m6A修飾在肝細胞癌藥物治療中作用研究進展

馮加其 劉雄青 黃鑫昱 劉璐 王甘露

【摘要】肝細胞癌（HCC）患者長期生存率不佳，藥物療效是影響其預后的重要因素。N6-甲基腺嘌呤（m6A）修飾是真核生物RNA中最豐富的修飾，可通過調(diào)節(jié)與癌癥相關的生物學功能來影響癌癥的發(fā)生發(fā)展及藥物療效。然而，m6A修飾在HCC藥物治療中的作用尚未完全闡明，因此，文章通過m6A修飾過程的3種調(diào)節(jié)成員（甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基轉(zhuǎn)移酶和結(jié)合蛋白）來論述其在HCC藥物治療中發(fā)揮的生物學作用，進而提出m6A修飾調(diào)節(jié)成員可作為HCC預后評估的生物標志物以及具有成為治療靶點的潛力，為HCC精準醫(yī)療提供新的見解。

【關鍵詞】肝細胞癌；m6A修飾；藥物；系統(tǒng)治療

Research progress in m6A methylation modification in the treatment of hepatocellular carcinoma

FENG Jiaqi 1，2， LIU Xiongqing1，2， HUANG Xinyu3， LIU Lu4， WANG Ganlu2

（1.The First Clinical Medical College of Guangdong Medical University， Zhanjiang 524023， China； 2.Shenzhen Baoan Clinical Medical College， Guangdong Medical University， Shenzhen 518101， China； 3.Department of Hepatobiliary Surgery， Fuyong People s Hospital， Baoan District， Shenzhen 518101， China； 4.Shenzhen Baoan District People s Hospital， Shenzhen 518101， China）

Corresponding author： WANG Ganlu，E-mail： wangganlu12@163.com

【Abstract】The long-term survival rate of patients with hepatocellular carcinoma （HCC） is poor， and drug efficacy is an important factor affecting clinical prognosis. N6-methyladenosine （m6A） modification is the most abundant modification in eukaryotic RNA， which can affect the occurrence and development of HCC and drug efficacy by regulating cancer-related biological functions. However， the role of m6A modification in HCC drug treatment has not been fully elucidated. Therefore， the biological functions of different regulatory members of the m6A modification process （methyltransferase， demethyltransferase and binding protein） in HCC drug treatment were illustrated， proposing that regulatory members of the m6A modification process can be used as biomarkers for HCC prognosis evaluation and have the potential to become therapeutic targets and providing novel insights for HCC precision medicine.

【Key words】Hepatocellular carcinoma； m6A modification； Drug； Systemic treatment

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是最常見的惡性腫瘤之一，占所有原發(fā)性肝癌患者的75%以上，其發(fā)病率在全球惡性腫瘤中居第6位，病死率居第3位［1］。既往HCC的治療手段主要為局部措施，包括手術切除、肝移植、局部消融等。但大部分患者被發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期，無法接受根治性治療，5年生存率小于20%［2］。近年來，隨著生物醫(yī)學的進步，系統(tǒng)治療為這一類中晚期患者帶來了新的曙光，然而其總體生存率仍然不佳［3］。因此，為HCC患者開發(fā)更有效的治療方法刻不容緩。

隨著表觀遺傳學研究的不斷深入，RNA修飾開始受到人們的關注，成為近年來較為火熱的研究領域。RNA修飾中甲基化修飾是一種十分普遍的修飾，其中N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine，m6A）修飾已被證明是真核生物RNA中最豐富的修飾，其調(diào)節(jié)成員的異常與HCC等多種人類惡性腫瘤有關［4］。研究表明，HCC中m6A的總體水平及調(diào)節(jié)成員的表達均為異常，且與臨床預后相關，此外，m6A修飾調(diào)節(jié)成員可以上調(diào)肝臟脂肪生成基因表達，在肝病中發(fā)揮著至關重要的作用［5］。

藥物耐受或缺乏有效預后標記物是HCC患者長期生存率不高的重要原因，但對于m6A修飾如何影響HCC治療在很大程度上仍未可知。因此，本文通過深入探索兩者關系，以期尋找有效的治療靶點，并開發(fā)新的靶向干預策略，為HCC患者的個體化治療方案提供更多可能性。

