DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋與普通雞蛋蛋黃脂肪酸組成對(duì)比分析

摘 要：為探究DHA營(yíng)養(yǎng)飼料對(duì)雞蛋蛋黃中脂肪酸組成的影響，試驗(yàn)選用120只健康的45周齡汶上蘆花雞隨機(jī)分成2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加1%禽用DHA預(yù)混料，分析蛋黃中脂肪酸組成，試驗(yàn)期30 d。結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，汶上蘆花雞飼喂禽用DHA預(yù)混料（藻油DHA飼料添加劑），可顯著提升蛋黃中DHA含量（Plt;0.05），DHA含量由（131.37±2.66）mg/100 g提高到（201.34±4.72）mg/100 g，并能顯著提升其他多種脂肪酸含量，且具有更優(yōu)的ω-6 PUFA /ω-3 PUFA比值。綜上所述，飼喂藻油DHA添加劑可顯著改善汶上蘆花雞雞蛋中的脂肪酸組成。

關(guān)鍵詞：DHA； 營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化；雞蛋；脂肪酸組成

中圖分類號(hào)：S816.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-1085（2024）12-0019-07

二十二碳六烯酸（DHA）屬于ω-3系列的多不飽和脂肪酸[1]，是大腦和視網(wǎng)膜組織中含量最高的ω-3型多不飽和脂肪酸。研究表明，補(bǔ)充DHA具有改善血液膽固醇（TC）、降血脂的作用，同時(shí)能夠促進(jìn)腦部發(fā)育[2-3]、改善視網(wǎng)膜功能，而且還具有抑制腫瘤、抗炎等生理作用[4-5]。DHA主要以乙酯型、甘油三酯型以及磷脂型三種形式存在，其中磷脂型DHA在改善神經(jīng)性疾病方面顯示出更高的效率且更容易被吸收[6]。

近幾年，中國(guó)雞蛋產(chǎn)量位居世界第一，同時(shí)雞蛋作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)來(lái)源，富含卵磷脂、多種維生素及微量元素，一直以來(lái)深受我國(guó)居民的青睞。蛋黃中含有較多的磷脂，因此近年來(lái)富含ω-3型多不飽和脂肪酸、DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋等逐漸成為研究熱點(diǎn)[7-12]，本研究以普通雞蛋及DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋為對(duì)象，對(duì)雞蛋蛋黃中多種脂肪酸含量進(jìn)行對(duì)比分析，以期為更好地開(kāi)發(fā)DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋提供數(shù)據(jù)支撐。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼糧購(gòu)自禹城亞太中匯飼料有限公司，禽用DHA預(yù)混料（藻油DHA≥24.5%）購(gòu)自青島藻源海洋生物科技有限公司。

1.2" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于山東省地方雞品種資源活體基因庫(kù)進(jìn)行。選取120 只健康的45周齡汶上蘆花雞，隨機(jī)分為2個(gè)組別，每個(gè)組別3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。對(duì)照組僅飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加1%禽用DHA預(yù)混料。試驗(yàn)期30 d。

1.3" 飼養(yǎng)管理

參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T33-2004）配制玉米-豆粕型飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。采用三層層疊籠養(yǎng)方式進(jìn)行養(yǎng)殖，每籠5只雞，舍溫控制在（20±2）℃，相對(duì)濕度控制在50%～60%；每天喂料3次（8：00、13：30和18：00）。

1.4" 儀器與試劑

儀器：GC-6890A氣相色譜儀、HP-88毛細(xì)管色譜柱（100 m×0.25 mm，0.2 μm）， 美國(guó)Agilent公司；FA2204電子天平，上海上平公司；電熱恒溫水浴鍋，北京永光明公司；GT200震動(dòng)球磨儀，北京格瑞德曼公司；FreeZone冷凍干燥機(jī)，美國(guó)Labconco公司。

試劑：37種脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品1ST5305，天津阿爾塔公司；十一烷酸甘油三酯（C11：0）標(biāo)準(zhǔn)品1ST2001（純度為98.9%），天津阿爾塔公司；乙醇、正庚烷、石油醚、鹽酸（分析純），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.5" 脂肪酸的測(cè)定

