環(huán)青海湖地區(qū)多年生栽培草地土壤真菌群落結(jié)構(gòu)特征

摘要：為探究環(huán)青海湖地區(qū)多年生栽培草地對(duì)土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和功能的影響，以多年生單播和混播栽培草地為對(duì)象，采用ITS測(cè)序方法對(duì)土壤真菌群落特征進(jìn)行了分析，運(yùn)用FUNGuild進(jìn)行真菌的功能預(yù)測(cè)，并結(jié)合土壤理化性質(zhì)進(jìn)一步揭示土壤真菌群落的驅(qū)動(dòng)因素。研究結(jié)果顯示：子囊菌門(mén)（Ascomycota）是多年生栽培草地的真菌優(yōu)勢(shì)菌門(mén)。與單播草地相比，混播沒(méi)有顯著改變土壤真菌群落的組成，但顯著增加了真菌群落的豐富度和多樣性。FUNGuild功能預(yù)測(cè)結(jié)果表明多年生栽培草地土壤真菌的潛在功能和營(yíng)養(yǎng)方式具有多樣性，且混播草地真菌的病理-腐生-共生型的相對(duì)豐度顯著高于單播草地。影響研究區(qū)土壤真菌群落的主要因子包括土壤全磷、有機(jī)碳、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、全碳：全磷。相比于單播，混播有助于增加土壤全氮和全碳含量，促進(jìn)土壤真菌群落的豐富度和多樣性，更有利于維持土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞：環(huán)青海湖地區(qū);多年生單播栽培草地;多年生混播栽培草地;土壤真菌群落結(jié)構(gòu);功能預(yù)測(cè)

中圖分類(lèi)號(hào)：S154.3""" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A""""" 文章編號(hào)：1007-0435（2024）09-2803-13

收稿日期：2024-03-22；修回日期：2024-04-18

基金項(xiàng)目：2024年中央財(cái)政林業(yè)科技推廣示范項(xiàng)目：高寒人工草地暫穩(wěn)態(tài)維持技術(shù)集成與示范項(xiàng)目資助

作者簡(jiǎn)介：

張小芳（1995-），女，漢族，甘肅天水人，博士研究生，主要從事草地生態(tài)與環(huán)境保護(hù)研究，E-mail：1289423206@qq.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：qmdong@qhu.edu.cn

doi：10.11733/j.issn.1007-0435.2024.09.014

引用格式：

張小芳， 張春平， 董全民，等.環(huán)青海湖地區(qū)多年生栽培草地土壤真菌群落結(jié)構(gòu)特征［J］.草地學(xué)報(bào)，2024，32（9）：2803-2815

ZHANG Xiao-fang， ZHANG Chun-ping， DONG Quan-min，et al.Soil Fungal Community Structure in Perennial Cultivated Grassland Around Qinghai Lake［J］.Acta Agrestia Sinica，2024，32（9）：2803-2815

Soil Fungal Community Structure in Perennial Cultivated Grassland

Around Qinghai Lake

ZHANG Xiao-fang1，2，3， ZHANG Chun-ping1，2，3， DONG Quan-min1，2，3*， HUO Li-an1，2，3，

TONG Yong-shang1，2，3， ZHANG Xue1，2，3， YANG Zeng-zeng1，2，3， YU Yang1，2，3，

CAO Quan1，2，3

（1. Qinghai Academy of Animal Science and Veterinary Medicine， Qinghai University， Xining， Qinghai Province 810016， China;

2. Qinghai Provincial Key Laboratory of Adaptive Management on Alpine Grassland， Xining， Qinghai Province 810016， China;

3. Key Laboratory of the Alpine Grassland Ecology in the Three Rivers Region， Qinghai University， Ministry of Education， Xining，

Qinghai Province 810016， China）

Abstract：In order to explore the effects of perennial cultivated grassland on the structure and function of fungal community in the region around Qinghai Lake，the characteristics of soil fungal community were analyzed by using ITS method，and FUNGuild was used to predict the function of fungi，and the driving factors of soil fungal community were further revealed by combination with the physical and chemical properties of soil. The results showed that Ascomycota was the dominant fungal phylum in perennial cultivated grassland. The composition of soil fungal community was not significantly changed by mixed cropping，but the richness and diversity of soil fungal community were significantly increased. The results of FUNGuild function prediction showed that the potential functions and nutritional modes of soil fungi in perennial cultivated grassland were diverse，and the relative abundance of Pathotroph-Saprotroph-Symbiotroph fungi was significantly increased by mixed cropping. The main factors affect soil fungal community in the study area included soil TP，SOC，AN，NN，C：P. In conclusion，compared to monocropping，mixed cropping could increase soil total nitrogen and carbon content，promote the richness and the diversity of soil fungal community，and maintain the stability of soil ecosystem.

Key words：Around Qinghai Lake;Perennial monocropping cultivated grassland;Perennial mixed cropping cultivated grassland;Soil fungal community structure;Function prediction

土壤微生物是土壤生態(tài)系統(tǒng)中不可或缺的部分［1］，尤其在物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用［2-3］。土壤真菌作為重要的微生物類(lèi)群，在適當(dāng)情況下可促進(jìn)植被恢復(fù)過(guò)程和系統(tǒng)健康，能直接或間接的提高土壤養(yǎng)分水平，反映土壤的養(yǎng)分狀況［4-5］。因此，土壤真菌群落不僅是土壤生態(tài)系統(tǒng)功能的指標(biāo)，也是退化生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)的重要基礎(chǔ)［6-7］，常用于評(píng)價(jià)生態(tài)系統(tǒng)的健康與穩(wěn)定［8］。微生物功能群是根據(jù)生態(tài)功能對(duì)相似物種進(jìn)行的功能分組［9］，研究這些功能群有助于理解如何保持土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定，并了解土壤對(duì)生態(tài)惡化的緩沖能力，這有助于采取措施來(lái)種植栽培草地從而恢復(fù)草地植被［10-11］。真菌功能群主要是真菌對(duì)植物宿主的依賴(lài)程度［12-13］，其中，腐生真菌主要與植物生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)有關(guān)，能夠通過(guò)降解凋落物和腐殖質(zhì)，來(lái)為植物提供額外的養(yǎng)分［14］。病原真菌與植物群落多樣性有關(guān)，主要是通過(guò)侵染特定宿主并改變植被的種間競(jìng)爭(zhēng)模式［1］。真菌作為土壤微生物的主要類(lèi)群之一［5］，其群落組成、功能性狀與環(huán)境間的相互作用關(guān)系不容忽視［15］。研究顯示，真菌群落極易受生境變化的影響，與溫度、土壤和植物群落等環(huán)境因子密切相關(guān)［16］。闞海明等［17］發(fā)現(xiàn)土壤真菌群落結(jié)構(gòu)與土壤有機(jī)碳、總氮、速效氮、總磷等土壤養(yǎng)分水平顯著相關(guān)。劉歡等［18］發(fā)現(xiàn)銨態(tài)氮、速效磷和pH值是土壤真菌門(mén)水平的主要影響因子。但也有研究表明真菌群落組分與各土壤因子均沒(méi)有顯著相關(guān)關(guān)系［19］。

