飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞生產(chǎn)性能、抗氧化能力及免疫性能的影響

收稿日期：2024-05-17

基金項(xiàng)目：西南民族大學(xué)研究生創(chuàng)新型科研項(xiàng)目 （ZD2023320）；四川省科技計劃項(xiàng)目（2021YFYZ0031、2023NSFSC0236）

作者簡介：魏盼琪（1998-），男，山東德州人，碩士研究生，主要從事動物生長調(diào)控研究。（E-mail）1956867307@qq.com

通訊作者：饒開晴， （E-mail）wkxwzz6@163.com

摘要： 本研究在飼料中分別添加非淀粉多糖復(fù)合酶制劑、抗菌肽及二者聯(lián)合添加，探究其對藏雞生產(chǎn)性能、抗氧化能力及免疫性能的影響。挑選240羽14 日齡健康藏雞（公母各半），將藏雞隨機(jī)分為4組：基礎(chǔ)飼料組（CK）、基礎(chǔ)飼料添加300 mg/kg復(fù)合酶制劑組（NSP處理）、基礎(chǔ)飼料添加200 mg/kg抗菌肽組（AMPs處理）及基礎(chǔ)飼料添加300 mg/kg復(fù)合酶制劑+200 mg/kg抗菌肽的酶肽組（NSP+AMPs處理）。在42日齡、63日齡于每個重復(fù)中選取2只體重相近的藏雞統(tǒng)計生產(chǎn)性能相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果表明，（1）與CK相比，NSP處理、AMPs處理及NSP+AMPs處理均能顯著增加21～42日齡藏雞平均日采食量（Plt;0.05）；NSP+AMPs處理能顯著提升藏雞平均日增重（Plt;0.05）。（2）NSP+AMPs處理可顯著降低42日齡、63日齡藏雞血清中丙二醛（MDA）含量（Plt;0.05），顯著提高超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性（Plt;0.05）。NSP處理可顯著降低42日齡及63日齡藏雞血清中MDA含量，提升42日齡及63日齡藏雞血清中GSH-Px的活性（Plt;0.05）。AMPs處理可顯著提升42日齡藏雞血清中GSH-Px活性及63日齡藏雞血清中SOD活性（Plt;0.05），可顯著降低63日齡藏雞血清中MDA含量；NSP+AMPs處理可顯著降低42日齡及63日齡藏雞肝臟中MDA含量（Plt;0.05），可顯著提高GSH-Px活性（Plt;0.05）。NSP處理可顯著降低42日齡藏雞肝臟中MDA含量，顯著提高GSH-Px活性（Plt;0.05），各處理均可提升42日齡及63日齡藏雞肝臟中SOD活性（Plt;0.05）。（3）AMPs處理與NSP+AMPs處理能顯著提升42日齡藏雞的法氏囊指數(shù)（Plt;0.05），且NSP+AMPs處理能顯著提升63日齡藏雞法氏囊指數(shù)（Plt;0.05），所有試驗(yàn)組均能顯著提升42日齡、63日齡藏雞血清新城疫抗體效價（Plt;0.05）；AMPs處理與NSP+AMPs處理均顯著提升42日齡、63日齡藏雞血清中免疫球蛋白Y（IgY）含量（Plt;0.05）。飼料中酶制劑與抗菌肽聯(lián)合添加可顯著提高藏雞的抗氧化能力與免疫性能，且顯著提高藏雞的生產(chǎn)性能，酶制劑與抗菌肽聯(lián)合添加效果優(yōu)于酶制劑或抗菌肽單獨(dú)添加。

關(guān)鍵詞： 藏雞；酶制劑；抗菌肽；抗氧化；免疫

中圖分類號： S816.7"" 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A"" 文章編號： 1000-4440（2024）10-1882-09

Effects of enzyme preparations and antibacterial peptides on production performance， antioxidant capacity and immune performance of Xizang chickens

WEI Panqi¹， YANG Jia¹， ZHENG Yucai¹， LI Zhixiong¹， NI Jianhua²， FENG Weidong³， RAO Kaiqing¹

