一起不明原因食源性疾患流行病調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析

摘 要：目的：查明一起食物中毒事件暴發(fā)的原因和可疑危險(xiǎn)因素，提出有針對(duì)性的防控措施和建議，防止類似事件再次發(fā)生。方法：收集整理暴發(fā)疫情調(diào)查處理資料，包括病例搜索及個(gè)案調(diào)查、現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生學(xué)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等資料，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)和流行病學(xué)特征綜合分析得出事件原因。結(jié)果：現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)有儲(chǔ)存不當(dāng)?shù)氖称?，剩余食品和環(huán)境涂抹樣本中檢出有金黃色葡萄球菌和蠟樣芽孢桿菌，二層男廁所廁坑及門(mén)把手檢出金黃色葡萄球菌，腸毒素A陽(yáng)性，患病學(xué)生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門(mén)把手檢出I型諾如病毒。結(jié)論：本次食源性腹瀉疫情為不潔飲食和諾如病毒疊加作用引起。

關(guān)鍵詞：食物中毒；流行病學(xué)調(diào)查；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)；諾如病毒

Epidemiological Investigation and Laboratory Analysis of a Food-Borne Disease of Unknown Cause

ZHANG Bowen， LIU Dandan

（Mentougou District Center for Disease Control and Prevention， Beijing 102300， China）

Abstract： Objective： To identify the cause and suspected risk factors of an outbreak of food poisoning， and put forward targeted prevention and control measures and suggestions to prevent the recurrence of similar incidents. Method： The investigation and processing data of the outbreak were collected and sorted out， including case search and case investigation， field hygiene investigation， laboratory testing and other data. The causes of the outbreak were obtained by comprehensive analysis of laboratory testing data and epidemiological characteristics. Result： On-site epidemiological investigation revealed improperly stored food， Staphylococcus aureus and Bacillus cereus were detected in residual food and environmental smear samples， Staphylococcus aureus and enterotoxin A positive were detected in the toilet pit and door handle of the 2nd floor men’s toilet， and norovirus type I was detected in the table top and seat of the sick student， and in the toilet pit and door handle of the 2nd and 3rd floor men’s toilet. Conclusion： This outbreak of food-borne diarrhea was caused by the combination of unclean diet and norovirus.

Keywords： food poisoning; epidemiological survey; laboratory testing; norovirus

食物中毒是指攝入了含有生物性、化學(xué)性有毒、有害物質(zhì)的食品或者把有毒有害物質(zhì)當(dāng)作食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性（不屬于傳染?。┑募毙?、亞急性疾病，是引發(fā)突發(fā)公共衛(wèi)生事件的重要原因之一[1]。全世界每年因食物污染而致病的人數(shù)達(dá)數(shù)億，中國(guó)平均每年有近5萬(wàn)人因食物中毒而使健康受到損害，食物安全直接關(guān)系到居民健康和生命安全[2]。2023年4月6日，北京市某中學(xué)多名學(xué)生出現(xiàn)腹瀉、腹痛、惡心和嘔吐等癥狀，經(jīng)調(diào)查疑似為食物中毒事件。本文針對(duì)發(fā)生食源性疾患的某學(xué)校，依據(jù)《食品安全事故流行病學(xué)調(diào)查技術(shù)指南》[3]進(jìn)行調(diào)查，根據(jù)《食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則》（GB 14938—1994）進(jìn)行判定，為今后科學(xué)有效防控食源性疫情提供參考。

1 調(diào)查對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

2023年4月6日，北京市某區(qū)醫(yī)院兒科門(mén)診接診9名嘔吐、腹痛患者，伴有食品共同暴露史，疑似食源性疾患?；颊呔鶃?lái)自北京市某區(qū)某中學(xué)，學(xué)校供餐人數(shù)共703人，均納入調(diào)查對(duì)象。

1.2 方法

1.2.1 流行病學(xué)調(diào)查

根據(jù)實(shí)際情況，制訂病例定義并進(jìn)行搜索。病例定義：2023年4月6日中午在學(xué)校就餐后，其主要癥狀為嘔吐（次數(shù)≥1次/d）合并腹痛的在校學(xué)生，共確定病例9人，年齡分布在7～11歲，均為在校就讀學(xué)生。對(duì)所有病例進(jìn)行采樣，同時(shí)開(kāi)展流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查，然后進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生學(xué)調(diào)查。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法

