三種真空采血管采集標(biāo)本對(duì)檢測(cè)總蛋白、白蛋白結(jié)果的影響

摘要：目的" 研究三種真空采血管對(duì)不同方法下檢測(cè)總蛋白和白蛋白結(jié)果的影響。方法" 隨機(jī)抽取80例健康體檢者靜脈血液樣本，分別注入普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管）、含促凝劑+分離膠試管（B管）、肝素抗凝試管（C管）中，同時(shí)用雙縮脲法檢測(cè)總蛋白，用溴甲酚綠法/免疫比濁法檢測(cè)白蛋白。對(duì)三管結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較其差異，從而衡量不同采血管內(nèi)添加劑對(duì)雙縮脲法檢測(cè)總蛋白，溴甲酚綠法/免疫比濁法檢測(cè)白蛋白的干擾程度。結(jié)果" 不同真空采血管比對(duì)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管）、含促凝劑試管（B管）的雙縮脲法檢測(cè)總蛋白結(jié)果均低于肝素抗凝試管（C管）；含促凝劑試管（B管）、肝素抗凝試管（C管）的溴甲酚綠法檢測(cè)白蛋白結(jié)果均低于普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；免疫比濁法檢測(cè)白蛋白的三管間結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論" 總蛋白、白蛋白檢測(cè)受采血管內(nèi)添加劑等干擾因素影響較多。對(duì)總蛋白、白蛋白異常水平的樣本建議采用更換采血管或者干擾因素少的方法如免疫比濁法進(jìn)行測(cè)定，以獲得可靠的結(jié)果。

關(guān)鍵詞：真空采血管；肝素；促凝劑；總蛋白；人血清白蛋白

中圖分類號(hào)：R446.1" " " " " " " " " " " " " " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A" " " " " " " " " " " " " " " " "DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.16.033

文章編號(hào)：1006-1959（2024）16-0142-03

Effect of Three Kinds of Vacuum Blood Collection Specimens on the Detection of Total Protein

and Albumin Results

TIAN Guo-liang，SONG Bo，LIU Yu，LI Qing

（Department of Clinical Laboratory/Zibo Key Laboratory of Molecular Immunoassay Medicine，

the First Hospital of Zibo City，Zibo 255200，Shandong，China）

Abstract：Objective" To study the effects of three kinds of vacuum blood collection tubes on the results of total protein and albumin detection by different methods.Methods" Venous blood samples of 80 healthy subjects were randomly selected and injected into ordinary additive-free glass test tube （A tube）， test tube containing coagulant+separation gel （B tube） and heparin anticoagulant test tube （C tube）. At the same time， total protein was detected by biuret method， and albumin was detected by bromocresol green method/immunoturbidimetric method. The results of the three tubes were statistically analyzed to compare the differences， so as to measure the interference degree of different intravascular additives on the detection of total protein by biuret method and albumin by bromocresol green method/immunoturbidimetric method.Results" The comparison experiments of different vacuum blood collection tubes confirmed that the results of total protein detection by biuret method in ordinary additive-free glass test tube （A tube） and coagulant test tube （B tube） were lower than those in heparin anticoagulant test tube （C tube）; the results of albumin detection by bromocresol green method in coagulant test tube （B tube） and heparin anticoagulant test tube （C tube） were lower than those of ordinary additive-free glass test tube （A tube）， and the difference was statistically significant （Plt;0.05）. There was no significant difference in the results of albumin detected by immunoturbidimetry among the three tubes （Pgt;0.05）.Conclusion" The detection of total protein and albumin is more affected by interference factors such as intravascular additives. For the samples with abnormal levels of total protein and albumin， it is recommended to use the method of replacing the blood collection tube or less interference factors such as immunoturbidimetry to obtain reliable results.

Key words：Vacuum blood collection tube;Heparin;Coagulant;Total protein;Human serum albumin

正確采集和處理標(biāo)本是臨床實(shí)驗(yàn)室分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)[1]。目前國(guó)內(nèi)各臨床實(shí)驗(yàn)室多采用無(wú)添加劑玻璃試管、含促凝劑+分離膠試管或者肝素鈉（鋰）抗凝試管采集血液標(biāo)本[2]，分離出血清（血漿），實(shí)現(xiàn)對(duì)生化、免疫等檢驗(yàn)項(xiàng)目的檢測(cè)。關(guān)于不同采血管對(duì)常見(jiàn)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目檢測(cè)的影響已有不少相關(guān)報(bào)道[3]，各研究結(jié)論也有所不同。本研究采用三種不同的采血管，分別用雙縮脲法檢測(cè)總蛋白、兩種不同方法檢測(cè)白蛋白，評(píng)估不同采血管對(duì)總蛋白、白蛋白檢測(cè)準(zhǔn)確性的干擾，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1試劑與儀器