1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員概述

m6A修飾調(diào)節(jié)成員包括甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基轉(zhuǎn)移酶及結(jié)合蛋白［6-7］，成員相關信息見表1。

2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC治療藥物中的作用

HCC治療藥物包括系統(tǒng)抗腫瘤治療（靶向治療、免疫治療、化學治療、中藥治療及基礎治療）、經(jīng)導管動脈化療栓塞（transcatheter arterial chemoembolization，TACE）中的藥物及放射性核素［8］，以下分別進行介紹，見圖1。

2.1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC靶向治療藥物中的作用

2.1.1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與索拉非尼

在肝癌的診療指南中，索拉菲尼長期占據(jù)主導地位，是美國食品藥品監(jiān)督管理局批準的治療晚期HCC的一種多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑，可通過阻斷腫瘤細胞增殖、抑制血管生成以及誘導腫瘤細胞凋亡發(fā)揮作用［8］，然而耐藥性限制其療效。既往Lin等［9］發(fā)現(xiàn)缺氧條件下，METTL3降低自噬相關基因叉頭框蛋白O3（forkhead box protein O3，F(xiàn)OXO3）mRNA的穩(wěn)定性以增加HCC中索拉非尼的耐藥，而過表達FOXO3可抑制HCC自噬來增強該藥療效。Xu等［10］發(fā)現(xiàn)METTL3/14水平增加，可通過修飾上調(diào)環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA）-SORE，競爭性激活Wnt/β-catenin信號通路并促進HCC患者對索拉非尼產(chǎn)生耐藥性。這兩項研究初步表明METTL3/14及其介導的信號因子可能是解決索拉非尼耐藥的重要靶點。隨著研究不斷深入，METTL3/14通過其他途徑促進索拉非尼耐藥相繼被揭示。研究發(fā)現(xiàn)METTL14依賴的m6A甲基化可通過介導肝細胞核因子3γ（hepatocyte nuclear factor 3γ，HNF3γ）表達下調(diào)，下調(diào)的HNF3γ轉(zhuǎn)錄激活腫瘤干細胞（cancer stem cell，CSC）以及下調(diào)OATP1B1和OATP1B3（影響索拉非尼吸收的兩種主要膜轉(zhuǎn)運蛋白）的表達而致HCC進展及索拉非尼耐藥［11］。相似的是，另一團隊發(fā)現(xiàn)METTL3依賴的m6A甲基化調(diào)節(jié)長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）NIFK-AS1在HCC組織和細胞中高表達，亦可通過下調(diào)蛋白OATP1B1和OATP1B3致HCC患者對索拉非尼耐藥［12］。

自此，研究者們將目光集中于非編碼RNA。而后Kong等［13］研究表明，HCC中長基因間非蛋白編碼RNA-1273（LINC01273）與METTL3形成的反饋軸失調(diào)，該化合物過表達而致索拉非尼耐藥性增加并促進腫瘤進展。Wu等［14］揭示METTL3/14介導lncRNA SREBF2-AS1啟動子處的DNA去甲基化和SREBF2的上調(diào)，亦可促進HCC進展及對索拉非尼耐藥。這些研究進一步豐富了METTL3/14形成索拉非尼耐藥的機制，除了上述調(diào)節(jié)成員之外，其他修飾調(diào)節(jié)成員也參與著索拉非尼的耐藥，與之相關研究較少。研究證實RBM15B被陰陽蛋白1轉(zhuǎn)錄激活，并以m6A依賴的方式上調(diào)髓系細胞觸發(fā)受體2 mRNA的穩(wěn)定性，進而促進HCC細胞增殖和侵襲及對索拉非尼耐藥［15］。Liao等［16］研究表明熱休克蛋白90阻礙含STIP1同源性和U-box的蛋白1誘導的YTHDF2泛素化和降解，提高了YTHDF2的表達進而增加HCC對索拉非尼耐藥。綜上所述，m6A引起索拉非尼的耐藥機制非常復雜，涉及自噬基因失活、藥物轉(zhuǎn)運蛋白表達減少、細胞信號通路的異?；罨癈SC激活等，仍需對其調(diào)控網(wǎng)絡進行深入研究。

