高穩(wěn)定10%恩諾沙星溶液的制備及質(zhì)量檢測(cè)

摘 要：本研究以恩諾沙星為原料，水、丙三醇為溶媒，亞硫酸氫鈉作為穩(wěn)定劑，聚乙二醇400作為助溶劑，NaOH作為酸堿調(diào)節(jié)劑，制備了一種恩諾沙星溶液，并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。結(jié)果顯示，該溶液在0～5 ℃低溫環(huán)境下無晶體析出，在（-20±2）℃冷凍解凍后性狀穩(wěn)定，含量符合標(biāo)準(zhǔn)；通過影響因素試驗(yàn)與加速試驗(yàn)，此款恩諾沙星溶液性質(zhì)穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞：恩諾沙星溶液；制備；穩(wěn)定性；加速試驗(yàn)

中圖分類號(hào)：S859.79+6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1673-1085（2024）08-0020-07

恩諾沙星（Enrofloxacin），屬于人工合成的第三代動(dòng)物專用喹諾酮類（Fluoroquinolones）廣譜抗菌藥物，又名乙基環(huán)丙氟哌酸、乙基環(huán)丙沙星，在臨床上常使用原形或其鹽酸鹽及乳酸鹽[1]。恩諾沙星具有抗菌譜廣、殺菌力強(qiáng)、作用迅速、體內(nèi)分布廣泛及與其他抗生素之間無交叉耐藥等多重優(yōu)點(diǎn)，且其內(nèi)服、肌注吸收迅速和較完全[2-3]。在獸醫(yī)臨床治療中，恩諾沙星對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、變形桿菌、巴氏桿菌、金色葡萄球菌、鏈球菌等致病菌都有殺菌效用，且被廣泛用于治療動(dòng)物細(xì)菌性疾病和支原體感染等[3-5]。恩諾沙星，味苦，不溶于水，易溶于氫氧化鈉溶液、甲醇及氰甲烷等有機(jī)溶劑，其鹽酸鹽溶于水。在獸醫(yī)臨床使用中，恩諾沙星溶液也存在一定的問題，如適口性差、穩(wěn)定性不足、低溫環(huán)境易析出結(jié)晶以及低溫運(yùn)輸過程中凍裂包裝等[5-7]。本研究選用丙三醇和水作為溶媒，亞硫酸氫鈉作為穩(wěn)定劑，聚乙二醇400作為助溶劑，NaOH作為酸堿調(diào)節(jié)劑，制備了一種恩諾沙星溶液，并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，以期為獸醫(yī)臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1" 試驗(yàn)材料

1.1" 試驗(yàn)試劑

試驗(yàn)所用的主要試劑見表1。

1.2" 試驗(yàn)儀器

試驗(yàn)所用的主要儀器見表2。

2" 試驗(yàn)方法

2.1" 10%恩諾沙星溶液的制備方法

燒杯中加入處方量一半的蒸餾水，稱取處方所需的恩諾沙星粉末倒入燒杯中，磁力攪拌器以100 r/min邊攪拌邊加入NaOH，直至恩諾沙星粉末完全溶解；隨后加入處方量的丙三醇、聚乙二醇400和亞硫酸氫鈉，攪拌至完全溶解，NaOH調(diào)節(jié)pH值至11.0～13.0，蒸餾水定容，靜置，經(jīng)過濾、灌封、高溫高壓滅菌，最后包裝。

2.2" 10%恩諾沙星溶液含量測(cè)定

恩諾沙星含量的測(cè)定使用2020年版《中國(guó)獸藥典》一部的高效液相色譜法[8]。十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；0.025 mol/L的磷酸溶液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH至3.0），乙腈（83：17）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm。理論板數(shù)按恩諾沙星峰計(jì)算應(yīng)不低于2 500，流速2 mL/min，進(jìn)樣10 μL。

2.3" 10%恩諾沙星溶液穩(wěn)定性檢測(cè)

2.3.1" 低溫試驗(yàn)" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于0～5 ℃冷藏和（-20±2）℃冷凍條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測(cè)，觀察恩諾沙星溶液的外觀性狀及解凍[在（10±2） ℃解凍]后的情況。

2.3.2" 影響因素試驗(yàn)

2.3.2.1" 強(qiáng)光照射試驗(yàn)" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品置于光照箱內(nèi)，于照度

（4 500±500） lx條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測(cè)。

2.3.2.2" 高溫試驗(yàn)" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于60 ℃條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測(cè)。

2.3.2.3" 高濕試驗(yàn)" 取不同批次市售包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于25 ℃、相對(duì)濕度（RH）95%±5%條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測(cè)。

2.3.3" 加速試驗(yàn)" 按照中國(guó)《獸用化藥中藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則匯編》（2022年）獸用化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則進(jìn)行技術(shù)試驗(yàn)[9]，取三批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品分別置于（40±2） ℃、相對(duì)濕度（RH）75%±5%條件下放置6個(gè)月，分別在第0、1、2、3、6個(gè)月末取樣檢測(cè)。

3" 試驗(yàn)結(jié)果

3.1" 10%恩諾沙星溶液含量測(cè)定

本試驗(yàn)所制備的恩諾沙星溶液，包裝規(guī)格為50 mL/瓶，標(biāo)示含量為10%，根據(jù)《中國(guó)獸藥典》的方法測(cè)得的結(jié)果見表3。溶液中恩諾沙星有效含量為101.97%～105.22%，符合《中國(guó)獸藥典》對(duì)于恩諾沙星溶液的要求。