（1.College of Animal and Veterinary Sciences， Southwest Minzu University/Key Laboratory of Veterinary Medicine of Universities in Sichuan Province， Chengdu" 610041， China;2.Xiangcheng County Zanggege Agricultural Development Co.， Ltd.， Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture， Ganzi 626700， China;3.Sichuan Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture Animal Husbandry Research Institute， Ganzi 626000， China）

Abstract： The effects of non-starch polysaccharide complex enzyme preparations， antimicrobial peptides and their combination on production performance， antioxidant capacity and immune performance of Xizang chickens were investigated. A total of 240 14-day-old healthy Xizang chickens （half male and half female） were randomly divided into four groups： basal diet group （CK）， basal diet supplemented with 300 mg/kg compound enzyme preparation group （NSP treatment）， basal diet supplemented with 200 mg/kg antimicrobial peptide group （AMPs treatment） and 300 mg/kg compound enzyme preparation + 200 mg/kg antimicrobial peptide group （NSP+AMPs treatment）. At 42 and 63 days of age， two Xizang chickens with similar body weight were selected from each replicate to calculate the production performance related indicators. The results showed that compared with CK， NSP treatment， AMPs treatment and NSP + AMPs treatment could significantly increase the average daily feed intake of Xizang chickens aged 21 days to 42 days （Plt;0.05）. NSP + AMPs treatment significantly increased the average daily gain of Xizang chickens （Plt;0.05）. NSP + AMPs treatment significantly reduced the content of malondialdehyde （MDA） in serum of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）， and significantly increased the activities of superoxide dismutase （SOD） and glutathione peroxidase （GSH-Px） （Plt;0.05）. NSP treatment could significantly reduce the content of MDA in serum of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens， and increase the activity of GSH-Px in serum of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）. AMPs treatment significantly increased the activity of GSH-Px in serum of 42-day-old Xizang chickens and the activity of SOD in serum of 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）， and significantly decreased the content of MDA in serum of 63-day-old Xizang chickens. NSP + AMPs treatment significantly decreased the content of MDA （Plt;0.05） and increased the activity of GSH-Px （Plt;0.05） in the liver of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens. NSP treatment could significantly reduce the content of MDA in the liver of 42-day-old Xizang chickens and significantly increase the activity of GSH-Px （Plt;0.05）. All treatments could increase the activity of SOD in the liver of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）. AMPs treatment and NSP + AMPs treatment could significantly increase the bursal index of 42-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）， and NSP + AMPs treatment could significantly increase the bursal index of 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）. All experimental groups could significantly increase the serum Newcastle disease antibody titer of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）. Both AMPs treatment and NSP + AMPs treatment significantly increased the content of immunoglobulin Y （IgY） in serum of 42-day-old and 63-day-old Xizang chickens （Plt;0.05）. The combined addition of enzyme preparations and antimicrobial peptides in feed can significantly improve the antioxidant capacity， immune performance and production performance of Xizang chickens. The combined addition of enzyme preparations and antimicrobial peptides is better than the single addition of enzyme preparations or antimicrobial peptides.

Key words： Xizang chickens;enzyme preparations;antibacterial peptides;antioxidant;immune

藏雞主要生長在青藏高原高海拔地區(qū)，是高原地區(qū)農(nóng)戶長期馴養(yǎng)和培育的一種獨(dú)特的地方品種^[1]。藏雞肌肉富含多種營養(yǎng)成分，肉質(zhì)細(xì)嫩，深受消費(fèi)者喜愛。但是，藏雞生長周期長，體型小，并且其飼養(yǎng)方式一般為農(nóng)戶戶外散養(yǎng)，導(dǎo)致藏雞的生產(chǎn)性能較低^[2]。近年來隨著全面脫貧攻堅(jiān)政策的展開，藏區(qū)旅游業(yè)快速發(fā)展，大量游客涌入藏區(qū)，藏雞產(chǎn)品因此被更多人所了解。但傳統(tǒng)的藏雞飼養(yǎng)方式生產(chǎn)效率較低，不能滿足市場對藏雞產(chǎn)品的需求。為了提高藏雞養(yǎng)殖效率和藏雞產(chǎn)量，目前藏雞的飼養(yǎng)模式已逐步由自由放養(yǎng)向大規(guī)模的舍內(nèi)飼養(yǎng)模式轉(zhuǎn)化。但藏雞在舍內(nèi)飼養(yǎng)過程中容易感染并傳播疾病，增加了養(yǎng)殖中潛在的風(fēng)險。在中國禁抗背景下，結(jié)合藏雞生產(chǎn)現(xiàn)狀，探尋一種安全、高效、綠色的飼料添加劑的需求已經(jīng)迫在眉睫。