2.1.2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與侖伐替尼

侖伐替尼是近期被授權的一線靶向藥物，與索拉非尼藥理作用相似，但對HCC患者具有更好的客觀療效及安全性，然而其耐藥機制未完全闡明。Wang等［17］通過誘導產(chǎn)生侖伐替尼抗藥性HCC細胞，發(fā)現(xiàn)與親代細胞相比，抗藥性細胞中METTL3水平顯著上調(diào)，并促進表皮生長因子受體翻譯，從而引發(fā)侖伐替尼耐藥。Zhang等［18］發(fā)現(xiàn)，METTL3可通過m6A-YTHDF2依賴性機制下調(diào)過氧化物酶體增殖激活受體γ共激活因子1α（PPARGC1A），該化合物及下游信號通路失調(diào)促進HCC的進展以及對侖伐替尼耐藥。CSC中卷曲類受體10（frizzled class receptor 10，F(xiàn)ZD10）是由METTL3介導的，F(xiàn)ZD10可上調(diào)Wnt/β-catenin和Hippo信號通路，從而促進CSC激活及致瘤性并減弱侖伐替尼的藥效，而靶向FZD10或使用β-連環(huán)蛋白抑制劑可以恢復侖伐替尼反應［19］；此外，YTHDF1亦可增強HCC的干細胞性，其通過增強NOTCH1基因表達促進CSC更新，以及對靶向藥物產(chǎn)生耐藥，而使用靶向YTHDF1的脂質(zhì)納米顆粒顯著增強了侖伐替尼的療效［20］。因此，CSC激活至關重要，進一步研究m6A修飾調(diào)節(jié)成員與該激活信號軸對于減緩HCC進展轉(zhuǎn)移及提高靶向藥物療效意義重大。

2.1.3 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與阿帕替尼

與索拉非尼及侖伐替尼藥物不同，阿帕替尼僅以血管內(nèi)皮生長因子2為靶點，其藥效為索拉非尼的10倍，但預后仍不樂觀；研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合抑制METTL3可進一步增強其療效，p53激活劑RG7112和阿帕替尼組合減少METTL3的表達進而減少p53 mRNA的m6A修飾，從而增強HCC對阿帕替尼的敏感性［21］。但目前暫無更多對于該藥及其他HCC靶向藥物的研究，研究人員可于未來進行相關探索，進一步提高靶向藥物的使用價值。

2.2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC免疫治療藥物中的作用

自2017年以來，免疫檢查點抑制劑（immune checkpoint inhibitor，ICI），包括程序性細胞死亡蛋白1（programmed death-l，PD-1）/程序性細胞死亡蛋白配體1（programmed death-ligand 1，PD-L1）及細胞毒性T細胞相關抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）抑制劑，已成為HCC治療的關鍵組成部分，但人群選擇及耐藥現(xiàn)象成為當前難題，迫切需要尋求有效途徑加以解決。