對(duì)剩余食物、留樣食品，患者所在班級(jí)的環(huán)境涂抹和相關(guān)人員的生物樣本，進(jìn)行病原體檢測(cè)及病毒檢測(cè)。開(kāi)展項(xiàng)目為菌落總數(shù)、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、致瀉大腸埃希氏菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)及諾如病毒檢測(cè)。

使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)樣本進(jìn)行初篩檢測(cè)，根據(jù)核酸檢測(cè)結(jié)果，針對(duì)性地對(duì)樣本進(jìn)行病原菌分離。蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌開(kāi)展毒力基因檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 流行病學(xué)調(diào)查

經(jīng)區(qū)疾控中心流行病學(xué)調(diào)查分析，在2023年

4月6日12：00，學(xué)生在學(xué)校集體就餐，餐食由學(xué)校食堂統(tǒng)一提供，其中一年級(jí)（1）班32人，發(fā)病4例；四年級(jí)（1）班29人，發(fā)病5例。發(fā)病前午餐提供餐品有宮保雞丁、胡蘿卜豆芽、炸雞排、米飯、雞蛋黃瓜湯、盒裝酸奶，9名患者均食用午餐提供的所有餐品。

2.2 現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生學(xué)調(diào)查

學(xué)校老師反映部分盒裝酸奶有脹氣，打開(kāi)包裝盒后有肉眼可見(jiàn)的黑色物質(zhì)，疑似菌斑?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)盒裝酸奶置于常溫保存，未按要求冷藏保存。初步調(diào)查結(jié)果為可疑食次是4月6日中餐，可疑食品為盒裝酸奶，不排除因食用其他食品或其他傳染病傳播導(dǎo)致此次事件發(fā)生的可能。

2.3 流行病學(xué)特征及臨床癥狀

9名患者，其中男生2名，女生7名，男女比例為1∶3.5，涉及班級(jí)一年級(jí)（1）班4人，四年級(jí)（1）5人，均為學(xué)生。年齡分布為7歲4人，10歲4人，11歲1人。詳見(jiàn)表1。

經(jīng)調(diào)查了解，所有學(xué)生12：00左右在班級(jí)就餐后，13：00至15：00，9名學(xué)生陸續(xù)出現(xiàn)惡心、嘔吐（嘔吐次數(shù)≥1次/24 h），偶有不同程度腹痛（上腹部，臍周部）、腹瀉情況，所有病例均無(wú)發(fā)熱表現(xiàn)，9名患者均到區(qū)醫(yī)院兒科門(mén)診就診。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果顯示，患者白細(xì)胞不高，臨床診斷為急性胃腸炎。在對(duì)癥治療后效果良好，無(wú)重癥病例，所有病例均已痊愈回家，無(wú)危重病例報(bào)告。詳見(jiàn)表1。

經(jīng)核實(shí)，首發(fā)患者為四年級(jí)（1）班學(xué)生，女，10歲，發(fā)病時(shí)間為4月6日13：00，就診時(shí)間為4月6日14：35。臨床治療為益生菌對(duì)癥、補(bǔ)液鹽和中藥治療。

2.4 采樣情況與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

2.4.1 采樣情況

①未采集到患者嘔吐物樣本。②采集廚師糞便樣本1件，開(kāi)展腸道多病原檢測(cè)。③采集剩余食品4種14件（宮保雞丁、胡蘿卜豆芽、炸雞排，開(kāi)展菌落總數(shù)、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè)；盒裝酸奶11件，開(kāi)展霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、菌落總數(shù)、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè)）。④采集食堂涂抹樣品6件（4個(gè)案板、1個(gè)水池、1個(gè)地漏），開(kāi)展菌落總數(shù)、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌檢測(cè)和致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè)。⑤環(huán)境樣品6管30件，分別為一年級(jí)（1）班和四年級(jí)（1）班的患病學(xué)生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門(mén)把手，開(kāi)展菌落總數(shù)、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和致瀉大腸埃希氏菌及諾如病毒檢測(cè)。