酶制劑是一種新型的替抗飼料添加劑，可有效改善飼料轉(zhuǎn)化率，從而提高動物的生產(chǎn)性能。復(fù)合酶制劑的主要作用是分解植物飼料的細(xì)胞壁，將飼料中不能被機(jī)體利用的非淀粉多糖分解為可被機(jī)體利用的糖，使機(jī)體對飼料內(nèi)營養(yǎng)成分的吸收利用更加高效，同時可以降低消化道內(nèi)食糜的黏度，加快腸道排空速度；另外，酶制劑還可以改善腸道菌群的多樣性結(jié)構(gòu)，有利于益生菌的繁殖，促進(jìn)腸道內(nèi)源性酶的分泌并提高其活性，從而提高機(jī)體抵抗力與生產(chǎn)性能^[3]。自1975年美國科學(xué)家將微生物酶添加到飼料中并取得顯著效果以來，酶制劑已被廣泛應(yīng)用于動物飼料中。

抗菌肽（AMPs）是由特定基因編碼的多肽類小分子物質(zhì)，它由外界刺激產(chǎn)生，攜帶正電荷，具有雙親性的分子結(jié)構(gòu)。AMPs具有廣譜抗菌活性和免疫調(diào)節(jié)的功能，相較于抗生素，AMPs除具有抗菌和免疫調(diào)節(jié)的功能外，還具有高選擇性和低毒的特點(diǎn)^[4]。有研究結(jié)果表明，AMPs在提高動物生產(chǎn)性能、增強(qiáng)免疫功能和維持腸道菌群穩(wěn)態(tài)方面都有積極作用^[5-6]。當(dāng)前在面臨全面飼料禁抗的現(xiàn)狀下，酶制劑和AMPs作為飼料替抗添加劑已成為養(yǎng)殖領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，但關(guān)于其在生產(chǎn)中單獨(dú)及兩者聯(lián)合應(yīng)用對藏雞生產(chǎn)性能、抗氧化性能與免疫性能影響的研究較少。本研究擬通過在藏雞飼料中分別添加酶制劑、抗菌肽及二者組合添加的方式，對比研究不同添加劑及添加方式對藏雞抗氧化性能、免疫性能與生產(chǎn)性能的影響，并比較不同添加劑與添加方式的效果，以期為復(fù)合酶制劑和抗菌肽在藏雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

雞免疫球蛋白Y（IgY）酶聯(lián)免疫試劑盒購自泉州睿信生物研究所；超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性測定所用試劑盒購自南京建成生物工程研究所；復(fù)合酶制劑購自北京挑戰(zhàn)生物技術(shù)有限公司，其主要成分包括β-葡聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶等；抗菌肽購自廣東海納川生物科技股份有限公司，主要由天蠶和柞蠶部分氨基酸片段雜合末端加入天冬酰胺組成； 試驗(yàn)所用藏雞均由甘孜藏族自治州鄉(xiāng)城縣藏咯咯國家級藏雞保種場提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)的方式進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計，選取體重相近且健康的14日齡藏雞共240羽（公母數(shù)量各半），隨機(jī)分為4組，包括：基礎(chǔ)飼料組（對照，CK）、基礎(chǔ)飼料添加300 mg/kg復(fù)合酶制劑組（NSP處理）、基礎(chǔ)飼料添加200 mg/kg抗菌肽組（AMPs處理）及基礎(chǔ)飼料添加300 mg/kg復(fù)合酶制劑+200 mg/kg抗菌肽的酶肽組（NSP+AMPs處理），每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10羽。預(yù)飼7 d后進(jìn)行為期42 d的試驗(yàn)。酶制劑與抗菌肽的添加量參考生產(chǎn)廠家建議并結(jié)合藏雞生產(chǎn)現(xiàn)狀確定。

