西和縣雞場免疫抑制病流行病學(xué)調(diào)查

摘 要：為了了解西和縣雞群免疫抑制病的流行情況，對該地區(qū)38個雞場進(jìn)行了雞傳染性貧血?。–IA）、雞傳染性法氏囊?。↖BD）、禽白血?。ˋLV）3種免疫抑制病的流行病學(xué)調(diào)查。采用ELISA方法檢測的CIA、IBD、ALV-J血清抗體陽性率分別為78.13%（750/960）、97.42%（832/854）、11.88%（114/960）。采用PCR技術(shù)檢測的CIA、IBD病原的陽性率為13.01%（139/1 068），IBD病原檢測為陰性（0/1 068），ELISA方法檢測的ALV-p27病原陽性率為3.68%（39/1 068）。調(diào)查結(jié)果表明，血清抗體陽性率高于病原陽性率，且抗體陽性率高的，其平均抗體滴度也較高。本研究通過對甘肅省西和縣雞群免疫抑制病的流行病學(xué)調(diào)查，為西和縣雞群免疫抑制病的防控提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：雞傳染性貧血?。浑u傳染性法氏囊??；禽白血??；流行病學(xué)調(diào)查

中圖分類號：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1673-1085（2025）01-0006-09

免疫抑制是指因各種因素對機(jī)體產(chǎn)生影響，使其對抗原的應(yīng)答能力降低或者缺失的現(xiàn)象。造成免疫抑制的因素有很多，主要是疾病、應(yīng)激和營養(yǎng)等，影響最為嚴(yán)重的是由病原微生物引起的疾病。人類由病毒引起免疫抑制的典型癥狀是患有獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）。家禽也有許多免疫抑制性疾病，如雞傳染性貧血?。–IA）、傳染性法氏囊?。↖BD）、禽白血?。ˋL）等。感染免疫抑制性疾病，有些雞會出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，而有些不出現(xiàn)。由于免疫抑制造成機(jī)體免疫力低下和健康水平下降，更容易造成疫苗免疫失敗，也更容易感染各種病原，導(dǎo)致混合感染、并發(fā)或繼發(fā)感染居多，增加了診療難度，在一定程度上給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

雞傳染性貧血?。–IA）是由雞傳染性貧血病病毒（CIAV）引起的雞再生障礙性貧血和全身淋巴細(xì)胞組織萎縮，同時發(fā)生免疫抑制的一種免疫抑制性疾病，2～4周齡的雛雞易感。1979年Yuasa等[1]在日本首次分離到CIAV Gi-fu-1株。1992年我國的崔現(xiàn)蘭等[2]首次在發(fā)病雞群中分離到該病毒。雞傳染性法氏囊?。↖BD）是由傳染性法氏囊病病毒（IBDV）引起雛雞的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。3～12周齡的雛雞和青年雞易感，幼雞感染恢復(fù)后可引起免疫抑制，導(dǎo)致對多種疫苗的免疫應(yīng)答能力降低，易感多種疫病[3]。禽白血病（AL）主要由反轉(zhuǎn)錄病毒屬、白血病、肉瘤病毒群的禽白血病病毒（ALV）及禽肉瘤病毒（RSV）等引起，造成禽類造血組織中某些細(xì)胞成分過度增生的淋巴白血病、內(nèi)皮組織瘤、上皮組織瘤、結(jié)締組織瘤等相關(guān)腫瘤性疾病[4]。禽白血病可分為 A、B、C、D、E和J 6個亞群，其中J亞型是主要流行毒株[5]。自1998年以來J亞群ALV（ALV-J）的出現(xiàn)對養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展帶來了重大影響[6-9]。5周齡的雞易感ALV-J，引起雞發(fā)生腫瘤病變和死亡，雞感染ALV-J可見嚴(yán)重的免疫抑制現(xiàn)象。

本研究對甘肅省西和縣的雞場進(jìn)行了CIV、IBD和AL 3種免疫抑制性疫病的流行病學(xué)進(jìn)行了調(diào)查，為西和縣的免疫抑制病的快速診斷及綜合防控、保證雞群免疫功能、提高疫苗的免疫效果、減少雞群免疫失敗、減少雞群禽流感等其他重大傳染病的發(fā)生，以及為養(yǎng)雞業(yè)穩(wěn)定健康的發(fā)展提供了理論依據(jù)和可靠方案。

