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    高粱種質(zhì)資源病蟲害抗性與主要農(nóng)藝性狀相關(guān)性分析

    2024-12-05 00:00:00胡蘭徐婧閆繼辰姜鈺
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2024年23期
    關(guān)鍵詞:抗性鑒定種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀

    摘要:為了探明病蟲害發(fā)生與高粱半花期、株高等主要農(nóng)藝性狀間的相關(guān)性,采用人工接菌和輔助接蟲的方法,對(duì)109份高粱種質(zhì)資源進(jìn)行炭疽病、靶斑病、彎孢霉葉斑病、大斑病和蚜蟲等5種病蟲害的抗性鑒定與評(píng)價(jià),并調(diào)查半花期、株高、穗長(zhǎng)等主要農(nóng)藝性狀。結(jié)果表明,對(duì)炭疽病表現(xiàn)為抗病以上的高粱品種資源有39份,占總鑒定材料的35.78%;對(duì)靶斑病表現(xiàn)抗病以上的材料有81份,占74.31%;對(duì)彎孢霉葉斑病表現(xiàn)抗病以上的材料有54份,占49.54%;對(duì)大斑病表現(xiàn)抗病以上的材料有68份,占62.39%;對(duì)高粱蚜蟲表現(xiàn)抗以上的材料有38份,占34.86%。相關(guān)性分析結(jié)果表明,高粱株高與炭疽病抗性呈正相關(guān),與靶斑病抗性呈負(fù)相關(guān);高粱半花期與彎孢霉葉斑病抗性呈負(fù)相關(guān);高粱大斑病抗性與炭疽病抗性呈負(fù)相關(guān),與靶斑病抗性呈正相關(guān);高粱穗長(zhǎng)與株高呈負(fù)相關(guān)。共篩選出兼抗5種病蟲害的抗病以上品種資源3份(哈1005、哈2013和哈R521),兼抗4種病蟲害的多抗性品種資源14份,這些具有優(yōu)異抗病蟲特性的高粱品種資源,為實(shí)現(xiàn)抗病育種和空間避病提供了鑒定技術(shù)及控病依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:高粱;抗性鑒定;雙抗或多抗性;農(nóng)藝性狀;種質(zhì)資源;相關(guān)性

    中圖分類號(hào):S435.14" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1002-1302(2024)23-0117-07

    胡" 蘭,徐" 婧,閆繼辰,等. 高粱種質(zhì)資源病蟲害抗性與主要農(nóng)藝性狀相關(guān)性分析[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2024,52(23):117-123.

    doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2024.23.016

    收稿日期:2024-01-16

    基金項(xiàng)目:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(編號(hào):CARS-06);遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)計(jì)劃(編號(hào):2021HQ1903)。