2.4.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

4月12日區(qū)疾控中心實(shí)驗(yàn)室結(jié)果顯示，可疑食品酸奶，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)，結(jié)果均未檢出，未分離到菌株。食品樣品中胡蘿卜豆芽檢出金黃色葡萄球菌，毒力基因陰性。環(huán)境樣品中水池涂抹樣品、一年級(jí)（1）班和四年級(jí)（1）班涂抹樣品檢出蠟樣芽孢桿菌，毒力基因陰性；案板涂抹樣品檢出金黃色葡萄球菌，毒力基因陰性。二層男廁所的廁坑及門(mén)把手樣品檢出金黃色葡萄球菌，A型腸毒素陽(yáng)性。患病學(xué)生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門(mén)把手檢出諾如病毒Ⅰ型，詳見(jiàn)表2。

3 結(jié)論與討論

本次事件所有患者均在學(xué)校就餐，且在餐后1～

3 h后出現(xiàn)不同程度的惡心、嘔吐、腹痛腹瀉等癥狀，結(jié)合發(fā)病快、潛伏期短的流行病學(xué)特征，通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)樣本采集及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析，推測(cè)本次事件由飲用不潔食品同時(shí)疊加諾如病毒感染引起。

對(duì)采集樣本進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)部分盒裝酸奶有脹氣，打開(kāi)包裝盒后有肉眼可見(jiàn)的黑色物質(zhì)，疑似菌斑，但通過(guò)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)并未成功分離到菌株，懷疑是某種微生物僅在某種特定的環(huán)境中可以生存，在實(shí)驗(yàn)室中較難培養(yǎng)，故未分離成功?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查盒裝酸奶置于常溫保存，未按要求冷藏保存，不排除酸奶變質(zhì)可能，若因儲(chǔ)存不當(dāng)，導(dǎo)致酸奶中細(xì)菌或霉菌大量繁殖，即會(huì)造成使用者腹瀉，甚至導(dǎo)致急性胃腸炎，推測(cè)酸奶可能也是此次事件發(fā)生的因素之一。

食品樣本、案板及廁所環(huán)境中均檢出金黃色葡萄球菌，但患者所處環(huán)境樣本并未檢出。有研究表明，金黃色葡萄球菌及其毒素已經(jīng)成為我國(guó)引發(fā)細(xì)菌性食物中毒的主要致病因子之一[4]。所有分離菌株均做腸毒素篩查，廁所環(huán)境檢出腸毒素A，經(jīng)一代測(cè)序分析，腸毒素結(jié)果為t062型，并不是我國(guó)主要的優(yōu)勢(shì)克隆株[5]，故其在人群中的流行暴發(fā)的概率較小，且僅在廁所環(huán)境中檢出。由于本次事件缺少患者的生物樣本分析，同時(shí)金黃色葡萄球菌的檢出量不大，故排除此次事件由金黃色葡萄球菌感染引起；水池涂抹及班級(jí)環(huán)境涂抹均檢出蠟樣芽孢桿菌，但其檢出量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于105 CFU·g-1，且毒力基因陰性，蠟樣芽孢桿菌的致病力不強(qiáng)，故排除；患病學(xué)生桌面及座椅、二層和三層男廁所的廁坑及門(mén)把手檢出諾如病毒Ⅰ型。諾如病毒具有潛伏期短，易傳播，發(fā)病快，人群普遍易感等特點(diǎn)，且在多處環(huán)境樣本中檢出，為諾如病毒的快速傳播提供了有利條件，推測(cè)此次事件存在因諾如病毒在人和物間的不斷流轉(zhuǎn)，從而導(dǎo)致眾多人員感染腹瀉情況的存在。通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果分析可見(jiàn)，環(huán)境樣本及剩余食品中均有病原菌檢出，證實(shí)不潔食品的存在，且環(huán)境中有諾如病毒的檢出，證明學(xué)校在出現(xiàn)相關(guān)患者后并未采取有效的預(yù)防措施，導(dǎo)致諾如病毒在人群中傳播感染。因此，學(xué)校應(yīng)對(duì)衛(wèi)生加強(qiáng)監(jiān)督，同時(shí)強(qiáng)調(diào)注意個(gè)人衛(wèi)生。

參考文獻(xiàn)

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