• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黃芪多糖對紅細胞調(diào)控T 淋巴細胞增殖的影響

    2015-06-11 02:21:42馬騫寰姜俊兵范闊海孫耀貴楊麗華李宏全
    動物醫(yī)學進展 2015年11期
    關(guān)鍵詞:脾臟外周血淋巴細胞

    尹 偉,馬騫寰,姜俊兵,范闊海,孫 娜,孫耀貴,楊麗華,李宏全*

    (1.山西農(nóng)業(yè)大學動物科技學院,山西太谷030801;2.東營佛思特生物工程有限公司,山東東營257091;3.山西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所,山西太原030032)

    自1981年美國學者Siegel提出“紅細胞免疫系統(tǒng)(red-cell immune system,RCIS)”的新概念以來,已證實紅細胞具有很多免疫相關(guān)物質(zhì),使紅細胞不僅具有識別、黏附、殺傷抗原及傳遞抗原信息和清除免疫復(fù)合物(immune complex,IC)等能力,還能調(diào)理吞噬、抑制補體活化,參與機體的免疫調(diào)控,并有完整的自我調(diào)控系統(tǒng)。因此,紅細胞免疫功能的變化與機體疾病的發(fā)生、發(fā)展及免疫狀態(tài)有高度相關(guān)性[1-5],尋求提高紅細胞免疫功能的活性物質(zhì)在臨床上具有重要意義。

    早在1962年,Cartstairs就首次報道自體紅細胞對植物血凝素P(phytohenag ylatinin,PHA-P)刺激的人淋巴細胞增殖有影響,紅細胞有利于人淋巴細胞的培養(yǎng)。Arosa F A 等[6]認為紅細胞是T 細胞活性調(diào)節(jié)器,紅細胞可促進人外周血T 淋巴細胞存活并能抑制激活介導(dǎo)的細胞死亡和氧化應(yīng)激,并設(shè)想可以通過平衡紅細胞免疫活性來改善T 淋巴細胞活性,達到臨床治療某些疾病的目的,越來越引起廣大研究者的關(guān)注。雖然許多研究證實了紅細胞上相關(guān)免疫物質(zhì)參與T 淋巴細胞的調(diào)控,但其免疫調(diào)控的機理研究尚不完全清楚。近年來,國外己建立了許多測定紅細胞調(diào)控淋巴細胞免疫功能的細胞培養(yǎng)法,研究紅細胞對T 淋巴細胞免疫功能的調(diào)控作用與機理。國內(nèi)雖然有一些實驗室開展了紅細胞調(diào)控淋巴細胞免疫功能的試驗研究,但相關(guān)研究方法亟待向規(guī)范化、標準化和定量、精確化方向發(fā)展。同時,國內(nèi)外關(guān)于外源性物質(zhì)調(diào)控紅細胞影響淋巴細胞增殖、分化的研究尚近乎空白。

    黃芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是中藥黃芪(Radix Astragalus)中含量最多、生物活性較強的一種物質(zhì),APS調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用機制尚不清楚,但APS對機體細胞免疫和體液免疫有著廣泛影響[7]。為此設(shè)計本試驗,將紅細胞與本實驗室提取的一種新型APS分別或共同作用于淋巴細胞,探討APS對紅細胞調(diào)控機體免疫功能的影響及其效應(yīng)機制,為拓展APS作為免疫調(diào)節(jié)劑在臨床上的應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 實驗動物 普通昆明(KM)小鼠30只,4周齡~6周齡,雌性,清潔級,體重18g~22g。購自山西醫(yī)科大學實驗動物中心。小鼠飼養(yǎng)在22℃±2℃環(huán)境里,自由采食和飲水,自然光照,飼喂1周后開始試驗。

    1.1.2 藥品及試劑 抗凝劑(肝素鈉125U/mL)、HANK'S緩沖液、紅細胞裂解液(Trise-NH4CL)、RPMI1640為美國GIBCO 公司產(chǎn)品;植物凝集素(PHAP)為美國Sigma公司產(chǎn)品;濃度20g/L臺盼蘭、二甲基亞砜、四甲基偶氮唑鹽(MTT)為北京醫(yī)藥公司產(chǎn)品;胎牛血清(FCS)為杭州四季青生物工程材料有限公司產(chǎn)品;淋巴細胞分離液為中國醫(yī)學科學院生物工程研究所研制;APS為本實驗室提取精制,呈乳白色粉末,分子質(zhì)量1.1×104ku、純度97.16%,單糖組成及分子摩爾比為:鼠李糖∶葡糖糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=1.19∶72.01∶5.85∶20.95。

    1.1.3 試 驗 儀 器 酶 標 儀(ZS-2 型),離 心 機(TGL168),恒溫培養(yǎng)箱(78-1),超凈工作臺,微量加樣器,無菌過濾器(直徑25mm、孔徑0.2nm),24孔和96 孔培養(yǎng)板,純水蒸餾器(SZ-96),生物顯微鏡(BDS200-PH),流式細胞儀(FACScalibur)。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗分組 應(yīng)用Statistics Analysis System,按重復(fù)數(shù)為3的4×4雙向分組原則完全隨機設(shè)計,A 因素為外周血/脾臟T 淋巴細胞(T)、外周血/脾臟T 淋巴細胞(T)+植物凝集素(PHA)、外周血/脾臟T 淋巴細胞(T)+紅細胞(RBC)、外周血/脾臟T 淋巴細胞(T)+紅細胞(RBC)+植物凝集素(PHA),B 因 素 為APS 0g/mL、APS 10g/mL、APS 50g/mL、APS 200g/mL(表1)。

