• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    免疫組化在肺小細(xì)胞癌活檢診斷中的重要性

    2014-06-28 13:30萬(wàn)輝戴一菲
    中國(guó)醫(yī)藥科學(xué) 2014年4期
    關(guān)鍵詞:免疫組化

    萬(wàn)輝??戴一菲

    [摘要] 目的 通過(guò)肺穿刺及支氣管鏡獲得的組織極易因擠壓過(guò)甚而結(jié)構(gòu)不清,使肺小細(xì)胞癌與低分化鱗癌、淋巴瘤間會(huì)出現(xiàn)形態(tài)學(xué)上的重疊,我們通過(guò)免疫組化探討肺小細(xì)胞癌活檢標(biāo)本的診斷及鑒別診斷。 方法 收集肺穿刺及支氣管鏡活檢病例46例,病理組織形態(tài)學(xué)均診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌,每個(gè)病例均進(jìn)行CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA免疫組化診斷。 結(jié)果 46例診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌的活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化證實(shí):43例為肺小細(xì)胞癌、2例低分化鱗癌、1例非何杰金氏淋巴瘤。 結(jié)論 免疫組化在肺小細(xì)胞癌的診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [關(guān)鍵詞] 肺小細(xì)胞癌;支氣管鏡活檢;免疫組化

    [中圖分類號(hào)] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616(2014)04-151-04

    An analysis on the significance of immunohistochemistry in the biopsy of small cell lung carcinoma

    WAN Hui1 DAI Yifei2

    1.Department of Pathology, Pu'ai Hospital of Anlu City,Anlu 432600,China;2.Department of Pathology, Central Hospital of Xiaogan,Xiaogan 432000,China

    [Abstract] Objective To explore the diagnosis and differential diagnosis of biopsy specimens of small cell lung carcinoma via immunohistochemistry,considering the tissues acquired via pneumocentesis and bronchoscope are easily to be squeezed so much so that their structures become unclear, which lead to morphological overlaps between small cell lung carcinoma, poorly differentiated squamous carcinoma and lymphoma. Methods 46 patients who were received biopsy of pneumocentesis and bronchoscope were selected and were diagnosed of lung cancer both pathologically and morphologically.The diagnosed cancer tended to be small cell lung carcinoma.Each patients were received immunohistochemistry of CgA,Syn,Sclc,TTF-1, ki67,CK5/7,P63,34βE12 and LCA. Results Among the 46 patients diagnosed of lung cancer,biopsy specimens which tended to be small cell lung carcinoma were confirmed by immunohistochemistry: 43 patients were infected by small cell lung carcinoma,2 lower differentiated squamous carcinoma and 1 non-Hodgkin's lymphoma. Conclusion Immunohistochemistry is of great significance in the diagnosis and differential diagnosis of small cell lung carcinoma.

    [Key words] Small cell lung carcinoma;Bronchoscopic biopsy;Immunohistochemistry

    肺癌是當(dāng)今世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。其中,肺小細(xì)胞癌(small cell lung carcinoma,SCLC)占其15%~20%[1],是肺癌中惡性程度最高的腫瘤。經(jīng)臨床實(shí)踐證實(shí),SCLC對(duì)放化療敏感性比非小細(xì)胞癌高,手術(shù)不是其治療的首選方案,因此治療前的準(zhǔn)確診斷是十分關(guān)鍵的。目前,肺穿刺及支氣管鏡活檢是診斷肺腫瘤的主要手段。但是,由于它取材標(biāo)本數(shù)量有限和易造成取材組織擠壓的原因,單從組織形態(tài)上診斷SCLC是存在一定風(fēng)險(xiǎn),本研究旨在探討相關(guān)蛋白在其診斷及鑒別診斷中的表達(dá)特點(diǎn),來(lái)反映免疫組化在SCLC活檢診斷中的重要性。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集孝感市中心醫(yī)院病理科2005年3月~2013年10月肺穿刺及支氣管鏡活檢病例46例,年齡為40~82歲,中位年齡61.3歲,男女比例約6∶1,病理組織形態(tài)學(xué)均診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌。每個(gè)病例均進(jìn)行CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA免疫組化診斷。

    1.2 方法

    病理組織學(xué)檢查方法 標(biāo)本均用10%中性福爾馬林固定,常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片、HE染色,顯微鏡下根據(jù)形態(tài)學(xué)特征作出診斷。endprint