1.3 試驗(yàn)飼料

本研究中以玉米-豆粕型飼料為基礎(chǔ)飼料，飼料參照美國國家研究委員會（NRC）肉仔雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（1998）和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33-2004）并結(jié)合藏雞生產(chǎn)實(shí)際配制。試驗(yàn)飼料為粉料型，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

預(yù)混料為每1 kg飼料提供維生素A 9 600.0 IU、維生素D3 3 600.0 IU、維生素E 26.4 IU、維生素K3 2.400 mg、維生素B12.400 mg、維生素B2 7.680 mg、維生素B6 3.600 mg、維生素B12 0.024 mg、泛酸鈣12.000 mg、煙酸43.200 mg、葉酸1.200 mg、生物素0.120 mg、膽堿600.000 mg、銅（CuSO4·5H2O） 9.600 mg、錳（MnSO4 H2O） 96.000 mg、鐵（FeSO4·7H2O） 36.000 mg、碘[Ca（IO3）2·H2O] 0.420 mg、硒（Na2SeO3） 0.180 mg?；A(chǔ)飼料代謝能為12.43 MJ/kg。

1.4 飼養(yǎng)管理

甘孜藏族自治州鄉(xiāng)城縣藏咯咯國家級藏雞保種場海拔約3 200 m，空氣氧含量約為16.7%。本試驗(yàn)分為21～42日齡和43～63日齡2個階段。依照常規(guī)免疫新程序進(jìn)行免疫，疫苗均購買于江蘇南農(nóng)高科技股份有限公司。采用立體式單籠飼養(yǎng)（各籠公母各半）模式進(jìn)行試驗(yàn)，保證試驗(yàn)藏雞自由采食和飲水，光暗時間循環(huán)比例為2∶1，圈舍溫度為22 ℃，相對濕度為55%～65%。每日觀察并記錄試驗(yàn)藏雞健康狀況，每7 d以重復(fù)籠為單位詳細(xì)稱量每個料槽的剩余飼料量，以計算每周的耗料量。

1.5 樣品采集

在試驗(yàn)期第20 d、41 d晚20時開始對藏雞禁食。在42日齡、63日齡于每個重復(fù)中選取2只體重相近的藏雞進(jìn)行空腹稱重后進(jìn)行屠宰。于頸靜脈處采集血液，室溫靜置1 h后，于離心機(jī)內(nèi)以3 000 r/min離心15 min分離出血清裝入凍存管；另外采集肝臟于凍存管中，并快速將裝有組織的凍存管放入液氮罐冷凍，再轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱中保存待用。

1.6 測定指標(biāo)及測定方法

1.6.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)測定 試驗(yàn)以7 d為1個周期，詳細(xì)稱取并記錄每籠料槽余料重量及每籠雞重，用以計算每周的采食量及平均日增重。分別于藏雞42日齡和63日齡，以籠為單位，禁食1夜（不禁水）后稱重，統(tǒng)計每籠的平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）。以籠為單位，計算試驗(yàn)21～42日齡、43～63日齡兩試驗(yàn)階段和21～63日齡整個試驗(yàn)期藏雞的ADFI、ADG、料重比（F/G）及死淘率。

死淘率=死亡淘汰蛋雞數(shù)量/試驗(yàn)蛋雞數(shù)量×100%。

1.6.2 抗氧化性能指標(biāo)測定 于42日齡、63日齡在各試驗(yàn)組隨機(jī)選取6個樣品進(jìn)行藏雞血清和肝臟中SOD活性、GSH-Px活性和MDA含量的測定。