青藏高原作為世界的第三極，是中國(guó)乃至亞洲的重要牧區(qū)之一，具有多種重要的生態(tài)系統(tǒng)功能［20］。高寒草地作為青藏高原最重要的生態(tài)功能區(qū)［21］，面積約占青藏高原總面積的60%左右，具有海拔最高、面積最大、類(lèi)型最獨(dú)特等特點(diǎn)［22］。青藏高原獨(dú)特的地形地貌使得該地區(qū)生態(tài)脆弱，對(duì)環(huán)境變化的響應(yīng)極為敏感，草地極易發(fā)生退化，最終形成黑土灘［23］，從而影響了青藏高原生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)、生態(tài)功能［24］。為了快速、有效地恢復(fù)退化草地，建植多年生栽培草地是該地區(qū)草地治理的主要措施［25］。而環(huán)青海湖地區(qū)作為高寒草地的代表性地理單元，建植多年生栽培草地生態(tài)修復(fù)的方法在退化草地的治理中也廣泛應(yīng)用。近年來(lái)，青藏高原地區(qū)先后選育出大量適用于當(dāng)?shù)丨h(huán)境條件的優(yōu)良牧草品種，并通過(guò)建植以青海冷地早熟禾（Poa crymophila）、青海中華羊茅（Festuca sinensis）等鄉(xiāng)土草種為主的栽培草地［26-27］，將各優(yōu)良牧草品種進(jìn)行單播或根據(jù)禾本科牧草的生物學(xué)特性進(jìn)行混播，都從一定程度上延緩了生態(tài)環(huán)境進(jìn)一步惡化的趨勢(shì)［28-30］。目前，多年生混播栽培草地的研究主要集中于生態(tài)位分化明顯的禾-豆混播，且研究表明禾-豆混播對(duì)土壤微生物和土壤肥力等具有顯著的調(diào)節(jié)作用［31-32］。而對(duì)于生態(tài)位分化不明顯的禾草混播，近年來(lái)的研究主要以植被群落結(jié)構(gòu)、群落生產(chǎn)力、土壤養(yǎng)分循環(huán)以及混播組合和比例篩選等為主［33-35］，并且大量研究表明，退化草地經(jīng)人工重建后，植物群落［36］（蓋度、高度、生物量和多樣性指數(shù)方面）和土壤［37］（土壤團(tuán)聚體、土壤含水量、土壤養(yǎng)分和固碳能力等）均有顯著改善。由于選擇效應(yīng)和互補(bǔ)效應(yīng)，即使生態(tài)位分化并不明顯的禾草混播也能顯著提高植物的地上生物量［38］，但對(duì)于禾草混播是否會(huì)對(duì)土壤微生物群落產(chǎn)生影響的研究較少，且已有的研究結(jié)果也不盡一致。姜鑫等［19］表明，與單播相比，牧草混播對(duì)土壤真菌多樣性和優(yōu)勢(shì)類(lèi)群的相對(duì)豐度均沒(méi)有顯著影響。張杰雪等［39］研究表明，混播草地Shannon指數(shù)和子囊菌門(mén)占比顯著高于單播草地。

因此，該研究基于2019年在環(huán)青海湖地區(qū)建立的多年生栽培草地，進(jìn)行ITS基因測(cè)序分析。系統(tǒng)地研究了2種常見(jiàn)禾草（青海中華羊茅和青海冷地早熟禾）單播與混播在4年后，根際土壤環(huán)境及真菌群落結(jié)構(gòu)的差異，厘清生態(tài)位相似的2種禾草在混播后是否會(huì)對(duì)根際土壤的真菌群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著影響，并且闡明微生物類(lèi)群與土壤理化因子間的關(guān)系，找出其主要的影響因子，以期為環(huán)青海湖地區(qū)發(fā)展優(yōu)質(zhì)栽培草地提供可參考的理論依據(jù)。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2019年5月，于青海省巴卡臺(tái)農(nóng)牧場(chǎng)（101°5′E，36°15′N(xiāo)）進(jìn)行小區(qū)試驗(yàn)。試驗(yàn)地平均海拔為3300 m，年均溫為-5℃～5℃，降水量338 mm左右［27］。樣地種植了12種多年生禾本科牧草品種，設(shè)置了12個(gè)單播處理和6個(gè)混播處理，設(shè)3個(gè)重復(fù)，隨機(jī)排列，共計(jì)54個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，總面積約為18 hm2（圖1）。本試驗(yàn)的研究對(duì)象為其中的2個(gè)單播處理和1個(gè)混播處理，分別是青海中華羊茅單播（F），面積約為1.1 hm2，播種密度為3.0 g·m-2、青海冷地早熟禾單播（C），面積約為1.0 hm2，播種密度為1.1 g·m-2，和青海中華羊茅+青海冷地早熟禾混播（FC），面積約為0.99 hm2，混播比例為1∶1，播種密度為2.1 g·m-2。種植時(shí)以行距15 cm，播深3～5 cm進(jìn)行機(jī)械條播，牧草品種均來(lái)自青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院。

1.2" 樣品采集

于2022年植物生長(zhǎng)旺季（8月），按隨機(jī)取樣法進(jìn)行采樣。挖出一個(gè)完整的根系，收集根際和根周土。根際土壤樣品采用抖落法進(jìn)行采集，抖落之后仍黏附在植物根系上的土壤為根際土壤（根際土壤lt;2 mm），抖落下來(lái)的土壤為根周土（根周土壤gt;2 mm）［40］。根周和根際（對(duì)于混播，F(xiàn)和C的根是分開(kāi)的）土壤樣品在去除松散礫石和植物碎屑，將每個(gè)土壤樣過(guò)篩后分為3份保存，1份自然風(fēng)干用于測(cè)定土理化性質(zhì)，1份放在4℃冰箱用于測(cè)定土壤速效氮，1份裝在50 mL滅菌離心管并在-80℃冷凍，用于微生物群落分析。

1.3" 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1" 土壤理化性質(zhì)測(cè)定" 土壤中各指標(biāo)參照《土壤農(nóng)化分析》［41］進(jìn)行測(cè)定。其中，土壤pH值（水土比5∶1）采用PHS-3S酸度計(jì)測(cè)定；土壤全氮（Soil total nitrogen，TN）和全碳（Soil total carbon，TC）采用元素分析儀（FLASHSMART，Germany）測(cè)定；土壤全磷（Soil total phosphorus，TP）采用堿熔（氫氧化鈉熔融）-鉬銻抗比色法測(cè)定；土壤有機(jī)碳（Soil organic carbon，SOC）和活性有機(jī)碳（Active organic carbon，AOC）采用重鉻酸鉀（K2Cr2O7）氧化法測(cè)定；銨態(tài)氮（Ammonium nitrogen，AN）和硝態(tài)氮（Nitrate nitrogen，NN）采用全自動(dòng)間斷化學(xué)分析儀（Clever Chem 380）測(cè)定；速效磷（Available phosphorus，AP）采用碳酸氫鈉（NaHCO2）浸提分光光度計(jì)法測(cè)定。