    免疫組化方法 采用ElivisionTM super免疫組化二步法,切片厚3μm,pH(6.0±0.1)檸檬酸組織抗原修復(fù)液高壓修復(fù),DAB顯色。試劑CgA(SP12)、Syn(SP11)、Sclc(123C3)、TTF-1(8G7G311)、ki67(MIB-1)、CK5/6(D5/16B4)、P63(4A4)、34βE12、LCA(PD7/26+2B11)由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供。

    免疫組化結(jié)果判斷CgA、Syn、Sclc、CK5/6、34βE12、LCA以細(xì)胞漿/細(xì)胞膜中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá);TTF-1、P63、ki67以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。

    2 結(jié)果

    2.1 病理組織學(xué)結(jié)果

    46例診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌的活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA蛋白標(biāo)記證實(shí):43例為SCLC、2例低分化鱗癌、1例非何杰金氏淋巴瘤。SCLC鏡下形態(tài):癌細(xì)胞呈片狀、巢狀、小梁狀分布,細(xì)胞核呈圓形、卵圓形或梭形,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,染色較深,核仁缺乏或不明顯,胞漿稀少,細(xì)胞分界不清,和分裂象易見(jiàn)(圖1);低分化鱗癌鏡下形態(tài):癌細(xì)胞呈片狀、巢狀分布,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)粗或泡狀核,核仁較明顯,胞漿少,和分裂象易見(jiàn)(圖2);非何杰金氏淋巴瘤鏡下形態(tài):腫瘤細(xì)胞排列較松散,細(xì)胞核呈圓形或卵圓形,染色質(zhì)較粗(圖3)。

    圖1 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,免疫組化證實(shí)為

    肺小細(xì)胞癌 (HE×200)

    圖2 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,免疫組化證實(shí)為低分化鱗癌(HE×200)

    圖3 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,

    免疫組化證實(shí)為淋巴瘤(HE×200)

    2.2 免疫組化結(jié)果

    43例SCLC病例中:Sclc的表達(dá)率為100%(43/43例)、TTF-1表達(dá)率為88.4%(38/43例)、CgA表達(dá)率為60.5%(26/43例)、Syn表達(dá)率為93.0%(40/43例)、CK5/6表達(dá)率為2.3%(1/43例),P63、34βE12、LCA均為陰性表達(dá),ki67陽(yáng)性表達(dá)>80%的占51.2%(22/43例),40%~80%的占48.8%(21/43例)(圖4);2例低分化鱗癌病例中:P63、34βE12、CK5/6均為陽(yáng)性表達(dá),Syn有1例灶狀區(qū)表達(dá)陽(yáng)性,CgA、TTF-1、Sclc、LCA均表達(dá)陰性(圖5);1例非何杰金氏淋巴瘤病例中:LCA陽(yáng)性表達(dá),Syn灶狀區(qū)表達(dá)陽(yáng)性,CgA、Sclc、CK5/6、34βE12、TTF-1、P63均陰性表達(dá)(圖6)。

    3 討論

    肺小細(xì)胞癌SCLC具有惡性程度高,生長(zhǎng)迅速,轉(zhuǎn)移發(fā)生早,手術(shù)切除效果差,對(duì)放化療敏感的特點(diǎn)。因此,現(xiàn)在對(duì)其治療不首選手術(shù)治療,治療前的診斷主要依靠肺穿刺和支氣管鏡活檢的病理學(xué)診斷。但是,SCLC的病理學(xué)形態(tài)與不典型類癌是存在共性的,而且活檢標(biāo)本由于取材鉗夾取力度的原因會(huì)造成組織擠壓、變形,我們46例活檢標(biāo)本均存在不同程度的這種現(xiàn)象,而且這種擠壓導(dǎo)致細(xì)胞核深染,結(jié)構(gòu)不清,使得低分化鱗癌與淋巴瘤易誤診為SCLC,46例活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA蛋白標(biāo)記證實(shí)其中2例為低分化鱗癌、1例為非何杰金氏淋巴瘤,并且SCLC、低分化鱗癌、淋巴瘤的臨床治療是不相同的。由此可見(jiàn),僅從形態(tài)學(xué)診斷是很難以作出完全性診斷[2],是存在一定風(fēng)險(xiǎn)的。