2.2.1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與ICI

腫瘤微環(huán)境（tumor micro-environment，TME）是ICI藥效的主要影響因素，m6A修飾單一調(diào)節(jié)成員可促進HCC免疫抑制TME形成，包括增加免疫抑制細胞、抑制免疫殺傷細胞等，從而直接引起ICI產(chǎn)生耐藥。既往發(fā)現(xiàn)ALKBH5以m6A依賴的方式上調(diào)絲裂原活化蛋白激酶8（MAP3K8）的表達，從而介導HCC細胞的增殖轉(zhuǎn)移以及PD-L1巨噬細胞的募集致PD-L1抑制劑藥效下降［22］；LRPPRC亦可通過上調(diào)HCC中PD-L1表達促進腫瘤進展和免疫耐藥，抑制LRPPRC觀察到腫瘤減緩并改善CD4+ 和CD8+ T細胞的浸潤［23］。近期Wang等［24］研究表明YTHDF1通過調(diào)節(jié)增強子同源物2（EZH2）-IL-6信號軸引起抑制CD8+ T功能障礙致PD-1抑制劑藥效降低；與此類似，Pan等［25］揭示METTL3介導甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBP）裂解激活蛋白mRNA的m6A修飾并促進其翻譯，同樣損害HCC中的CD8+ T細胞引起PD-1抑制劑耐藥。此外，有學者發(fā)現(xiàn)circRNA可抑制ICI藥物療效，m6A修飾調(diào)節(jié)成員可對其調(diào)控間接引起耐藥。如YTHDF1可與circRHBDD1相互作用，并加速磷酸肌醇3-激酶調(diào)節(jié)亞基1的翻譯，以增強有氧糖酵解并抑制HCC的PD-1抑制劑治療［26］。WTAP通過結(jié)合IGF2BP3可增強circCCAR1的穩(wěn)定性，并由HCC細胞以HNRNPA2B1依賴的方式進行分泌，穩(wěn)定PD-1蛋白并引起CD8+ T細胞功能障礙，進而增加PD-1抑制劑的抗性［27］。METTL3介導circ_0027791的m6A修飾并穩(wěn)定其表達，通過促進PD-L1的表達及M2型巨噬細胞極化，進而降低PD-L1抑制劑療效［28］。以上證據(jù)表明，m6A修飾可能是免疫逃逸的調(diào)節(jié)因子，在免疫耐藥中發(fā)揮重要作用。對其進一步研究，不僅可以提高我們對HCC免疫治療的理解，還可以為個體化免疫治療方案的制定提供支持和指導，促進免疫治療的長遠發(fā)展和應用。

2.2.2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員模型評分與ICI

ICI預后標記物及人群選擇是影響其療效的另一重要因素，m6A修飾調(diào)節(jié)成員所構(gòu)建的預后模型及風險評分可成為潛在的免疫治療預測因子。研究通過YTHDF1、YTHDF2、METTL3、KIAA1429和ZC3H13的表達模型構(gòu)建風險評分，發(fā)現(xiàn)其可預測HCC預后，且風險評分與HCC患者總生存期、對索拉非尼及PD-1免疫治療的反應呈負相關［29］。另有研究進一步建立YTHDF1、YTHDF2、METTL3、IGF2BP3、KIAA1429和ZC3H13模型并評分，包括免疫表型評分（immunophenoscore，IPS）、IPS-CTLA4阻斷劑評分、IPS-PD-1/PD-L1阻斷劑評分，同樣發(fā)現(xiàn)低評分的患者更適合免疫治療，其中ZC3H13的表達水平與免疫檢查點顯著正相關，揭示ZC3H13在ICI治療中發(fā)揮著關鍵作用［30］。另外一些使用更多數(shù)量的HCC患者以及m6A修飾調(diào)節(jié)成員所構(gòu)建的模型相繼出現(xiàn)并持有同樣見解。如Liu等［31］、Zhao等［32］使用多種m6A修飾調(diào)節(jié)成員建立模型及評分，表明高m6A評分者總生存期較低，低評分的HCC患者更受益于ICI藥物治療。然而，也有研究顯示與之相反的結(jié)論，在Du等［33］、Zhou等［34］研究中發(fā)現(xiàn)高評分HCC患者單獨使用ICI或兩種ICI藥物療效更強。以上結(jié)論不一可能基于不同來源及數(shù)目的HCC患者、不同數(shù)量的m6A修飾調(diào)節(jié)成員所建立模型和評分，以及不同工作者判斷標準差異導致。而m6A修飾調(diào)節(jié)成員自身不僅可預測預后，與之相關的lncRNA也可進行預測。一項研究鑒定出14個m6A相關lncRNA模型，并根據(jù)風險評分將HCC患者分為高低組，發(fā)現(xiàn)低風險組的IPS、IPS-PD-1/PD-L1阻斷劑、IPS-CTLA4阻斷劑評分顯著較高［35］。更進一步研究鑒定出82個m6A相關lncRNA，基于此將HCC患者分為3種亞型，發(fā)現(xiàn)C1亞類表現(xiàn)出活躍的免疫反應以及對ICI藥物的高敏感性，預后最佳；C2亞類表現(xiàn)出高代謝活性和無免疫浸潤狀態(tài)，預后良好；C3亞類與衰竭的免疫環(huán)境及不良預后有關［36］?？傊?，這些研究表明m6A修飾在重塑多樣化和復雜的TME中發(fā)揮了不可忽視的作用，繼續(xù)量化HCC的m6A修飾模式可增強對TME特征的理解，以便對患者危險分層并向精準治療方向發(fā)展。