    作者簡(jiǎn)介:胡" 蘭(1980—),女,遼寧鞍山人,碩士,副研究員,主要從事旱糧作物病害防控研究。E-mail:40164877@qq.com。

    通信作者:姜" 鈺,博士,研究員,主要從事旱糧作物病害防控研究。E-mail:jiangyumiss@163.com。

    世界第五大谷類作物——高粱(Sorghum bicolor)是一種重要的作物,因其抗逆性和強(qiáng)大的雜種優(yōu)勢(shì),在世界干旱少雨地區(qū)發(fā)揮著增產(chǎn)潛能,不僅是我國(guó)重要的食用、飼用和工業(yè)用原料作物,而且也是一種重要的生物能源[1-2]。近年來,多種病蟲害普遍發(fā)生并廣泛傳播,使得高粱品質(zhì)下降,產(chǎn)量損失加重,嚴(yán)重威脅高粱生產(chǎn)。由高粱刺盤孢(Colletotrichum sublineolum)引起的高粱炭疽?。╯orghum anthracnose),廣泛分布在全球幾乎所有的大陸上,是最具破壞性的葉部病害之一,侵染高粱各個(gè)生長(zhǎng)階段的所有部位,導(dǎo)致高粱葉、穗(粒)和莖稈枯死、腐爛等,產(chǎn)量損失高達(dá)50%,高粱炭疽病病害級(jí)別與產(chǎn)量損失呈指數(shù)級(jí)正相關(guān),即隨著病害級(jí)別的增高,高粱穗粒重及千粒重?fù)p失率相應(yīng)升高[3-4]。由凸臍蠕孢(Exserohilum turcicum)引起的高粱大斑?。⊿LB)在世界上相對(duì)涼爽和潮濕的地區(qū)流行,是影響高粱生產(chǎn)最重要的葉部病害之一,病殘?bào)w或土壤中的菌絲、菌核或孢子是主要侵染來源,感病品種可以造成50.00%~74.45%的產(chǎn)量損失[5-6]。由平臍蠕孢菌(Bipolaris sorghicola)引起的高粱靶斑病(TLS)主要危害高粱葉片和葉鞘,是高粱在高濕度條件下主要葉部病害之一,大多在葉部產(chǎn)生紫紅色或黃褐色病斑,大大降低了植物生物量,在我國(guó)東北地區(qū)和西部山區(qū)普遍發(fā)生[7]。由新月彎孢霉(Curvularia lunata)引起的高粱彎孢葉斑?。–LS)主要危害高粱葉部,也可在籽粒中寄藏,垂直繼代傳播,侵染玉米、高粱等作物。近幾年來,該病害在我國(guó)北部玉米、高粱產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生。墨西哥的錫那羅亞州地區(qū)發(fā)現(xiàn)該病危害90多個(gè)高粱品種[8]。高粱蚜蟲(Melanaphis sacchar)在世界性各地廣泛分布,主要危害高粱、甘蔗等作物,在作物的整個(gè)生育期均可遭受蚜蟲的危害,其突發(fā)性和猖獗性嚴(yán)重制約了高粱生產(chǎn),蚜蟲在刺吸汁液的同時(shí)還分泌大量蜜露,影響植株的光合作用及其正常生長(zhǎng),嚴(yán)重時(shí)造成植物莖稈彎曲,不能抽穗,甚至絕收。蚜蟲會(huì)造成高粱產(chǎn)量降低,此外蚜蟲還能攜帶、傳播高粱紅條病毒?。?]。遼寧省于1979年、山西省于1983—1984年的蚜蟲大發(fā)生,給當(dāng)?shù)馗吡簧a(chǎn)造成了重大損失。2015—2017年因蚜蟲危害,美國(guó)高粱種植面積減少了30%,生產(chǎn)收益減少了43%[10]。和其他作物一樣,病蟲害會(huì)造成高粱作物的巨大損失,除了病原菌突變或新害蟲種類的出現(xiàn)外,還取決于作物階段、品種的易感性和環(huán)境條件的普遍性。在化學(xué)防治、農(nóng)業(yè)防治和生物防治等措施中,最經(jīng)濟(jì)有效的方法是培育抗病品種,篩選抗性資源是選育抗病(蟲)品種的基礎(chǔ)和必要手段,因此掌握品種抗?。ㄏx)特性尤其重要。國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者開展了高粱抗靶斑病、蚜蟲、炭疽病等鑒定評(píng)價(jià)研究,篩選出一系列抗病(蟲)品種,但對(duì)高粱抗彎孢霉葉斑病和大斑病鑒定研究較少,與農(nóng)藝性狀關(guān)聯(lián)性分析更少[11-16]。因此,本研究采用人工接菌和輔助接蟲進(jìn)行高粱抗?。ㄏx)性的鑒定,對(duì)109份高粱種質(zhì)資源進(jìn)行炭疽病、靶斑病、彎孢霉葉斑病、大斑病和高粱蚜蟲等5種病蟲害的抗性鑒定與評(píng)價(jià),并與花期、株高等主要農(nóng)藝性狀進(jìn)行相關(guān)性分析,以期為實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)防病和抗病育種提供鑒定技術(shù)、控病依據(jù)和優(yōu)異種質(zhì)資源。