1.3.2" 土壤真菌的測(cè)定" 微生物組總DNA的提取采用CTAB法，并通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA提取質(zhì)量，同時(shí)采用紫外分光光度計(jì)對(duì)DNA進(jìn)行定量。選擇引物ITS1FI2（5′-GTGARTCATCGAATCTTTG-3′）和ITS2（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3）對(duì)真菌ITS進(jìn)行擴(kuò)增。PCR產(chǎn)物由AMPure XT beads（Beckman Coulter Genomics，Danvers，MA，USA）純化，Qubit（Invitrogen，USA）定量，再按照每個(gè)樣本的測(cè)序量要求，進(jìn)行相應(yīng)比例的混合。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，回收采用AMPure XT beads回收試劑盒。對(duì)純化后的PCR產(chǎn)物使用Agilent 2100生物分析儀（Agilent，美國(guó)）和Illumina（Kapa Biosciences，Woburn，MA，美國(guó)）的文庫(kù)定量試劑盒進(jìn)行評(píng)估。整個(gè)測(cè)序過(guò)程由杭州聯(lián)川生物科技有限公司完成。

1.4" 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2020進(jìn)行原始數(shù)據(jù)的整理，運(yùn)用R語(yǔ)言進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)分析單播和混播土壤理化性質(zhì)和真菌群落結(jié)構(gòu)的差異。采用FUNGuild數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)（http：//www.stbates.org/guilds/app.php）進(jìn)行功能預(yù)測(cè)，將OTU物種注釋表輸入即可輸出相應(yīng)的功能預(yù)測(cè)結(jié)果，根據(jù)營(yíng)養(yǎng)方式（Trophic mode）可劃分為病理營(yíng)養(yǎng)型（pathotroph）、共生營(yíng)養(yǎng)型（symbiotroph）和腐生營(yíng)養(yǎng)型（saprotroph）3種類(lèi)型，結(jié)果數(shù)據(jù)保留置信度為“很可能”（Probable）和“極可能”（Highly Probable）的ASVs及其類(lèi)別。采用Pearson相關(guān)對(duì)土壤因子進(jìn)行分析，對(duì)不同水平真菌群落相對(duì)豐度和土壤性質(zhì)進(jìn)行Mantel test檢驗(yàn)。所有圖在杭州聯(lián)川生物公司云平臺(tái)和Origin 2021完成。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 混播對(duì)土壤真菌群落組成的影響

利用高通量測(cè)序技術(shù)分析了多年生栽培草地真菌的群落組成，共鑒定出2036個(gè)真菌OTUs，分類(lèi)歸屬于11門(mén)38綱79目154科276屬（圖2）。在多年生栽培草地中，土壤真菌類(lèi)群最豐富的3個(gè)門(mén)水平類(lèi)群為子囊菌門(mén)（Ascomycota，相對(duì)豐度60.37%～71.31%）、擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota，相對(duì)豐度8.63%～17.47%）和接合菌門(mén)（Zygomycota，相對(duì)豐度5.07%～11.47%），總相對(duì)豐度超過(guò)80%（圖2A），T檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比于單播，混播沒(méi)有顯著改變F和C真菌優(yōu)勢(shì)門(mén)的相對(duì)豐度。

綱水平上，真菌群落豐度大于1%的類(lèi)群包括糞殼菌綱（Sordariomycetes，相對(duì)豐度34.39%～36.90%）、傘菌綱（Agaricomycetes，相對(duì)豐度6.64%～15.75%）、座囊菌綱（Dothideomycetes，相對(duì)豐度6.06%～15.19%）、Mucoromycotina_Incertae_sedis（相對(duì)豐度5.07%～11.45%）、盤(pán)菌綱（Pezizomycetes，相對(duì)豐度4.83%～14.96%）、散囊菌綱（Eurotiomycetes，相對(duì)豐度5.20%～7.54%）、真菌未分類(lèi)（Fungi_unclassified，相對(duì)豐度5.89%～8.54%）、子囊菌門(mén)未定名綱（Ascomycota_unclassified，相對(duì)豐度4.98%～10.02%）和球囊菌綱（Glomeromycetes，相對(duì)豐度2.94%～8.60%），總相對(duì)豐度超過(guò)96%（圖2B），T檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比于單播，混播顯著提高了F和C座囊菌綱的相對(duì)豐度（Plt;0.05）。

肉座菌目（Hypocreales，相對(duì)豐度29.47%～32.57%）和格孢菌目（Pleosporales，相對(duì)豐度6.01%～15.10%）是多年生栽培草地的優(yōu)勢(shì)目，且混播顯著提高了格孢菌目的相對(duì)豐度（Plt;0.05，圖2C）。

叢赤殼科（Nectriaceae，相對(duì)豐度22.57%～27.59%）和被孢霉科（Mortierellaceae，相對(duì)豐度5.06%～11.45%）是多年生栽培草地的優(yōu)勢(shì)科，混播沒(méi)有顯著改變優(yōu)勢(shì)科的相對(duì)豐度，但顯著提高了Pleosporales_Incertae_sedis（相對(duì)豐度2.02%～9.04%）的相對(duì)豐度（Plt;0.05，圖2D）。

比較單播和混播植物真菌屬的群落組成可以發(fā)現(xiàn)，赤霉屬（Gibberella，相對(duì)豐度11.05%～14.77%）和被孢霉屬（Mortierella，相對(duì)豐度5.06%～11.45%）在多年生栽培草地中都處于優(yōu)勢(shì)屬的地位，且混播后赤霉屬的相對(duì)豐度高于單播處理，被孢霉屬的相對(duì)豐度則低于單播處理（圖2E）。

通過(guò)LEfSe分析，可以找出組間具有顯著差異的物種（Biomarker），以及顯著影響組間差異性的物種或群落。LEfSe分析顯示（圖3），某些真菌類(lèi)群的豐度在單播和混播中存在顯著差異。F和FC-F共發(fā)現(xiàn)16個(gè)生物標(biāo)志物（圖3A），分別為2個(gè)門(mén)、3個(gè)綱、3個(gè)目、4個(gè)科和4個(gè)屬，其中11個(gè)在FC-F中豐度顯著富集，5個(gè)在F中豐度顯著富集，相對(duì)豐度顯著差異的菌門(mén)分別為球囊菌門(mén)（F）和子囊菌門(mén)（FC-F）。相對(duì)豐度顯著差異的菌屬分別為斗管囊霉屬（F）、刺盾炱目未定名屬（FC-F）、光黑殼屬（FC-F）和莖點(diǎn)霉屬（FC-F）。C和FC-C也共發(fā)現(xiàn)16個(gè)生物標(biāo)志物（圖3B），分別為1個(gè)綱、3個(gè)目、7個(gè)科和5個(gè)屬，其中11個(gè)在FC-C中豐度顯著富集，5個(gè)在C中豐度顯著富集，相對(duì)豐度顯著差異的菌綱為座囊菌綱（FC-C），相對(duì)豐度顯著差異的菌屬分別為粘帚霉屬（C）、蠟殼耳屬（FC-C）、緩霉菌屬（FC-C）、格孢菌目未定名屬（FC-C）和莖點(diǎn)霉屬（FC-C）。同時(shí)進(jìn)化分支圖可以觀察到多年生栽培草地真菌衍生出多條進(jìn)化枝，每條進(jìn)化支上的差異物種如紅、綠、藍(lán)、青四色的圓表示，相同顏色的圓串聯(lián)成獨(dú)立的進(jìn)化支。其差異菌系在F單播和FC-F混播之間的進(jìn)化路線(xiàn)保持一定的獨(dú)立性。C和FC-C的進(jìn)化路線(xiàn)相互夾雜，表明它們有相近的進(jìn)化方向。綜上，混播會(huì)改變多年生栽培草地根系中的環(huán)境特征，從而使根系微生物形成不同的進(jìn)化方向。

