多殺性巴氏桿菌的研究

摘要：多殺性巴氏桿菌是引起畜禽巴氏桿菌病的病原菌，禽巴氏桿菌病又稱禽霍亂。多殺性巴氏桿菌最早是由Pasteur于1878—1879年發(fā)現(xiàn)，是畜、禽、野生動(dòng)物及人類的一種重要的共患性病原。

關(guān)鍵詞：多殺巴氏桿菌；免疫；預(yù)防

1 病原學(xué)

多殺性巴氏桿菌大部分都存在于許多家禽或者是野生動(dòng)物的呼吸道和腸道，是一種革蘭陰性小桿菌，卵呈現(xiàn)圓形，不具有運(yùn)動(dòng)性，也被人稱之為出血性敗血癥，牛是最易被感染的動(dòng)物，而傳播的途徑主要以呼吸道為主。

多殺性巴氏桿菌主要生長在溫度35～38℃，最適pH為7.2～7.8，會(huì)在不同的環(huán)境下生長，而培養(yǎng)的細(xì)菌可以抑制某些動(dòng)物的細(xì)菌生長，例如馬、牛、綿羊、山羊等抑制效果是最強(qiáng)的，而雞、鴨、豬和水牛的血液很少或沒有抑制作用[1]。

本菌在添加血清或血液的培養(yǎng)基上生長良好。斜射光觀察到的菌落形態(tài)是研究多殺性巴氏桿菌最有價(jià)值的特征之一。從禽巴氏桿菌病例中初次分離到的菌落可能有虹光，也可能因強(qiáng)度不同而呈扇形虹光或藍(lán)光，帶有少許甚至不帶虹光。

2 分類

根據(jù)DNA同源性，多殺性巴氏桿菌可分為3個(gè)亞種，分別是多殺亞種、敗血亞種和殺禽亞種。

常規(guī)的血清學(xué)分型是利用血清學(xué)方法檢測(cè)莢膜和菌體抗原，采用被動(dòng)血凝試驗(yàn)檢測(cè)特異性的莢膜血清群抗原，目前已發(fā)現(xiàn)5個(gè)血清型，分別為A、B、D、E和F。

多殺性巴氏桿菌其他分群方法包括噬菌體分型和多位點(diǎn)酶電泳（MLEE）。Gadberry和Miller[2]的試驗(yàn)證明：溶血性巴氏桿菌、雞巴氏桿菌、嗜肺巴氏桿菌以及耶爾森桿菌屬的3個(gè)種能抵抗噬菌體的裂解作用。研究結(jié)果表明了應(yīng)用噬菌體分群系統(tǒng)對(duì)多殺性巴氏桿菌進(jìn)行分群是可能的。

在用于多殺性巴氏桿菌菌株的分群以表型特征為依據(jù)的方法中，多位點(diǎn)酶電泳的區(qū)分最為清楚，被認(rèn)為是進(jìn)行多殺性巴氏桿菌流行病學(xué)研究的工具之一[3]。

3 生理學(xué)特征

一般可以利用多殺性巴氏桿菌的生理學(xué)特征對(duì)其進(jìn)行鑒定。多殺性巴氏桿菌不產(chǎn)氣，但能產(chǎn)生氧化酶、觸酶、過氧化物酶和特征性的氣味。與大多數(shù)革蘭氏陰性細(xì)菌不同的是，它對(duì)青霉素敏感。

4 抵抗力

多殺性巴氏桿菌在不產(chǎn)生芽孢的小桿菌中，是對(duì)物理和化學(xué)作用抵抗力很低的一種。本菌極易在直射陽光、干燥和熱的情況下迅速死亡，普通的消毒劑也極易使其滅活。

多殺性巴氏桿菌在陽光下只能存活10 min，在水和土壤中也不超過2周，在4℃或更低溫度下，細(xì)菌在凍干狀態(tài)或密封于試管中不發(fā)生變異，也不會(huì)失去致病力。若將細(xì)菌真空保存，則該菌可以存活5年[4]。

Das[4]將棉拭子浸漬感染該菌的鼠血液，細(xì)菌活力可維持118 h，但是166 h后則失去感染力（此時(shí)棉拭子已完全干燥）。存在于玻璃板上血液中的細(xì)菌也能存活24、30 h后才失去活性。Das[4]還報(bào)道稱將具有傳染性的血液密封于試管中冷藏，可使其中的細(xì)菌存活

221 d。Skidmore[5]發(fā)現(xiàn)在溫室下，該菌可在玻板上干燥的火雞血液中存活8 d，但30 d后可能失去活性。

Nobrega和Bueno[6]就溫度對(duì)多殺性巴氏桿菌活力和致病力的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在17.6℃的常溫下，存放于密封試管中的肉湯培養(yǎng)物經(jīng)2年后仍有致病性，而在2～4℃時(shí)1年后便失去活力。Dimov[7]通過對(duì)照試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：多殺性巴氏桿菌在濕度低于40%的土壤中很快失活；在濕度為50%，溫度為20℃的條件下，該菌在pH 5.0的環(huán)境中能存活5～6 d。

5 致病性

多殺性巴氏桿菌的病毒力比較復(fù)雜，并且經(jīng)常都在發(fā)生變化[7]，而變化的原因主要是根據(jù)感染的品種而決定，病菌和宿主之間的改變可以根據(jù)菌體莢膜可增強(qiáng)多殺性巴氏桿菌侵襲和繁殖能力[8]。但是根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究中分析可知，很多從畜禽亂病例中分離的病菌大部分都屬于低毒力病菌。所以毒力的強(qiáng)度與宿主是分不開關(guān)系的。多殺性巴氏桿菌通常是從呼吸道進(jìn)入到宿主的體內(nèi)，而人類的感染大部分都來自畜禽的咬傷，通過皮膚組織侵入[9]。而家禽中火雞對(duì)多殺性巴氏桿菌最易感[10]，通過檢測(cè)分離毒菌可知，同居的感染也是最容易的自然感染方式，除非是宿主抵抗力較強(qiáng)不易感染，否則病毒存在時(shí)間長，因此，人們更愿用棉拭子沾浸培養(yǎng)物，涂擦于禽類的鼻腔進(jìn)行感染。如果需要更強(qiáng)的感染，則常采用非腸道途徑注射培養(yǎng)物。

