海青[26]將新梨7號(hào)暗培養(yǎng)7 d后轉(zhuǎn)到光下常規(guī)培養(yǎng)，生根率達(dá)75.00%。而湯浩茹等[25]發(fā)現(xiàn)巴梨和考密斯等西洋梨在暗培養(yǎng)時(shí)，生根誘導(dǎo)效果較差；苗冉冉等[20]也發(fā)現(xiàn)暗培養(yǎng)對(duì)津香蜜和巴梨不定根誘導(dǎo)均無顯著促進(jìn)作用，且會(huì)使組培苗出現(xiàn)細(xì)弱、枯尖現(xiàn)象。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)暗培養(yǎng)0～20 d對(duì)玉露香梨組培苗生根均無顯著促進(jìn)作用，且隨暗培養(yǎng)時(shí)間增加，愈傷明顯增大，莖尖枯死現(xiàn)象加重。

一般來說，適當(dāng)質(zhì)量濃度活性炭有助于組培苗生根，如現(xiàn)代月季葉片再生植株添加0.1%活性炭可形成完整根系[27]；甜櫻桃組培苗添加1.0 g·L-1活性炭生根率可達(dá)100.00%[28]；黃金梨組培苗加入0.5 g·L-1活性炭后，生根率超過80.00%[29]；秋子梨添加1.0 g·L-1活性炭后生根率由45.50%提高到90.00%，平均生根條數(shù)由2.24提高到6.20，根系長(zhǎng)度和植株表面積均顯著增加[30-31]。但也有研究表明活性炭會(huì)抑制組培苗生根，如0.5 g·L-1和1.0 g·L-1活性炭顯著抑制中矮1號(hào)組培苗生根[32]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，活性炭對(duì)玉露香組培苗生根有顯著抑制作用，當(dāng)活性炭質(zhì)量濃度為1.0～4.0 g·L-1時(shí)，生根率及生根數(shù)均為0。

4 結(jié) 論

適合玉露香梨組培苗繼代增殖的培養(yǎng)基配方為MS+1.00 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA，繁殖系數(shù)為3.57，平均有效新梢數(shù)為1.17；適合玉露香梨組培苗生根的培養(yǎng)基配方為1/2MS+2.00 mg·L-1 NAA，生根率為60.00%，平均生根條數(shù)為3.40；暗培養(yǎng)和添加活性炭均不適于玉露香梨組培苗生根。

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