    1" 材料與方法

    1.1" 試驗(yàn)材料

    鑒定所用的109份高粱種質(zhì)資源均來自中國(guó)黑龍江省,由遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所收集并保存。以L402B為抗病對(duì)照品種,NR10為感病對(duì)照品種,進(jìn)行高粱抗炭疽病的鑒定;以L407B為抗病對(duì)照品種,Tx622B為感病對(duì)照品種,進(jìn)行高粱抗靶斑病的鑒定;以LR218為抗病對(duì)照品種,以TNS30為感病對(duì)照品種,進(jìn)行高粱抗彎孢霉葉斑病的鑒定;以LR215為抗病對(duì)照品種,R1為感病對(duì)照品種,進(jìn)行高粱抗大斑病的鑒定;以TAM428為抗蚜對(duì)照品種,以L405B為感蚜對(duì)照品種,進(jìn)行高粱抗蚜能力的鑒定。高粱蚜蟲系遼寧省沈陽地區(qū)的自然發(fā)生種群。

    1.2" 病原菌的分離與保存

    分別于2019年9月在遼寧省沈陽市、阜新市、朝陽市等高粱主產(chǎn)區(qū)采集病葉標(biāo)本,剪成2 cm×4 cm 小片,用1% NaClO溶液進(jìn)行表面消毒2 min,再用無菌水漂洗3次,平放于水瓊脂培養(yǎng)基(WA)平板上,于25 ℃培養(yǎng)5 d。用接種針挑取分生孢子進(jìn)行單孢分離純化,經(jīng)病原菌鑒定、致病性測(cè)定后,確定為供接種用菌株,菌株在20%甘油中于 -40 ℃ 下長(zhǎng)期保存、備用。

    1.3" 供試材料的準(zhǔn)備

    2020—2021年連續(xù)2年在遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所試驗(yàn)地(遼寧省遼陽市)進(jìn)行高粱品種資源抗炭疽病、靶斑病、大斑病、彎孢霉葉斑病和蚜蟲的田間鑒定。抗性調(diào)查結(jié)果取2年中最高級(jí)別,農(nóng)藝性狀調(diào)查結(jié)果取平均值。將相同?。ㄏx)害鑒定材料隨機(jī)排列,小區(qū)行長(zhǎng)5 m,單行區(qū),行距0.6 m,小區(qū)保苗25株以上。土壤肥力水平和栽培管理與大田生產(chǎn)相同。

    1.4" 病原的培養(yǎng)及田間接種鑒定方法

    1.4.1" 接種體的培養(yǎng)及田間接種" 高粱炭疽病菌(菌株LTJ1)接種物的制備:將病菌均勻涂布在酪蛋白-乳糖水解液培養(yǎng)基(ATCC)平板上,于25 ℃光—暗(12 h—12 h)交替培養(yǎng)15 d,用無菌水將菌落表面橘紅色的分生孢子團(tuán)洗下,配制成濃度為 3×105個(gè)/mL的孢子懸浮液。在高粱8~10葉期,用噴霧器將病菌孢子懸浮液噴施在植株喇叭口中及周圍葉片上,用量為10 mL/株[17]。

    高粱靶斑病菌(菌株LBB1)、彎孢霉葉斑病菌(菌株LWB1)、大斑病菌(菌株LDB1)接種物的制備:將病原菌分別接種于高粱粒培養(yǎng)基(分別將高粱籽粒浸泡24 h、水煮20 min,冷卻后控去多余水分,裝入罐頭瓶中,于121 ℃高壓滅菌60 min,冷卻、備用)上,于25 ℃培養(yǎng)10 d,3 d搖瓶1次,使菌絲布滿高粱籽粒。然后將帶菌高粱籽粒鋪于潔凈瓷盤中,噴少量無菌水,以無積水為宜,在瓷盤上覆蓋無菌濕毛巾保濕培養(yǎng)24 h,鏡檢確認(rèn)產(chǎn)生大量分生孢子后,即可用于田間接種。采用植株喇叭口期接種方法,將制備的帶菌高粱粒投入植株心葉中,每株接種10粒[18]。

