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    免疫組化在肺小細(xì)胞癌活檢診斷中的重要性

    2014-06-28 13:30萬(wàn)輝戴一菲
    中國(guó)醫(yī)藥科學(xué) 2014年4期
    關(guān)鍵詞:免疫組化

    萬(wàn)輝??戴一菲

    [摘要] 目的 通過(guò)肺穿刺及支氣管鏡獲得的組織極易因擠壓過(guò)甚而結(jié)構(gòu)不清,使肺小細(xì)胞癌與低分化鱗癌、淋巴瘤間會(huì)出現(xiàn)形態(tài)學(xué)上的重疊,我們通過(guò)免疫組化探討肺小細(xì)胞癌活檢標(biāo)本的診斷及鑒別診斷。 方法 收集肺穿刺及支氣管鏡活檢病例46例,病理組織形態(tài)學(xué)均診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌,每個(gè)病例均進(jìn)行CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA免疫組化診斷。 結(jié)果 46例診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌的活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化證實(shí):43例為肺小細(xì)胞癌、2例低分化鱗癌、1例非何杰金氏淋巴瘤。 結(jié)論 免疫組化在肺小細(xì)胞癌的診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [關(guān)鍵詞] 肺小細(xì)胞癌;支氣管鏡活檢;免疫組化

    [中圖分類號(hào)] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616(2014)04-151-04

    An analysis on the significance of immunohistochemistry in the biopsy of small cell lung carcinoma

    WAN Hui1 DAI Yifei2

    1.Department of Pathology, Pu'ai Hospital of Anlu City,Anlu 432600,China;2.Department of Pathology, Central Hospital of Xiaogan,Xiaogan 432000,China

    [Abstract] Objective To explore the diagnosis and differential diagnosis of biopsy specimens of small cell lung carcinoma via immunohistochemistry,considering the tissues acquired via pneumocentesis and bronchoscope are easily to be squeezed so much so that their structures become unclear, which lead to morphological overlaps between small cell lung carcinoma, poorly differentiated squamous carcinoma and lymphoma. Methods 46 patients who were received biopsy of pneumocentesis and bronchoscope were selected and were diagnosed of lung cancer both pathologically and morphologically.The diagnosed cancer tended to be small cell lung carcinoma.Each patients were received immunohistochemistry of CgA,Syn,Sclc,TTF-1, ki67,CK5/7,P63,34βE12 and LCA. Results Among the 46 patients diagnosed of lung cancer,biopsy specimens which tended to be small cell lung carcinoma were confirmed by immunohistochemistry: 43 patients were infected by small cell lung carcinoma,2 lower differentiated squamous carcinoma and 1 non-Hodgkin's lymphoma. Conclusion Immunohistochemistry is of great significance in the diagnosis and differential diagnosis of small cell lung carcinoma.

    [Key words] Small cell lung carcinoma;Bronchoscopic biopsy;Immunohistochemistry

    肺癌是當(dāng)今世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。其中,肺小細(xì)胞癌(small cell lung carcinoma,SCLC)占其15%~20%[1],是肺癌中惡性程度最高的腫瘤。經(jīng)臨床實(shí)踐證實(shí),SCLC對(duì)放化療敏感性比非小細(xì)胞癌高,手術(shù)不是其治療的首選方案,因此治療前的準(zhǔn)確診斷是十分關(guān)鍵的。目前,肺穿刺及支氣管鏡活檢是診斷肺腫瘤的主要手段。但是,由于它取材標(biāo)本數(shù)量有限和易造成取材組織擠壓的原因,單從組織形態(tài)上診斷SCLC是存在一定風(fēng)險(xiǎn),本研究旨在探討相關(guān)蛋白在其診斷及鑒別診斷中的表達(dá)特點(diǎn),來(lái)反映免疫組化在SCLC活檢診斷中的重要性。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集孝感市中心醫(yī)院病理科2005年3月~2013年10月肺穿刺及支氣管鏡活檢病例46例,年齡為40~82歲,中位年齡61.3歲,男女比例約6∶1,病理組織形態(tài)學(xué)均診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌。每個(gè)病例均進(jìn)行CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA免疫組化診斷。

    1.2 方法

    病理組織學(xué)檢查方法 標(biāo)本均用10%中性福爾馬林固定,常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片、HE染色,顯微鏡下根據(jù)形態(tài)學(xué)特征作出診斷。endprint

    免疫組化方法 采用ElivisionTM super免疫組化二步法,切片厚3μm,pH(6.0±0.1)檸檬酸組織抗原修復(fù)液高壓修復(fù),DAB顯色。試劑CgA(SP12)、Syn(SP11)、Sclc(123C3)、TTF-1(8G7G311)、ki67(MIB-1)、CK5/6(D5/16B4)、P63(4A4)、34βE12、LCA(PD7/26+2B11)由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供。

    免疫組化結(jié)果判斷CgA、Syn、Sclc、CK5/6、34βE12、LCA以細(xì)胞漿/細(xì)胞膜中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá);TTF-1、P63、ki67以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。