    表1 T 淋巴細胞增殖測定方案Table 1 Experimental program for detecting T lymphocyte proliferation

    1.2.2 藥物配制 PHA 應(yīng)用液:將5mg PHA 溶于10mL無血清RPMI1640培養(yǎng)液,無菌濾器微孔過濾,分裝2 mL/瓶,-40℃凍存?zhèn)溆?;APS 應(yīng)用液:細胞培養(yǎng)用的APS 20mg用2mL 無血清RPMI1640培養(yǎng)液充分溶解后離心,取上清,在無菌超凈臺內(nèi),用5 mL 注射器和無菌過濾器過濾,然后,用含100mL/L胎牛血清的RPMI1640細胞完全培養(yǎng)液稀釋成1、5、10mg/mL 3個濃度的應(yīng)用液。細胞培養(yǎng)體系中加入APS的終濃度分別為0、10、50、200μg/mL。

    1.2.3 外周血T 淋巴細胞懸液的制備 ①取9只試驗小鼠,分別無菌摘除眼球采集各小鼠眼眶肝素抗凝血,加入等量無血清1640培養(yǎng)液,4℃保存;②吸取淋巴細胞分層液(萄聚糖-泛影葡胺)6mL 置于15mL離心管中,將離心管傾斜45°角;取稀釋保存的抗凝血約3mL,在距分層液界面1cm 處沿試管壁緩慢加至分層液上面,應(yīng)注意保持兩者界面清晰,勿使血液混入分層液內(nèi);③將離心管置于水平式離心機內(nèi)在18℃~20℃、2 000r/min離心20min,離心后,管內(nèi)可分為4層:上層是血漿、血液稀釋液及絕大部分的血小板,下層為紅細胞及粒細胞,中層為細胞分層液,分層液和血漿交界部位渾濁的灰白色層即為外周血單個核細胞(主要是淋巴細胞);④用毛細管輕輕插入灰白色層,沿管壁輕輕吸出灰白色的單個核細胞,盛入另一離心管,加RPMI1640 維持液重懸;⑤將所得到的外周血單個核細胞懸液用5倍體積的RPMI-1640 洗滌2 次,依次在18℃~25℃環(huán)境下以2 000r/min、1 500r/min 離心10 min,去掉大部分混雜的血小板。⑥用完全RPMI-1640(含100mL/L胎牛血清的RPMI-1640)重懸洗滌后的外周血單核細胞,然后接種至培養(yǎng)瓶中,貼壁2h后,取非貼壁細胞(97%以上為T 淋巴細胞),1 000r/min離心10min,重懸于完全RPMI-1640;⑦用完全RPMI-1640定容細胞,計數(shù)細胞后再調(diào)整細胞至1×106/mL濃度;⑧取2滴細胞懸液加1滴20g/L臺盼藍染液,3min~5min后取樣作濕片高倍鏡檢?;罴毎恢?,死亡的細胞染成藍色。計數(shù)200 個細胞,計算活細胞百分率,要求活性在95%以上,備用。⑨將分離得到的9只小鼠的外周血T 淋巴細胞合并用于試驗。

    1.2.4 脾臟T 淋巴細胞懸液的制備 ①拉頸處死經(jīng)無菌摘除眼球采血后的小鼠,置700 mL/L 乙醇中浸泡5min,取出后用無菌生理鹽水擦洗,無菌棉球擦干;②將小鼠后右側(cè)臥位固定于解剖板上,消毒左側(cè)背腹交界處皮膚,在超凈工作臺上無菌取出小鼠脾臟,置于盛有Hank's液的平皿中;剔除脾臟表面脂肪及結(jié)締組織,用含抗生素的Hank's液洗凈表面血跡后,將脾臟剪成小塊,繼續(xù)用含抗生素的Hanks液沖洗至清亮;③將脾臟小塊置于200目濾網(wǎng)上,用滅菌注射器針芯輕輕將其捻碎,同時用RPMI-1640液沖洗,使單個細胞經(jīng)網(wǎng)進入溶液中,收集網(wǎng)下含脾細胞的沖洗液,注入無菌離心管中,1 500 r/min離心10min,洗滌一次并重懸;④取10mL圓底帶蓋離心管,預(yù)先加好6mL 淋巴細胞分離液,然后緩緩沿管壁將上述脾臟細胞懸液4mL 疊加到分離液上,2 000r/min水平離心20 min;⑤吸取第2層云霧狀的低密度細胞,轉(zhuǎn)移入另一離心管中,用Hank's液重懸,在1 500r/min離心10min條件下洗滌兩次。⑥去上清后加入預(yù)冷的8.3g/L Tris-NH4Cl裂解紅細胞1min,重復(fù)裂解1次,再用1640液洗2次~3 次,棄上清,混勻。⑦經(jīng)20g/L 臺盼藍染色,檢查死亡細胞數(shù)少于5%,再用含100mL/L胎牛血清的RPMI-1640完全培養(yǎng)液(含100 U/mL青霉素,100 U/mL 鏈霉素)將脾細胞稀釋為6×106個/mL的細胞懸液。⑧將分離得到的9只小鼠的脾臟T 淋巴細胞合并用于試驗。