    高粱上蚜蟲的接種:田間高粱蚜自然“點(diǎn)”發(fā)生后,剪取蚜量多(200頭以上)的葉片,卡在高粱中下部葉片,每個(gè)品種接種5株,葉片接種量為1張/株。

    1.4.2" 抗病蟲鑒定調(diào)查方法" 蚜蟲的調(diào)查:在人工輔助接蟲7、14 d后觀察接種點(diǎn)附近的蚜蟲量,根據(jù)蟲口量進(jìn)行調(diào)查。在高粱籽粒進(jìn)入乳熟期(接種后40~50 d)后對(duì)炭疽病、靶斑病、彎孢霉葉斑病和大斑病進(jìn)行調(diào)查,通過目測(cè)鑒定材料的發(fā)病情況重點(diǎn)調(diào)查接種部位及周圍葉片。病情分級(jí)及其對(duì)應(yīng)的癥狀描述[17-18]見表1。依據(jù)葉片病斑面積占該葉片總面積的百分比劃分病情等級(jí),記錄每份材料病情級(jí)別。當(dāng)感?。ㄏx)對(duì)照材料達(dá)到其相應(yīng)感病程度(9級(jí))時(shí),該批次抗病蟲鑒定視為有效。對(duì)初次鑒定(2020年)和重復(fù)鑒定(2021年)的結(jié)果進(jìn)行比較,以記錄的最高病情級(jí)別為最終鑒定結(jié)果,并根據(jù)該結(jié)果對(duì)鑒定材料進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。

    1.5" 田間性狀的調(diào)查

    半花期指半數(shù)高粱品種處于開花狀態(tài)的時(shí)期,在本試驗(yàn)中記錄高粱從播種到半花期的時(shí)間,d。籽粒成熟后,選擇生長(zhǎng)均勻的高粱品種資源,進(jìn)行株高、穗長(zhǎng)的測(cè)量,每份資源測(cè)量10株,計(jì)算平均值。

    1.6" 數(shù)據(jù)分析

    用Excel 2021整理調(diào)查數(shù)據(jù),并繪制直方圖,用IBM SPSS Statistics 24對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析、主成分分析等。

    2" 結(jié)果與分析

    2.1" 田間生物性狀調(diào)查結(jié)果

    由表2可以看出,不同高粱種質(zhì)資源性狀的變異范圍為8.63%~16.69%,變幅較大,其中穗長(zhǎng)、株高的變異系數(shù)分別為15.11%、16.69%;半花期的最大值為93 d,最小值為63 d,平均值為76.81 d;株高最大值為197.8 cm,最小值為88.8 cm,平均值為130.55 cm;穗長(zhǎng)最大值為38.5 cm,最小值為17.2 cm,平均值為24.68 cm。

    2.2" 種質(zhì)資源抗病蟲性的鑒定結(jié)果

    由表3可以看出,109份高粱種質(zhì)資源中對(duì)炭疽病表現(xiàn)為高抗(HR)的有19份,占17.43%;表現(xiàn)為抗(R)的資源有20份,占18.35%;表現(xiàn)為中抗(MR)的資源有11份,占10.09%;表現(xiàn)為感(S)的資源有19份,占17.43%;表現(xiàn)為高感(HS)的資源有40份,占36.70%。對(duì)靶斑病表現(xiàn)為高抗(HR)的資源有40份,占36.70%;表現(xiàn)為抗(R)的資源有41份,占37.61%;表現(xiàn)為中抗(MR)的資源有14份,占12.84%;表現(xiàn)為感(S)的資源有7份,占6.42%;表現(xiàn)為高感(HS)的資源有7份,占6.42%。對(duì)彎孢霉葉斑病表現(xiàn)為高抗(HR)的資源有18份,占16.51%;表現(xiàn)為抗(R)的資源有36份,占33.03%;表現(xiàn)為中抗(MR)的資源有35份,占32.11%;表現(xiàn)為感(S)的資源有18份,占16.51%;表現(xiàn)為高感(HS)的資源有2份,占1.83%。對(duì)大斑病表現(xiàn)為高抗(HR)的資源有27份,占24.77%;表現(xiàn)為抗(R)的資源有41份,占37.61%;表現(xiàn)為中抗(MR)的資源有26份,占23.85%;表現(xiàn)為感(S)的資源有12份,占11.01%;表現(xiàn)為高感(HS)的資源有3份,占2.75%。對(duì)蚜蟲表現(xiàn)為高抗(HR)的資源有14份,占12.84%;表現(xiàn)為抗(R)的資源有24份,占22.02%;表現(xiàn)為中抗(MR)的資源有21份,占19.27%;表現(xiàn)為感(S)的資源有22份,占20.18%;表現(xiàn)為高感(HS)的資源有28份,占25.69%。共篩選出兼抗5種病蟲害的抗病以上資源3份,分別為哈1005、哈2013、哈R521,兼抗4種病蟲害的多抗性資源14份。