1" 材料與方法

1.1" 材料與試劑

病毒DNA/RNA磁珠法提取試劑盒、雞傳染性貧血病病毒PCR檢測試劑盒、傳染性法氏囊病毒PCR檢測試劑盒，青島英賽特生物科技有限公司；雞傳染性貧血病毒抗體ELISA檢測試劑盒，美國愛德士生物科技有限公司；傳染性法氏囊病毒抗體ELISA檢測試劑盒，荷蘭BIOCHEK公司；禽白血病病毒抗體ELISA檢測試劑盒，法國ID.VET公司；禽白血病病毒p27抗原檢測試劑盒，國生生物公司。

1.2" 儀器與設(shè)備

全自動核酸提取純化儀，青島英賽特生物科技有限公司；QuantStudioTM5 實(shí)時熒光定量PCR儀，賽默飛世爾科技公司；SPX-250B-Z恒溫箱，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；酶標(biāo)儀，賽默飛世爾科技公司；WellWash洗板機(jī)，賽默飛世爾科技公司。

1.3" 試驗(yàn)方法

1.3.1" 實(shí)時熒光定量 PCR（qPCR）檢測" 用滅菌棉拭子在雞泄殖腔處轉(zhuǎn)動至少3圈蘸取分泌物后，立即放入滅菌離心管中，剪去露出的拭子桿部，蓋緊離心管蓋，做好標(biāo)記送至實(shí)驗(yàn)室。肛拭子離心管加入適量的PBS，室溫放置至少1 h，取300 μL于病毒DNA/RNA磁珠法提取試劑盒中，將試劑盒放在全自動核酸提取純化儀進(jìn)行核酸提取，提取出來的核酸采用雞傳染性貧血病病毒、傳染性法氏囊病毒PCR試劑盒進(jìn)行檢測，按照雞傳染性貧血病病毒、傳染性法氏囊病毒PCR試劑盒說明書進(jìn)行結(jié)果判定。

1.3.2" ELISA檢測" 在雞場現(xiàn)場進(jìn)行翅靜脈采血，一只注射器只采一只雞的血樣，標(biāo)記好場區(qū)、舍號及翅號，分離出來的血清用以檢測雞傳染性貧血病病毒抗體、傳染性法氏囊病毒抗體和禽白血病病毒J亞型抗體，禽白血病病毒p27抗原也使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法進(jìn)行檢測。所有操作步驟、計算方法及判定標(biāo)準(zhǔn)按照對應(yīng)試劑盒提供的操作說明書進(jìn)行。

2" 試驗(yàn)結(jié)果分析

2.1" 各雞場雞群CIAV檢測結(jié)果分析

不同雞場的CIAV檢測結(jié)果如表1所示。采用ELISA方法共檢測了960份血清，抗體陽性率為78.13%。其中，有20個雞場的抗體陽性率達(dá)到了100%，平均抗體滴度較高；陽性率介于50%～100%之間的有7個；低于50%的雞場有8個；有3個場的陽性率為0%，平均抗體滴度較低，說明這3個雞場未進(jìn)行CIAV免疫，也未感染過。在PCR檢測的1 068份肛拭子中，抗原陽性率為13.01%，抗原陽性率遠(yuǎn)低于抗體陽性率。

2.2" 各雞場雞群IBD檢測結(jié)果分析

不同雞場的IBD檢測結(jié)果如表2所示。ELISA試驗(yàn)共檢測了854份血清，抗體陽性率為97.42%。其中，有33個雞場的陽性率達(dá)到了100%，抗體滴度也較高，整體離散度較小，這些雞場都免疫了法氏囊疫苗，顯示疫苗免疫效果良好；抗體陽性率介于50%～100%之間的有3個；有2個場的陽性率為0%，抗體滴度也很低。在PCR檢測的1 068份肛拭子中，IBD抗原檢測結(jié)果全為陰性，說明該區(qū)域雞場沒有IBD感染和傳播的風(fēng)險。