1.1.1總蛋白測(cè)定試劑" 總蛋白測(cè)定試劑（雙縮脲法）由貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（蘇州）有限公司提供。

1.1.2白蛋白測(cè)定試劑" 白蛋白測(cè)定試劑（溴甲酚綠法）由貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（蘇州）有限公司提供；白蛋白測(cè)定試劑（散射比濁法）由德國(guó)西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品有限公司提供。

1.1.3總蛋白、白蛋白測(cè)定儀器" AU5800全自動(dòng)生化分析儀由貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（蘇州）有限公司提供；BNⅡ全自動(dòng)蛋白分析儀由德國(guó)西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品有限公司提供；Sorvall ST19R低速水平冷凍離心機(jī)由賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司提供。

1.1.4真空采血管" 普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管）由江蘇康健醫(yī)療用品有限公司提供；含促凝劑+分離膠試管（B管）由威海威高采血耗材有限公司提供；肝素抗凝試管（C管）由碧迪醫(yī)療器械（上海）有限公司提供。

1.2樣本來(lái)源" 收集2021年12月1日-12月20日淄博市第一醫(yī)院體檢中心80位受檢者[男30例，女50例；年齡18～73歲，平均年齡（48.43±13.27）歲]的無(wú)溶血、無(wú)黃疸、無(wú)脂濁的空腹靜脈血液標(biāo)本作為樣本來(lái)源。

1.3實(shí)驗(yàn)方法" 將采集的標(biāo)本分別注于普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管）、含促凝劑+分離膠試管（B管）、肝素抗凝試管（C管）3種采血管，每管3 ml。除玻璃試管外，各管顛倒混勻2～3次。A、B管內(nèi)血液完全凝固后以相對(duì)離心力RCF（g）1200×g離心10 min（溫度20 ℃）分離出血清備用；C管立即離心，分離出血漿備用。將A、B、C管標(biāo)本分別在AU5800全自動(dòng)生化分析儀上通過(guò)雙縮脲法檢測(cè)總蛋白，溴甲酚綠法檢測(cè)白蛋白；在BNⅡ全自動(dòng)蛋白分析儀上通過(guò)免疫比濁法檢測(cè)白蛋白。每份樣本檢測(cè)3次，在2 h之內(nèi)測(cè)定完畢。將檢測(cè)的3次數(shù)據(jù)，取平均值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法" 利用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組間數(shù)據(jù)比較采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的方差分析（F檢驗(yàn)），P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同試管類型各組間數(shù)據(jù)的兩兩比較采用Tukey法。

2結(jié)果

2.1總蛋白" A、B、C管三組的雙縮脲法檢測(cè)總蛋白的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 白蛋白" A、B、C管三組的溴甲酚綠法白蛋白檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而A、B、C管免疫比濁法檢測(cè)白蛋白結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

3討論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，普通無(wú)添加劑玻璃試管（A管）、含促凝劑+分離膠試管（B管）與肝素抗凝試管（C管）的雙縮脲法檢測(cè)總蛋白結(jié)果相比較，存在負(fù)偏倚；而B(niǎo)、C與A管的溴甲酚綠法檢測(cè)白蛋白結(jié)果相比較，存在負(fù)偏倚；三管間免疫比濁法檢測(cè)白蛋白的結(jié)果間差異不明顯。說(shuō)明真空采血管內(nèi)的促凝劑、分離膠、肝素抗凝劑等添加物，都可能對(duì)總蛋白、白蛋白的檢測(cè)產(chǎn)生一定干擾。

含促凝劑+分離膠試管內(nèi)含有促凝劑與分離膠兩類添加成分。血液促凝劑是硅石粉、玻璃粉及其他促凝成分經(jīng)特殊加工制成的粉劑[4]。這些成分都可能干擾雙縮脲法檢測(cè)總蛋白和溴甲酚綠法檢測(cè)白蛋白的結(jié)果。分離膠是由疏水有機(jī)化合物和硅石粉組成的、具有觸變性的黏液膠體[5]，有助于血清與血細(xì)胞間的快速分離。在血液離心過(guò)程中分離膠可能會(huì)吸附某些分析物，或釋放可能干擾化學(xué)分析的物質(zhì)[6]。