    圖4 肺小細(xì)胞癌的IHC結(jié)果(IHC×200)

    A:Sclc陽(yáng)性表達(dá);B:Syn陽(yáng)性表達(dá);C:CgA陽(yáng)性表達(dá);D:TTF-1陽(yáng)性表達(dá);E:P63陰性表達(dá);F:34βE12陰性表達(dá);G:CK5/6陰性表達(dá);H:LCA陰性表達(dá);I:ki67高表達(dá)

    圖5 低分化鱗癌的IHC結(jié)果 (IHC×200)

    A:34βE12陽(yáng)性表達(dá);B:P63陽(yáng)性表達(dá);C:CK5/6陽(yáng)性表達(dá);D:Sclc陰性表達(dá);E: Syn陰性表達(dá);F:CgA陰性表達(dá);G:TTF-1陰性表達(dá);H:LCA陰性表達(dá)

    圖6 淋巴瘤的IHC結(jié)果 (IHC×200)

    A: LCA陽(yáng)性表達(dá);B:Syn灶狀陽(yáng)性表達(dá);C:Sclc陰性表達(dá);D:CgA陰性表達(dá);E:TTF-1陰性表達(dá);F:34βE12陰性表達(dá);G:P63陰性表達(dá);H:CK5/6陰性表達(dá)

    突觸素Syn最常用于診斷神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的特異性標(biāo)志物[3],它幾乎存在于所有的中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)末梢[4],在我們研究的46例病例中,43例SCLC中Syn表達(dá)率為93.0%。SCLC抗體是一種神經(jīng)粘附分子糖蛋白,主要用于肺小細(xì)胞癌和神經(jīng)源性腫瘤的診斷,43例SCLC中Sclc抗體的表達(dá)率為100%。CgA是人類腎上腺髓質(zhì)中含量最高的一種可溶性酸性蛋白,廣泛存在于神經(jīng)元及其神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中,43例SCLC中CgA表達(dá)率為60.5%。TTF-1被Lazzaro等人于1991年發(fā)現(xiàn)除了存在于甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中外,在肺組織吉發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中也存在,而且它的基因擴(kuò)增和蛋白水平的增高存在于多種肺癌中[5],43例SCLC中TTF-1表達(dá)率為88.4%[6]。以上說(shuō)明Syn、Sclc、CgA、TTF-1是診斷SCLC的可靠指標(biāo),這與高福平等人[7]及王銀屏等人[8]的研究相一致,并且4種指標(biāo)聯(lián)合使用診斷的準(zhǔn)確率更高。

    低分化鱗癌雖然細(xì)胞核與SCLC存在區(qū)別,前者細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙或泡狀,核仁明顯,但由于活檢標(biāo)本組織被擠壓,細(xì)胞核也會(huì)呈現(xiàn)與SCLC一樣的濃染現(xiàn)象,導(dǎo)致部分病例在形態(tài)上有重疊[9]。但是,免疫組化標(biāo)記物CgA、TTF-1、Sclc均表達(dá)陰性,Syn2例中有1例僅灶狀區(qū)陽(yáng)性表達(dá),而P63、34βE12、CK5/6均為陽(yáng)性表達(dá),且這三種指標(biāo)在43例SCLC中均陰性表達(dá)。由此可見(jiàn),Syn、Sclc、CgA、TTF-1、P63、34βE12、CK5/6這幾種免疫組化標(biāo)記物聯(lián)合使用可到達(dá)鑒別SCLC和低分化鱗癌的目的。endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Sing S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol,2005,23(4):850-856.

    [2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).《臨床技術(shù)操作規(guī)范》病理學(xué)分冊(cè)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:8.

    [3] 何昊瑋,鄭軍華,高建平,等.腎上腺皮質(zhì)腫瘤神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)特征的初步研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(10):1072-1074.

    [4] 楊春,周輝,白琳琳,等.神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)阿爾海默病大鼠海馬突觸素表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2010,14(10):1803-1807.

    [5] Perner S,Wagner PL,Soltermann A,et al.TTF1 expression in non-small cell lung carcinoma:association with TTF1 gene amplification and improved survival[J].J Pathol,2009,217(1):65-72.

