紫花苜蓿青貯飼料對草魚生長性能和肌肉品質(zhì)的影響

摘要：為了更好地在漁業(yè)中利用青貯飼料，本試驗研究了不同收獲期紫花苜蓿（Medicago sativa L.）調(diào)制而成的青貯飼料在南京秋季對草魚（Ctenopharyngodon idella）生長性能、腸道消化力和肉質(zhì)等的影響。試驗設(shè)對照組（CON組）、初花期（CH組）和盛花期（KH組）紫花苜蓿青貯飼料替代15%蛋白預(yù)混料。挑選150條初始體重為（1000±50） g的草魚，隨機分成三組，每組50條，飼喂60 d后取樣分析。結(jié)果表明，與CON組相比，CH組和KH組對草魚最終體重、質(zhì)量增加率和特定生長率無顯著影響，CH組草魚腸道蛋白酶活性顯著增加（Plt;0.05），KH組草魚腸道蛋白酶活性顯著降低（Plt;0.05）；CH組和KH組草魚肌肉質(zhì)構(gòu)指標均無顯著差異；KH組谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著高于CON組與CH組（Plt;0.05）。綜上所述，初花期和盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代15%蛋白預(yù)混料未影響秋季草魚增重，呈現(xiàn)提高草魚肉質(zhì)的趨勢，且初花期紫花苜蓿青貯飼料替代組提高了草魚腸道蛋白酶活性。因此，初花期紫花苜蓿青貯飼料替代15%蛋白預(yù)混料飼養(yǎng)草魚的潛力巨大。

關(guān)鍵詞：紫花苜蓿；青貯飼料；草魚；消化酶；肌肉品質(zhì)

中圖分類號：S965.112""" 文獻標識碼：A""""" 文章編號：1007-0435（2024）09-2990-09

收稿日期：2023-08-23；修回日期：2023-12-09

基金項目：2023云南省“興滇英才支持計劃”-青年人才項目資助；安徽省飼草生物育種國際合作研究中心開放課題（AHIJRCFB202305）資助

作者簡介：

陳辰（2000-），男，漢族，內(nèi)蒙古赤峰人，碩士，主要從事飼草調(diào)制加工與利用研究，E-mail：cc_lovely@163.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：liuqinhua@njau.edu.cn

doi：10.11733/j.issn.1007-0435.2024.09.033

引用格式：

陳" 辰， 滑少波， 李杰勤，等.紫花苜蓿青貯飼料對草魚生長性能和肌肉品質(zhì)的影響［J］.草地學(xué)報，2024，32（9）：2990-2998

CHEN Chen， HUA Shao-bo， LI Jie-qin，et al.Effects of Alfalfa Silage on Growth Performance and Meat Quality of Grass Carp［J］.Acta Agrestia Sinica，2024，32（9）：2990-2998

Effects of Alfalfa Silage on Growth Performance and Meat Quality of Grass Carp

CHEN Chen2，4， HUA Shao-bo2， LI Jie-qin3， JIANG Hua1， HUANG He-ping1，

JIANG Wan-qi2， YAO Min-xue2，LI Xiang-fei2， CHU Xiao-hui1， LIU Qin-hua1，2*

（1. Yunnan Agricultural University， Kunming， Yunnan Province 650201， China;2. Nanjing Agricultural University， Nanjing， Jiangsu

Province 210095， China; 3. Anhui Province International Joint Research Center of Forage Bio-breeding， Chuzhou， Anhui

Province 233100， China;4. Mengcao Ecological Environment（Group） Co. Ltd.， Hohhot， Inner Mongolia 010070， China）