    1.2.5 紅細胞懸液的制備 從上述淋巴細胞分層液離心后的離心管中,小心的吸取沉底的紅細胞100μL,加入到2 mL Hanks液中洗滌3 次,離心(2 000r/min)5min,棄上清,計數(shù)測活性,光學顯微鏡下觀察證實不含白細胞和血小板后,再用完全RPMI-1640調(diào)整紅細胞懸液的濃度為1×108/mL。

    1.2.6 T 淋巴細胞增殖活性的測定 ①于96孔平底培養(yǎng)板中各孔中加入100μL 相應(yīng)的細胞與相應(yīng)劑量的藥物(PHA、APS),對照組加培養(yǎng)液,每孔做3個重復(fù)孔;外周血或脾臟T 淋巴細胞體系中加入紅細胞的數(shù)量為紅細胞∶T 淋巴細胞=100∶1[8-9];脾臟T 淋巴細胞體系中PHA 的終濃度為1g/mL、外周血T 淋巴細胞為1.25g/mL,APS的終濃度分別為:高濃度200g/mL、中濃度50g/mL、低濃度10g/mL 和0g/mL;各孔用RPMI 1640完全培養(yǎng)液補充總體積至250μL。②將培養(yǎng)板放入37℃、體積分數(shù)為5%的CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,于終止培養(yǎng)前4h,輕輕從各孔中吸出100μL上清后,每孔加入10mg/mL MTT 溶液10μL,繼續(xù)培養(yǎng)4h,培養(yǎng)結(jié)束后仔細棄去上清,每孔加酸化異丙醇100 μL,充分振蕩吹打后靜置20 min,用檢測波長595 nm 進行檢測,用OD 值表示結(jié)果。

    2 結(jié)果

    2.1 外周血T 淋巴細胞增殖的檢測結(jié)果比較

    不同細胞培養(yǎng)體系、相同APS作用水平下外周血T 淋巴細胞增殖結(jié)果的統(tǒng)計分析顯示:在APS為0水平時,除A 體系外,其余各體系中T 淋巴細胞均有不同程度增殖;其中,B-0組增殖水平最高,而C-0與D-0組間差異不顯著(P>0.05)。在APS分別為低、中、高3個不同水平時,B、C 和D 體系中相應(yīng)各組T 淋巴細胞增殖均分別顯著高于A 體系(P<0.05)。其中,APS低水平時,C-1組與D-1組組間差異不顯著(P>0.05)而均顯著高于B-1 組(P<0.05),以D-1組測定值最高;APS中水平時,C-2組與D-2組組間差異不顯著(P>0.05)而均顯著高于B-2組(P<0.05),以D-2 組測定值最高;APS高水平時,D-3顯著高于B-3組和C-3組(P<0.05),而B-3 組 與C-3 組 組 間 差 異 不 顯 著(P<0.05)(表2)。

    相同細胞培養(yǎng)體系、不同APS作用水平下外周血T 淋巴細胞增殖結(jié)果的統(tǒng)計分析顯示:在A 體系中,各組間T 淋巴細胞的增殖無統(tǒng)計學差異(P>0.05),但A-0組測定值最低;在B體系中,APS低、中、高水平組間T 淋巴細胞的增殖差異不顯著(P>0.05),但均顯著低于B-0組(P<0.05),以B-3組測定值最低;在C體系中,APS低、中水平組T 淋巴細胞的增殖組間差異不顯著(P>0.05)而顯著高于C-0組(P<0.05),APS高水平組與C-0 組差異不顯著(P>0.05),以C-2 組測定值最高;在D 體系中,APS 中水平組T 淋巴細胞的增殖顯著高于D-0組、D-1組和D-3組(P<0.05),D-0組、D-1組與D-3組組間差異不顯著(P>0.05),以D-2組測定值最高(表2、圖2)。結(jié)果顯示,APS不能刺激體外培養(yǎng)的外周血T 淋巴細胞增殖或作用微弱;PHA 和紅細胞均能刺激體外培養(yǎng)的外周血T 淋巴細胞增殖,且PHA 的作用顯著高于紅細胞;APS 與PHA 共同作用于體外培養(yǎng)的外周血T 淋巴細胞時可抑制其增殖,而與紅細胞共同作用時可促進其增殖;紅細胞與PHA 共同作用于體外培養(yǎng)的外周血T 淋巴細胞時可促進其增殖;APS 的作用不呈濃度依賴性,以50μg/mL劑量作用最強。

    2.2 脾臟T 淋巴細胞增殖的檢測結(jié)果比較

    不同細胞培養(yǎng)體系、相同APS作用水平下脾臟T 淋巴細胞增殖結(jié)果的統(tǒng)計分析顯示:在APS為0水平時,B-0組、C-0組和D-0組T 淋巴細胞增殖均顯著高于A-0組(P<0.05),且B-0組顯著高于C-0組和D-0組(P<0.05),而C-0與D-0組間差異不顯著(P>0.05),但D-0組測定值高于C-0組。在APS分別為低、中和高三個不同水平時,B、C 和D體系中相應(yīng)各組T 淋巴細胞增殖均分別顯著高于A 體系(P<0.05)。其中,APS為低水平時,C-1顯著高于B-1和D-1(P<0.05),B-1和D-1組間差異不顯著(P>0.05);APS為中水平時,C-2顯著高于B-2組和D-2組(P<0.05),而B-2組和D-2組組間差異不顯著(P>0.05);APS為高水平時,C-3組顯著高于B-3組和D-3組(P<0.05),而B-3組與和D-3組組間差異不顯著(P<0.05)(表3、圖3)。