2.3 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC化學及放射治療藥物中的作用

若患者不適合或不耐受靶向或免疫治療，化學及放射治療也許能帶來一定幫助。然而化學治療藥物對HCC患者的療效較低，持續(xù)時間有限，且耐藥現(xiàn)象較常發(fā)生，因此很多藥物的臨床價值有限。

2.3.1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與化學治療藥物

HCC常見的化學治療藥物包括順鉑、5-氟尿嘧啶（5-FU）、阿霉素及奧沙利鉑等［8］，m6A修飾調(diào)節(jié)成員對其作用呈兩面性。如Wang等［37］發(fā)現(xiàn)ZC3H13通過m6A-丙酮酸激酶M2型（pyruvate kinase M2，PKM2）途徑抑制糖酵解以減慢HCC的進展，可加強HCC細胞對順鉑敏感性。而Duan等［38］發(fā)現(xiàn)IGF2BP1識別并促進circMAP3K4翻譯，其產(chǎn)物可以保護HCC細胞免受順鉑暴露，致使HCC患者的預后更差。以上研究揭示不同的m6A修飾調(diào)節(jié)成員可以產(chǎn)生相反的作用，但具體機制尚不清楚，需要進一步探索。另一項研究發(fā)現(xiàn)METTL3/IGF2BP1介導的m6A修飾參與LNCAROD穩(wěn)定性并維持其上調(diào)，可在缺氧微環(huán)境下誘導PKM2增加，從而增加HCC細胞有氧糖酵解以增加5-FU耐藥性［39］。這表明同一修飾調(diào)節(jié)成員對不同的藥物會產(chǎn)生相似的作用，更加證明HCC發(fā)生發(fā)展的復雜性及難治性。而這些研究局限于單一藥物，無法同時進行藥物之間比較，有學者進一步對此研究，補充了相關結(jié)論。研究報道HNRNP家族成員RALY-RNA結(jié)合蛋白樣基因，可與FTO協(xié)同上調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子-β2（transforming growth factor-β2，TGF-β2）mRNA的穩(wěn)定性，在其研究中使用順鉑和5-FU以不同濃度處理后，發(fā)現(xiàn)RALY-RNA結(jié)合蛋白樣基因過表達細胞的細胞活力顯著高于對照，從而增加HCC細胞的化學治療耐藥性［40］。另一項研究發(fā)現(xiàn)METTL3在高嘌呤合成代謝的HCC細胞中可上調(diào)無齒E3泛素蛋白連接酶同系物（DTL）促進HCC生長、引起DNA損傷修復功能障礙，并增加順鉑及5-FU耐藥性［41］。

m6A修飾調(diào)節(jié)成員及其相關基因構(gòu)建的預后模型不僅可預測ICI療效，在化學治療中亦可發(fā)揮類似功能。RBM15、LRPPRC、YTHDC2、IGFBP2被用于建立模型，該模型可預測HCC患者對TACE治療的反應，并且研究中還開發(fā)了該模型的內(nèi)源性RNA網(wǎng)絡，進一步揭示了模型的分子機制［42］。另一項研究采用m6A相關血管生成基因構(gòu)建預后模型并定義風險組，發(fā)現(xiàn)與低危組患者相比，高危組的HCC患者預后較差，且準確度高于臨床指標，在其研究中進行藥物篩選發(fā)現(xiàn)阿霉素在高危組更敏感，奧沙利鉑在低危組更有效［43］。綜上，m6A修飾調(diào)節(jié)成員與HCC常見化學治療藥物關系繁雜，在不同情況下采取相對應的靶向藥物進行抑制，才能增強該藥療效以及減少藥物副作用，實現(xiàn)更加精準的治療目標。