Abstract：In order to make better use of silage in fisheries，the effects of silage prepared from alfalfa （Medicago sativa L.） at different harvest times on the growth performance，intestinal digestion and meat quality of grass carp （Ctenopharyngodon idella） in autumn in Nanjing were studied. The experiment was divided into a control group （CON），an early-bloom group （CH） and a full-bloom group （KH）. A total of 150 grass carp with an initial body weight of （1000±50） g were randomly divided into three groups with 50 grass carp in each group，and samples were taken for analysis after feeding for 60 days. The results showed that compared with the CON group，the CH group and the KH group had no significant effect on the final body weight，mass gain rate and specific growth rate of grass carp （Pgt;0.05），the intestinal protease of grass carp in the CH group was significantly increased （Plt;0.05），the intestinal protease of grass carp in the KH group was significantly decreased （Plt;0.05），and the muscle texture index of grass carp in the CH group and KH group was not significantly affected （P gt; 0.05）. The aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase in the KH group were significantly higher than those in the CON group and CH group （Plt;0.05）. In conclusion，the substitution of 15% protein premix by alfalfa silage at early flowering and full flowering stage did not affect the weight gain of grass carp in autumn，but showed a trend of improving the meat quality of grass carp，and the alfalfa silage substitution group at early flowering stage increased the intestinal protease activity of grass carp. Therefore，alfalfa silage at the early flowering stage has greater potential to replace 15% protein premix for grass carp.

Key words：Alfalfa;Silage;Grass carp;Digestive enzyme;Meat quality

草魚（Ctenopharyngodon idella）是我國產(chǎn)量最高的淡水經(jīng)濟型魚類。在2020年，產(chǎn)量達到557萬t，占淡水漁業(yè)總量的18.04%［1］。我國種草養(yǎng)魚歷史悠久，在長期的生產(chǎn)實踐中已篩選出了多種可用于草魚養(yǎng)殖的飼草，如紫花苜蓿（Medicago sativa L.）、蘇丹草（Sorghum sudanense （Piper） Stapf）和‘桂木一號’象草（Pennisetum purpureum Schumach.）［2-4］。然而，飼喂新鮮飼草，存在季節(jié)性供需矛盾和鮮草營養(yǎng)變化大等問題，飼喂效果參差不齊，較難保證穩(wěn)產(chǎn)和高產(chǎn)。青貯是一種將飼草營養(yǎng)成分長期良好保存的飼草調(diào)制加工和貯藏方式［8］，能夠一年四季地為草魚提供營養(yǎng)價值穩(wěn)定的飼草料，對保障草魚全年穩(wěn)產(chǎn)和高產(chǎn)具有重要的研究和實驗意義。

我國是糧食進口大國，2021年我國從美國進口大豆達到3230萬t［5］，從秘魯進口魚粉達到184萬t。魚類傳統(tǒng)配合飼料中的蛋白質(zhì)原料主要是豆粕、棉粕、菜籽粕和魚粉等［6］。近期，新冠疫情和俄羅斯-烏克蘭戰(zhàn)爭危機疊加，導(dǎo)致全球大豆和魚粉緊缺，魚類飼料價格上漲迅速［7］。紫花苜蓿富含蛋白質(zhì)和多種礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分［10］，將其調(diào)制成青貯飼料來替代日糧中的部分蛋白預(yù)混料，將有助于降低養(yǎng)殖成本和提高魚肉品質(zhì)?，F(xiàn)今已有紫花苜蓿草粉被用于草魚飼料的報道［11］，但尚無將紫花苜蓿青貯飼料作為草魚日糧成分的報道。

本研究旨在探究不同收獲期紫花苜蓿調(diào)制而成的青貯飼料對草魚生長性能、腸道消化力和肌肉品質(zhì)的影響，為紫花苜蓿青貯飼料在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的高效利用奠定理論基礎(chǔ)和技術(shù)支撐。

1" 材料與方法

1.1" 試驗材料

紫花苜蓿種植于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)白馬教學(xué)科研實踐基地，地處北亞熱帶大陸性濕潤氣候，東經(jīng)119.18°，北緯31.6°，四季分明，降雨豐富。常年平均降水117 d，日均降水量為1106.5 mm，一般相對濕度為76%，無霜期237 d。蛋白預(yù)混料采購于廣東海大集團股份有限公司，玉米、麥麩和米糠均購買于私人商鋪。