    [6] 彭光銀,范欽和,陳炳宇.肺小細(xì)胞癌45例臨床病理分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2011,11(10):2458-2459.

    [7] 高福平,魏謹(jǐn).Syn及CD56在肺小細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J].臨床肺科雜志,2012,17(5):900-901.

    [8] 王銀萍,曲麗梅,郝玉丹.肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢的陷阱—附64例免疫組化研究[J].中國(guó)肺癌雜志,2009,12(8):901-904.

    [9] 牛春波,賈飛勇,辛華,等.免疫組化在肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本鑒別診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011,15(6):1062-1063.

    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Sing S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol,2005,23(4):850-856.

    [2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).《臨床技術(shù)操作規(guī)范》病理學(xué)分冊(cè)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:8.

    [3] 何昊瑋,鄭軍華,高建平,等.腎上腺皮質(zhì)腫瘤神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)特征的初步研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(10):1072-1074.

    [4] 楊春,周輝,白琳琳,等.神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)阿爾海默病大鼠海馬突觸素表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2010,14(10):1803-1807.

    [5] Perner S,Wagner PL,Soltermann A,et al.TTF1 expression in non-small cell lung carcinoma:association with TTF1 gene amplification and improved survival[J].J Pathol,2009,217(1):65-72.

    [6] 彭光銀,范欽和,陳炳宇.肺小細(xì)胞癌45例臨床病理分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2011,11(10):2458-2459.

    [7] 高福平,魏謹(jǐn).Syn及CD56在肺小細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J].臨床肺科雜志,2012,17(5):900-901.

    [8] 王銀萍,曲麗梅,郝玉丹.肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢的陷阱—附64例免疫組化研究[J].中國(guó)肺癌雜志,2009,12(8):901-904.

    [9] 牛春波,賈飛勇,辛華,等.免疫組化在肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本鑒別診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011,15(6):1062-1063.

    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Sing S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol,2005,23(4):850-856.

    [2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).《臨床技術(shù)操作規(guī)范》病理學(xué)分冊(cè)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:8.

    [3] 何昊瑋,鄭軍華,高建平,等.腎上腺皮質(zhì)腫瘤神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)特征的初步研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(10):1072-1074.

    [4] 楊春,周輝,白琳琳,等.神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)阿爾海默病大鼠海馬突觸素表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2010,14(10):1803-1807.

    [5] Perner S,Wagner PL,Soltermann A,et al.TTF1 expression in non-small cell lung carcinoma:association with TTF1 gene amplification and improved survival[J].J Pathol,2009,217(1):65-72.

    [6] 彭光銀,范欽和,陳炳宇.肺小細(xì)胞癌45例臨床病理分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2011,11(10):2458-2459.

    [7] 高福平,魏謹(jǐn).Syn及CD56在肺小細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J].臨床肺科雜志,2012,17(5):900-901.

    [8] 王銀萍,曲麗梅,郝玉丹.肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢的陷阱—附64例免疫組化研究[J].中國(guó)肺癌雜志,2009,12(8):901-904.

    [9] 牛春波,賈飛勇,辛華,等.免疫組化在肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本鑒別診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011,15(6):1062-1063.