    相同細胞培養(yǎng)體系、不同APS作用水平下脾臟T 淋巴細胞增殖結(jié)果的統(tǒng)計分析顯示:在A 體系中,各組間T 淋巴細胞的增殖無統(tǒng)計學差異(P>0.05);在B 體系中,APS低、中和高水平組間T 淋巴細胞的增殖差異不顯著(P>0.05),但均顯著低于APS為0的B-0組(P<0.05),以APS低劑量組測定值最高;在C體系中,APS低、中水平組T 淋巴細胞的增殖顯著高于C-0組(P<0.05),而APS高劑量水平組與C-0組差異不顯著(P>0.05),APS低、中、高水平組組間差異不顯著(P>0.05),但以APS中劑量組測定值最高;在D 體系中,APS 低劑量組脾臟T 淋巴細胞的增殖與D-0組差異不顯著(P>0.05),中劑量顯著高于D-0組(P<0.05),低劑量組顯著低于D-0組(P<0.05),而APS低、中、高水平組組間差異顯著(P<0.05),以D-2組測定值最高(表3)。結(jié)果表明,APS、紅細胞和PHA 對體外培養(yǎng)脾臟和外周血T 淋巴細胞的作用呈現(xiàn)一致的效應(yīng)。

    表2 不同細胞培養(yǎng)體系外周血T 淋巴細胞增殖測定值Table 2 The detection value of peripheral blood T lymphocyte proliferation in different cell culture systems

    表3 不同細胞培養(yǎng)體系中脾臟T 淋巴細胞增殖測定值Table 3 The detection value of splenic T lymocyte proliferation in different cell culture systems

    3 討論

    血液循環(huán)系統(tǒng)與淋巴系統(tǒng)之間不僅在組織學上關(guān)系密切,在功能上也是相輔相成的。淋巴細胞在中樞淋巴器官發(fā)育成熟后,經(jīng)血流遷移到外周血淋巴器官發(fā)揮各種生物學功能,在遷移過程中淋巴細胞會與紅細胞不斷接觸,紅細胞上的免疫活性分子就有可能對其增殖轉(zhuǎn)化產(chǎn)生作用。脾臟既是機體最大的外周免疫器官又是機體血庫,它給淋巴細胞與紅細胞之間的相互作用提供了有利的場所。血液中紅細胞的數(shù)量與其他各種血細胞相比占絕對優(yōu)勢,這與紅細胞功能有關(guān)。紅細胞免疫研究發(fā)現(xiàn),紅細胞具有清除血液中免疫復(fù)合物的作用,參與這一功能的紅細胞表面分子是C3b受體(CR1)。對紅細胞免疫的進一步研究發(fā)現(xiàn)紅細胞表面存在有CD2分子的配體(CD58、CD59),紅細胞內(nèi)含有NK 細胞刺激因子,這是紅細胞體外培養(yǎng)體系中能夠刺激T 淋巴細胞、NK 細胞的分子基礎(chǔ),但至今國內(nèi)研究還對紅細胞以何種方式激活淋巴細胞并不清楚,也缺乏相關(guān)的研究報道。直到查占山等[8]報道紅細胞細胞CD35和血漿補體活性對提高淋巴細胞免疫活性有意義,張佩軍等[9]也報道犬紅細胞培養(yǎng)上清液對犬淋巴細胞的增殖轉(zhuǎn)化有明顯的促進作用。

    結(jié)合前人的研究,本試驗選擇了脾臟和外周血兩個相關(guān)的淋巴細胞增殖反應(yīng)指標進行研究。研究中發(fā)現(xiàn),紅細胞、PHA 單獨作用于T 淋巴細胞或者共同作用均能刺激T 淋巴細胞的增殖活性,但二者無協(xié)同作用,這些因素能使T 細胞對刺激的敏感性增強,從而使OD 值變化急劇,表明體外培養(yǎng)48h,紅細胞有類似于PHA 的功效,它能促進脾臟T 淋巴細胞和外周血T 淋巴細胞的增殖活性。查占山等[8]研究了健康成人紅細胞CD35在滅活腹水癌細胞S180激活淋巴細胞免疫反應(yīng)中的作用,在單抗阻斷紅細胞CD35或EDTA 破壞補體后,T 淋巴細胞CD25的表達顯著降低,表明紅細胞CD35和血漿補體對抗原激活淋巴細胞免疫反應(yīng)起著重要的調(diào)控作用,本試驗T 淋巴細胞體外培養(yǎng)體系中不存在有致病原(抗原)或抗原抗體復(fù)合物,因此紅細胞上不會粘附有CD35-C3b復(fù)合物,說明紅細胞促進T 淋巴細胞的增殖存在有多種機制,可能紅細胞CD58、CD59與淋巴細胞CD2的結(jié)合促進了淋巴細胞在增殖,并且這種結(jié)合不需要CD35粘附免疫復(fù)合物的介導(dǎo)。