2.3.2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與放射治療

HCC放射治療包括內(nèi)照射及外照射，內(nèi)照射使用90釔、131碘、碘化油等核素藥物，外照射僅采用輻射治療［8］。研究顯示HCC中ALKBH5上調(diào)，介導單核細胞募集和M2型巨噬細胞極化，形成正反饋促進肝纖維化并降低放射治療敏感性，揭示ALKBH5具有TME調(diào)節(jié)因子和放射增敏靶點的雙重作用［44］。其他消化道腫瘤，如胃癌靶向WTAP，胰腺癌靶向METTL3或HNRNPC，可增加放射治療敏感性［45］；然而目前關于m6A修飾與HCC放射敏感性的研究較少且不夠詳細，因此需要進行深入研究，以確定更多m6A放射增敏靶點。

2.4 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC中藥及基礎治療藥物中的作用

2.4.1 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與中醫(yī)藥物

近年來，中藥活性成分調(diào)控m6A修飾調(diào)節(jié)成員治療HCC的潛力已被醫(yī)學界認可。丹參在肝癌中藥治療中發(fā)揮重要功能，其有效成分之一丹參酮ⅡA，被證明可上調(diào)METTL14依賴的m6A修飾，增加促凋亡蛋白表達同時降低抑凋亡蛋白表達，從而抑制HCC［46］；另外，還有諸多中藥的抗癌功效已在治療應用處進行歸納總結(jié)。

2.4.2 m6A修飾調(diào)節(jié)成員與基礎藥物

HCC患者往往伴隨著肝炎、肝纖維化、肝硬化等基礎肝病，并因一系列抗腫瘤治療加重上述肝損傷。從肝炎到肝硬化再到HCC的致病過程涉及m6A的調(diào)節(jié)，其中HBx蛋白是HBV致癌潛力的主要因素，通過向腫瘤抑制因子添加m6A修飾來發(fā)揮其促腫瘤潛力，研究發(fā)現(xiàn)抑制FTO、ALKBH5顯著減少HBV蛋白的產(chǎn)生，而抑制METTL3、METTL14、YTHDF2和YTHDF3會增加HBV蛋白水平［47］。對以上m6A修飾調(diào)節(jié)成員進行靶向和/或聯(lián)合抗病毒藥物對于進一步減少病毒復制具有極大潛力。一些靶向m6A修飾調(diào)節(jié)成員對肝病發(fā)揮治療作用的藥物也已被驗證［48-49］：如甜菜堿對非酒精性脂肪性肝病有保護作用，部分原因是通過降低FTO的表達和肝臟m6A水平介導的；苓桂術甘湯通過降低細胞因子信號傳導抑制因子2的m6A水平來降低其表達，成為改善非酒精性脂肪性肝病的有效配方；膳食姜黃素通過調(diào)節(jié)METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5和YTHDF2表達，從而改善脂多糖誘導的肝損傷和脂質(zhì)代謝失調(diào)；艾塞那肽、甲氯芬酸、恩他卡彭為FTO抑制劑，可改善肝病患者的肝脂肪變性，減輕脂肪量。總之，m6A修飾在HCC的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用，但關于m6A修飾與代謝性或病毒性肝病的研究仍處于起步階段，迫切需要大量的探索，根據(jù)HCC患者的病因和發(fā)病機制定制治療方案，將更加優(yōu)化個體化治療。