    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

    猜你喜歡
    免疫組化
    免疫組化病理技術(shù)及質(zhì)量控制方式的研究
    病理科為什么要做免疫組化
    胃腸道間質(zhì)瘤病臨床病理及免疫組化特征分析
    bFGF和Endostatin在宮頸癌中的表達(dá)
    配對(duì)盒基因2和CD44基因在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義
    自動(dòng)免疫組化染色與人工染色對(duì)CerbB—2的影響
    膀胱癌組織中c—Met的表達(dá)及意義
    Livin和Survivin在卵巢癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究
    前列腺偶發(fā)癌的臨床病理分析
    肺尤文肉瘤1例報(bào)告
    啦啦啦 在线观看视频| 久久精品成人免费网站| 午夜福利一区二区在线看| 天堂8中文在线网| av网站免费在线观看视频| 午夜两性在线视频| 国产黄频视频在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日韩中文字幕视频在线看片| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 波多野结衣一区麻豆| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产野战对白在线观看| 色老头精品视频在线观看| 一进一出抽搐动态| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久久精品免费免费高清| 日日夜夜操网爽| 麻豆av在线久日| 免费黄频网站在线观看国产| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久热这里只有精品99| 国产一级毛片在线| 中文字幕av电影在线播放| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产欧美亚洲国产| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 脱女人内裤的视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 久久久久久人人人人人| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产成人啪精品午夜网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 成人免费观看视频高清| 亚洲精品国产av蜜桃| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久影院123| 美女大奶头黄色视频| 丁香六月天网| 999精品在线视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | a级毛片在线看网站| 韩国高清视频一区二区三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品九九99| 国产日韩欧美亚洲二区| 成人影院久久| 欧美日韩福利视频一区二区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 欧美午夜高清在线| 99久久人妻综合| 曰老女人黄片| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 999久久久国产精品视频| 咕卡用的链子| 极品人妻少妇av视频| 亚洲人成电影观看| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲,欧美精品.| 国产日韩欧美亚洲二区| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 麻豆国产av国片精品| 亚洲九九香蕉| 久久女婷五月综合色啪小说| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 后天国语完整版免费观看| 国产精品二区激情视频| 黑人操中国人逼视频| av一本久久久久| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产av一区二区精品久久| 人妻一区二区av| videos熟女内射| 一区福利在线观看| 亚洲欧美激情在线| 国产精品久久久久久精品电影小说| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 99香蕉大伊视频| 最新的欧美精品一区二区| 久久国产精品大桥未久av| 男女床上黄色一级片免费看| 国产成人系列免费观看| 亚洲 国产 在线| 韩国高清视频一区二区三区| 99九九在线精品视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 欧美在线一区亚洲| 免费看十八禁软件| 亚洲av美国av| 天天影视国产精品| 99热全是精品| 国产精品1区2区在线观看. | av国产精品久久久久影院| 免费在线观看黄色视频的| 这个男人来自地球电影免费观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产亚洲精品第一综合不卡| 男人爽女人下面视频在线观看| 色播在线永久视频| 看免费av毛片| 亚洲情色 制服丝袜| 夫妻午夜视频| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久中文字幕一级| 9191精品国产免费久久| 多毛熟女@视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品第一国产精品| 久久久久精品国产欧美久久久 | 日本91视频免费播放| 成人国产一区最新在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 99久久综合免费| 操美女的视频在线观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲精品第二区| 在线观看舔阴道视频| 正在播放国产对白刺激| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 日韩制服骚丝袜av| 99热网站在线观看| 国产精品九九99| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 热99久久久久精品小说推荐| 考比视频在线观看| 日韩电影二区| 午夜福利视频在线观看免费| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产精品久久久久久精品古装| 日韩一区二区三区影片| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩免费高清中文字幕av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产在线视频一区二区| 久久狼人影院| 蜜桃在线观看..| 国产精品熟女久久久久浪| 大码成人一级视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成年人黄色毛片网站| 叶爱在线成人免费视频播放| 成在线人永久免费视频| 久久中文字幕一级| 免费观看av网站的网址| 男女之事视频高清在线观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲性夜色夜夜综合| av有码第一页| 天天添夜夜摸| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 少妇的丰满在线观看| 又大又爽又粗| 麻豆国产av国片精品| 在线av久久热| 黄片小视频在线播放| 欧美日韩亚洲高清精品| 18禁观看日本| 国产真人三级小视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 超碰97精品在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 99久久99久久久精品蜜桃| 在线 av 中文字幕| 蜜桃国产av成人99| 秋霞在线观看毛片| 91大片在线观看| 国产片内射在线| 午夜免费鲁丝| av国产精品久久久久影院| 脱女人内裤的视频| 99九九在线精品视频| 