2.2" 混播對(duì)土壤真菌多樣性的影響

本研究通過(guò)Shannon指數(shù)、Chao1指數(shù)、Simpson指數(shù)和OTUs指數(shù)對(duì)栽培草地Alpha多樣性進(jìn)行分析，如圖4所示。與F，C單播相比，混播顯著提高了FC-F和FC-C的Chao1指數(shù)和OTUs指數(shù)（Plt;0.05）。FC-C的Shannon指數(shù)也顯著高于C單播（Plt;0.05）。Simpson指數(shù)在單播和混播處理中變化不明顯。表明混播會(huì)提高多年生栽培草地根際真菌的多樣性和豐富度。

2.3" 混播對(duì)土壤真菌OTUs數(shù)量的影響

根據(jù)多年生栽培草地土壤真菌的OTUs數(shù)量進(jìn)行了韋恩分析，并繪制了韋恩圖（圖5）。由圖5A所示，F(xiàn)和FC-F共識(shí)別出的真菌OTUs有1451個(gè)，其中F和FC-F處理中分別識(shí)別出971和956個(gè)OTUs。F和FC-F共有的OTUs總數(shù)有476個(gè)，占比為32.80%，F(xiàn)和FC-F所特有的OTUs數(shù)目為495和480，占比分別為34.11%和33.08%，與F單播相比，混播降低了F的真菌OTUs數(shù)量。由圖5B所示，C和FC-C共識(shí)別出的OTUs數(shù)量有1274個(gè)，C和FC-C分別識(shí)別出769和850個(gè)OTUs。其中，C和FC-C共有的OTUs為345個(gè)，占比為27.08%，特有的OTUs為424和505個(gè)，占比分別為33.28%和39.64%，相比于C單播，混播增加了C的OTUs數(shù)量。

2.4" 土壤真菌的功能預(yù)測(cè)

利用FUNGuild方法預(yù)測(cè)多年生栽培草地的微生態(tài)功能，如圖6所示，環(huán)青海湖地區(qū)多年生栽培草地的土壤真菌根據(jù)營(yíng)養(yǎng)型可分為8類(lèi)，分別是未定義（Unidentified，相對(duì)豐度19.80%～21.91%）、病理型（Pathotroph，相對(duì)豐度1.56%～2.28%）、腐生型（Saprotroph，相對(duì)豐度9.34%～15.87%）、共生型（Symbiotroph，相對(duì)豐度5.66%～10.49%）、病理-腐生型（Pathotroph-Saprotroph，相對(duì)豐度5.72%～8.09%）、病理-共生型（Pathotroph-Symbiotroph，相對(duì)豐度0.85%～2.45%）、腐生-共生型（Saprotroph-Symbiotroph，相對(duì)豐度12.20%～24.13%）和病理-腐生-共生型（Pathotroph-Saprotroph-Symbiotroph，相對(duì)豐度30.04%～36.66%）。其中病理-腐生-共生型為主要的營(yíng)養(yǎng)型，使用T-test方法對(duì)單播和混播土壤真菌的營(yíng)養(yǎng)型分類(lèi)進(jìn)行差異檢驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)相比于單播，混播顯著提高了F和C的病理-腐生-共生型的相對(duì)豐度（Plt;0.05）。

2.5" 混播對(duì)土壤理化因子的影響

對(duì)不同處理土壤理化因子分析發(fā)現(xiàn)（圖7），不同草地土壤pH值在8.67～9.20之間，混播沒(méi)有顯著改變多年生栽培草地的土壤pH值?；觳ズ螅寥繲N和TC含量相比于單播均有所提高，其余養(yǎng)分含量（TP，SOC，AOC，AN，NN，AP）在單播和混播之間均有顯著差異（Plt;0.05），且大小依次為Fgt;FCgt;C。

2.6" 多年生栽培草地土壤理化因子對(duì)真菌群落的影響

Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，土壤pH值和TP，SOC，AN，NN和AP均呈顯著負(fù)相關(guān)，而TP，SOC，AOC，AN，NN和AP之間極顯著正相關(guān)，它們與C∶P和N∶P則呈極顯著負(fù)相關(guān)。利用Mantel test對(duì)不同分類(lèi)水平上真菌群落的相對(duì)豐度和土壤理化因子進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)門(mén)水平真菌類(lèi)群相對(duì)豐度只與土壤TN顯著相關(guān)，在綱、目、科、屬水平，真菌類(lèi)群與土壤TP，SOC，AN，NN，C∶P均顯著相關(guān)（圖8）。

3" 討論

3.1" 混播對(duì)土壤真菌群落組成和多樣性的影響

不同植被恢復(fù)類(lèi)型的土壤真菌在門(mén)水平的組成上具有一定的相似性，但在相對(duì)豐度上存在一定差異［15］。本研究中，多年生栽培草地的土壤真菌子囊菌門(mén)為主要優(yōu)勢(shì)門(mén)，其次為擔(dān)子菌門(mén)和接合菌門(mén)，這與前人針對(duì)不同草地和草原在微生物群落方面的研究結(jié)果相吻合［42-43］。子囊菌門(mén)和擔(dān)子菌門(mén)中的大多菌為腐生菌類(lèi)，是土壤中的主要真菌分解者［43］。其中，子囊菌門(mén)在降解土壤有機(jī)質(zhì)、促進(jìn)土壤碳的積累方面具有重要作用，也能夠通過(guò)分解動(dòng)植物殘?bào)w和木質(zhì)素等來(lái)提高土壤質(zhì)量，加速土壤的碳素循環(huán)。有研究發(fā)現(xiàn)，植物發(fā)生病害的幾率與子囊菌門(mén)的相對(duì)含量之間存在正向關(guān)聯(lián)。而擔(dān)子菌門(mén)分解木質(zhì)化的植物殘留物，通常在營(yíng)養(yǎng)豐富的土壤環(huán)境中富集［18］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)單播和混播在子囊菌門(mén)和擔(dān)子菌門(mén)上豐度差異不顯著，但與F單播相比，F(xiàn)C-F的子囊菌門(mén)和擔(dān)子菌門(mén)的相對(duì)豐度增加，與C單播相比，F(xiàn)C-C的子囊菌門(mén)相對(duì)豐度減少，但擔(dān)子菌門(mén)的相對(duì)豐度增加，預(yù)示FC混播會(huì)減少C被病原菌和蟲(chóng)害侵害的機(jī)會(huì)，相反，F(xiàn)C混播會(huì)增加F被病原菌和蟲(chóng)害侵害的機(jī)會(huì)。格孢菌目和肉座菌目是目水平上的優(yōu)勢(shì)真菌分類(lèi)群。而子囊菌門(mén)的格孢菌目在土壤中起著分解和降解有機(jī)物質(zhì)的重要作用［44-45］。本研究中，混播顯著提高了格孢菌目的相對(duì)豐度。