    2.3" 種質(zhì)資源抗病(蟲)性與農(nóng)藝性狀相關(guān)性分析

    相關(guān)性分析結(jié)果(表4)表明,株高與炭疽病抗性呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.256;株高與靶斑病抗性呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.223;半花期與彎孢霉葉斑病抗性呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.272;大斑病抗性與炭疽病抗性呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.354;大斑病抗性與靶斑病抗性呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.469;穗長(zhǎng)與株高呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.197。

    3" 討論與結(jié)論

    本研究對(duì)109份高粱種質(zhì)資源進(jìn)行5種?。ㄏx)害的抗性鑒定及3個(gè)主要農(nóng)藝性狀的評(píng)價(jià),結(jié)果表明,對(duì)炭疽病表現(xiàn)為抗病以上的高粱品種有39份,占總鑒定材料的35.78%;對(duì)靶斑病表現(xiàn)為抗病以上的材料有81份,占74.31%;對(duì)彎孢霉葉斑病表現(xiàn)為抗病以上的材料有54份,占49.54%;對(duì)大斑病表現(xiàn)為抗病以上的材料有68份,占62.39%;對(duì)蚜蟲表現(xiàn)為抗以上的材料有38份,占34.86%。共篩選出兼抗5種病(蟲)害的抗病以上資源3份(哈1005、哈2013和哈R521),兼抗4種病蟲害的多抗性資源14份。相關(guān)性分析結(jié)果表明,株高與炭疽病抗性呈正相關(guān),與靶斑病抗性呈負(fù)相關(guān);半花期與彎孢霉葉斑病的抗性呈負(fù)相關(guān);大斑病抗性與炭疽病抗性呈負(fù)相關(guān),與靶斑病抗性呈正相關(guān);穗長(zhǎng)與株高呈負(fù)相關(guān)。

    葉部病害可以通過降低活性光合面積而導(dǎo)致產(chǎn)量下降,也可以直接或間接影響高粱產(chǎn)量(籽粒、飼料、糖積累等)和質(zhì)量。在過去的幾十年里,對(duì)炭疽病和大斑病存在多個(gè)小種的病害以及受環(huán)境影響極大的如莖腐病和粒霉病、蚜蟲等病蟲害均開展了跨學(xué)科、國(guó)際性和合作性研究,高粱多種抗性的應(yīng)用取得了相當(dāng)大的進(jìn)展,高粱主要農(nóng)藝性狀的主成分及聚類分析、表型遺傳多樣性也有相關(guān)研究,但兩者結(jié)合相關(guān)研究較少[20-24]。

    研究發(fā)現(xiàn)的抗病蟲特性優(yōu)異高粱資源,可為實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)防病和抗病育種提供鑒定技術(shù)、控病依據(jù)。同時(shí),研究中應(yīng)用的人工接種鑒定技術(shù),可為高粱品種資源抗病蟲性評(píng)價(jià)提供方法和手段,為采用生物工程技術(shù)進(jìn)行抗性基因分子標(biāo)記和基因編輯與利用提供基礎(chǔ)材料,為空間避病提供理論依據(jù)。實(shí)踐證明,利用抗?。ㄏx)品種可減少化學(xué)藥劑的使用,降低成本,保護(hù)環(huán)境,是高粱病蟲害防治的重要手段和有效途徑。

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