1.2" 試驗設(shè)計

試驗設(shè)對照組（CON，不添加紫花苜蓿青貯飼料），初花期組（CH，按鮮重添加15%初花期紫花苜蓿青貯飼料替代日糧中的預(yù)混料），盛花期組（KH，按鮮重添加15%盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代日糧中的預(yù)混料）。按草魚營養(yǎng)需要，將日糧構(gòu)成配制如表1。青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)見表2。

1.3" 試驗方法

1.3.1" 試驗飼料及調(diào)制" 將新鮮紫花苜蓿切短至1～2 cm后混勻，將 18.0 kg紫花苜蓿與2.4 kg米糠混合均勻后，平均分裝至3個聚乙烯塑料袋中（60 cm×90 cm，19絲），每袋約6.8 kg。抽真空后密封，置于室溫（32～39℃）下貯藏60 d后備用。青貯發(fā)酵結(jié)束后，按配方與其它日糧原料進行混合，使用顆粒機（125型，星佰農(nóng)機廠，鄭州）制成水分含量約為15%的1～2 cm顆粒，放入自封袋中真空封裝保存?zhèn)溆?，對照組混合飼料中乳酸菌含量為1.84 lg cfu·g-1 FW，初花組混合飼料中乳酸菌含量為4.21 lg cfu·g-1 FW，開花組混合飼料中乳酸菌含量為4.34 lg cfu·g-1 FW。

1.3.2" 青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和營養(yǎng)品質(zhì)分析" 青貯飼料干物質(zhì)含量采用烘干法測定，105℃殺青2 h后，65℃烘干48 h。粗蛋白含量采用凱氏定氮法測定［12］。pH值采用pH 211型精密pH計（意大利HANNA公司）測定［13］。氨態(tài)氮含量采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定［14］。有機酸含量采用高效液相色譜儀測定［14］。色譜條件：Agilent高效液相色譜儀；色譜柱為Carbomix H-NP5；流動相為2.5 mmol·L-1 H2SO4；流速為0.7 mL·min-1；柱溫為55℃；檢測器為示差檢測器，30℃。

1.3.3" 養(yǎng)殖條件" 試驗用魚購買于南京市白馬鎮(zhèn)，飼養(yǎng)于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)白馬教學(xué)科研實踐基地池塘中。約3畝（1畝=666.67 m2）池塘分為三區(qū)，每區(qū)50條草魚，養(yǎng)殖試驗期為60 d。草魚體色和形態(tài)正常、體格健壯、攝食良好、初始體重為（1000±50） g。每區(qū)草魚套養(yǎng)15條（500±50） g的鰱魚和200條5～8 cm的黃顙魚，配備增氧機一臺，每日早9：00至晚6：00開機。每日飼喂上述飼料兩次，早上7：00一次，下午5：00一次，每次均使用手工投喂方式，每天按每組草魚初始總重的4%喂料，即每餐投喂1000 g飼料，每組60 d總飼喂量為120 kg。試驗期間氣溫18～26℃，溶解氧≥ 5.00 mg·L-1，pH值為6.80～7.60，亞硝酸鹽含量為0.10～0.40 mg·L-1，硝酸鹽含量為0.08～0.13 mg·L-1。飼喂60 d（9月18日至11月18日）后取樣分析。

1.4" 草魚樣品采集及分析

試驗結(jié)束后，未進行饑餓處理測量并統(tǒng)計每個區(qū)域中試驗用魚的存活數(shù)。取各區(qū)中試驗用魚放入水箱中，加入間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉液（400 mg·L-1）中麻醉后首先測定體長度、最終體質(zhì)量。隨后每個組隨機取6尾試驗魚進行活體解剖，先對內(nèi)臟團、肝臟和腸稱取質(zhì)量，并測量腸全長。然后取背側(cè)肌肉、肝臟及魚中腸，每尾試驗魚稱取2 g背側(cè)肌肉用于肌肉質(zhì)構(gòu)測定；取肝臟用于肝臟消化酶活性測定；取魚中腸用于腸道消化酶活性的測定。除肌肉外，其余樣品均保存于-20℃。