1.6.3 免疫性能指標(biāo)測定" 于42日齡、63日齡在每個重復(fù)中選取2只體重相近的藏雞進(jìn)行屠宰并采集脾臟及法氏囊，采集時去除器官表面黏附的血跡及其他組織，稱重并計算器官指數(shù)（器官指數(shù)=器官重/活體重）。使用雞IgY酶聯(lián)免疫試劑盒檢測血液中IgY水平，其操作方法按照試劑盒說明書嚴(yán)格執(zhí)行。新城疫抗體效價的測定嚴(yán)格按照《新城疫診斷技術(shù)》（GB/T 16550-2008）進(jìn)行。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS26.0軟件的單因素方差分析程序檢驗(yàn)各組數(shù)據(jù)間的差異顯著性，并采用LDS多重比較法進(jìn)行比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，在藏雞21～42日齡階段，與CK相比，NSP處理、AMPs處理和NSP+AMPs處理藏雞平均日采食量均顯著提升（Plt;0.05），NSP處理與NSP+AMPs處理21～42日齡藏雞的平均日增重顯著增加（Plt;0.05），CK和AMPs處理的平均日增重差異不顯著（Pgt;0.05）；各試驗(yàn)組的料重比差異不顯著（Pgt;0.05）。相較于CK，NSP處理、AMPs處理以及NSP+AMPs處理的死淘率分別減少了1.67個百分點(diǎn)、5.00個百分點(diǎn)、5.00個百分點(diǎn)。

在藏雞43～63日齡階段，各試驗(yàn)組平均日采食量與CK相比差異不顯著（Pgt;0.05），與CK相比，NSP+AMPs處理顯著提升藏雞平均日增重（Plt;0.05），而AMPs處理對藏雞平均日增重?zé)o顯著影響（Pgt;0.05）；該階段的料重比各組間差異不顯著（Pgt;0.05）。CK與NSP處理藏雞的死淘率均為3.33%，而AMPs處理與NSP+AMPs處理的死淘率為0。

在藏雞21～63日齡階段，與CK相比，NSP+AMPs處理的平均日增重顯著提高（Plt;0.05），而NSP處理和AMPs處理間藏雞的平均日增重?zé)o顯著差異（Pgt;0.05），各處理間料重比也無顯著差異（Pgt;0.05），但AMPs處理與NSP+AMPs處理能有效降低藏雞死淘率。

2.2 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞血清中與抗氧化相關(guān)的指標(biāo)的影響

由表3可知，在藏雞42日齡時，與CK相比，NSP處理與NSP+AMPs處理顯著降低藏雞血清中MDA含量（Plt;0.05），AMPs處理藏雞血清中MDA含量與CK差異不顯著（Pgt;0.05）；NSP+AMPs處理可顯著提高藏雞血清中SOD活性（Plt;0.05）；各試驗(yàn)組藏雞血清中GSH-Px活性均顯著高于CK（Plt;0.05）。以上結(jié)果表明，NSP處理可提高42日齡藏雞血清中GSH-Px活性，降低MDA含量。AMPs處理可提高藏雞血清中GSH-Px活性。NSP+AMPs處理既降低藏雞血清中MDA含量，又提高了血清中SOD和GSH-Px的活性。

在藏雞63日齡時，各試驗(yàn)組血清MDA含量均顯著低于CK（Plt;0.05）；與CK相比，AMPs和NSP+AMPs處理顯著提升藏雞血清中SOD活性（Plt;0.05）；NSP處理與NSP+AMPs處理藏雞血清中GSH-Px活性顯著高于CK（P＜0.05），而AMPs處理藏雞血清中GSH-Px活性與CK相比差異不顯著（Pgt;0.05）。以上結(jié)果表明，NSP處理可提高63日齡藏雞血清中GSH-Px活性，降低MDA含量；AMPs處理可提高血清中SOD活性，降低MDA含量；而NSP+AMPs處理不僅可降低血清中MDA含量，還提高了血清中SOD和GSH-Px的活性。

2.3 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞肝臟中與抗氧化相關(guān)的指標(biāo)的影響