    同時試驗中發(fā)現(xiàn)APS的添加會影響各體系中的T 淋巴細胞的增殖活性,APS作用于無紅細胞試驗體系時,APS 不能刺激體外培養(yǎng)的外周血、脾臟T 淋巴細胞增值或作用微弱;在PHA 激活組,APS不僅不能夠促進體外培養(yǎng)T 淋巴細胞增殖活化,而且還抑制PHA 誘導(dǎo)的T 淋巴細胞的增殖活性??紫榉宓葘PS 的免疫調(diào)節(jié)作用進行了綜述:APS均可降低脾臟T 細胞對ConA 和PHA 的應(yīng)答反應(yīng),其作用隨濃度增大而加強,這說明APS對T 細胞的功能有抑制作用[10],本試驗結(jié)果與其一致。但胡庭俊等報道,APS能使小鼠脾淋巴細胞PKC(蛋白激酶)活性明顯升高,可增加PHA 誘導(dǎo)的小鼠體內(nèi)淋巴細胞的轉(zhuǎn)化率及小鼠外周淋巴細胞酸性非特異性酯酶(ANAE)活性細胞的陽性率[11],張華玉等[12]通過給7 日齡正常雛雞注射APS 進行研究,發(fā)現(xiàn)APS注射液組淋巴細胞數(shù)量及ANAE 染色陽性淋巴細胞的百分率顯著增高,提示APS注射液對雛雞外周血液中的淋巴細胞數(shù)量和T 淋巴細胞的百分率有明顯的增進作用。說明APS必須經(jīng)過體內(nèi)的外代謝環(huán)節(jié)才能參與淋巴細胞的分化與成熟。

    APS和紅細胞共同作用于本試驗體系時,在一定濃度范圍內(nèi)APS可協(xié)同紅細胞促進T 淋巴細胞的增殖活性,且對PHA 激活T 淋巴細胞的促進作用最為明顯,在中劑量水平(50μg/mL)效果最佳,在脾臟和外周T 淋巴細胞的試驗體系中得到一致的效果。李宏全等[13]研究證實,人工感染傳染性法氏囊病毒(IBDV)雛雞紅細胞免疫粘附功能顯著下降,肌肉注射APS可顯著恢復(fù)雛雞紅細胞免疫功能并促進免疫復(fù)合物的清除,結(jié)合本試驗的結(jié)果,提示APS有可能通過增強紅細胞與T 淋巴細胞的黏附而促進淋巴細胞的增殖。APS 作為一種傳統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)藥物,它影響了紅細胞對淋巴細胞的調(diào)節(jié)作用,使紅細胞對淋巴細胞的調(diào)節(jié)功能趨于緩和,而且紅細胞的免疫調(diào)節(jié)作用隨著APS濃度的變化而變化,中濃度時效果最好。APS與紅細胞的這種協(xié)同作用,對外周血和脾臟淋巴細胞增殖作用的效果一致,由此得出結(jié)論:在體外試驗中,在同一種屬內(nèi),紅細胞對外周血和脾臟的T 淋巴細胞增殖的免疫效應(yīng)有刺激作用,紅細胞能夠使淋巴細胞對外援刺激的敏感性增強。同時本試驗證明了APS能夠協(xié)助紅細胞對淋巴細胞進行免疫調(diào)控,兩者共同作用,引起淋巴細胞數(shù)目的增加和增殖功能的增強,從而促進細胞免疫功能,但是APS 單獨做刺激或者與PHA 共同刺激時,不能促進T 淋巴細胞的增殖,故此推測APS可以通過調(diào)節(jié)紅細胞的免疫功能間接的促進了T 淋巴細胞的增殖活性。

    綜上所述,本試驗研究結(jié)果表明小鼠紅細胞、PHA 單獨作用對T 淋巴細胞的增殖均有顯著的促進作用,且紅細胞對PHA 激活的T 淋巴細胞的增殖也有促進作用,但是二者沒有明顯的協(xié)同促進作用;黃芪多糖不能夠促進體外培養(yǎng)T 淋巴細胞增殖活化,甚至還抑制PHA 誘導(dǎo)的T 淋巴細胞的增殖活性;黃芪多糖能夠協(xié)助紅細胞對淋巴細胞的免疫調(diào)控功能,雙方共同作用,引起淋巴細胞數(shù)目的增加和增殖功能的增強從而促進細胞免疫功能。

    [1] Kremlitzka M,Polgar A,F(xiàn)ulop L,et al.Complement receptor type 1(CR1,CD35)is a potent inhibitor of B-cell functions in rheumatoid arthritis patients[J].Int Immunol,2012,25(1):25-33.

    [2] Anand D,Kumar U,Kanjilal M,et al.Leucocyte complement receptor 1(CR1/CD35)transcript and its correlation with the clinical disease activity in rheumatoid arthritis patients[J].Clin Exp Immunol,2014,176(3):327-335.

    [3] Congbin Y,Aibin L,Congli Y,et al.Overexpression of complement receptor type I(CR1,CD35)on erythrocytes in patients with hemoplasma infection[J].Microbiol Immunol,2010,54(8):460-465.

    [4] Carlisle R C,Di Y,Cerny A M,et al.Human erythrocytes bind and inactivate type 5adenovirus by presenting Coxsackie virus-adenovirus receptor and complement receptor 1[J].Blood,2009,113(9):1909-1918.