3 m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC治療中的應用

m6A修飾與HCC的發(fā)生發(fā)展、治療及預后密切相關，異常的m6A調(diào)節(jié)成員已被確定為新型抗癌藥物靶點，在此簡要進行闡述。

3.1 天然藥物

天然藥物即為中藥，與化學藥物相比，這些藥物的活性成分在具有療效的基礎上毒性相對較低，對于身體衰弱的HCC患者更為適用，因此開發(fā)其抗癌潛力很有必要。目前研究已揭示黃芩苷可通過調(diào)節(jié)METTL3/m6A/HKDC1軸抑制HCC的進展［50］；龍血竭乙醇提取物可通過下調(diào)METTL3表達及降低METTL3與凋亡抑制基因Survivin mRNA的結(jié)合率，從而發(fā)揮抗HCC作用［51］；槲皮素已被鑒定為METTL3抑制劑，它可以填充S-腺苷蛋氨酸的腺苷部分，降低其酶活性，從而抑制HCC細胞增殖［52］。白藜蘆醇可通過降低YTHDF2表達水平進而調(diào)控肝癌細胞的脂質(zhì)和能量代謝，抑制HCC增殖［53］。大黃酸為第一個確定的FTO抑制劑，與阿霉素相互作用可進一步減低耗氧率，抑制線粒體能量代謝而發(fā)揮協(xié)同抗HCC作用［54］。人參皂苷Rh2具有廣泛的抗腫瘤效果，通過影響甲基轉(zhuǎn)移酶ZC3H13/CBLL1 的核定位，降低IGFBP1表達而抑制腫瘤細胞生長［55］；黃連堿可通過促進IGF2BP1泛素化抑制HCC發(fā)展和轉(zhuǎn)移［56］。葫蘆素B可以靶向IGF2BP1發(fā)揮變構(gòu)抑制作用，從而誘導HCC細胞凋亡、增加免疫細胞浸潤并抑制PD-L1表達提高ICI療效［57］。

3.2 合成藥物

合成藥物經(jīng)歷了從單純化學合成到將人工智能和化學合成集成到藥物領域的現(xiàn)代技術，并且人工智能可能在未來持續(xù)引領藥物研發(fā)。ALK-04為靶向ALKBH5的小分子抑制劑，可通過調(diào)節(jié)腫瘤浸潤淋巴細胞改善免疫抑制TME，將其與ICI藥物聯(lián)合應用可緩解耐藥，增強多種癌癥的免疫療效［58］。Huang等［59］于2019年開發(fā)了2種有前景的FTO抑制劑，即FB23和FB23-2，并指出FB23-2對急性髓性白血病細胞有明顯的抑瘤作用；而后研究人員通過人工納米平臺，將FB23-2和腫瘤相關抗原遞送到腫瘤浸潤樹突狀細胞（DC）中，發(fā)現(xiàn)其可以促進DC成熟及CD8+ T細胞浸潤，從而抑制HCC細胞增殖并提高ICI療效［60］。STM2457是一種高效、選擇性的METTL3抑制劑，可增強HCC對侖伐替尼的敏感性［17］。納米顆粒小干擾RNA，為一種新型METTL3靶向藥物，其聯(lián)合PD-1抑制劑可協(xié)同激活CD8+ T細胞并介導HCC消退［25］。

4 結(jié)論與展望

越來越多的證據(jù)表明m6A修飾對HCC的治療及預后具有重要意義。m6A修飾調(diào)節(jié)成員在HCC藥物治療中起著至關重要的作用，我們可以通過現(xiàn)有或研發(fā)更新的藥物靶向失調(diào)的m6A修飾調(diào)節(jié)成員，以及將其與HCC治療藥物進行聯(lián)合應用均具有可觀的潛力。但目前m6A修飾在HCC診斷和治療中的應用仍處于早期階段，以下問題有待進一步研究：① m6A修飾調(diào)節(jié)成員間關系錯綜復雜，其修飾過程動態(tài)可逆，在不同研究中甚至顯示作用相互矛盾，如何明確三者功能需要進一步探索；② m6A修飾調(diào)節(jié)成員對HCC治療藥物主要產(chǎn)生抑制作用，但在某些情況下亦可表現(xiàn)出“雙刃劍”功效，需要深入探索相關機制并細致分類以便更好利用；③ 本文列舉靶向失調(diào)的m6A調(diào)節(jié)成員藥物可能冰山一角，其特異性差及不良反應大等缺點亦不容忽視，將其與抗腫瘤藥物聯(lián)合應用可能發(fā)揮更大潛力，期待在未來研究中找到更優(yōu)藥物或?qū)崿F(xiàn)老藥新用。相信將會有更多關于HCC發(fā)生發(fā)展的調(diào)控機制和治療靶點被開發(fā)，以造福更多的患者。

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（責任編輯：楊江瑜）