欧美性长视频在线观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 99国产精品一区二区三区| 精品福利观看| 在线观看www视频免费| 欧美成人午夜精品| 高清欧美精品videossex| 午夜91福利影院| 久久久久网色| 午夜精品国产一区二区电影| 久久精品国产综合久久久| 高清av免费在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品国产色婷婷电影| 精品熟女少妇八av免费久了| 热99re8久久精品国产| av片东京热男人的天堂| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 黄色a级毛片大全视频| 真人做人爱边吃奶动态| 搡老熟女国产l中国老女人| www日本在线高清视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 国产精品免费视频内射| 丝袜在线中文字幕| 涩涩av久久男人的天堂| 久久av网站| 国产在线免费精品| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲男人天堂网一区| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品成人在线| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 91国产中文字幕| 国产精品亚洲av一区麻豆| 黑人猛操日本美女一级片| 国产成人免费观看mmmm| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲精品久久午夜乱码| 一本大道久久a久久精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲精品第二区| 高清欧美精品videossex| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 五月天丁香电影| 国产成人欧美| 少妇精品久久久久久久| 国产主播在线观看一区二区| 在线天堂中文资源库| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产成人影院久久av| 色婷婷av一区二区三区视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 美女福利国产在线| 9热在线视频观看99| 老司机靠b影院| 国产真人三级小视频在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 99国产综合亚洲精品| 国产精品一区二区在线不卡| 大陆偷拍与自拍| 午夜老司机福利片| 极品人妻少妇av视频| 一级毛片电影观看| 男男h啪啪无遮挡| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 少妇粗大呻吟视频| av天堂在线播放| 精品视频人人做人人爽| 国产成人精品在线电影| 亚洲黑人精品在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 一级毛片女人18水好多| 一级毛片电影观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 日本av手机在线免费观看| 亚洲成人手机| 亚洲欧美激情在线| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产一卡二卡三卡精品| 美女大奶头黄色视频| 国产精品偷伦视频观看了| 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 欧美久久黑人一区二区| 高清欧美精品videossex| 亚洲三区欧美一区| tube8黄色片| 国产av精品麻豆| 久久久国产成人免费| 欧美xxⅹ黑人| 中文字幕人妻熟女乱码| 人人妻人人澡人人看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲色图综合在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 丁香六月天网| 亚洲国产日韩一区二区| 69av精品久久久久久 | 视频在线观看一区二区三区| 精品久久久久久电影网| 91老司机精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 新久久久久国产一级毛片| 久久久水蜜桃国产精品网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 色婷婷av一区二区三区视频| 日本av手机在线免费观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 在线天堂中文资源库| 欧美精品一区二区大全| 精品一区二区三区四区五区乱码| 色视频在线一区二区三区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 午夜影院在线不卡| 成年人免费黄色播放视频| 久久久久国内视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲五月色婷婷综合| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 黄色视频,在线免费观看| 人人妻人人澡人人看| 黄色毛片三级朝国网站| 丝袜在线中文字幕| kizo精华| 超色免费av| 日韩大片免费观看网站| 制服人妻中文乱码| 亚洲中文字幕日韩| a级片在线免费高清观看视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| e午夜精品久久久久久久| 淫妇啪啪啪对白视频 | 成人av一区二区三区在线看 | 中文字幕色久视频| 国产精品久久久久成人av| 欧美日韩黄片免| 一个人免费看片子| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲av成人一区二区三| 麻豆乱淫一区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 国产av精品麻豆| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久青草综合色| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产深夜福利视频在线观看| 久久久久精品人妻al黑| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久久精品94久久精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产熟女午夜一区二区三区| 一区福利在线观看| 天堂中文最新版在线下载| 在线av久久热| av电影中文网址| 涩涩av久久男人的天堂| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲国产av影院在线观看| 女性被躁到高潮视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久久久视频综合| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美日韩一级在线毛片| 久久青草综合色| 悠悠久久av| 岛国毛片在线播放| 国产国语露脸激情在线看| 日日夜夜操网爽| 悠悠久久av| 女人久久www免费人成看片| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久精品国产综合久久久| 在线观看一区二区三区激情| 高清黄色对白视频在线免费看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产亚洲av高清不卡| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 黄色片一级片一级黄色片| 窝窝影院91人妻| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产国语露脸激情在线看| 99久久综合免费| tube8黄色片| 69av精品久久久久久 | 极品人妻少妇av视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 啦啦啦免费观看视频1| 