    [5] Ogembo J G,Kannan L,Ghiran I,et al.Human complement receptor type 1/CD35is an Epstein-Barr virus receptor[J].Cell Rep,2013,3(2):371-385.

    [6] Arosa,F(xiàn) A,Pereira,C F,F(xiàn)onseca,A M.Red blood cells as modulators of T cell growth and survival[J].Cur Pharmaceut Design,2004,10(2),191-201.

    [7] 任 敏,張曉靜.黃芪多糖對斷奶仔豬免疫功能的影響[J].鄭州牧業(yè)工程高等??茖W校學報,2006,26(1):7-9.

    [8] 查占山,錢寶華,郭 峰.紅細胞CD35在抗原激活淋巴細胞免疫反應(yīng)中的作用[J].解放軍醫(yī)學雜志,2006,31(2):104-106.

    [9] 張佩君,白麗麗,喬 琦,等.犬紅細胞培養(yǎng)上清液對淋巴細胞增殖的影響[J].西北農(nóng)林科技大學學報:自然科學版,2007,35(4):51-59.

    [10] 孔祥峰,胡元亮,宋大魯,等.黃芪多糖的免疫藥理學研究進展[J].中獸醫(yī)學雜志,2003(3):34-37.

    [11] 胡庭俊,程富勝.黃芪多糖對小鼠免疫細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)分子的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報,2005,36(6):616-619.

    [12] 張華玉,陳建杰,陶宏衛(wèi).黃芪多糖注射液(APS)對雛雞淋巴細胞免疫功能的影響[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2007(5):1.

    [13] Li H Q,Reeve-Johnson L,Wang J D.Effect of Astragalus polysaccharides on erythrocyte immune adherence of chickens inoculated with infectious bursal disease virus[J].Agri Sci China,2007,6(11):1402-1408.