微生物的豐富度和多樣性是反映群落穩(wěn)定性和土壤營(yíng)養(yǎng)狀況和健康狀況的關(guān)鍵指標(biāo)之一［46］，微生物多樣性越高，說(shuō)明群落結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，表明土壤生態(tài)系統(tǒng)就越穩(wěn)定，越有利于植物的生長(zhǎng)［47］。本研究中，我們對(duì)多年生牧草單播和混播栽培草地進(jìn)行野外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)相對(duì)于F和C單播處理，F(xiàn)C混播處理顯著提高了多年生栽培草地根際土壤真菌的多樣性和豐富度。原因是土壤真菌群落的豐富度和多樣性與植被豐富度有關(guān)，隨著植被豐富度的增加，真菌群落的豐富度和多樣性也會(huì)增加，一方面，不同植物會(huì)產(chǎn)生不同種類(lèi)和數(shù)量的根系分泌物，這些分泌物為真菌的生長(zhǎng)和繁殖提供養(yǎng)分，影響真菌的數(shù)量和豐度，或者禾草混播后種間根系的相互作用會(huì)產(chǎn)生具有特異性的根系分泌物，從而提高了真菌的豐富度指數(shù)［48］。另一方面，植被群落多樣性越高，菌根真菌與其根系共生的機(jī)會(huì)就越大，種間共生真菌的競(jìng)爭(zhēng)力也會(huì)提高，從而促進(jìn)了真菌群落的豐富度和多樣性，而且植物也會(huì)影響凋落物的質(zhì)量和數(shù)量，間接影響土壤性質(zhì)，進(jìn)而影響到微生物的多樣性［33］。土壤微生物群落的數(shù)量和多樣性能反應(yīng)土壤肥力，微生物多樣性已被證明可以維持土壤有機(jī)碳分解的穩(wěn)定性，土壤微生物（如細(xì)菌和真菌）多樣性的增加往往會(huì)促進(jìn)生態(tài)系統(tǒng)的多功能性，真菌生物多樣性在生態(tài)系統(tǒng)的多功能性中起著關(guān)鍵作用，特別是在土壤養(yǎng)分循環(huán)方面，真菌多樣性也是決定土壤多功能性的關(guān)鍵因素。真菌（例如腐生真菌和外生菌根真菌）通過(guò)分解植物來(lái)源的凋落物和復(fù)雜的有機(jī)物以及控制地下碳分配來(lái)調(diào)節(jié)碳循環(huán)，通過(guò)分泌含氮化合物解聚的外酶來(lái)促進(jìn)氮循環(huán)，并通過(guò)分解含磷的有機(jī)物和風(fēng)化含磷的礦物質(zhì)來(lái)催化磷循環(huán)［49］。真菌多樣性也會(huì)對(duì)植物生長(zhǎng)和病害防治等方面具有影響，植物多樣性的升高會(huì)促進(jìn)真菌多樣性，可抑制土壤真菌病原體，地上植物群落多樣性的增加與地下真菌群落多樣性的增加相對(duì)應(yīng)，這反過(guò)來(lái)又有助于改善根際土壤健康和病原體抑制。由于植物和土壤微生物通過(guò)碳、氮和微量營(yíng)養(yǎng)素交換等多種相互作用以及相互或拮抗作用聯(lián)系在一起，因此，根據(jù)生物多樣性和生態(tài)系統(tǒng)功能假說(shuō)，土壤真菌群落多樣性的增加也可能有利于植物的抗逆性。植物群落多樣性的增加可以促進(jìn)土壤真菌群落的多樣性，植物病原體更少，或者可以豐富植物有益分類(lèi)群，通過(guò)多種生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)對(duì)植物健康產(chǎn)生積極影響［50］。土壤真菌群落具有多種生態(tài)功能，如腐生菌、共生菌和病理菌，它們與植物生產(chǎn)有不同的關(guān)系。一些真菌類(lèi)群是眾所周知的共生者，與植物共生，可以通過(guò)分解有機(jī)物為有效的營(yíng)養(yǎng)形式供植物體吸收、促進(jìn)植物生長(zhǎng)，同時(shí)也利用植物的根際分泌物調(diào)節(jié)自身的生長(zhǎng)繁殖，為植物提供營(yíng)養(yǎng)而對(duì)植物產(chǎn)生有益影響。相比之下，一些真菌分類(lèi)群是眾所周知的植物病原體，以病原菌的形式出現(xiàn)，入侵植物，對(duì)植物的根、莖、葉造成危害，引起農(nóng)作物減產(chǎn)或者品質(zhì)下降，對(duì)植物產(chǎn)生不利影響［51］。因此，相比于單播，混播會(huì)提高植被的豐富度，混播后土壤真菌群落的豐富度和多樣性升高，所以混播后土壤的生態(tài)系統(tǒng)越穩(wěn)定。

