CTD相關(guān)ILD患者血清中HDAC3水平及臨床意義

【摘要】 目的：探討結(jié)締組織疾?。–TD）相關(guān)間質(zhì)性肺疾?。↖LD）患者血清中組蛋白去乙?；?

（HDAC3）表達(dá)水平及臨床意義。方法：選取2021年11月—2022年12月于江西省胸科醫(yī)院住院治療的40例CTD相關(guān)ILD患者作為CTD相關(guān)ILD組，選取同期接受體檢的40例健康正常人為健康對(duì)照組。比較兩組血常規(guī)指標(biāo)[白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血小板（PLT）計(jì)數(shù)、血紅蛋白（Hb）]、腎功能指標(biāo)（肌酐、尿素氮、尿酸）、炎癥指標(biāo)[C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）]、血清HDAC3水平。結(jié)果：兩組血常規(guī)指標(biāo)和腎功能指標(biāo)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。CTD相關(guān)ILD組血清CRP、IL-6及血清HDAC3水平均顯著高于健康對(duì)照組（Plt;0.05）。Pearson相關(guān)系數(shù)分析顯示，CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平與血常規(guī)及腎功能指標(biāo)無(wú)顯著相關(guān)性（Pgt;0.05），與CRP、IL-6呈正相關(guān)（Plt;0.05）。結(jié)論：CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平高于健康人群，可能與患者炎癥因子表達(dá)有關(guān)，在輔助診斷CTD相關(guān)ILD方面可能有一定的參考價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)締組織病 肺間質(zhì)病變 組蛋白去乙?；?

Serum HDAC3 Levels in CTD Associated ILD Patients and Its Clinical Significance/YE Zheng， YAO Na， XU Fanglin. //Medical Innovation of China， 2024， 21（28）： -152

[Abstract] Objective： To investigate the expression level of histone deacetylase 3 （HDAC3） in serum of connective tissue disease （CTD） associated interstitial lung disease （ILD） and its clinical significance. Method： A total of 40 CTD associated ILD patients hospitalized in Jiangxi Chest Hospital from November 2021 to December 2022 were selected as CTD associated ILD group， and 40 healthy normal patients who underwent physical examination during the same period were selected as healthy control group. Blood routine indexes [white blood cell （WBC）， red blood cell （RBC）， platelet （PLT） count， hemoglobin （Hb）]， renal function indexes （creatinine， urea nitrogen， uric acid）， inflammatory indexes [C reactive protein （CRP）， interleukin-6 （IL-6）] and serum HDAC3 levels were compared between two groups. Result： There were no significant differences in blood routine indexes and renal function indexes between two groups （Pgt;0.05）. The levels of CRP， IL-6 and HDAC3 in CTD associated ILD group were significantly higher than those in healthy control group （Plt;0.05）. Pearson correlation coefficient analysis showed that serum HDAC3 level in CTD associated ILD patients had no significant correlation with blood routine and renal function indexes （Pgt;0.05）， but was positively correlated with CRP and IL-6 （Plt;0.05）. Conclusion： Serum HDAC3 level in CTD associated ILD patients is higher than that in healthy population， which may be related to the expression of inflammatory factors in the patients， and may have certain reference value in assisting the diagnosis of CTD associated ILD.

[Key words] Connective tissue disease Interstitial lung disease Histone deacetylase 3

First-author's address： Department of Respiratory and Critical Care， Jiangxi Chest Hospital， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.28.035