由表4可知，在藏雞42日齡時，NSP處理、NSP+AMPs處理藏雞肝臟中MDA含量顯著低于CK（Plt;0.05），而AMPs處理藏雞肝臟中MDA含量與CK相比差異不顯著（Pgt;0.05）；各試驗(yàn)組肝臟中SOD活性均顯著高于CK（Plt;0.05）；NSP處理、NSP+AMPs處理藏雞肝臟中GSH-Px活性顯著高于CK（Plt;0.05），AMPs處理藏雞肝臟中GSH-Px活性與CK相比差異不顯著（Pgt;0.05）。以上結(jié)果表明，AMPs處理僅可提高42日齡藏雞肝臟中SOD的活性，NSP處理及NSP+AMPs處理可降低藏雞肝臟中MDA含量，還可提高肝臟中SOD和GSH-Px的活性。

在藏雞63日齡時，NSP+AMPs處理藏雞肝臟中MDA含量顯著低于CK（Plt;0.05），NSP處理、AMPs處理與CK相比藏雞肝臟中MDA含量無顯著差異（Pgt;0.05）；各處理組藏雞肝臟中SOD活性與CK相比均顯著提高（Plt;0.05）；NSP+AMPs處理藏雞肝臟中GSH-Px活性顯著高于CK（Plt;0.05），而GSH-Px活性在NSP處理、AMPs處理與CK間無顯著差異（Pgt;0.05）。以上結(jié)果表明，63日齡時，NSP處理和AMPs處理僅可提高藏雞肝臟中SOD活性，而NSP+AMPs處理可降低肝臟中MDA含量，還可提高肝臟中SOD和GSH-Px的活性。

2.4 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，在藏雞42日齡時，與CK相比，AMPs處理與NSP+AMPs處理均顯著增加藏雞法氏囊指數(shù)（Plt;0.05），而各組間脾臟指數(shù)均無顯著差異（Pgt;0.05）。

在藏雞63日齡時，與CK相比，NSP+AMPs處理顯著提升法氏囊指數(shù)（Plt;0.05），而NSP處理、AMPs處理與CK相比藏雞法氏囊指數(shù)無顯著差異（Pgt;0.05），且各組間藏雞脾臟指數(shù)均無顯著差異（Pgt;0.05）。

2.5 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞血清中IgY含量的影響

由圖1可見，在藏雞42日齡和63日齡時，與CK相比，AMPs處理和NSP+AMPs處理均顯著提升藏雞血清中IgY含量（Plt;0.05），而NSP處理藏雞血清中IgY含量與CK相比差異不顯著（Pgt;0.05）。

2.6 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞新城疫抗體效價的影響

由圖2可知，在藏雞42日齡和63日齡時，與CK相比，各試驗(yàn)組均能顯著提升新城疫抗體效價（Plt;0.05）。

3 討論

3.1 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞生產(chǎn)性能的影響

動物的生產(chǎn)性能是反應(yīng)其攝入飼料營養(yǎng)多少的最終表現(xiàn)形式，因此飼料添加劑是否促進(jìn)生產(chǎn)性能的提高可作為評價其營養(yǎng)效果的主要標(biāo)準(zhǔn)之一。研究結(jié)果表明，因植物型飼料原料中的營養(yǎng)物質(zhì)都被封閉在細(xì)胞壁內(nèi)無法被肉雞吸收利用^[7]，所以向肉雞飼料內(nèi)添加復(fù)合酶制劑可有效提高肉雞生產(chǎn)性能。Olukosi等^[8]研究發(fā)現(xiàn)，在低磷低能量水平玉米-豆粕型飼料中添加復(fù)合酶制劑能顯著提升7日齡肉雞的養(yǎng)分利用率。Stefanello等^[9]研究發(fā)現(xiàn)，在玉米-豆粕型肉雞飼料中復(fù)合添加木聚糖酶和淀粉酶可提高氮校正表觀代謝能，且與未添加木聚糖酶和淀粉酶的對照相比具有顯著差異，同時可提升肉雞的空腸和回腸淀粉酶活性，提高肉雞的養(yǎng)分利用率?？咕氖侨〈股氐男乱淮偕L劑，具有廣譜抗菌作用。研究結(jié)果表明，慢性熱應(yīng)激的艾拔益佳AA肉仔雞口服0.2 mg的抗菌肽，可顯著提升其平均日增重與飼料轉(zhuǎn)化率，改善腸道結(jié)構(gòu)，從而有效抵抗慢性熱應(yīng)激對肉雞的不利影響 ^[10]。本研究中，飼料中添加酶制劑與抗菌肽均可以提高21～42日齡藏雞的平均日采食量，且酶制劑與抗菌肽聯(lián)合添加能顯著增加43～62日齡藏雞的平均日增重，這與前人的研究結(jié)果相符。出雛后21 d內(nèi)藏雞腸道發(fā)育尚未完善，對腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率較差，因此在藏雞的雛雞期飼料中添加酶制劑能更好地發(fā)揮其分解飼料原料的功能，提高藏雞機(jī)體對飼料原料的利用率。同時酶制劑與抗菌肽還能起到調(diào)節(jié)腸道pH的作用，適宜的腸道pH促進(jìn)了內(nèi)源酶的分泌并提高了內(nèi)源酶的活性，從而提高了藏雞的生產(chǎn)性能。