1.4.1" 生長與形態(tài)學(xué)指標" 有關(guān)生長及形態(tài)學(xué)指標的計算公式如下：

WWGR=（mt-m0）/m0×100%

KSGR=（lnmt-lnm0）/t×100%

DCF=100×m/L3

wVSI=mv/m×100%

wHSI=mh/m×100%

wRGW=mG/m×100%

I=LG/L

RS=nt/n0×100%

式中，WWGR為質(zhì)量增加率（%），KSGR為特定生長率（%·d-1），DCF為肥滿度，WVSI為臟體指數(shù)（%），WHSI為肝體指數(shù)（%），WRGW為腸體指數(shù)（%），I為比腸長，RS為存活率（%），t為飼養(yǎng)天數(shù)（d），m0為初始質(zhì)量（g），mt為最終質(zhì)量（g），mv內(nèi)臟質(zhì)量（g），mh肝臟質(zhì)量（g），mG為腸質(zhì)量（g），LG為腸長（cm），m為體質(zhì)量（g），L為體長（cm），n0和nt分別為各組試驗初、末試驗魚數(shù)（尾）。

1.4.2" 肝臟和腸道消化酶活性測定" 在冷凍條件下，取0.10～0.20 g樣品，按樣品量∶生理鹽水（0.69%）1∶9混合，在冰水浴中充分勻漿，勻漿液4℃，3000 r·min-1 離心15 min，取上清液用于測定蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶測定試劑盒均購買于南京晚晴生物科技有限公司，使用紫外分光光度計按說明書操作測定吸光度，通過標準曲線測定消化酶活性。

1.4.3" 肌肉質(zhì)構(gòu)指標" 取1 cm×1 cm×0.5 cm背部肌肉，使用質(zhì)構(gòu)分析儀（TMS-Pro，美國FTC公司）進行肌肉質(zhì)構(gòu)分析，測定指標包括硬度（Hardness）、粘合度（Adhesiveness）、凝聚力（Cohesiveness）、彈性（Springiness）、黏性（Gumminess）、咀嚼度（Chewiness）和恢復(fù)力（Resilience）。采用25 mm×25 mm的柱形探頭，接觸感應(yīng)力為5 gf，測試速度1 mm·s-1，目標模式為形變，形變量50%，時間2.5 s，每個樣品測定兩次取平均值。

1.4.4" 血清生化指標" 試驗用魚麻醉后，使用2 mL無菌注射器（事先進行肝素鈉抗凝劑潤針）取尾部靜脈血液，立即進行離心（3500 r·min-1，10 min），取上清液—20℃冷凍保存，用于谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate aminotransferase，AST），谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine aminotransferase，ALT），血蛋白（Albumin，ALB），葡萄糖（Glucose，GLU），甘油三酯（Trilaurin，TG），總膽固醇（Total cholesterol，TC），乳酸（Lactic acid，LA）的測定。測定試劑盒均購買于南京晚晴生物科技有限公司。

1.4.5" 氨基酸檢測方法" 采用全自動氨基酸自動分析儀（L-8900，日本）測定肌肉氨基酸含量。

酸水解方法：0.1 g肌肉放入水解瓶，加6 mol·L-1鹽酸溶液10 mL，—20℃放置2～3 min，使用氮吹儀（YDCY-12AL，上海）通入氮氣2 min，用防爆氣體罐封口；將水解瓶置110℃處理22～24 h后，溶液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶加超純水定容；取1 mL溶液至5 mL離心管中，氮吹儀吹干，加0.02 mol·L-1鹽酸2 mL溶解殘渣，以0.22 μm孔徑濾器過濾，得到的澄清液體用全自動氨基酸分析儀測定氨基酸含量。

堿水解方法：0.1 g肌肉放入水解瓶，加4 mol·L-1鹽酸溶液10 mL，—20℃放置2～3 min，使用氮吹儀（YDCY-12AL，上海）通入氮氣2 min，用防爆氣體罐封口；將水解瓶置110℃處理22～24 h后，溶液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶加超純水定容；取1 mL溶液至5 mL離心管中，氮吹儀吹干，加0.02 mol·L-1鹽酸2 mL溶解殘渣，以0.22 μm孔徑濾器過濾，得到的澄清液體用全自動氨基酸分析儀測定氨基酸含量。