肝素抗凝管具有血漿分離速度快、生化項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果報(bào)告時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)[7]。不少國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)都對(duì)肝素抗凝管與其他真空采血管間項(xiàng)目結(jié)果間的差異進(jìn)行了比較，得出的結(jié)果也大相徑庭[8，9]。本研究中總蛋白的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，肝素抗凝管要高于其他兩管。原因可能是血清的凝固過(guò)程消耗了凝血因子、纖維蛋白原、少量參與凝血過(guò)程的其他血漿蛋白質(zhì)，凝固進(jìn)程擠壓血細(xì)胞也可能將細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)釋放到血清內(nèi)，這些變量導(dǎo)致血清與肝素抗凝血漿間總蛋白檢測(cè)結(jié)果的不一致[10]。其中，影響較大的是纖維蛋白原的消耗。

本研究與姚維菊[8]、萬(wàn)麗等[11]的研究結(jié)果相近，認(rèn)為肝素抗凝管的溴甲酚綠法白蛋白檢測(cè)結(jié)果低于普通無(wú)添加劑玻璃試管。這種不一致究竟是由肝素造成，還是由于血清與血漿的固有差異有關(guān)，仍值得進(jìn)一步探究。有研究指出，肝素可能會(huì)通過(guò)與溴甲酚綠染料競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合白蛋白分子結(jié)合位點(diǎn)的方式，干擾溴甲酚綠法白蛋白的檢測(cè)[12]。另外，各家采血管制造商的抗凝管內(nèi)肝素用量和純度不一，本身的緩沖體系對(duì)肝素的抗干擾能力也有差異。這些也會(huì)對(duì)溴甲酚綠法白蛋白檢測(cè)的結(jié)果一致性造成影響。

目前在國(guó)內(nèi)各臨床實(shí)驗(yàn)室中，受試劑成本、檢測(cè)時(shí)限、標(biāo)本數(shù)量等多方面因素影響，人血清白蛋白濃度大多采用溴甲酚綠法檢測(cè)。但本研究發(fā)現(xiàn)，溴甲酚綠法易受到肝素、促凝劑、分離膠等干擾物質(zhì)的影響導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確，與既往研究一致[13]；而免疫比濁法測(cè)定的白蛋白結(jié)果未受到上述物質(zhì)的干擾。免疫比濁法具有特異性高、受干擾影響小[14，15]的特點(diǎn)，但因其成本較高[16]、自動(dòng)化程度低，目前臨床推廣較少。在白蛋白的濃度本身可能決定治療措施（醫(yī)學(xué)決定水平）[17]或患者應(yīng)用大量肝素藥物造成離體血液肝素殘留的情況下，為追求更為準(zhǔn)確的白蛋白檢測(cè)結(jié)果，建議討論改進(jìn)現(xiàn)有檢測(cè)方案的可能性，如采集足量體積的血液標(biāo)本、更換無(wú)添加劑采血管、改變檢測(cè)方法[18]等，這些措施值得臨床與實(shí)驗(yàn)室的共同探索[19]。

對(duì)患者的個(gè)性化醫(yī)療目前是臨床的熱點(diǎn)。隨著社會(huì)的發(fā)展、經(jīng)濟(jì)水平的提高，對(duì)患者的個(gè)性化檢測(cè)（如對(duì)特定患者采用特定的采血管、特定的檢測(cè)方案）也應(yīng)該提上日程。當(dāng)然，檢驗(yàn)方案的選擇受到各種因素的制約，個(gè)性化檢測(cè)之路仍待摸索前行[20]。臨床實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告中，最好能標(biāo)明檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法，以期更好地提示臨床。加強(qiáng)分析前質(zhì)量控制，重視臨床與實(shí)驗(yàn)室的溝通，保證標(biāo)本的合格率與檢測(cè)準(zhǔn)確性，一直是實(shí)驗(yàn)室與臨床科室共同努力的方向。

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收稿日期：2023-06-22；修回日期：2023-08-28

編輯/肖婷婷

基金項(xiàng)目：淄博市醫(yī)藥衛(wèi)生科研項(xiàng)目（編號(hào)：20231800130）

作者簡(jiǎn)介：田國(guó)亮（1984.12-），男，山東淄博人，碩士，主管檢驗(yàn)技師，主要從事臨床生物化學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)研究

通訊作者：李慶（1975.5-），男，山東淄博人，碩士，主任技師，主要從事臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)研究