結(jié)締組織疾?。–TD）是慢性自身性免疫疾病，其能夠累及全身各個(gè)系統(tǒng)器官，其中肺臟是最為常見的受累器官，而在肺臟受累過(guò)程中，間質(zhì)性肺疾?。↖LD）最為常見[1]。ILD病情變化迅速，且預(yù)后極差，是造成CTD患者死亡的主要因素之一[2]。并發(fā)ILD的CTD主要病種包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、系統(tǒng)性硬皮?。⊿Sc）、多發(fā)性肌炎/皮肌炎（PM/DM）、原發(fā)性干燥綜合征（pSS）等[3]。CTD相關(guān)ILD的臨床診斷較為困難，患者無(wú)特異性的臨床癥狀，臨床上主要通過(guò)高分辨率體層攝影（HRCT）進(jìn)行CTD相關(guān)ILD的診斷，但可能存在一定的誤診和漏診情況。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究證實(shí)異常組蛋白乙?；叭ヒ阴；陬愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中發(fā)揮重要作用。Yuan等[4]證實(shí)組蛋白去乙?；?（HDAC3）可促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)間質(zhì)性肺疾病的發(fā)生。為此推測(cè)HDAC3在一定程度上參與了間質(zhì)性肺疾病進(jìn)程，但是還需要進(jìn)一步驗(yàn)證，因此本研究旨在探討HDAC3在CTD相關(guān)ILD患者血清中的表達(dá)水平及臨床意義，以實(shí)現(xiàn)CTD相關(guān)ILD的輔助診斷及治療，提高患者生存率，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年11月—2022年12月江西省胸科醫(yī)院住院治療且確診的40例CTD相關(guān)ILD患者作為CTD相關(guān)ILD組，另選取同期于本院行健康體檢的40例正常人群作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡gt;18歲；（2）肝臟及腎臟功能正常；（3）CTD相關(guān)ILD組符合CTD的分類診斷標(biāo)準(zhǔn)及ILD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，對(duì)照組體檢健康。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在其他原發(fā)性呼吸系統(tǒng)疾??；（2）存在惡性腫瘤疾病；（3）存在精神障礙疾病，無(wú)法配合完成研究；（4）存在其他肺部病變；（5）家族史或遺傳傾向的肺部病變；（6）合并原發(fā)性高血壓、糖尿病、冠心病等慢性疾??；（7）血轉(zhuǎn)氨酶、血肌酐及尿素氮水平超過(guò)正常值的1.5倍；（8）處于哺乳期或妊娠期。本研究經(jīng)江西省胸科醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象及其家屬同意參與本研究，簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血常規(guī)指標(biāo) 采集所有對(duì)象空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血3 mL，使用邁瑞B(yǎng)C-760 CS全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血小板（PLT）計(jì)數(shù)及血紅蛋白（Hb）水平。所有操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.2.2 腎功能指標(biāo) 采集所有對(duì)象空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血3 mL，使用日立1780型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血肌酐、尿素氮、尿酸水平。所有操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.2.3 炎癥指標(biāo)及HDAC3水平 采集所有對(duì)象空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血3 mL，室溫條件下自然凝固15 min，3 000 r/min離心20 min，取血清置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。使用ELSIA試劑盒檢測(cè)血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、HDAC3水平，試劑盒均購(gòu)自江西江藍(lán)純生物試劑有限公司。所有操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.2.4 相關(guān)性 采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平與WBC、RBC、PLT、Hb、肌酐、尿素氮、尿酸、CRP、IL-6水平的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析和處理，血常規(guī)、腎功能指標(biāo)、CRP、IL-6、HDAC3水平等計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析相關(guān)性。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較

CTD相關(guān)ILD組男22例，女18例；年齡41～85歲，平均（63.25±11.40）歲；體重指數(shù)18.38～28.48 kg/m2，平均（23.41±2.63）kg/m2；疾病分型：RA相關(guān)ILD 10例，SLE相關(guān)ILD 8例，DM/PM相關(guān)ILD 12例，SSc相關(guān)ILD 6例，pSS相關(guān)ILD 4例。對(duì)照組中男20例，女20例；年齡38～87歲，平均（60.29±12.09）歲；體重指數(shù)18.61～28.12 kg/m2，平均（23.77±2.99）kg/m2。兩組性別、年齡、體重指數(shù)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），有可比性。

2.2 兩組血常規(guī)指標(biāo)比較

兩組WBC、RBC、PLT計(jì)數(shù)及Hb水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），見表1。

2.3 兩組腎功能指標(biāo)比較

兩組肌酐、尿素氮、尿酸水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），見表2。

2.4 兩組炎癥指標(biāo)及HDAC3水平比較

CTD相關(guān)ILD組CRP、IL-6及血清HDAC3水平均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表3。

2.5 CTD相關(guān)ILD患者HDAC3水平與各指標(biāo)的關(guān)系

Pearson相關(guān)系數(shù)結(jié)果顯示，CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平與WBC、RBC、PLT、Hb、肌酐、尿素氮、尿酸水平無(wú)顯著相關(guān)性（Pgt;0.05），與CRP、IL-6呈正相關(guān)（Plt;0.05），見表4。

