基于COI 基因的浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜遺傳多樣性研究

摘 要 為了解浙江省內(nèi)不同黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata）群體的種質(zhì)資源現(xiàn)狀，基于線粒體DNA COI序列對來自浙江省內(nèi)野外和養(yǎng)殖場的8個黃緣閉殼龜群體的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)進行比較分析。結(jié)果表明：黃緣閉殼龜線粒體COI基因序列長度為1 040 bp，A=27. 4%、T=30. 5%、C=24. 6%、G=17. 5%，有較強的AT偏好性；共定義9 個單倍型，單倍型多樣性（Hd）為（0. 799 00±0. 210 00），核苷酸多樣性（Pi）為（0. 002 09±0. 001 47），呈“高Hd低Pi”遺傳分布；不同黃緣閉殼龜群體間的遺傳距離為0～0. 003，群體內(nèi)部的遺傳距離為0～0. 004，其中磐安后閣村（YS）群體內(nèi)部的遺傳距離最大，為0. 004；單倍型系統(tǒng)發(fā)育樹并未呈現(xiàn)明顯的譜系結(jié)構(gòu)；群體間遺傳分化指數(shù)（FST）為-0. 347 52～0. 822 22，8 個群體的遺傳分化不顯著（pgt;0. 05）；中性檢驗（Tajima’s D=-0. 366 27，F(xiàn)u’s FS=-0. 605）與核苷酸錯配分布均表明，浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜群體并未經(jīng)歷種群擴張事件，同時，由Mantel檢驗可知，遺傳距離與地理距離沒有顯著的相關(guān)性（R=0. 293 8，pgt;0. 05）；AMOVA分子方差結(jié)果顯示，群體內(nèi)的遺傳變異高于群體間（85. 06%gt;14. 94%）。研究表明，浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜群體之間為高單倍型多樣性和低核苷酸多樣性的遺傳特征，并且存在一定水平的遺傳分化，群體內(nèi)存在明顯的基因交流，根據(jù)COI基因分析顯示，在磐安縣獲得的野生黃緣閉殼龜個體確定為黃緣閉殼龜浙江種，同時也發(fā)現(xiàn)存在浙江種與安徽種的雜交種，建議將分化程度不同的黃緣閉殼龜群體劃分為不同單元保護。研究結(jié)果為浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜種質(zhì)資源開發(fā)利用和合理制定保護措施提供了基礎(chǔ)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：黃緣閉殼龜；COI ；遺傳多樣性；遺傳結(jié)構(gòu)；浙江省

中圖分類號：Q953 文獻標識碼：A 文章編號：2310 - 1490（2024）- 02 - 0367 - 11

DOI：10.12375/ysdwxb.20240216

黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata）別名夾板龜、克蛇龜、斷板龜和黃緣盒龜，屬地龜科（Geoemydi?dae）閉殼龜屬（Cuora），是水陸兩棲性龜類。野生黃緣閉殼龜主要分布于我國河南省和安徽省，此外，浙江省、湖南省和臺灣地區(qū)等地也有野生黃緣閉殼龜?shù)膱蟮溃?］。根據(jù)世界自然保護聯(lián)盟（IUCN）記錄，黃緣閉殼龜可分為臺灣亞種（C. f. flavomarginata）、中國大陸南方亞種（C. f. sinensis）以及日本琉球亞種（C. f. evelynae）［2］。由于黃緣閉殼龜具有極高的食用、藥用價值，馴化性好，長相獨特，觀賞價值高，其野生資源遭到嚴重破壞，已被IUCN列為瀕危（EN）物種［2］，被《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》附錄Ⅱ收錄［3］，被《中國生物多樣性紅色名錄—脊椎動物卷（2020）》列為極危（CR）物種［4］，2016年被列入《浙江省重點保護陸生野生動物名錄》［5］。