1.5.1" 酸解-脂肪提取" 分別稱取蛋黃在凍干前后的重量用于水分的換算。將蛋黃取出后，于冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行冷凍干燥，后于震動(dòng)球磨儀中分散均勻。稱取0.3 g蛋黃粉移入100 mL離心管中，按照GB 5009.168-2016的方法進(jìn)行脂肪提取；然后在離心管中加入2.0 mL十一碳酸甘油三酯內(nèi)標(biāo)溶液（5.00 mg/mL），再依次加入100 mg焦性沒(méi)食子酸、2 mL的95%乙醇和4 mL水，混勻，最后加入8.3 mol/L的鹽酸溶液10 mL，充分混勻后放于80 ℃水浴中水解40 min。每隔10 min進(jìn)行振蕩混勻，將黏附于內(nèi)壁的顆粒物混入溶液中。水解完成后，取出離心管冷卻至室溫。為防止乳化，加入10 mL的95%乙醇，混勻；加入50 mL石油醚，振搖5 min，靜置10 min，將醚層提取液收集到250 mL的雞心瓶中，重復(fù)提取水解液3次，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，黃色殘留物即為蛋黃中脂肪提取物。

1.5.2" 脂肪的皂化、脂肪酸的甲酯化及氣相色譜測(cè)定脂肪酸組成" （1）脂肪的皂化、脂肪酸的甲酯化：在蛋黃脂肪提取物中加入2%的氫氧化鈉甲醇溶液8 mL，連接回流冷凝器，將雞心瓶置于80 ℃水浴上回流至油滴消失，過(guò)程約30 min；在回流冷凝器上端加入7 mL的15%三氟化硼甲醇溶液，繼續(xù)回流2 min，用少量水沖洗回流冷凝器；停止加熱，取下雞心瓶，迅速冷卻至室溫。加入15 mL正庚烷，振搖2 min；加入15 mL飽和氯化鈉水溶液，靜置分層。吸取上層溶液5 mL至25 mL試管中，加入4 g無(wú)水硫酸鈉，振搖1 min，靜置5 min分層，吸取上層正庚烷層，用0.22 μm有機(jī)濾膜過(guò)濾至進(jìn)樣瓶中，進(jìn)行上機(jī)氣相色譜分析。

（2）氣相色譜分析：HP-88毛細(xì)管色譜柱（100 m×0.25 mm，0.2 μm）， 載氣為高純氮?dú)?，進(jìn)樣體積為1.0 μL，分流比25：1。柱箱升溫程序：初始溫度100 ℃，持續(xù)13 min；100～180 ℃，升溫速率為10 ℃/min，保持6 min；180～200 ℃，升溫速率為1 ℃/min，保持20 min；200～230 ℃，升溫速率為4 ℃/min，保持10.5 min。檢測(cè)器為火焰離子化檢測(cè)器（FID），前進(jìn)樣口溫度為270 ℃，檢測(cè)器溫度為280 ℃，壓力為31.75 psi，氫氣流量40.0 mL/min，空氣流量400 mL/min，氮?dú)馕泊盗髁?0.0 mL/min。

1.6" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用EXCEL2019進(jìn)行初步整理， 結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，以P＜0.05 時(shí)表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上顯著差異。

2" 結(jié)果與分析

2.1" DHA飼料添加劑對(duì)蛋黃中DHA含量的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，添加1%禽用DHA預(yù)混料喂養(yǎng)的試驗(yàn)組雞蛋黃中脂肪酸含量顯著提高（Plt;0.05），DHA含量由（131.37±2.66）mg/100 g提高到（201.34±4.72）mg/100 g。

2.2" DHA飼料添加劑對(duì)蛋黃中其他脂肪酸含量的影響

由表2可知，除DHA含量顯著提升外，經(jīng)DHA 營(yíng)養(yǎng)飼糧喂養(yǎng)的雞蛋蛋黃中的其他脂肪酸種類以及含量也產(chǎn)生變化。試驗(yàn)組雞蛋蛋黃中檢出了反式亞油酸、γ-亞麻酸、二十二碳酸、花生四烯酸、二十三碳酸五種對(duì)照組雞蛋蛋黃中未檢出的脂肪酸，其中包括了飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組的脂肪酸除了肉豆蔻油酸外，其他含量都有了顯著提高（Plt;0.05）。另外，飽和脂肪酸SFA、不飽和脂肪酸UFA、單不飽和脂肪酸MUFA、多不飽和脂肪酸PUFA、ω-6 PUFA、ω-3 PUFA的含量均得到顯著性提高（Plt;0.05）。