3.2" 混播對(duì)土壤真菌群落營(yíng)養(yǎng)型的影響

FUNGuild對(duì)多年生栽培草地土壤真菌的功能注釋結(jié)果顯示，土壤真菌群落與大多研究結(jié)果一致，按照營(yíng)養(yǎng)方式大體上主要可以分為3種，分別是病理型、腐生型和共生型，其余5種為復(fù)合營(yíng)養(yǎng)型。病理型真菌獲得的營(yíng)養(yǎng)均來(lái)自宿主，該類(lèi)營(yíng)養(yǎng)型可以抑制植物生長(zhǎng)，也可能導(dǎo)致植物發(fā)生病害。腐生型真菌具有重要的生態(tài)作用，可以分解植物殘?bào)w、動(dòng)物糞便等有機(jī)物獲得能量，對(duì)促進(jìn)植物生長(zhǎng)具有重要作用［52］。共生營(yíng)養(yǎng)型可能與宿主植物存在較多的代謝互動(dòng)，為對(duì)方提供所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，豐富的共生營(yíng)養(yǎng)型真菌可以提高植物對(duì)氮和磷的吸收，通過(guò)拮抗作用使得病理型真菌的產(chǎn)生減少，減輕植物的病害，對(duì)植物的生長(zhǎng)起到有益作用［53］。有研究表明，不同植被恢復(fù)類(lèi)型的土壤真菌功能類(lèi)型差異較大，但整體上以腐生營(yíng)養(yǎng)型和病理營(yíng)養(yǎng)型為主［15］，而王亞妮等［16］在不同草地類(lèi)型的研究中也證實(shí)了沙化草地在進(jìn)行人工重建植被后，由于植物定殖，使得共生真菌的相對(duì)豐度增加。本研究中病理-腐生-共生型為主要的營(yíng)養(yǎng)型，與前人研究結(jié)果不一致，一方面可能是植物種類(lèi)不同所導(dǎo)致的［52］，另一方面是真菌的生活史較細(xì)菌更為復(fù)雜，在土壤中吸收營(yíng)養(yǎng)的方式具有多樣化，所以當(dāng)土壤環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，為了防止因環(huán)境發(fā)生變化而對(duì)本身不利時(shí)，會(huì)主動(dòng)采用多種營(yíng)養(yǎng)方式或者迅速改變自身的營(yíng)養(yǎng)方式來(lái)適應(yīng)外界環(huán)境，這也是其為適應(yīng)外界多變環(huán)境而采取的生存策略［54］。并且混播后，作為過(guò)渡型的土壤病理-腐生-共生型真菌豐度表現(xiàn)為顯著增加，這與李茂森等［55］的研究結(jié)果相同，可能是因?yàn)槿藶閷?duì)土壤進(jìn)行干擾以及施肥等導(dǎo)致環(huán)境和養(yǎng)分輸入的變化，從而改變了真菌的生存環(huán)境，使得這些易受人為影響的兼有營(yíng)養(yǎng)型的真菌進(jìn)行功能轉(zhuǎn)換而占據(jù)優(yōu)勢(shì)，因此真菌代謝功能的多樣性增加［56］，功能結(jié)構(gòu)趨于復(fù)雜［54］。混播后腐生-共生真菌其相對(duì)豐度降低，表明混播后土壤真菌對(duì)凋落物和有機(jī)質(zhì)的分解能力可能下降。單播和混播栽培草地中病理-共生型真菌的相對(duì)豐度較低，說(shuō)明多年生栽培草地發(fā)生病理型共生真菌病害的幾率較小，且混播草地的病理-共生型真菌相對(duì)豐度低于單播草地，說(shuō)明相比于單播，混播草地更不容易發(fā)生病理型共生真菌的病害。

3.3" 真菌群落與環(huán)境因子的關(guān)系

土壤真菌群落與土壤理化性質(zhì)、氣候、地理位置及植被類(lèi)型存在關(guān)聯(lián)性［57］，同時(shí)也會(huì)受植被和土壤以及非生物因素之間的多種相互作用的共同影響。有研究發(fā)現(xiàn)，土壤理化性質(zhì)是微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的主要影響因子［58］。但是不同的土壤理化因子對(duì)微生物的影響（例如微生物群落組成、數(shù)量和多樣性等方面）差異較大［5，59］，薛凱等［60］研究發(fā)現(xiàn)，微生物群落多樣性與土壤DOC，AN和AP含量顯著相關(guān)。楊希智等［61-62］的研究也證實(shí)了土壤微生物與TN和AP顯著相關(guān)。鄭佳華等［63］認(rèn)為，有效磷和硝態(tài)氮含量是放牧和刈割對(duì)草原土壤真菌群落組成和多樣性的主要影響因子。Williams等［64］認(rèn)為土壤理化因子包括pH值、有效氮、磷和土壤有機(jī)物含量等是控制微生物群落的組成以及多樣性的主要決定因素。鄧慧玉等［65］發(fā)現(xiàn)真菌在不同分類(lèi)水平（綱、目、科、屬、種）的相對(duì)豐度與土壤pH和NO-3-N的相關(guān)性均達(dá)到極顯著的水平。本研究結(jié)果顯示，真菌的Alpha多樣性與pH值，TP，SOC，AN，NN，AP，C∶P，N∶P顯著相關(guān)。真菌群落在不同分類(lèi)水平上，門(mén)水平只與TN含量具有顯著的相關(guān)性，綱、目、科、屬水平的相對(duì)豐度主要與土壤TP，SOC，AN，NN，C∶P有關(guān)，與上述研究基本一致。土壤pH值和TP，SOC，AN，NN和AP均呈顯著負(fù)相關(guān)，而TP，SOC，AOC，AN，NN和AP之間極顯著正相關(guān)，表明各個(gè)土壤因子之間關(guān)系緊密，一些土壤指標(biāo)的改變可能引起另一些土壤指標(biāo)的變化，因此，在后續(xù)對(duì)多年生栽培草地的生態(tài)保護(hù)中可從土壤方面入手，通過(guò)改善土壤理化性質(zhì)來(lái)影響一些標(biāo)志物種的相對(duì)豐度，從而達(dá)到真菌群落多樣性得到維持或提升的目標(biāo)。

4" 結(jié)論

與單播相比，混播顯著增加了多年生栽培草地土壤中真菌群落的Chao1指數(shù)和OTUs指數(shù)，但沒(méi)有改變真菌群落構(gòu)成。單播和混播栽培草地土壤真菌中，門(mén)水平上，子囊菌門(mén)和擔(dān)子菌門(mén)為優(yōu)勢(shì)門(mén)，混播未改變優(yōu)勢(shì)菌門(mén)的相對(duì)豐度。綱水平上，混播顯著提高了座囊菌綱的相對(duì)豐度，肉座菌目和格孢菌目是多年生栽培草地的優(yōu)勢(shì)目，且混播顯著提高了格孢菌目的相對(duì)豐度。叢赤殼科和被孢霉科是多年生栽培草地的優(yōu)勢(shì)科，混播沒(méi)有顯著改變優(yōu)勢(shì)科的相對(duì)豐度，但顯著提高了Pleosporales_Incertae_sedis的相對(duì)豐度。比較單播和混播植物真菌屬的群落組成可以發(fā)現(xiàn)，赤霉屬和被孢霉屬在多年生栽培草地中都處于優(yōu)勢(shì)屬的地位，但混播未改變優(yōu)勢(shì)屬的相對(duì)豐度?；觳ゲ±?腐生-共生型真菌的相對(duì)豐度顯著高于單播，相比于單播，混播草地對(duì)腐生真菌和共生真菌群落組成的影響比病原真菌更明顯。在土壤養(yǎng)分消耗更大、凋落物輸入更豐富的混播草地中，腐生真菌的豐度增加，共生真菌的豐度減少，這種適應(yīng)性變化有利于增強(qiáng)真菌群落對(duì)有機(jī)養(yǎng)分的利用效率，表明土壤真菌在退化草地植被恢復(fù)的土壤養(yǎng)分循環(huán)中發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。土壤TN，TP，SOC，AN，NN，C∶P是土壤真菌群落變化的主要調(diào)控因子。各個(gè)土壤因子之間關(guān)系緊密，因此，在后續(xù)可通過(guò)改善土壤理化性質(zhì)來(lái)影響一些標(biāo)志物種的相對(duì)豐度，從而使多年生栽培草地的真菌群落多樣性得到維持或提升。綜上，本研究的結(jié)果有助于理解建植栽培草地與土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和功能之間的聯(lián)系，并為退化草地生態(tài)系統(tǒng)植被恢復(fù)策略提供重要參考。