    2 結(jié)果

    2.1 病理組織學(xué)結(jié)果

    46例診斷為肺癌,傾向于肺小細(xì)胞癌的活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA蛋白標(biāo)記證實(shí):43例為SCLC、2例低分化鱗癌、1例非何杰金氏淋巴瘤。SCLC鏡下形態(tài):癌細(xì)胞呈片狀、巢狀、小梁狀分布,細(xì)胞核呈圓形、卵圓形或梭形,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,染色較深,核仁缺乏或不明顯,胞漿稀少,細(xì)胞分界不清,和分裂象易見(jiàn)(圖1);低分化鱗癌鏡下形態(tài):癌細(xì)胞呈片狀、巢狀分布,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)粗或泡狀核,核仁較明顯,胞漿少,和分裂象易見(jiàn)(圖2);非何杰金氏淋巴瘤鏡下形態(tài):腫瘤細(xì)胞排列較松散,細(xì)胞核呈圓形或卵圓形,染色質(zhì)較粗(圖3)。

    圖1 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,免疫組化證實(shí)為

    肺小細(xì)胞癌 (HE×200)

    圖2 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,免疫組化證實(shí)為低分化鱗癌(HE×200)

    圖3 支氣管鏡活檢傾向于肺小細(xì)胞癌,

    免疫組化證實(shí)為淋巴瘤(HE×200)

    2.2 免疫組化結(jié)果

    43例SCLC病例中:Sclc的表達(dá)率為100%(43/43例)、TTF-1表達(dá)率為88.4%(38/43例)、CgA表達(dá)率為60.5%(26/43例)、Syn表達(dá)率為93.0%(40/43例)、CK5/6表達(dá)率為2.3%(1/43例),P63、34βE12、LCA均為陰性表達(dá),ki67陽(yáng)性表達(dá)>80%的占51.2%(22/43例),40%~80%的占48.8%(21/43例)(圖4);2例低分化鱗癌病例中:P63、34βE12、CK5/6均為陽(yáng)性表達(dá),Syn有1例灶狀區(qū)表達(dá)陽(yáng)性,CgA、TTF-1、Sclc、LCA均表達(dá)陰性(圖5);1例非何杰金氏淋巴瘤病例中:LCA陽(yáng)性表達(dá),Syn灶狀區(qū)表達(dá)陽(yáng)性,CgA、Sclc、CK5/6、34βE12、TTF-1、P63均陰性表達(dá)(圖6)。

    3 討論

    肺小細(xì)胞癌SCLC具有惡性程度高,生長(zhǎng)迅速,轉(zhuǎn)移發(fā)生早,手術(shù)切除效果差,對(duì)放化療敏感的特點(diǎn)。因此,現(xiàn)在對(duì)其治療不首選手術(shù)治療,治療前的診斷主要依靠肺穿刺和支氣管鏡活檢的病理學(xué)診斷。但是,SCLC的病理學(xué)形態(tài)與不典型類癌是存在共性的,而且活檢標(biāo)本由于取材鉗夾取力度的原因會(huì)造成組織擠壓、變形,我們46例活檢標(biāo)本均存在不同程度的這種現(xiàn)象,而且這種擠壓導(dǎo)致細(xì)胞核深染,結(jié)構(gòu)不清,使得低分化鱗癌與淋巴瘤易誤診為SCLC,46例活檢標(biāo)本經(jīng)免疫組化CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA蛋白標(biāo)記證實(shí)其中2例為低分化鱗癌、1例為非何杰金氏淋巴瘤,并且SCLC、低分化鱗癌、淋巴瘤的臨床治療是不相同的。由此可見(jiàn),僅從形態(tài)學(xué)診斷是很難以作出完全性診斷[2],是存在一定風(fēng)險(xiǎn)的。

    圖4 肺小細(xì)胞癌的IHC結(jié)果(IHC×200)

    A:Sclc陽(yáng)性表達(dá);B:Syn陽(yáng)性表達(dá);C:CgA陽(yáng)性表達(dá);D:TTF-1陽(yáng)性表達(dá);E:P63陰性表達(dá);F:34βE12陰性表達(dá);G:CK5/6陰性表達(dá);H:LCA陰性表達(dá);I:ki67高表達(dá)

    圖5 低分化鱗癌的IHC結(jié)果 (IHC×200)

    A:34βE12陽(yáng)性表達(dá);B:P63陽(yáng)性表達(dá);C:CK5/6陽(yáng)性表達(dá);D:Sclc陰性表達(dá);E: Syn陰性表達(dá);F:CgA陰性表達(dá);G:TTF-1陰性表達(dá);H:LCA陰性表達(dá)

    圖6 淋巴瘤的IHC結(jié)果 (IHC×200)