2.3" 各雞場雞群ALV檢測結(jié)果分析

不同雞場的ALV檢測結(jié)果如表3所示。共檢測960份血清，抗體陽性率為11.88%。其中，1個雞場的陽性率達(dá)到了100%；陽性率介于50%～100%之間有4個雞場；低于50%的有5個，說明該區(qū)域雞群中存在一定的ALV感染或傳播，或者引進(jìn)雛雞存在垂直傳播感染造成陽性問題；ALV-J抗體陰性場區(qū)有28個。在檢測1 068份肛拭子中，ALV-p27抗原陽性率最高為43.33%，陽性率最低的為3.03 %。對38個場進(jìn)行ALV-p27抗原檢測，陽性場有6個，感染陽性率為15.79%，其余場區(qū)全為陰性。

3" 討論

3.1" 西和縣CIA血清學(xué)、病原PCR檢測調(diào)查結(jié)果討論

38個場的CIA免疫情況比較結(jié)果見表4。李玉燕等[7]對CIA活疫苗進(jìn)行免疫試驗(yàn)，結(jié)果顯示肛拭子CIA疫苗在第7周時沒有排毒。而本調(diào)查中，有8家雞場的肛拭子PCR病原檢測結(jié)果呈陽性，且均發(fā)生在免疫后7周及以后，因而確定為CIAV感染。

經(jīng)調(diào)查，未免疫CIA疫苗的雞場有6個。從表4可知，肉雞場JC7、JC8、JC31血清抗體陽性率為0，肛拭子PCR病原檢測結(jié)果呈陰性，進(jìn)一步說明這3個場是非免疫場；JC9、JC16、JC26血清抗體陽性率分別為100%、46.6%和40%，肛拭子PCR病原檢測陽性率分別為33.33%、100%和16.67%，說明這3個非免疫場存在CIAV感染。免疫的場區(qū)共有32個（22個肉雞場、10個蛋雞場），免疫時間在45～50日齡。其中10個蛋雞場的平均抗體滴度為2 371，抗體陽性率54.42%，抗體滴度和陽性率不是很高，但病原檢測是陰性的。22個免疫的肉雞場：6個感染場，平均抗體滴度為9 067，抗體陽性率100%，病原陽性率平均為54.98%；16個陰性場，平均抗體滴度為11 727，具有較高的抗體水平，其平均抗體陽性率高達(dá)98.16%。說明西和縣雞場存在一定程度的CIAV傳播和感染風(fēng)險，肉雞比蛋雞更易感，未免疫的雞場比免疫雞場更易感。

3.2" 西和縣IBD血清學(xué)、PCR病原檢測調(diào)查結(jié)果討論

從表2的檢測數(shù)據(jù)可以看出，免疫雞場中IBD的血清抗體陽性率基本都達(dá)到100%；肛拭子PCR病原學(xué)檢測結(jié)果為0%，說明目前西和縣的雞場沒有IBD感染風(fēng)險。

38個場的IBD免疫情況調(diào)查詳見表5。10個蛋雞場全部免疫IBD疫苗，經(jīng)ELISA檢測的IBD抗體滴度達(dá)到20 548，說明這些場接種疫苗后的免疫效果很好。28個肉雞場中，只有2個場未免疫IBD疫苗，平均抗體滴度為384；26個肉雞免疫場的IBD抗體平均滴度為19 704，JC4、JC9、JC24三個場抗體陽性率分別為96.67%、89.29%、86.21%，其余均是100%，根據(jù)本次試驗(yàn)使用的試劑盒判定標(biāo)準(zhǔn)，低于1 324判為陰性，說明抗體低的這些場可能存在疫苗漏免情況。

3.3" 西和縣ALV-J血清學(xué)、ALV-p27病原ELISA檢測調(diào)查結(jié)果討論

38個場的感染調(diào)查情況詳見表6。用ELISA方法檢測的ALV-p27抗原結(jié)果會存在假陽性的可能，本試驗(yàn)中，通過增加血清抗體檢測作為對照，根據(jù)抗原和抗體檢測結(jié)果，最終確認(rèn)檢出ALV-p27抗原陽性雞場為感染場。西和縣雞場中ALV-J抗體檢出陽性場有10個（表3），陽性率為26.32%，檢出ALV-p27病原陽性場有6個，陽性率為15.79%；38個雞場中，10個蛋雞場全部為陰性場，6個肉雞場檢出為感染場，陽性率為4.64%。說明這些雞場周圍面臨較大的環(huán)境感染壓力。

4" 小結(jié)