3.2" 10%恩諾沙星溶液穩(wěn)定性檢測(cè)

3.2.1" 低溫試驗(yàn)" 生產(chǎn)實(shí)踐中，恩諾沙星溶液存儲(chǔ)在低溫條件下易生成結(jié)晶，在運(yùn)輸過程中有凍裂包裝的現(xiàn)象。為改善該問題，本試驗(yàn)使用聚乙二醇400作為助溶劑，并在溶媒中加入丙三醇這一常見防凍劑，對(duì)配置的恩諾沙星溶液進(jìn)行低溫檢測(cè)試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

由表4可見，試驗(yàn)所選的3批次恩諾沙星溶液分別在冷藏和冷凍條件下放置10 d后，外觀性狀、pH值及恩諾沙星含量均無明顯變化，該溶液在0～5 ℃低溫環(huán)境下無晶體析出，在（-20±2） ℃解凍后性狀穩(wěn)定，含量符合標(biāo)準(zhǔn)。

3.2.2" 影響因素試驗(yàn)" 強(qiáng)光照射、高溫、高濕試驗(yàn)結(jié)果，分別見表5、6、7。

由表5可見，包裝的恩諾沙星溶液在照度（4 500±500） lx條件下放置10 d后，外觀性狀、pH值均無明顯變化，含量雖有所下降但仍符合《中國(guó)獸藥典》的要求。已有的研究結(jié)果表明，恩諾沙星的降解與光照有關(guān)，且強(qiáng)光照射下易引起溶液顏色變化，所以該溶液產(chǎn)品應(yīng)采用遮光瓶包裝，在存儲(chǔ)及運(yùn)輸過程中應(yīng)避免強(qiáng)光照射[10-11]。由表6、7可知，該恩諾沙星溶液在60 ℃條件下和25 ℃、相對(duì)濕度（RH）95%±5%條件下放置10 d，外觀性狀、pH值以及含量均無明顯變化，且符合獸藥典規(guī)定。

3.2.3" 加速試驗(yàn)" 加速試驗(yàn)結(jié)果，見表8。

由表8可見，經(jīng)過6個(gè)月的加速試驗(yàn)后，該款恩諾沙星溶液外觀性狀、pH值和含量均無明顯變化，表明該恩諾沙星溶液穩(wěn)定性好。

4" 討論

針對(duì)恩諾沙星溶液在臨床應(yīng)用中所出現(xiàn)的穩(wěn)定性不足、低溫環(huán)境易析出結(jié)晶以及低溫運(yùn)輸過程中凍裂包裝等問題，本研究采用具有廣泛相容性的高分子物質(zhì)聚乙二醇400作為助溶劑來提高恩諾沙星的溶解度[12]；同時(shí)添加丙三醇這一溶媒來提高溶液的防凍性[13]，低溫試驗(yàn)結(jié)果也表明該溶液在0～5 ℃低溫環(huán)境下無晶體析出，在（-20±2 ）℃冷凍解凍后性狀穩(wěn)定，含量符合標(biāo)準(zhǔn)，且不存在凍裂包裝的現(xiàn)象，臨床應(yīng)用中存在的問題得到了有效解決。添加的丙三醇具有暖甜味，并具有一定的潤(rùn)滑作用[14-15]，這能改善恩諾沙星味苦的特性，有效提高恩諾沙星溶液的適口性，便于在養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用。影響因素試驗(yàn)及加速試驗(yàn)結(jié)果顯示，10%恩諾沙星溶液具有較高的穩(wěn)定性，這為生產(chǎn)更穩(wěn)定的恩諾沙星溶液及注射液提供了理論依據(jù)。

綜上所述，本研究成功制備了一款符合質(zhì)量要求且具有較高穩(wěn)定性的恩諾沙星溶液，可采用混飲法用于治療禽類的細(xì)菌性疾病和支原體感染。該溶液為淡黃色澄明液體，pH值11.0～13.0，規(guī)格為10%

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Preparation and Quality Detection of Highly Stable 10 %

Enrofloxacin Solution

WANG Tongtong1" ，LI Jinxiang2，SUN Peizhi，LENG Dunpeng1，GAO Yan2，MENG Fanyun3，

ZHAO Shanshan2

（1.Qingdao Zhongren Animal Drug Co.， Ltd，Qingdao" 266000，China；

2. Jiaozhou Agricultural and Rural Bureau，Qingdao" 266000，China；

3.Jiaoxi Animal Health and Product Quality Workstation，Qingdao" 266000，China）

Abstract：" In this study， a highly stable enrofloxacin solution was prepared by using enrofloxacin as raw material， water and glycerol as solvent， sodium bisulfite as stabilizer， polyethylene glycol 400 as cosolvent and NaOH as acid-base regulator. We also investigated its stability. The results showed that the solution had no crystal precipitation at low temperature of 0～5 ℃， and the properties were stable after freezing and thawing at （-20±2 ）℃， and the content met the standard. Through the influence factor test and accelerated test， it can be seen that the enrofloxacin solution is stable.

Keywords：" Enrofloxacin; Manufacturing technology; Stability; Accelerated test