３個(gè)廠家４種口蹄疫疫苗對(duì)塔河馬鹿免疫效果評(píng)價(jià)

摘要：為進(jìn)一步做好塔河馬鹿口蹄疫免疫工作，找到最佳免疫程序。采用３個(gè)廠家４種口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗和不同免疫程序?qū)ξ疵庖哌^的塔河馬鹿進(jìn)行免疫試驗(yàn)，采用液相阻斷ELISA檢測(cè)其免疫抗體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：使用Ｃ廠的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活高端疫苗免疫2次就可以使抗體效價(jià)達(dá)到合格；使用B、C廠的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活統(tǒng)采疫苗免疫3次可使抗體效價(jià)達(dá)到合格；Ａ廠的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活統(tǒng)采疫苗免疫３次不合格（除成年公鹿）。本試驗(yàn)為鹿場(chǎng)口蹄疫疫苗免疫程序的提供參考。

關(guān)鍵詞：塔河馬鹿；口蹄疫疫苗；免疫評(píng)估

塔河馬鹿為世界上唯一棲息在荒漠中的馬鹿亞種，分布在新疆塔里木河流域。新疆兵團(tuán)第二師鐵門關(guān)市為最大的養(yǎng)殖基地。2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定馬鹿為特種家畜，納入家畜管理，需免疫口蹄疫疫苗?？谔阋呤钱?dāng)今世界上最為嚴(yán)重的家畜傳染病之一，危害豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動(dòng)物[1]，該病傳播迅速，發(fā)病率高，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（WOAH）規(guī)定必須報(bào)告的傳染病之一，為一類動(dòng)物疫病。該病不但引起幼畜死亡，生產(chǎn)性能下降，而且嚴(yán)重影響家畜及畜產(chǎn)品流通和貿(mào)易活動(dòng)。目前中國(guó)沒有鹿專用的口蹄疫疫苗，故本試驗(yàn)選用牛羊的口蹄疫疫苗進(jìn)行試驗(yàn)，通過對(duì)比分析3個(gè)廠家4種疫苗的抗體水平以及評(píng)價(jià)疫苗免疫效果，為鹿場(chǎng)口蹄疫疫苗免疫程序制定提供參考。

1 材料和方法

1.1 鹿的選擇

母鹿共240頭，其中2歲以上成年母鹿120頭，70日齡左右雌性仔鹿120頭。公鹿共240頭，其中2歲以上成年公鹿120頭，70日齡左右公仔鹿120頭。以上鹿均健康且未免疫過口蹄疫疫苗。

1.2 主要試劑

疫苗：A、B、C 3個(gè)廠家生產(chǎn)的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活統(tǒng)采苗以及C廠的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活高端商品苗。

檢測(cè)試劑：蘭獸研O型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)。

1.3 試驗(yàn)方法

1）小群試驗(yàn)。采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液1 mL/只對(duì)70日齡左右的20只（公母各半）斷奶仔鹿進(jìn)行麻醉，肌肉注射1.5 mL口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液2 mL解除麻醉，觀察應(yīng)激反應(yīng)情況；采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液5 mL/只對(duì)20頭（公母各半）2歲以上成年鹿進(jìn)行麻醉，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液10 mL解除麻醉，觀察應(yīng)激反應(yīng)情況。對(duì)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)的肌注腎上腺素或地塞米松急救。

2）正式實(shí)驗(yàn)。①仔鹿免疫和采樣：吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液1 mL/只對(duì)70日齡左右斷奶仔鹿進(jìn)行麻醉，無菌頸靜脈采血3 mL，肌肉注射1.5 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液3 mL/只解除麻醉，觀察鹿反應(yīng)，分別于第1天采血檢測(cè)O型口蹄疫抗體和第1次免疫、第31天采血檢測(cè)和第2次免疫、第61天采血檢測(cè)和第3次免疫、第241天采血檢測(cè)。血樣室溫靜置2 h后，離心收集血清；②成年鹿免疫和采樣：采用吹管肌肉注射10%鹽酸賽拉嗪注射液5 mL/只對(duì)成年鹿進(jìn)行麻醉，無菌頸靜脈采血3 mL，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%鹽酸苯噁唑注射液10 mL/只解除麻醉，觀察鹿反應(yīng)，分別于第1天采血檢測(cè)O型口蹄疫抗體和第1次免疫、第31天采血檢測(cè)和第2次免疫、第61天采血檢測(cè)和第3次免疫、第241天采血檢測(cè)。血樣室溫靜置2 h后，離心收集血清。