1.4.6" 魚肉脂肪酸檢測方法" 采用氣相色譜儀檢測脂肪酸。色譜條件：TRACE GC氣相色譜儀；色譜柱為安捷倫HP-88（100 mm×0.25 mm），載氣為氦氣，進樣40 μL，100∶1分流比，進樣口溫度為270℃，檢測器溫度為280℃，檢測器輔助氣氫氣流速為30 mL·min-1，空氣流速為30 mL·min-1。升溫程序：100℃持續(xù)4 min，以15℃·min-1升溫至180℃后持續(xù)6 min，再以1℃·min-1速度升溫至200℃后持續(xù)15 min，以8℃·min-1升溫至230℃后持續(xù)10 min。

1.5" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準偏差表示，并用SPSS 22版統(tǒng)計分析軟件分析試驗數(shù)據(jù)，在單因子方差分析的基礎(chǔ)上采用t檢驗法檢驗組間是否存在顯著差異，Plt;0.05認為存在顯著性差異。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚生長性能指標的影響

由表3可知，飼喂盛花期或初花期紫花苜蓿青貯混合飼料組與對照組相比，草魚最終體重、增重率、特定生長率未出現(xiàn)顯著性差異。三組飼料之間餌料系數(shù)及蛋白質(zhì)效率未出現(xiàn)顯著性差異。

2.2" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚形態(tài)學(xué)指標的影響

由表4可知，飼喂盛花期紫花苜蓿青貯混合顆粒飼料顯著增加了臟體比指數(shù)（Plt;0.05），其中CON組與CH組之間無顯著性差異。肥滿度、肝體比、比腸長及腸體比未見顯著性差異。

2.3" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚腸道消化酶活性的影響

由表5可知，飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚腸道蛋白酶和淀粉酶活性產(chǎn)生了顯著影響（Plt;0.05）。CH組腸道蛋白酶活性顯著高于CON和KH組（Plt;0.05），KH組蛋白酶活性顯著低于CON組（Plt;0.05）。CH組和KH組草魚的腸道淀粉酶顯著低于CON組（Plt;0.05），且KH組的蛋白酶活性顯著低于CH組（Plt;0.05）。

2.4" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚肌肉質(zhì)構(gòu)的影響

由表6可知，飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚魚肉的硬度、粘合度、彈性、凝聚力、黏性、咀嚼度和恢復(fù)力無顯著影響。與CON組相比，CH和KH組的硬度、彈性、黏性和咀嚼度呈現(xiàn)降低趨勢（0.05lt;Plt;0.1）。

2.5" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚血清生化指標的影響

由表7可知，KH組對草魚血漿谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性和總膽固醇濃度產(chǎn)生了顯著影響（Plt;0.05）。KH組的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著高于CH和CON組（Plt;0.05），總膽固醇濃度顯著低于CH和CON組（Plt;0.05）。CH組的白蛋白濃度顯著低于KH組和CON組（Plt;0.05），且KH組的白蛋白濃度顯著低于CON組（Plt;0.05）。

2.6" 紫花苜蓿青貯配合顆粒飼料及魚肉氨基酸分析

由表8可知，對照組飼料中天冬氨酸含量在所有氨基酸中最高，其次是谷氨酸、甘氨酸和亮氨酸。初花期組和盛花期組中谷氨酸含量在所有氨基酸中最高，其次是天冬氨酸、賴氨酸和亮氨酸。三個飼料組谷氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸含量呈現(xiàn)顯著性差異（Plt;0.05），初花期組谷氨酸、天冬氨酸含量最高，盛花期組丙氨酸、甲硫氨酸含量最高（Plt;0.05），對照組甘氨酸含量最高（Plt;0.05）。氨基酸總量在初花期組最高（Plt;0.05）。