蛋黃占雞蛋可食用部分的比例一般在33%～45%之間，試驗(yàn)組雞蛋ω-3 PUFA的含量符合NY/T 4069-2021行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中ω-3多不飽和脂肪酸強(qiáng)化雞蛋的要求，即ω-3多不飽和脂肪酸的含量≥300 mg/100 g；ω-6PUFA /ω-3 PUFA 比值也表現(xiàn)出顯著性下降（Plt;0.05），顯示出DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋具有更優(yōu)的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值。

3" 討論

3.1" DHA飼糧對(duì)蛋黃中DHA含量的影響

二十二碳六烯酸（DHA）是大腦和視網(wǎng)膜組織中含量最高的ω-3型多不飽和脂肪酸，對(duì)人體有顯著的保健作用[13]，同時(shí)，雞蛋中磷脂型DHA更容易被人體吸收[6]。陳秀麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)，蛋黃中DHA沉積效率不會(huì)隨著飼糧中DHA含量增加而無(wú)限制的增加。為避免出現(xiàn)高脂肪酸肝臟損傷，考慮耐受性、成本以及雞蛋風(fēng)味等情況[15]，本試驗(yàn)采用1%禽用DHA預(yù)混料作為DHA飼料添加劑，研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)1%禽用DHA預(yù)混料喂養(yǎng)的汶上蘆花雞，其蛋黃中的DHA含量比基礎(chǔ)飼糧喂養(yǎng)的雞蛋蛋黃中DHA含量顯著提高（Plt;0.05），同時(shí)使得雞蛋中ω-3 PUFA含量達(dá)到300 mg/100 g以上，符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[16]。在汶上蘆花雞對(duì)DHA飼料添加劑耐受且無(wú)副作用的前提下，要想進(jìn)一步使雞蛋中DHA有更高含量的富集，可參考龍爍等[10]研究?jī)?yōu)化DHA營(yíng)養(yǎng)飼料配方。

3.2" DHA飼糧對(duì)蛋黃中其他脂肪酸含量的影響

脂肪酸是維持人類生命活動(dòng)的必需物質(zhì)之一，對(duì)機(jī)體免疫與腦和神經(jīng)的發(fā)育都具有重要的作用[17]。陳秀麗等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加裂殖壺菌，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，蛋黃中脂肪酸種類發(fā)生了變化，檢測(cè)出對(duì)人體有益的花生四烯酸的存在。王維維等[19]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻油可使α-亞麻酸含量有所提升，使ω-3多不飽和脂肪酸的含量顯著提升。楊蕊等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加微藻DHA能顯著提高雞的平均日采食量。趙英才[8]、陳秀麗[14]、楊蕊[20]等均研究發(fā)現(xiàn)，DHA營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化雞蛋具有更優(yōu)的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值。本試驗(yàn)用1%禽用DHA預(yù)混料喂養(yǎng)的蘆花雞蛋蛋黃中，除DHA含量明顯提升外，其他脂肪酸的含量均有顯著提升，且比對(duì)照組增加了5種脂肪酸，這些變化可能與藻油本身含有的脂肪酸在產(chǎn)蛋雞體內(nèi)的代謝沉積富集有關(guān)，或者與促進(jìn)了汶上蘆花雞采食量的增多有關(guān)。

4" 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，汶上蘆花雞采用富DHA飼糧（1%禽用DHA預(yù)混料）能夠顯著提高蛋黃中DHA的含量（Plt;0.05），也顯著提升其他多種脂肪酸含量，且具有更優(yōu)的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值，顯著改善汶上蘆花雞雞蛋的蛋品質(zhì)。

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Analysis of Fatty Acid Composition between DHA Enriched Eggs and Normal Egg Yolks

Abstract：" In order to explore the effect of DHA nutritional feed on the fatty acid composition of egg yolks， 120 healthy 45-week-old Wenshang Luhua chickens were randomly divided into two groups， with 3 replicates in each group and 20 chickens in each replicate. The control group was fed with basal diet， and the experimental group was supplemented with 1% algal oil DHA feed additive in the basal diet for 30 days， analyzing the fatty acid composition in the egg yolk. The results showed that compared with the control group， the content of DHA in egg yolk could be significantly increased （Plt;0.05）， the DHA content was increased from （131.37±2.66） mg/100 g to （201.34±4.72） mg/100 g， and the content of other fatty acids could be significantly increased， and the omega-6 PUFA/ω-3 PUFA ratio was better. In conclusion， DHA nutrient feed feeding could significantly improve the fatty acid composition of Luhua chicken eggs.

Keywords：" DHA; Enrichment; Egg; Fatty acid composition