3 討論

CTD是自身免疫性疾病，疾病涉及人體全身各個(gè)器官，其中ILD是其最為常見的肺部并發(fā)癥[6]。CTD的主要發(fā)病機(jī)制為自身免疫和/或肺泡上皮和/或血管內(nèi)皮的反復(fù)損傷，通過(guò)促纖維化事件的惡性循環(huán)引起持續(xù)的成纖維細(xì)胞激活和進(jìn)行性損傷，進(jìn)而導(dǎo)致各類器官組織的損傷[7]。ILD的發(fā)病原因并不明確，目前認(rèn)為ILD與全身性疾病、藥物中毒或環(huán)境暴露有關(guān)[8]。近年來(lái)隨著肺影像學(xué)檢查及肺功能檢查技術(shù)的普遍應(yīng)用，CTD相關(guān)ILD的確診率逐漸增加，但是依舊存在漏診及誤診的情況。因此找尋CTD相關(guān)ILD患者血清標(biāo)志物，用于疾病的早期診斷可以提供更多治療的選擇。HDAC3在人體組織和細(xì)胞中廣泛表達(dá)，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，HDAC3在多種類型免疫細(xì)胞的發(fā)育、分化和功能發(fā)揮中具有重要調(diào)控作用；相關(guān)研究報(bào)道，HDAC3在特發(fā)性肺纖維化患者的肺組織中異常過(guò)度表達(dá)[9-10]，HDAC3可能促進(jìn)缺氧條件下的肺纖維化進(jìn)展[11]；抑制HDAC3異常表達(dá)可緩解肺纖維化[12]。由此推測(cè)，HDAC3在CTD相關(guān)ILD患者血清中可能存在異常表達(dá)。

本研究結(jié)果顯示，兩組WBC、RBC、PLT、Hb、肌酐、尿素氮、尿酸水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。分析原因可能是，本研究納入CTD相關(guān)ILD患者病情程度較輕，尚未出現(xiàn)嚴(yán)重的細(xì)胞免疫損傷，未累及腎臟器官損傷。

機(jī)體受到感染或者組織損傷時(shí)CRP急劇上升，郭冬梅等[13]的研究報(bào)道，CTD相關(guān)間質(zhì)性肺炎患者血清CRP水平顯著高于不合并間質(zhì)性肺炎患者。當(dāng)機(jī)體受到特定的誘導(dǎo)物刺激時(shí)IL-6水平顯著升高，相關(guān)研究證實(shí)，CTD患者的IL-6、CRP水平顯著高于健康人，IL-6、CRP能夠作為CTD相關(guān)ILD早期肺組織損傷的判斷指標(biāo)[14-15]。本研究結(jié)果顯示，CTD相關(guān)ILD組CRP、IL-6水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），與上述報(bào)道基本一致。分析原因可能是因?yàn)榛颊唧w內(nèi)發(fā)生了肺泡炎癥，在炎癥因子或介質(zhì)的作用下，刺激成纖維細(xì)胞增生及膠原增殖，進(jìn)而導(dǎo)致肺纖維化的形成，因此體內(nèi)CRP、IL-6水平顯著升高[16]。

本研究結(jié)果顯示，CTD相關(guān)ILD組血清HDAC3水平顯著高于對(duì)照組（Plt;0.05）。HDAC3屬于Ⅰ類HDACs家族成員，是NCOR1/SMRT復(fù)合物的重要去乙?；附M成，其參與了組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑及轉(zhuǎn)錄調(diào)控[17-18]；袁慧等[19]研究表明，HDAC3在RA相關(guān)ILD小鼠肺組織及肺泡灌洗液中呈現(xiàn)高表達(dá)水平，指出HDAC3可能是RA相關(guān)ILD發(fā)病過(guò)程中的關(guān)鍵分子。同時(shí)，本研究中根據(jù)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，發(fā)現(xiàn)CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平與CRP、IL-6呈正相關(guān)（Plt;0.05）。HDAC3能夠調(diào)控膿毒癥模型中炎癥因子水平，敲除HDAC3能夠明顯的緩解模型慢性炎癥癥狀[20]。本研究結(jié)合上述報(bào)道，表明機(jī)體肺部受損，炎癥因子的分泌量增加，進(jìn)一步刺激HDAC3水平的增加來(lái)抑制炎癥反應(yīng)，為此提示HDAC3可能參與了CTD相關(guān)ILD的炎癥反應(yīng)過(guò)程。

綜上所述，CTD相關(guān)ILD患者血清HDAC3水平高于健康人群，可能與患者炎癥因子表達(dá)有關(guān)，在輔助診斷CTD相關(guān)ILD方面可能有一定的參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]劉夢(mèng)洋，張銘銘，楊曙光，等.特發(fā)性肺纖維化急性加重期與結(jié)締組織病相關(guān)性間質(zhì)性肺病急性加重期中醫(yī)證候分布規(guī)律研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2022，50（10）：76-82.

[2]楊奕，馮艷，李志軍.高分辨率CT在結(jié)締組織病并發(fā)間質(zhì)性肺炎的早期診斷價(jià)值[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，43（3）：374-378.