    A: LCA陽(yáng)性表達(dá);B:Syn灶狀陽(yáng)性表達(dá);C:Sclc陰性表達(dá);D:CgA陰性表達(dá);E:TTF-1陰性表達(dá);F:34βE12陰性表達(dá);G:P63陰性表達(dá);H:CK5/6陰性表達(dá)

    突觸素Syn最常用于診斷神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的特異性標(biāo)志物[3],它幾乎存在于所有的中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)末梢[4],在我們研究的46例病例中,43例SCLC中Syn表達(dá)率為93.0%。SCLC抗體是一種神經(jīng)粘附分子糖蛋白,主要用于肺小細(xì)胞癌和神經(jīng)源性腫瘤的診斷,43例SCLC中Sclc抗體的表達(dá)率為100%。CgA是人類腎上腺髓質(zhì)中含量最高的一種可溶性酸性蛋白,廣泛存在于神經(jīng)元及其神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中,43例SCLC中CgA表達(dá)率為60.5%。TTF-1被Lazzaro等人于1991年發(fā)現(xiàn)除了存在于甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中外,在肺組織吉發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中也存在,而且它的基因擴(kuò)增和蛋白水平的增高存在于多種肺癌中[5],43例SCLC中TTF-1表達(dá)率為88.4%[6]。以上說(shuō)明Syn、Sclc、CgA、TTF-1是診斷SCLC的可靠指標(biāo),這與高福平等人[7]及王銀屏等人[8]的研究相一致,并且4種指標(biāo)聯(lián)合使用診斷的準(zhǔn)確率更高。

    低分化鱗癌雖然細(xì)胞核與SCLC存在區(qū)別,前者細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙或泡狀,核仁明顯,但由于活檢標(biāo)本組織被擠壓,細(xì)胞核也會(huì)呈現(xiàn)與SCLC一樣的濃染現(xiàn)象,導(dǎo)致部分病例在形態(tài)上有重疊[9]。但是,免疫組化標(biāo)記物CgA、TTF-1、Sclc均表達(dá)陰性,Syn2例中有1例僅灶狀區(qū)陽(yáng)性表達(dá),而P63、34βE12、CK5/6均為陽(yáng)性表達(dá),且這三種指標(biāo)在43例SCLC中均陰性表達(dá)。由此可見(jiàn),Syn、Sclc、CgA、TTF-1、P63、34βE12、CK5/6這幾種免疫組化標(biāo)記物聯(lián)合使用可到達(dá)鑒別SCLC和低分化鱗癌的目的。endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Sing S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol,2005,23(4):850-856.

    [2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).《臨床技術(shù)操作規(guī)范》病理學(xué)分冊(cè)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:8.

    [3] 何昊瑋,鄭軍華,高建平,等.腎上腺皮質(zhì)腫瘤神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)特征的初步研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(10):1072-1074.

    [4] 楊春,周輝,白琳琳,等.神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)阿爾海默病大鼠海馬突觸素表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2010,14(10):1803-1807.

    [5] Perner S,Wagner PL,Soltermann A,et al.TTF1 expression in non-small cell lung carcinoma:association with TTF1 gene amplification and improved survival[J].J Pathol,2009,217(1):65-72.

    [6] 彭光銀,范欽和,陳炳宇.肺小細(xì)胞癌45例臨床病理分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2011,11(10):2458-2459.

    [7] 高福平,魏謹(jǐn).Syn及CD56在肺小細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J].臨床肺科雜志,2012,17(5):900-901.

    [8] 王銀萍,曲麗梅,郝玉丹.肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢的陷阱—附64例免疫組化研究[J].中國(guó)肺癌雜志,2009,12(8):901-904.

    [9] 牛春波,賈飛勇,辛華,等.免疫組化在肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本鑒別診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011,15(6):1062-1063.

    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

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    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

    肺淋巴瘤的發(fā)病率在肺惡性腫瘤中所占不到0.5%[10],在活檢標(biāo)本中它的細(xì)胞形態(tài)由于取材原因與SCLC有重疊,但是白細(xì)胞共同抗原LCA是它的特異性標(biāo)記物,在43例SCLC中它的表達(dá)均為陰性,在淋巴瘤中陽(yáng)性表達(dá)。因此,LCA是鑒別SCLC與淋巴瘤的特異性指標(biāo)。

    綜上所述,肺穿刺及支氣管鏡活檢僅從形態(tài)學(xué)上診斷肺小細(xì)胞癌是很片面的,也存在風(fēng)險(xiǎn),它需要與低分化鱗癌、不典型類癌及淋巴瘤相鑒別,而且這四種疾病的治療方法是不同的。因此,免疫組化標(biāo)記物CgA、Syn、Sclc、TTF-1、ki67、CK5/6、P63、34βE12、LCA在其診斷與鑒別診斷中具有十分重要的意義。

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    [10] Ferraro P,Trastek VF,Adlakha H,et al.Primary non-Hodgkin's lymphoma of lung[J].Ann Thorac Surg,2000,69(4):993-997.

    (收稿日期:2013-12-06)endprint

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