3.2 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞抗氧化性能的影響

機(jī)體在正常新陳代謝過程中會產(chǎn)生自由基，包括羥自由基、氧自由基等，統(tǒng)稱為活性氧（ROS）。通常機(jī)體可以通過酶和非酶系統(tǒng)清除機(jī)體內(nèi)ROS^[11]，以維持機(jī)體內(nèi)ROS處于動態(tài)平衡的狀態(tài)，當(dāng)動物機(jī)體處于病理狀態(tài)時，體內(nèi)大量的自由基不能被及時消除，這將導(dǎo)致機(jī)體過度氧化和氧化損傷^[12]，進(jìn)而影響肌肉品質(zhì)^[13]。有研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶制劑能提升肉雞肝臟中SOD和GSH-Px的活性，并且降低肝臟中MDA含量^[14]。

研究結(jié)果表明，飼料中添加酶制劑及抗菌肽能提升畜禽機(jī)體的抗氧化性能。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.05%和0.15%的復(fù)合酶（主要成分為酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、酸性纖維素酶等）均能顯著提高斷奶仔豬血清總抗氧化能力（T-AOC）以及GSH-Px與SOD的活性，降低MDA含量^[15]。Sharma等^[16]的研究結(jié)果表明，適量的抗菌肽Hispidalin可消除2，2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基（DPPH）自由基，能夠抑制脂質(zhì)發(fā)生相關(guān)的氧化反應(yīng)，減少丙二醛的產(chǎn)生。同時孫全友等^[17]的研究結(jié)果也表明，抗菌肽能顯著提升21日齡肉雞血清SOD活性、降低MDA含量。Landy等^[18]在肉雞飼料中添加棉籽生物活性肽的研究結(jié)果表明，飼料中添加6 g/kg的棉籽生物活性肽能顯著提升肉雞免疫功能與血清總抗氧化能力。本研究在飼料中添加酶制劑顯著提升了42日齡藏雞血清中GSH-Px活性，同時顯著降低了MDA含量；并顯著提升了63日齡藏雞血清中GSH-Px活性，降低了MDA含量。添加抗菌肽顯著提升了42日齡藏雞血清中GSH-Px活性，并顯著提升63日齡藏雞血清中SOD活性，顯著降低了藏雞血清中MDA含量，但對GSH-Px活性無顯著影響，這與前人的研究結(jié)果較一致。

抗氧化性能的提升可能與酶制劑促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，進(jìn)而促進(jìn)器官的生長發(fā)育有關(guān)^[19-20]。而抗菌肽本質(zhì)上為由氨基酸組成的多肽分子，其在腸道被分解后，多種氨基酸被釋放，氨基酸能起到直接或間接的抗氧化作用。例如，含有較多疏水性氨基酸、芳香性氨基酸或具備親水性與親脂性的肽更可能具有抗氧化性能，從而降低MDA含量，降低ROS對機(jī)體的傷害，提高動物機(jī)體的抗氧化功能^[21-22]。

3.3 飼料中添加酶制劑和抗菌肽對藏雞免疫性能的影響

法氏囊和脾臟是機(jī)體重要的免疫器官，其器官重量占機(jī)體總重的比例即器官指數(shù)，器官指數(shù)大小能在一定程度上反映機(jī)體免疫能力的大小。在本試驗(yàn)中AMPs處理與NSP+AMPs處理均能顯著增加42日齡藏雞的法氏囊指數(shù)，同時NSP+AMPs處理也能顯著增加63日齡藏雞的法氏囊指數(shù)。