由表9可知，對照組魚肉中天冬氨酸含量在所有氨基酸中最高，其次為脯氨酸、絲氨酸、甲硫氨酸。初花期組中天冬氨酸含量在所有氨基酸中最高，其次為脯氨酸、谷氨酸、甲硫氨酸。盛花期組中脯氨酸含量在所有氨基酸中最高，其次為甲硫氨酸、谷氨酸、天冬氨酸。三組飼料之間天冬氨酸、脯氨酸、絲氨酸、谷氨酸含量呈現(xiàn)顯著性差異（Plt;0.05），其中初花期組谷氨酸、亮氨酸、賴氨酸含量最高（Plt;0.05），盛花期組丙氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸含量最高（Plt;0.05），對照組甘氨酸含量最高（Plt;0.05）。對照組絲氨酸含量最高（Plt;0.05）。初花期組氨基酸總量最高（Plt;0.05）。

2.7" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對魚肉脂肪酸的影響

本研究共在魚肉中檢測出了14種脂肪酸，其中飽和脂肪酸4種，不飽和脂肪酸10種（表10）。除亞油酸以外，三組飼料喂養(yǎng)草魚對魚肉脂肪酸含量影響顯著（Plt;0.05），其中對照組肉豆蔻油酸、棕櫚油酸、十七烷酸、反油酸、反式亞油酸、花生酸含量顯著低于兩個處理組（Plt;0.05），α-亞麻酸、二十一烷酸、二十二烷酸盛花期組含量最高（Plt;0.05），初花期組神經(jīng)酸、二十二碳六烯酸含量最高（Plt;0.05），對照組芥酸含量最高（Plt;0.05）。初花期組總脂肪酸、總不飽和脂肪酸、總飽和脂肪酸均最高（Plt;0.05）。

3" 討論

3.1" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚生長性能及形態(tài)學(xué)的影響

在本試驗中，初花期和盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代飼料中15 %蛋白預(yù)混料未顯著影響降低草魚的增重率和特定生長率，表明兩個生育期紫花苜蓿青貯飼料可作為蛋白原料來養(yǎng)殖草魚。其原因是紫花苜蓿是蛋白質(zhì)含量高的飼草，青貯發(fā)酵后的紫花苜蓿有酸香味，草魚喜食適口性好的飼料［15］，制成顆粒飼料后仍具有酸香味。本次試驗用魚未進行試驗前馴化，在秋季末期環(huán)境溫度下降，草魚攝食量下降，對環(huán)境的適應(yīng)力下降，適應(yīng)時間增長，草魚對飼料成分變化的適應(yīng)較慢，導(dǎo)致增重增長較為緩慢［15-16］。臟體比指數(shù)是反映魚類對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的利用程度，高能量的攝入會導(dǎo)致魚臟體比指數(shù)上升［17］。類似地，肥滿度也反映了草魚的能量攝入水平。草魚的肥滿度在育成階段會隨飼料蛋白水平的上升而升高［18］。本試驗中，各組飼料間能量未表現(xiàn)出差異，同時CH與KH組的臟體比指數(shù)和肥滿度差異不顯著。

3.2" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚消化酶的影響

消化酶活性反映了魚消化和利用食物的能力。消化酶活性越高，吸收能力越強，營養(yǎng)效價越佳［19］。本試驗結(jié)果表明，初花期和盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代飼料中的15%蛋白預(yù)混料顯著影響了草魚腸道蛋白酶和淀粉酶的活性。與CON和KH組相比，CH組中較高的蛋白酶活性說明其可供消化的蛋白質(zhì)含量高。CH組和KH組的淀粉酶活性低于CON組，其原因是紫花苜蓿的替代增加了飼料中的纖維含量，降低了顆粒飼料中的可消化碳水化合物的比例，導(dǎo)致相關(guān)酶的活性降低［20］。另外，乳酸菌是養(yǎng)殖業(yè)中常用的飼料益生菌，可促進動物消化。初花期紫花苜蓿青貯飼料中豐富的乳酸菌（gt;106 cfu·g-1）促進了魚對蛋白的消化，這與林艾影等［19］研究結(jié)果保持一致。