    猜你喜歡
    脾臟外周血淋巴細胞
    遺傳性T淋巴細胞免疫缺陷在百草枯所致肺纖維化中的作用
    保留脾臟的胰體尾切除術(shù)在胰體尾占位性病變中的應(yīng)用
    對診斷脾臟妊娠方法的研究
    腹腔鏡脾切除術(shù)與開腹脾切除術(shù)治療脾臟占位的比較
    白血病外周血體外診斷技術(shù)及產(chǎn)品
    結(jié)腸炎小鼠外周血和結(jié)腸上皮組織中Gal-9的表達
    探討CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T淋巴細胞在HCV早期感染的作用
    慢性蕁麻疹患者外周血IL-17和IL-23的表達及臨床意義
    一例與附紅細胞體相關(guān)的犬脾臟腫大的診治
    2型糖尿病患者外周血中hsa-miR-29b的表達及臨床意義
    中文字幕av成人在线电影| 国产不卡一卡二| 国产一区二区激情短视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 久久国产乱子免费精品| 五月玫瑰六月丁香| 51国产日韩欧美| 美女大奶头视频| 久久久久久久久久黄片| 99热网站在线观看| 天堂√8在线中文| 九色成人免费人妻av| 69人妻影院| 国产高清有码在线观看视频| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲欧美清纯卡通| 一区二区三区免费毛片| 俺也久久电影网| 可以在线观看的亚洲视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲av中文字字幕乱码综合| av专区在线播放| 成人永久免费在线观看视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 全区人妻精品视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产一区二区三区av在线 | 18禁在线播放成人免费| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品久久久久久久久免| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产激情偷乱视频一区二区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲人成网站高清观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久99热6这里只有精品| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美另类亚洲清纯唯美| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲在线观看片| 日本一本二区三区精品| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲精品456在线播放app | 黄色一级大片看看| 国产探花极品一区二区| 美女被艹到高潮喷水动态| 伦精品一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 中文资源天堂在线| 成人欧美大片| 真人做人爱边吃奶动态| 午夜视频国产福利| 看黄色毛片网站| 免费无遮挡裸体视频| 日韩欧美 国产精品| 国产一区二区三区视频了| av天堂在线播放| 亚洲美女黄片视频| 高清日韩中文字幕在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 欧美性感艳星| 在线a可以看的网站| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜亚洲福利在线播放| 五月玫瑰六月丁香| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一进一出好大好爽视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 99九九线精品视频在线观看视频| 中国美女看黄片| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 又粗又爽又猛毛片免费看| 婷婷色综合大香蕉| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 丰满乱子伦码专区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 狠狠狠狠99中文字幕| 俺也久久电影网| 精品一区二区三区视频在线| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲av二区三区四区| 九九在线视频观看精品| 午夜福利高清视频| 欧美又色又爽又黄视频| 午夜a级毛片| 国产一区二区在线av高清观看| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲国产精品成人综合色| 日韩亚洲欧美综合| xxxwww97欧美| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 欧美bdsm另类| 亚州av有码| 色综合站精品国产| 最近中文字幕高清免费大全6 | 校园春色视频在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 国内精品一区二区在线观看| 麻豆成人av在线观看| 我的老师免费观看完整版| 午夜福利18| 日本 av在线| av在线天堂中文字幕| 久久久久久久午夜电影| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产淫片久久久久久久久| 国产日本99.免费观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 91av网一区二区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 色综合站精品国产| 亚洲av一区综合| 天美传媒精品一区二区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 免费大片18禁| 丝袜美腿在线中文| 99热6这里只有精品| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲午夜理论影院| 免费av不卡在线播放| 日日啪夜夜撸| 亚洲美女视频黄频| 免费看美女性在线毛片视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 高清在线国产一区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| ponron亚洲| 国产免费av片在线观看野外av| 十八禁网站免费在线| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜视频国产福利| 欧美三级亚洲精品| 国产成年人精品一区二区| 一区二区三区四区激情视频 | 男人舔奶头视频| 久久精品国产清高在天天线| 日本免费a在线| 简卡轻食公司| 亚洲天堂国产精品一区在线| 一个人看视频在线观看www免费| h日本视频在线播放| 日韩欧美 国产精品| 丰满的人妻完整版| 欧美性感艳星| 午夜精品在线福利| 直男gayav资源| 91在线观看av| 在线a可以看的网站| 亚洲真实伦在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲五月天丁香| 欧美中文日本在线观看视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲中文字幕日韩| 精品一区二区免费观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 97热精品久久久久久| 亚洲五月天丁香| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产免费一级a男人的天堂| 九九在线视频观看精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲午夜理论影院| 色综合婷婷激情| 天堂网av新在线| 99久久精品一区二区三区| 黄色丝袜av网址大全| 色av中文字幕| 亚洲精品456在线播放app | 国产伦精品一区二区三区四那| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 一级av片app| 精品人妻熟女av久视频| 久久午夜福利片| 偷拍熟女少妇极品色| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲av成人av| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品人妻久久久影院| 最近中文字幕高清免费大全6 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 欧美3d第一页| 联通29元200g的流量卡| h日本视频在线播放| 在线观看av片永久免费下载| 长腿黑丝高跟| 最后的刺客免费高清国语| 九九爱精品视频在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品久久久久久久电影| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 午夜亚洲福利在线播放| 在线看三级毛片| 波多野结衣巨乳人妻| 免费av不卡在线播放| 精华霜和精华液先用哪个| 嫩草影院新地址| 在线免费十八禁| 又爽又黄a免费视频| av福利片在线观看| 热99在线观看视频| 91久久精品国产一区二区成人| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产黄片美女视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| АⅤ资源中文在线天堂| 97热精品久久久久久| 成年女人毛片免费观看观看9| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 嫩草影视91久久| 色哟哟·www| 久久久国产成人免费| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 天天一区二区日本电影三级| 波多野结衣高清无吗| 国产高清视频在线观看网站| 禁无遮挡网站| 欧美最黄视频在线播放免费| 欧美日韩黄片免| 色综合亚洲欧美另类图片| 69av精品久久久久久| 日本黄色片子视频| 中文字幕高清在线视频| 成人国产一区最新在线观看| 国产男人的电影天堂91| 天天躁日日操中文字幕| 黄色欧美视频在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 少妇的逼好多水| 国产亚洲欧美98| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产av在哪里看| 观看美女的网站| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲无线观看免费| 久久久久久九九精品二区国产| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲国产精品成人综合色| 国产精品久久久久久久久免| 中文字幕高清在线视频| ponron亚洲| 国产亚洲91精品色在线| av女优亚洲男人天堂| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产乱人伦免费视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 午夜福利视频1000在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 高清日韩中文字幕在线| 久久久久九九精品影院| 久久久精品大字幕| 悠悠久久av| 国产成年人精品一区二区| 久久久色成人| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 久久这里只有精品中国| 99久久无色码亚洲精品果冻| 特大巨黑吊av在线直播| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产精品久久视频播放| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲色图av天堂| 色吧在线观看| 俺也久久电影网| 免费一级毛片在线播放高清视频| 两个人的视频大全免费| 国产亚洲91精品色在线| 99热这里只有是精品在线观看| 国产亚洲精品av在线| 午夜影院日韩av| 