對于未免疫相關(guān)疫苗的雞群，樣本雞只血清抗體檢測為陽性的，表明該雞場環(huán)境中存在相關(guān)病毒，可能導(dǎo)致雞群感染。對于免疫了相關(guān)疫苗的雞群，樣本雞只血清抗體檢測結(jié)果為陽性，有以下幾種可能：一是正常免疫后雞群產(chǎn)生了良好的免疫應(yīng)答；二是免疫雞群感染強(qiáng)毒后，中和原有疫苗產(chǎn)生的抗體后再產(chǎn)生的野毒抗體，這種情況下應(yīng)該從整個雞群的生產(chǎn)性能、精神狀態(tài)及臨床癥狀來綜合評價。通常來說，強(qiáng)毒感染后體內(nèi)相應(yīng)抗體的效價值明顯高于一般弱毒疫苗免疫所能產(chǎn)生的抗體效價；三是若樣本雞只整體血清抗體效價明顯低于既定的常規(guī)免疫抗體效價，也可能是環(huán)境中存在相應(yīng)病毒，從而使雞群受到感染。

本次調(diào)查選擇了CAV、IBD、ALV-J 3種免疫抑制性傳染病作為研究對象，但還有其他的免疫抑制性傳染病如REO、MD等，因此本研究的結(jié)果只能反映甘肅省西和縣雞CAV、IBD、ALV-J 3種免疫抑制性傳染病的發(fā)生現(xiàn)狀。雞群免疫失敗的主要原因是雞群中存在免疫抑制性疾病，但也受其他因素的影響，例如雞只的營養(yǎng)狀況、疫苗本身的質(zhì)量問題、疫苗毒株與流行毒株血清型（或基因型）的一致性問題、免疫途徑、免疫程序等，均對雞群的免疫狀態(tài)有一定影響。因此，我們需要重視引種，加強(qiáng)檢查防疫，杜絕引入免疫抑制性疾病，加強(qiáng)種雞群的免疫凈化，培育無免疫抑制性傳染病雞群，加強(qiáng)雞場防疫管理，從而達(dá)到預(yù)防和控制的目的。

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An Epidemiological Investigation of Immunosuppressive Diseases in Chicken Farms in Xihe County

LU Yanhui1， DING Aijun1， SHI Fangquan2， ZHANG Peng1， GUO Yan3， WANG Hailan1，

GUO Longzong1

（1.Shandong Yisheng Livestock amp; Poultry Breeding Co.， Ltd， Yantai" 264000， China;

2.Xihe county animal husbandry and veterinary station，" Longnan" 742000， China;

3.Yantai Science and Technology Innovation Promotion Center， Yantai" 264000， China）

Abstract： In order to understand the prevalence of immunosuppressive diseases in chickens in Xihe County， an epidemiological survey of three immunosuppressive diseases ， infectious chicken Infectious Anemia （CIA） ，bursal disease （IBD） and avian leukemia （ALV） was conducted in 38 chicken farms in Xihe County. The positive rates of CIA， IBD and ALV-J antibodies detected by ELISA were 78.13% （750/960）， 97.42% （832/854） and 11.88% （114/960）， respectively.The positive rate of CIA and IBD detected by PCR was 13.01% （139/1 068）. The positive rate of IBD was negative （0/1 068）. And the positive rate of ALV-p27 detected by ELISA was 3.68% （39/1 068）. The investigate results showed that serum antibody positive rate was higher than pathogen positive rate， and the average antibody titer was higher with high antibody positive rate.This study provides a theoretical basis for the prevention and control of immunosuppressive disease of chickens in Xihe County， Gansu province through the epidemiological investigation.

Keywords： Chicken Infectious Anemia; Infectious Bursal Disease; Avian Leukemia; Epidemiology

收稿日期：2024-09-26

基金項(xiàng)目：十四五國家重點(diǎn)研發(fā)計劃綠色宜居村鎮(zhèn)技術(shù)創(chuàng)新專項(xiàng)（2022YFD1100506）

第一作者：盧艷慧（1995—），女，主要從事規(guī)模化種雞場實(shí)驗(yàn)室檢測工作，E-mail：19862128956@163.com

通信作者：郭龍宗（1981—），男，高級獸醫(yī)師，主要從事規(guī)模化種雞場獸醫(yī)技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室管理，E-mail：guolongzong1981@163.com