免疫球蛋白是由B細(xì)胞分化成熟為漿細(xì)胞后所分泌的一種具有能與抗原特異性結(jié)合，且有免疫功能的球蛋白。張永紅等^[23]指出，免疫球蛋白能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合，達(dá)到中和抗原的作用，以抵抗病毒、過敏原、細(xì)菌和毒素等物質(zhì)的侵襲。根據(jù)其分子結(jié)構(gòu)，可分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5大類^[24]，其中免疫球蛋白IgY與哺乳動物的IgG相似，由蛋雞產(chǎn)生的IgY經(jīng)轉(zhuǎn)移聚集在卵黃中，是禽類動物體內(nèi)的主要抗體。王靖^[25]在對京海黃雞的研究中指出，血清中免疫球蛋白含量的高低可以直接反應(yīng)動物免疫功能的強(qiáng)弱。Xie等^[6]在1日齡818肉雞飼料中組合添加100 mg/kg Plectasin和100 mg/kg Cecropins 的抗菌肽，可顯著提升21日齡肉雞的脾臟指數(shù)，且在21日齡與50日齡時胸腺指數(shù)與法氏囊指數(shù)均有提升的趨勢。本研究中，與對照相比，整個飼養(yǎng)階段酶制劑對藏雞血清中IgY含量無顯著影響，這可能與酶制劑的添加水平、酶制劑種類及試驗(yàn)動物品種不同有關(guān)?？咕目梢詫共≡葘C(jī)體的侵襲，參與調(diào)節(jié)并增強(qiáng)機(jī)體的免疫性能。本研究中AMPs處理和NSP+AMPs處理均顯著增加了42日齡、63日齡藏雞血清中的IgY含量。

抗體效價在一定的程度上可以反映出肉雞的免疫效果，也在很大程度上反映了肉雞抵抗病毒入侵的能力。譚俊榮^[26]通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)4種人工合成的不同類型的小肽均能增強(qiáng)肉雞血清新城疫抗體效價。Bai等 ^[27]的研究結(jié)果表明，向肉雞飼料中添加海帶粉與天蠶素抗菌肽可顯著提升21日齡與42日齡肉雞的血清新城疫病毒抗體滴度。本試驗(yàn)中NSP處理、AMPs處理、NSP+AMPs處理均顯著提升了42日齡、63日齡藏雞血清中新城疫抗體效價，這與前人研究結(jié)果相符，研究結(jié)果表明NSP處理、AMPs處理、NSP+AMPs處理均能提升藏雞的免疫性能。酶制劑增強(qiáng)機(jī)體免疫性能的機(jī)制可能是飼料中的蛋白質(zhì)在蛋白酶的作用下產(chǎn)生具有免疫活性的小肽，參與免疫功能的調(diào)節(jié)。Bao等^[28]研究發(fā)現(xiàn)肉雞飼料中添加豬源抗菌肽顯著增加腸道黏膜sIgA的表達(dá)，卜華超^[29]的研究結(jié)果表明，添加不同劑量的天蠶素抗菌肽可以顯著提高感染鼠傷寒沙門氏菌肉雞血清中IgM、IgA和IgG的含量，IgM含量、IgA含量在14日齡顯著高于對照組，可見抗菌肽能促進(jìn)免疫球蛋白的合成并增加其活性，從而提高藏雞的抗病力。

本研究結(jié)果表明，飼料中復(fù)合添加酶制劑與抗菌肽能顯著提升藏雞的平均日增重，增強(qiáng)藏雞的免疫性能，使藏雞在21～63日齡死淘率相較于基礎(chǔ)飼料組減少8.33個百分點(diǎn)。在藏雞42日齡時，抗菌肽以及酶肽復(fù)合添加顯著提升藏雞法氏囊指數(shù)、血清IgY含量以及血清新城疫抗體效價。

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（責(zé)任編輯：陳海霞）