目前，關(guān)于黃緣閉殼龜?shù)难芯恐饕性谌斯ゐB(yǎng)殖與繁殖［6?7］、形態(tài)與組織［8］、遺傳多樣性［9］及線粒體基因組［10?11］等方面。荊勝利等［12］和郭旭升等［13］通過對黃緣閉殼龜保護遺傳學等方面的分析，分別探究了大別山區(qū)人工馴養(yǎng)黃緣閉殼龜?shù)倪z傳多樣性和河南信陽黃緣閉殼龜保護區(qū)的種群現(xiàn)狀，為黃緣閉殼龜后續(xù)的保護提供了基礎(chǔ)。潘冬冬等［14］基于線粒體基因?qū)Π不拯S緣閉殼龜和臺灣黃緣閉殼龜進行了研究，并對其在安徽省皖南山區(qū)、大別山區(qū)的野外生存情況進行了調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃緣閉殼龜?shù)馁Y源衰退，并存在種質(zhì)混雜的情況。董傳舉等［15］對黃緣閉殼龜種群進行分類時，描述了其生物學特性，但關(guān)于浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜種質(zhì)資源現(xiàn)狀、遺傳多樣性研究卻未見報道。因此，本研究利用線粒體COI基因序列對浙江省內(nèi)不同黃緣閉殼龜群體進行遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性分析，以期了解其種質(zhì)資源情況，從而為浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜?shù)暮侠砝?、資源保護等研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

試驗用黃緣閉殼龜取自義烏宏富農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司、東陽金雕養(yǎng)龜基地、東陽巍山養(yǎng)殖場、湖州菱湖龜鱉場、永康后項養(yǎng)龜場和永康下貴養(yǎng)龜場6家養(yǎng)殖場的養(yǎng)殖群體以及杭州清涼峰國家級自然保護區(qū)、磐安后閣村野外個體，共44個樣本（表1）。

1. 2 試驗方法

1. 2. 1 基因組DNA提取

使用無菌拭子擦拭黃緣閉殼龜口部黏液，置于含有200 μL 0. 01 mol/L磷酸緩沖鹽溶液（PBS）的離心管中保存。采用上海生工Ezup柱式動物基因組DNA 抽提試劑盒提取基因組DNA，使用NanoDrop2000分光光度計測定提取的DNA純度和濃度，將合格樣品于冰箱中-20 ℃保存。

1. 2. 2 PCR擴增及測序

根據(jù)GenBank數(shù)據(jù)庫中公布的黃緣閉殼龜線粒體全基因組序列（登錄號：EU708434. 1），采用Primer Premier 5. 0軟件設(shè)計其線粒體COI序列特異性引物，送至生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物。引物序列為COI-F：5'-AGCCATCTTACCTGTGTTTT-3'，COI-R：5'-TTGCTCAAGTTTGGTGTAGT-3'。PCR 總反應(yīng)體系為25 μL，其中R Taq DNAPremix 10 μL，基因組DNA 1 μL，上、下游引物各1 μL，ddH2O補足至25 μL。PCR擴增程序為94 ℃預變性5 min；94 ℃變性30 s，56 ℃退火45 s，72 ℃延伸90 s，共5個循環(huán)；72 ℃延伸10 min。擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，送生工生物工程（上海）股份有限公司雙向測序。

1. 2. 3 數(shù)據(jù)分析

利用SeqMan軟件參照序列峰圖對所測黃緣閉殼龜COI序列進行人工校正和修飾［16］。使用MEGA6. 0軟件進行多序列比對、堿基組成分析以及系統(tǒng)發(fā)育分析，采用鄰接法（NJ）構(gòu)建單倍型聚類樹［17］，并計算群體間及單倍型間的遺傳距離。使用DnaSP 6軟件計算序列變異位點數(shù)，分析不同群體的單倍型數(shù)、群體單倍型多樣性（Hd）以及核苷酸多樣性（Pi ）等遺傳多樣性指數(shù)［18］，繪制核苷酸不配對分布曲線。通過Tajiam’s D 檢驗和Fu’ FS中性檢驗明確黃緣閉殼龜群體在歷史上是否發(fā)生群體擴張。由Arlequin3. 11軟件計算群體遺傳分化指數(shù)（FST），使用Mantel檢驗，自展重復1 000次，對黃緣閉殼龜群體的遺傳距離與地理距離之間的相關(guān)性進行分析［19］，并基于分子方差分析（AMOVA）分析群體間的遺傳變異［20］。采用Network 5. 0（Rohl 2003）軟件基于中間連接法建立單倍型網(wǎng)絡(luò)圖［21］，以描述單倍型序列的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系以及地理關(guān)系。