免费观看人在逋| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产老妇女一区| 国产黄a三级三级三级人| 熟女人妻精品中文字幕| 伦精品一区二区三区| 国产一区二区三区av在线 | 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲第一电影网av| 国产爱豆传媒在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 一进一出抽搐动态| 赤兔流量卡办理| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 热99re8久久精品国产| 色5月婷婷丁香| 欧美日韩精品成人综合77777| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产精品一区二区免费欧美| 午夜福利高清视频| av在线天堂中文字幕| 精品久久久久久成人av| 99视频精品全部免费 在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产麻豆成人av免费视频| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 丝袜美腿在线中文| 国产欧美日韩精品一区二区| 美女大奶头视频| 国产中年淑女户外野战色| 日韩欧美精品v在线| 成人av在线播放网站| 全区人妻精品视频| 天天躁日日操中文字幕| 国产黄片美女视频| 国产精品久久久久久av不卡| 日本熟妇午夜| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 变态另类丝袜制服| 久久久精品大字幕| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国内精品久久久久精免费| 99热网站在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 又粗又爽又猛毛片免费看| 麻豆成人午夜福利视频| 91久久精品电影网| 久99久视频精品免费| 三级国产精品欧美在线观看| 1024手机看黄色片| 两个人的视频大全免费| 国产人妻一区二区三区在| 熟女电影av网| 97热精品久久久久久| h日本视频在线播放| 国产高清有码在线观看视频| 国内精品一区二区在线观看| 丝袜美腿在线中文| 亚洲经典国产精华液单| videossex国产| 国语自产精品视频在线第100页| av视频在线观看入口| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 欧美成人性av电影在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲七黄色美女视频| 国产免费男女视频| 国产高清有码在线观看视频| 成人国产综合亚洲| 亚洲五月天丁香| 精品福利观看| 97热精品久久久久久| .国产精品久久| 男女视频在线观看网站免费| 在线观看66精品国产| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美成人a在线观看| 成年版毛片免费区| 毛片一级片免费看久久久久 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 黄色欧美视频在线观看| 精品久久国产蜜桃| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲无线在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美人与善性xxx| 偷拍熟女少妇极品色| av在线亚洲专区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产午夜精品论理片| 极品教师在线免费播放| 国产探花极品一区二区| 亚洲国产精品成人综合色| 成年版毛片免费区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精华一区二区三区| 日本黄大片高清| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产精华一区二区三区| 亚洲av五月六月丁香网| 免费看美女性在线毛片视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久久色成人| 欧美+亚洲+日韩+国产| 韩国av在线不卡| 最好的美女福利视频网| 特大巨黑吊av在线直播| 精品一区二区免费观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲色图av天堂| 在线观看午夜福利视频| 日本黄大片高清| 国产人妻一区二区三区在| 欧美+亚洲+日韩+国产| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲av二区三区四区| 精品久久久久久久末码| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久亚洲精品不卡| 九色国产91popny在线| 久久精品影院6| 中文字幕高清在线视频| 最近中文字幕高清免费大全6 | 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精华一区二区三区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产亚洲欧美98| www日本黄色视频网| 直男gayav资源| 亚洲av美国av| 国产在线男女| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产真实乱freesex| 此物有八面人人有两片| 婷婷丁香在线五月| 美女黄网站色视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 舔av片在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产精品一区二区性色av| 51国产日韩欧美| 国产精品无大码| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产91精品成人一区二区三区| 免费观看精品视频网站| 我要看日韩黄色一级片| 看十八女毛片水多多多| 国产亚洲精品久久久com| 国产乱人视频| 特大巨黑吊av在线直播| 久久中文看片网| 成人一区二区视频在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 在线播放国产精品三级| 亚洲av.av天堂| 黄色丝袜av网址大全| 一a级毛片在线观看| 国产精品伦人一区二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产乱人视频| 简卡轻食公司| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产亚洲av嫩草精品影院| 小说图片视频综合网站| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人国产综合亚洲| 欧美zozozo另类| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 在线观看美女被高潮喷水网站| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 黄色欧美视频在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 精品久久久噜噜| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产单亲对白刺激| 深夜a级毛片| 熟女人妻精品中文字幕| 22中文网久久字幕| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 两个人的视频大全免费| 国产淫片久久久久久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩欧美国产在线观看| 黄色女人牲交| 国产精品永久免费网站| 精品国产三级普通话版| 亚洲人成网站在线播| 婷婷色综合大香蕉| 成人亚洲精品av一区二区| 美女免费视频网站| 国产精品伦人一区二区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 少妇的逼水好多| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 日本黄色视频三级网站网址| 成人性生交大片免费视频hd| 少妇人妻一区二区三区视频| 九色国产91popny在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 精品福利观看| 乱系列少妇在线播放| 美女大奶头视频| 九色国产91popny在线| 中文字幕熟女人妻在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产真实乱freesex| 成人三级黄色视频| 男女那种视频在线观看| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲成人免费电影在线观看| xxxwww97欧美| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲五月天丁香| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲avbb在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲精品日韩av片在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 偷拍熟女少妇极品色| 女同久久另类99精品国产91| 51国产日韩欧美| 草草在线视频免费看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 欧美在线一区亚洲| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产成人福利小说| 亚洲色图av天堂| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜a级毛片| 99久久精品一区二区三区| 69av精品久久久久久| 成人毛片a级毛片在线播放| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产精品免费一区二区三区在线| 搡老熟女国产l中国老女人| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 午夜免费成人在线视频| 国产 一区 欧美 日韩| 偷拍熟女少妇极品色| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 干丝袜人妻中文字幕| 国产精品人妻久久久影院| 久久精品国产亚洲av涩爱 | а√天堂www在线а√下载| 成年女人看的毛片在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 天堂动漫精品| 黄色配什么色好看| 国产美女午夜福利| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 18+在线观看网站| 99riav亚洲国产免费| av天堂在线播放| 中文在线观看免费www的网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 又紧又爽又黄一区二区| 日本黄色片子视频| 天堂动漫精品| 国内精品久久久久久久电影| 婷婷精品国产亚洲av在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 欧美性感艳星| 欧美日韩黄片免| 色av中文字幕| 久久久久久大精品| 国产熟女欧美一区二区| 在线看三级毛片| 亚洲av免费在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 能在线免费观看的黄片| www.色视频.com| 在线观看舔阴道视频| 亚洲最大成人手机在线| 欧美bdsm另类| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| av中文乱码字幕在线| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品免费久久久久久久清纯| 老熟妇仑乱视频hdxx| 在线播放国产精品三级| 制服丝袜大香蕉在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 乱系列少妇在线播放| 99久久精品热视频| 亚洲性久久影院| av女优亚洲男人天堂| 黄色女人牲交| 成人永久免费在线观看视频| 国产淫片久久久久久久久| 久久久成人免费电影|