[3]李海蘭，熊曾，劉進(jìn)康，等.結(jié)締組織病相關(guān)性肺間質(zhì)病變的高分辨CT表現(xiàn)[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2017，42（8）：934-939.

[4] YUAN H，JIAO L，YU N，et al.Histone deacetylase 3-mediated inhibition of micro RNA-19a-3p facilitates the development of rheumatoid arthritis-associated interstitial lung disease[J].Front Physiol，2020，11（1）：549656-549661.

[5]中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)風(fēng)濕免疫科醫(yī)師分會(huì)風(fēng)濕病相關(guān)肺血管/間質(zhì)病學(xué)組，國(guó)家風(fēng)濕病數(shù)據(jù)中心.2018中國(guó)結(jié)締組織病相關(guān)間質(zhì)性肺病診斷和治療專家共識(shí)[J].中華內(nèi)科雜志，2018，57（8）：558-565.

[6] SPAGNOLO P，DISTLER O，RYERSON C J，et al.Mechanisms of progressive fibrosis in connective tissue disease （CTD）-associated interstitial lung diseases（ILDs）[J].Ann Rheum Dis，2021，80（2）：143-150.

[7]高海翟，黃晶，魏仲航.IgG4與結(jié)締組織病的研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2020，24（12）：2062-2064.

[8] KHANNA D，TASHKIN D P，DENTON C P，et al.Etiology， risk factors， and biomarkers in systemic sclerosis with interstitial lung disease[J].Am J Respir Crit Care Med，2020，201（6）：650-660.

[9] JEONG S H，SON E S，LEE Y E，et al.Histone deacetylase 3 promotes alveolar epithelial-mesenchymal transition and fibroblast migration under hypoxic conditions[J].Exp Mol Med，2022，54（7）：922-931.

[10] CHEN F，GAO Q，ZHANG L，et al.Inhibiting HDAC3 （histone deacetylase 3） aberration and the resultant Nrf2 （nuclear factor erythroid-derived 2-related factor-2） repression mitigates pulmonary fibrosis[J].Hypertension，2021，78（2）：15-25.

[11]李珊，劉永哲，黃慧，等.組蛋白去乙酰化酶在特發(fā)性肺纖維化和隱源性機(jī)化性肺炎發(fā)病機(jī)制中的作用[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2019，42（5）：361-366.

[12]楊佳璇，郭俊.選擇性組蛋白去乙?；?抑制劑RGFP966對(duì)肺腺癌細(xì)胞A549增殖、遷移能力的影響及作用機(jī)制研究[J].四川醫(yī)學(xué)，2021，42（3）：249-253.

[13]郭冬梅，張紅衛(wèi)，羅綺雯.結(jié)締組織病相關(guān)間質(zhì)性肺炎患者血清KL-6與LDH水平變化及其臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué)，2020，49（22）：3733-3738.

[14] TEZCAN D，SIVRIKAYA A，ERGüN D，et al.Evaluation of serum interleukin-6 （IL-6）， IL-13， and IL-17 levels and computed tomography finding in interstitial lung disease associated with connective tissue disease patients[J].Clin Rheumatol，2021，40（11）：4713-4724.

[15] YOSHIDA Y，SUGIMOTO T，HOSOKAWA Y，et al.C-reactive protein and ground-glass opacity as predictors for intractable interstitial lung disease in patients with systemic sclerosis under cyclophosphamide treatment regardless of concomitant glucocorticoids[J].Mod Rheumatol，2022，32（1）：141-148.

[16]郭林紅，周煒.結(jié)締組織病相關(guān)肺間質(zhì)病的生物標(biāo)志物[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2019，13（2）：137-142.

[17] BONDAREV A D，ATTWOOD M M，JONSSON J，et al.

Recent developments of HDAC inhibitors： emerging indications and novel molecules[J].Br J Clin Pharmacol，2021，87（12）：4577-4597.

[18] EMMETT M J，LAZAR M A.Integrative regulation of physiology by histone deacetylase 3[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2019，20（2）：102-115.

[19]袁慧，焦麗，吳茜，等.HDAC3、IL-17RA、miR-19a-3p在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)間質(zhì)性肺病小鼠中的表達(dá)及意義[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐，2021，6（13）：8-11.

[20] HE R，LIU B，GENG B，et al.The role of HDAC3 and its inhibitors in regulation of oxidative stress and chronic diseases[J].Cell Death Discov，2023，9（1）：131.

（收稿日期：2024-03-07） （本文編輯：馬嬌）