久久99一区二区三区| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲专区国产一区二区| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产99久久九九免费精品| 成人国产一区最新在线观看| 99国产综合亚洲精品| 精品欧美一区二区三区在线| 手机成人av网站| 欧美午夜高清在线| tocl精华| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 欧美在线黄色| 亚洲精华国产精华精| 搡老乐熟女国产| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美一级毛片孕妇| 免费观看a级毛片全部| 午夜日韩欧美国产| av在线老鸭窝| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 欧美日韩av久久| 久久中文看片网| 精品国产乱码久久久久久小说| 热re99久久国产66热| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美在线一区亚洲| 两个人看的免费小视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲av美国av| 久久这里只有精品19| 热99国产精品久久久久久7| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲美女黄色视频免费看| 热re99久久国产66热| 另类精品久久| 日韩欧美一区视频在线观看| 久久免费观看电影| 极品人妻少妇av视频| 老司机亚洲免费影院| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美黑人精品巨大| 91国产中文字幕| 一区二区三区乱码不卡18| 在线永久观看黄色视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| www日本在线高清视频| 在线精品无人区一区二区三| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 欧美日韩精品网址| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 99久久国产精品久久久| 精品福利观看| 亚洲av电影在线进入| 欧美大码av| 久久久国产欧美日韩av| 这个男人来自地球电影免费观看| 精品少妇内射三级| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产麻豆69| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产区一区二久久| 亚洲精品成人av观看孕妇| 女人久久www免费人成看片| av网站在线播放免费| 国产一级毛片在线| 男女免费视频国产| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品亚洲成a人片在线观看| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲国产欧美网| 精品人妻在线不人妻| 国产欧美日韩综合在线一区二区| www日本在线高清视频| 十八禁网站网址无遮挡| av一本久久久久| 久热这里只有精品99| 性少妇av在线| 午夜精品国产一区二区电影| 午夜福利在线观看吧| 国产男女内射视频| 成人av一区二区三区在线看 | 真人做人爱边吃奶动态| 日韩欧美一区视频在线观看| 一区二区av电影网| 国产免费视频播放在线视频| 久久狼人影院| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲情色 制服丝袜| 精品一区二区三卡| 亚洲av男天堂| 99热全是精品| 中文字幕人妻丝袜制服| 淫妇啪啪啪对白视频 | 日韩三级视频一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| 91字幕亚洲| 日韩大码丰满熟妇| 人妻人人澡人人爽人人| 人妻一区二区av| 人妻久久中文字幕网| 嫩草影视91久久| 超色免费av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 性高湖久久久久久久久免费观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 男女午夜视频在线观看| 国产av又大| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲国产av新网站| 国产亚洲一区二区精品| 满18在线观看网站| 亚洲国产欧美网| 99国产精品免费福利视频| 亚洲avbb在线观看| 97在线人人人人妻| 午夜精品久久久久久毛片777| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲av电影在线进入| 久久热在线av| 久热这里只有精品99| 亚洲精品乱久久久久久| 久久久久久人人人人人| 超色免费av| 一二三四在线观看免费中文在| 黄频高清免费视频| 美女福利国产在线| 99国产精品免费福利视频| 午夜成年电影在线免费观看| 老熟女久久久| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品少妇内射三级| 久久久水蜜桃国产精品网| av天堂久久9| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人国产av品久久久| 国产高清videossex| 啦啦啦免费观看视频1| 日本vs欧美在线观看视频| 三上悠亚av全集在线观看| 成年人黄色毛片网站| 国产精品1区2区在线观看. | 国产一区二区在线观看av| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲精品自拍成人| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久中文字幕一级| 亚洲成人手机| 亚洲国产日韩一区二区| 丰满迷人的少妇在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲综合色网址| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 日韩制服骚丝袜av| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产精品偷伦视频观看了| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品少妇内射三级| 亚洲中文av在线| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 色婷婷久久久亚洲欧美| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产av一区二区精品久久| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产又爽黄色视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品久久久久久精品古装| 成年人黄色毛片网站| 久久久精品区二区三区| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲一区二区三区欧美精品| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 美女午夜性视频免费| 两个人看的免费小视频| 久久久国产精品麻豆| 日日夜夜操网爽| 国产三级黄色录像| 久久国产亚洲av麻豆专区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲精品久久午夜乱码| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 久久久国产一区二区| 成年动漫av网址| 高清在线国产一区| 免费在线观看完整版高清| 国产人伦9x9x在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产主播在线观看一区二区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 两个人免费观看高清视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲国产精品一区三区| 久久av网站| 脱女人内裤的视频| 国产精品.久久久| 在线观看免费高清a一片| 国产av精品麻豆| 欧美性长视频在线观看| cao死你这个sao货|