3.3" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚肉質(zhì)的影響

質(zhì)構(gòu)特性是評價肉類商品特性的重要指標之一，能影響消費者對魚類的消費選擇。在本試驗中，初花期和盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代飼料中的15%蛋白預(yù)混料飼養(yǎng)殖草魚，草魚肌肉硬度、彈性、咀嚼度都有所降低，表明魚肉更嫩，其原因可能是紫花苜蓿青貯飼料的替代改變了草魚肌纖維結(jié)構(gòu)，氨基酸水平提高，讓魚肉品質(zhì)得到改善［21］。本試驗中顆粒飼料天冬氨酸及谷氨酸含量較高，在魚肉中二者含量占據(jù)較高地位。天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸為鮮味氨基酸［22］，鮮味氨基酸含量增加表現(xiàn)為魚肉的鮮味增加。因此添加紫花苜蓿青貯飼料可以改善魚肉品質(zhì)，但其機理和添加量還需要進一步研究。

3.4" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對草魚血漿生化指標的影響

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝臟細胞中活性最強、分布最廣的轉(zhuǎn)氨酶。如果肝臟出現(xiàn)病變，肝細胞通透性會增大，酶即釋放于血液中，谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量升高。本試驗中KH組草魚谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著性的高于CON組與CH組，但AST均低于草魚生長可接受范圍（ALT為4.96～15.84 U·L-1，AST為40.66～116.47 U·L-1）［23-24］，高科迪等［25］研究發(fā)現(xiàn)，飼料日糧含脂質(zhì)水平達到6%，草魚肝細胞發(fā)生形變，導(dǎo)致草魚肝臟發(fā)生病變。在本試驗中，各飼料組粗脂肪含量均在6%，高水平飼料脂肪對草魚肝臟功能產(chǎn)生了影響，其中KH組飼料影響最大。

血液葡萄糖含量的變化與機體的新陳代謝及健康狀況密切相關(guān)。草魚的血液葡萄糖正常含量為2.78～12.72 mmol·L-1［26］。在本試驗中，三組血液葡萄糖含量均在正常范圍之內(nèi)，CH與KH組血液中葡萄糖含量低于CON組，這是因為紫花苜蓿青貯飼料中的糖已經(jīng)轉(zhuǎn)化為乳酸，替代后降低了糖含量，導(dǎo)致草魚攝食后的血液中的葡萄糖含量較低［27］。

血液總膽固醇和甘油三酯是草魚重要的脂類物質(zhì)，其含量反映了草魚脂質(zhì)代謝的狀況［28］。本試驗中KH組草魚血漿總膽固醇含量明顯低于CON組。這與錢文春等［28］的研究類似，其原因是KH組的蛋白質(zhì)含量較低。魚血漿白蛋白主要在魚的肝臟中合成，具有維持血漿膠體滲透壓平衡和運輸機體代謝產(chǎn)物的功能［29］。本試驗中兩個試驗組的白蛋白含量均低于CON組，其原因可能是肝臟功能下調(diào)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成能力下降，進而降低了血漿白蛋白水平，這與胡安東等［29］的研究中肝功能異常影響蛋白合成結(jié)論一致。

3.5" 飼喂紫花苜蓿青貯飼料對魚肉脂肪酸的影響

本試驗采用生魚肉進行脂肪酸測定，紫花苜蓿青貯飼料替代組的魚肉中含有不飽和脂肪酸含量較高。有研究表明［30］，飼喂青草可以增加魚肉中不飽和脂肪酸的含量，可以增加魚肉的香味。本試驗使用青貯手段保存了紫花苜蓿的營養(yǎng)物質(zhì)，達到了提高不飽和脂肪酸含量的效果。

4" 結(jié)論

綜上所述，在南京秋季利用初花期和盛花期紫花苜蓿青貯飼料替代15%蛋白預(yù)混料未影響草魚增重，呈現(xiàn)提高草魚肉質(zhì)的趨勢，且初花期紫花苜蓿青貯飼料替代組提高了草魚腸道蛋白酶活性，因此初花期紫花苜蓿青貯飼料替代15%蛋白預(yù)混料飼養(yǎng)草魚具有巨大潛力。

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（責任編輯" 閔芝智）