6 宿主

該病是一種廣泛的人獸共患病原菌，許多動(dòng)物對(duì)此都有易感性，比如雞、鴨、鵝、野禽、豬、牛、羊、馬等，根據(jù)以往的報(bào)道來看，禽巴氏桿菌病的宿主非常多，幾乎所有的鳥類都易感。而在家禽中最易感染的是火雞，并且在感染后一般3～5 d內(nèi)就會(huì)死亡，嚴(yán)重者甚至是全部都會(huì)死亡，病毒多發(fā)生在青年的火雞群。根據(jù)實(shí)驗(yàn)可知，通過腭裂涂擦或與病禽接觸感染高致病力多殺性巴氏桿菌后，90%～100%的成年火雞于48 h內(nèi)死亡。環(huán)境應(yīng)激因子，如氣候變化、營養(yǎng)、損傷和興奮等均可影響該病的發(fā)病率和發(fā)病過程。

7 毒素

無論強(qiáng)毒還是無毒力的多殺性巴氏桿菌都可產(chǎn)生毒素。內(nèi)毒素可能構(gòu)成細(xì)菌的毒力，然而細(xì)菌必須侵入和繁殖才能在體內(nèi)產(chǎn)生足夠數(shù)量的內(nèi)毒素，參與致病過程。內(nèi)毒素的血清學(xué)特異性與脂多糖有關(guān)，游離的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)主動(dòng)免疫。

8 流行病學(xué)

禽巴氏桿菌病在世界大多數(shù)國家都有發(fā)生，呈散發(fā)性或流行型。多數(shù)情況下，該病都能造成很高的死亡率，偶爾也可能損失很少。曾有報(bào)道稱一群5.5月齡的火雞，在6 d內(nèi)損失68%，也有人曾報(bào)道過該病一夜之間造成1 000余只鵝突然死亡的現(xiàn)象。慢性呼吸性禽巴氏桿菌病時(shí)發(fā)現(xiàn)該病造成的死亡率雖低，但持續(xù)期很長，至少可達(dá)4年。巴氏桿菌存在的范圍極廣，熱帶地區(qū)更嚴(yán)重。

本病毒很難發(fā)生大面積的感染情況，基本存在于局部性，所以哪怕感染該病的畜禽死亡率也不會(huì)很高，死亡率只占1%～10%，但嚴(yán)重時(shí)也存在50%～70%。因?yàn)樵摬∈菑V泛存在的致病性細(xì)菌，是大部分養(yǎng)殖場防控的對(duì)象。在細(xì)菌病毒弱而畜禽抵抗力強(qiáng)時(shí)是不易被感染的，只有在畜禽抵抗力弱而病毒性強(qiáng)時(shí)才會(huì)有感染的風(fēng)險(xiǎn)。畜禽發(fā)病的是沒有季節(jié)性限制的，但如果是飼養(yǎng)環(huán)境差，如果冷熱交替明顯，氣候變化大，并且環(huán)境潮濕的季節(jié)該病發(fā)病率較高。散發(fā)性或地方流行性，豬肺疫、鴨巴氏桿菌病（搖頭瘟）可呈流行性。禽的強(qiáng)毒Fo型也可感染豬、牛等家畜，不過這樣引起的巴氏桿菌病多是散發(fā)性的。

9 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

需要優(yōu)化飼養(yǎng)環(huán)境，重點(diǎn)需要考慮到畜禽的舒適度。飼養(yǎng)人員要禁止畜禽的混養(yǎng)，防止細(xì)菌相互交叉感染。在畜禽應(yīng)激反應(yīng)時(shí)要增加抗應(yīng)激和提高免疫力的添加劑。飼養(yǎng)人員需要定期做消毒的清潔工作，并且要嚴(yán)格禁止外來人員的進(jìn)入。需要做好環(huán)境的通風(fēng)，保持環(huán)境的干燥衛(wèi)生。

10 預(yù)防措施

預(yù)防禽巴氏桿菌病的最佳方法是接種疫苗。從飼養(yǎng)上來說，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，采取全進(jìn)全出的飼養(yǎng)制度，減少不同個(gè)體帶病傳染的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)嚴(yán)格遵守獸醫(yī)部門的衛(wèi)生制度，按時(shí)接種禽巴氏桿菌病疫苗。禽巴氏桿菌病注射氫氧化鋁甲醛疫苗，2月齡以上每次每羽肌注射2 mL、8～10 d后再注射1次，免疫期為6個(gè)月。

從環(huán)境上來說，首先要保證環(huán)境的定期消毒，通常使用5%石灰水或1%漂白粉溶液即可。因該菌陽光直射和干燥環(huán)境中菌體很快死亡，所以禽舍內(nèi)要經(jīng)常更換墊料并保持墊料的清潔干燥，更換出的墊料如果要繼續(xù)使用以及新進(jìn)入的墊料必須經(jīng)陽光暴曬后方可使用。

禽巴氏桿菌病一旦發(fā)生會(huì)大大影響?zhàn)B殖戶的經(jīng)濟(jì)效益，因此養(yǎng)殖戶要做好禽巴氏桿菌病的防治工作，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，投喂干凈的食物，加強(qiáng)禽舍的保溫等。

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