參考文獻(xiàn)

［1］" BEVER J D，MANGAN S A，ALEXANDER H M. Maintenance of Plant Species Diversity by Pathogens［J］. Annual Review of Ecology，Evolution，and Systematics，2015，46（1）：305-325

［2］nbsp; LEGAY N，BAXENDALE C，GRIGULIS K，et al. Contribution of above- and below-ground plant traits to the structure and function of grassland soil microbial communities［J］. Annals of Botany，2014，114（5）：1011-1021

［3］" MURUGAN R，LOGES R，TAUBE F，et al. Changes in soil microbial biomass and residual indices as ecological indicators of land use change in temperate permanent grassland［J］. Microbial Ecology，2014，67（4）：907-918

［4］" 任玉連，陸梅，范方喜，等. 高原濕地沼澤化草甸土壤真菌與理化性質(zhì)的關(guān)系［J］. 生態(tài)科學(xué)，2019，38（1）：42-49

［5］" 王明濤，雷變霞，趙玉紅，等. 垂穗披堿草人工草地建植和管理措施對(duì)土壤真菌群落的影響［J］. 草地學(xué)報(bào)，2023，31（6）：1728-1734

［6］" COBAN O，DEYN G B D，PLOEG M V D. Soil microbiota as game-changers in restoration of degraded lands［J］. Science，2022，375（6584）：eabe0725

［7］" HARRIS J. Soil microbial communities and restoration ecology：facilitators or followers？［J］. Science，2009，325（5940）：573-574

［8］" DEACON L J，PRYCE-MILLER E J，F(xiàn)RANKLAND J C，et al. Diversity and function of decomposer fungi from a grassland soil［J］. Soil Biology amp; Biochemistry，2006，38（1）：7-20

［9］" LOZANO Y M，AGUILAR-TRIGUEROS C A，ROY J，et al. Drought induces shifts in soil fungal communities that can be linked to root traits across twenty-four plant species［J］. The New Phytologist，2021，232（5）：1917-1929

［10］楊虎，王佩瑤，李小偉，等. 賀蘭山東坡不同植被類(lèi)型的土壤真菌多樣性及其群落結(jié)構(gòu)［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2022，31（2）：239-247

［11］王麗艷，周晨，劉光正，等. 基于高通量測(cè)序的閩楠幼林根際土壤叢枝菌根真菌群落變化［J］. 微生物學(xué)通報(bào)，2021，48（5）：1461-1472

［12］AGUILAR-TRIGUEROS C A，POWELL J R，ANDERSON I C，et al. Ecological understanding of root-infecting fungi using trait-based approaches［J］. Trends in Plant Science，2014，19（7）：432-438

［13］LUTZONI F，NOWAK M D，ALFARO M，et al. Contemporaneous radiations of fungi and plants linked to symbiosis［J］. Nature Communications，2018（9）：5451

［14］HEIJDEN M G A V D，BARDGETT R D，STRAALEN N M V. The unseen majority：soil microbes as drivers of plant diversity and productivity in terrestrial ecosystems［J］. Ecology Letters，2008，11（3）：296-310

［15］高風(fēng)，文仕知，韋鑠星，等. 桂西北石漠化區(qū)不同植被恢復(fù)類(lèi)型對(duì)土壤理化性質(zhì)、酶活與真菌群落多樣性的影響［J］. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2023，35（10）：2425-2435

［16］王亞妮，胡宜剛，王增如，等. 人工植被重建對(duì)沙化高寒草地土壤真菌群落特征的影響［J］. 土壤學(xué)報(bào)，2023，60（1）：280-291

［17］闞海明，陳超，馬曉東，等. 華北退化荒地建植豆類(lèi)和禾本植物人工草地對(duì)土壤真菌群落結(jié)構(gòu)和功能的影響［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2023，43（24）：10092-10103

［18］劉歡，董凱，仁增旺堆，等. 藏沙蒿與多年生禾草混播對(duì)西藏沙化草地植被及土壤真菌群落特征的影響［J］. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2023，32（6）：45-57

［19］姜鑫，?？瞬? 青藏高原禾草混播對(duì)土壤微生物多樣性的影響［J］. 植物生態(tài)學(xué)報(bào)，2021，45（5）：539-551

［20］丁明軍，張鐿鋰，孫曉敏，等. 近10年青藏高原高寒草地物候時(shí)空變化特征分析［J］. 科學(xué)通報(bào)，2012，57（33）：3185-3194

［21］張小芳，張春平，董全民，等. 三江源區(qū)高寒混播草地群落結(jié)構(gòu)特征的研究［J］. 草地學(xué)報(bào)，2020，28（4）：1090-1099

［22］肖穎，吉使阿微，趙文學(xué)，等. 青藏高原東緣不同人工草地土壤養(yǎng)分、酶活性及微生物生物量特征［J］. 中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2022，44（9）：90-99

［23］尚占環(huán)，董世魁，周華坤，等. 退化草地生態(tài)恢復(fù)研究案例綜合分析：年限、效果和方法［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2017，37（24）：8148-8160

［24］趙旺林，羅天祥，張林. 氣候變化與放牧對(duì)西藏典型高寒荒漠草地植被指數(shù)變化的相對(duì)影響［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2019，39（22）：8494-8503

［25］董怡玲，尹亞麗，李世雄，等. 混單播措施下極度退化草地植被和土壤碳氮恢復(fù)效果研究［J］. 草業(yè)科學(xué)，2022，39（8）：1579-1586

［26］DONG S K，SHANG Z H，GAO J X，et al. Enhancing sustainability of grassland ecosystems through ecological restoration and grazing management in an era of climate change on Qinghai-Tibetan Plateau［J］. Agriculture，Ecosystems amp; Environment，2020（287）：106684

［27］李彩弟，張春平，俞旸，等. 種植方式對(duì)青海湖流域人工草地植被和土壤養(yǎng)分特征的影響［J］. 草地學(xué)報(bào)，2023，31（2）：471-478

［28］SCHARDL C L，YOUNG C A，F(xiàn)AULKNER J R，et al. Chemotypic diversity of epichloae，fungal symbionts of grasses［J］. Fungal Ecology，2012，5（3）：331-344

［29］GAO X X，DONG S K，XU Y D，et al. Resilience of revegetated grassland for restoring severely degraded alpine meadows is driven by plant and soil quality along recovery time：A case study from the Three-river Headwater Area of Qinghai-Tibetan Plateau［J］. Agriculture，Ecosystems amp; Environment，2019（279）：169-177

［30］馬玉壽，周華坤，邵新慶，等. 三江源區(qū)退化高寒生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)技術(shù)與示范［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2016，36（22）：7078-7082

［31］王旭，曾昭海，胡躍高，等. 豆科與禾本科牧草混播效應(yīng)研究進(jìn)展［J］.中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2007（4）：92-98

［32］YAN H L，GU S S，LI S Z，et al. Grass-legume mixtures enhance forage production via the bacterial community［J］. Agriculture，Ecosystems amp; Environment，2022，338（6）：108087