分組：每組鹿30頭，共16組，分別使用A、B、C廠家4種疫苗。

1.4 檢測(cè)方法

按照試劑盒說明書對(duì)采集血清進(jìn)行O型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)。

判定標(biāo)準(zhǔn)：O型口蹄疫免疫抗體效價(jià)＞27為陽(yáng)性，陽(yáng)性率70%以上為合格。

1.5 數(shù)據(jù)處理：運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 小群試驗(yàn)

1頭仔鹿和1頭成年鹿出現(xiàn)注射部位紅腫情況，1天后消失。1頭鹿仔鹿注射出現(xiàn)厭食、精神不振的情況，第2天恢復(fù)正常。其余未見不良反應(yīng)。

2.2 O型口蹄疫抗體結(jié)果

免疫次數(shù)比較：第1次免疫后30天所有鹿抗體效價(jià)不合格（陽(yáng)性率18.3%）；第2次免疫后30天抗體效價(jià)不合格（陽(yáng)性率61.9%，顯著高于第1次）；第3次免疫后抗體效價(jià)合格（陽(yáng)性率81.0%，顯著高于第1、2次）；241天后抗體效價(jià)不合格（陽(yáng)性率66.9%）。雌性仔鹿第1次免疫后抗體效價(jià)陽(yáng)性率12.5%和成年母鹿差異不顯著；雌性仔鹿第2次免疫后抗體效價(jià)陽(yáng)性率56.7%，顯著低于成年母鹿65.8%；第3次免疫后均合格，效價(jià)陽(yáng)性率差異不顯著。公仔鹿第1次免疫后抗體效價(jià)陽(yáng)性率22.5%和成年公鹿23.3%差異不顯著；公仔鹿第2次免疫后抗體效價(jià)陽(yáng)性率56.7%顯著低于成年公鹿的68.3%；第3次免疫后均合格，效價(jià)陽(yáng)性率差異不顯著。

不同廠家比較：對(duì)雌性仔鹿和成年母鹿：第1次免疫3個(gè)廠家4種疫苗抗體效價(jià)均不合格；第2次免疫后只有C廠家高端苗抗體效價(jià)合格，分別達(dá)到76.7%和80.0%，均顯著高于A、B、C廠家統(tǒng)采苗；3次免疫后A廠家疫苗抗體效價(jià)不合格，其他廠家均合格，抗體效價(jià)在70%以上；免疫第241天后B、C廠家抗體效價(jià)均合格。對(duì)公仔鹿和成年公鹿：第1次免疫3個(gè)廠家4種疫苗抗體效價(jià)均不合格；第2次免疫后只有C廠家高端抗體效價(jià)合格，達(dá)到73.3%、83.3%，公仔鹿C廠家高端苗顯著高于A、C廠家統(tǒng)采苗，成年公鹿C廠家高端苗顯著高于A、B、C廠家統(tǒng)采苗；第3次免疫后公仔鹿除A廠家疫苗抗體效價(jià)不合格外，其他所有疫苗抗體效價(jià)均合格且B、C廠家顯著高于A廠家。詳見表1。

3 討論

1）本次實(shí)驗(yàn)使用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗對(duì)塔河馬鹿進(jìn)行免疫，3只鹿出現(xiàn)應(yīng)激狀況，應(yīng)激率0.75%，第2天均恢復(fù)正常，一方面疫苗本來就有應(yīng)激，另一方面可能不是鹿專用疫苗。

2）塔河馬鹿野性比較強(qiáng)，每次保定需要使用吹管肌肉注射麻藥才能進(jìn)行保定。本次實(shí)驗(yàn)使用疫苗免疫，仔鹿抗體陽(yáng)性率顯著低于成年鹿，可能由于麻醉對(duì)成年鹿應(yīng)激較小，對(duì)仔鹿應(yīng)激較大有關(guān)。

3）本實(shí)驗(yàn)疫苗免疫效果C廠家高端疫苗免疫2次就可以達(dá)到抗體效價(jià)合格，B、C廠家統(tǒng)采苗免疫3次以后抗體效價(jià)就合格，A廠家不合格（除成年公鹿），可能因?yàn)椴皇锹箤Ｓ靡呙?，要多次免疫才合格，A廠家疫苗對(duì)塔河馬鹿不敏感有關(guān)。

4）本次試驗(yàn)對(duì)塔河馬鹿推薦使用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活高

端疫苗免疫2次或使用B、C廠家統(tǒng)采疫苗免疫3次。■

參考文獻(xiàn)：

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[2] 田來明，權(quán)心嬌，李男，等.梅花鹿口蹄疫病及繼發(fā)病癥的綜合防制措施[J].

吉林畜牧獸醫(yī)，2021，42（16）：64-65.