［33］趙文，尹亞麗，李世雄，等. 植被重建對(duì)黑土灘草地植被及微生物群落特征的影響［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2020，29（1）：71-80

［34］WANG H，CHEN H. The importance of plant functional groups under different fertilization and mowing regimes：Implications for sustainable meadows［J］. Agriculture，Ecosystems amp; Environment，2016，224：67-74

［35］李文，魏廷虎，永措巴占，等. 混播比例對(duì)三江源人工草地植被和土壤養(yǎng)分特征的影響［J］. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2021，30（12）：39-48

［36］WANG C T，WANG G X，LIU W，et al. Effects of establishing an artificial grassland on vegetation characteristics and soil quality in a degraded meadow［J］. Israel Journal of Ecology amp; Evolution，2013，59（3）：141-153

［37］常濤，李珊，李以康，等. 混播人工草地建植初期對(duì)黑土灘植被和土壤的恢復(fù)效果［J］. 草地學(xué)報(bào)，2023，31（5）：1546-1555

［38］LI A，NIU K，DU G. Resource availability，species composition and sown density effects on productivity of experimental plant communities［J］. Plant amp; Soil，2011，344（1-2）：177-186

［39］張杰雪，王占青，全小龍，等. 高寒地區(qū)人工草地土壤微生物群落對(duì)不同種植方式和年限的響應(yīng)［J］. 草地學(xué)報(bào)，2021，29（2）：270-280

［40］CHAUDHARY D R，GAUTAM R K，YOUSUF B，et al. Nutrients，microbial community structure and functional gene abundance of rhizosphere and bulk soils of halophytes［J］. Applied Soil Ecology，2015（91）：16-26

［41］鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析［M］. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000：25-103

［42］榮新山，何敏，王從彥，等. 藏北退化高寒草原土壤細(xì)菌和真菌多樣性分析［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2018，27（9）：1646-1651

［43］伍文憲，張蕾，黃小琴，等. 川西北高寒牧區(qū)不同人工草地對(duì)土壤微生物多樣性影響［J］. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2019，28（3）：29-41

［44］劉金艷，周攀，周小路，等. 子囊菌Sordaria tomento-alba的篩選及其木質(zhì)素降解特性［J］. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2022，28（3）：693-698

［45］徐歡，丁明軍，張華，等. 高寒草原退化過(guò)程中植被和土壤因子對(duì)微生物群落的交互影響［J/OL］. 環(huán)境科學(xué)，1-22［2024-03-06］.https：//doi.org/10.13227/j.hjkx.202307217

［46］BEIMFORDE C，F(xiàn)ELDBERG K，NYLINDER S，et al. Estimating the Phanerozoic history of the Ascomycota lineages：Combining fossil and molecular data［J］. Molecular Phylogenetics amp; Evolution，2014，78（1）：386-398

［47］ZHOU J，F(xiàn)ONG J J. Strong agricultural management effects on soil microbial community in a non-experimental agroecosystem［J］. Applied Soil Ecology，2021，165（16）：103970

［48］HU L F，ROBERT C A M，CADOT S，et al. Root exudate metabolites drive plant-soil feedbacks on growth and defense by shaping the rhizosphere microbiota［J］. Nature Communications，2018，9（1）：2738

［49］XU H D，YU M K，CHENG X R. Abundant fungal and rare bacterial taxa jointly reveal soil nutrient cycling and multifunctionality in uneven-aged mixed plantations［J］. Ecological Indicators，2021，129：107932

［50］ANITA B G，JACOB G M，SANU A. Diversity，detection and exploitation：linking soil fungi and plant disease［J］. Current Opinion in Microbiology，2022，70：102199

［51］ZHANG G Y，SHEN Z X，F(xiàn)U G. Function diversity of soil fungal community has little exclusive effects on the response of aboveground plant production to experimental warming in alpine grasslands［J］. Applied Soil Ecology，2021，168：104153

［52］朱文娟，任月梅，楊忠，等. 谷子土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及功能預(yù)測(cè)分析［J］. 作物雜志，2023（5）：170-178

［53］高磊，黃銀，馬金彪，等. 兩種鹽生植物內(nèi)生真菌多樣性及其功能預(yù)測(cè)［J］. 微生物學(xué)通報(bào)，2023，50（8）：3357-3371

［54］孫鵬洲，羅珠珠，李玲玲，等. 黃土高原干旱區(qū)長(zhǎng)期種植紫花苜蓿和一年生作物輪作對(duì)土壤真菌群落的影響［J］. 中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)（中英文），2022，30（6）：965-975

［55］李茂森，王麗淵，楊波，等. 生物炭對(duì)烤煙成熟期根際真菌群落結(jié)構(gòu)的影響及功能預(yù)測(cè)分析［J］. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2022，39（5）：1041-1048

［56］燕紅梅，張欣鈺，檀文君，等. 5種植物根際真菌群落結(jié)構(gòu)與多樣性［J］. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2020，26（2）：364-369

［57］方圓，王娓，姚曉東，等. 我國(guó)北方溫帶草地土壤微生物群落組成及其環(huán)境影響因素［J］. 北京大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2017，53（1）：142-150

［58］徐林芳，米媛婷，柳蘭洲，等. 內(nèi)蒙古不同類(lèi)型草原土壤真菌群落結(jié)構(gòu)及其影響因子的研究［J］. 草地學(xué)報(bào)，2023，31（7）：1977-1987

［59］樊瑾，李詩(shī)瑤，王融融，等. 荒漠草原生物結(jié)皮演替對(duì)結(jié)皮層及層下土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響［J］. 生態(tài)學(xué)雜志，2021，40（7）：2033-2044

［60］薛凱，張彪，周姝彤，等. 青藏高原高寒草地土壤微生物群落及影響因子［J］. 科學(xué)通報(bào)，2019，64（27）：2915-2927

［61］楊希智，王長(zhǎng)庭，字洪標(biāo)，等. 三江源區(qū)不同建植年限人工草地土壤微生物群落結(jié)構(gòu)特征［J］. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2015，21（2）：341-349

［62］齊文娟，龍瑞軍，馮瑞章，等. 江河源區(qū)不同建植年限人工草地土壤微生物及酶活性研究［J］. 水土保持學(xué)報(bào)，2007（4）：145-149

［63］鄭佳華，趙萌莉，王琪，等. 放牧和刈割對(duì)大針茅草原土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及多樣性的影響［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2022，42（12）：4998-5008

［64］WILLIAMS A，MANOHARAN L，ROSENSTOCK N P，et al. Long-term agricultural fertilization alters arbuscular mycorrhizal fungal community composition and barley （Hordeum vulgare） mycorrhizal carbon and phosphorus exchange［J］. New Phytologist，2016，213（2）：874-885

［65］鄧慧玉，劉子愷，馬星竹，等. 長(zhǎng)期施肥處理對(duì)東北黑土真菌多樣性和群落結(jié)構(gòu)的影響［J］. 福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2024，40（1）：69-75

（責(zé)任編輯" 劉婷婷）