2 結(jié)果

2. 1 線粒體COI基因序列的堿基組成及變異特征

對測序后的序列進行比對，獲得黃緣閉殼龜線粒體COI基因序列的長度為1 040 bp，基因序列堿基A、T、C、G的平均含量分別為27. 4%、30. 5%、24. 6%和17. 5%，A+T的平均含量為57. 9%，C+G的平均含量為42. 1%，表現(xiàn)出AT偏倚性。在44只黃緣閉殼龜個體線粒體COI序列中，共檢測到保守位點1 004個，多態(tài)性位點13個，單一信息位點4個，簡約信息位點9個。

2. 2 黃緣閉殼龜群體遺傳多樣性

基于線粒體COI 基因序列共定義了9 個單倍型，8 個黃緣閉殼龜群體的單倍型多樣性（Hd）為（0. 429 00±0. 169 00）～（1. 000 00±0. 500 00），核苷酸多樣性為（0. 000 42±0. 000 16）～（0. 004 25±0. 001 21）。其中，YS 群體的核苷酸多樣性最高（0. 004 25±0. 001 21），DY1群體、HUZ群體和YW群體的單倍型多樣性較高，分別為（1. 000 00±0. 500 00）、（1. 000 00±0. 096 00）和（1. 000 00±0. 126 00）（表2）。

2. 3 黃緣閉殼龜群體間的遺傳距離和遺傳分化

遺傳距離分析可知，基于線粒體COI基因序列，兩兩群體間的遺傳距離為0～0. 003，其中YW、YS群體與其他群體間的遺傳距離較遠（0. 002～0. 003）。8個群體內(nèi)的遺傳距離為0～0. 004，HZ 和YK2群體內(nèi)遺傳距離最小，YS 群體內(nèi)遺傳距離最大，達到0. 004（表3）。

FST 分析結(jié)果顯示，兩兩群體間的FST 值在-0. 347 52～0. 822 22，DY1 與YK2 之間的遺傳分化指數(shù)最大，為0. 822 22；其次為HUZ 群體與YK2 群體，遺傳分化指數(shù)為0. 615 56，處于較高遺傳分化水平。DY1 和YK1 群體間的遺傳分化指數(shù)最小，為-0. 347 52，表明兩個群體間的遺傳分化較弱（表3）。同時，Mantel檢驗結(jié)果顯示，浙江省內(nèi)不同黃緣閉殼龜群體間的遺傳距離與地理距離之間沒有顯著的相關(guān)性（R=0. 293 8，p=0. 134），表明黃緣閉殼龜種群的遺傳分化受地理因素的影響不顯著。

利用分子方差分析和遺傳分化系數(shù)對8個群體間的遺傳變異和遺傳進化進行分析?；贑OI基因序列，群體間的分子變異率為14. 94%，群體內(nèi)的分子變異率為85. 06%，分子變異主要發(fā)生在群體內(nèi)部。群體總體遺傳分化系數(shù)為0. 149 39（pgt;0. 05），總體分子變異處于中等水平（表4）。

2. 4 黃緣閉殼龜群體間單倍型組成和分布

對9 個單倍型進行分析，構(gòu)建單倍型網(wǎng)絡(luò)（圖1）。在定義的9個單倍型中，共有5個共享單倍型，4個特有單倍型。共享單倍型分別為Hap1（在DY1和YW 群體中共享）、Hap2（在YW、YS、HUZ和YK1群體中共享）、Hap3（在YW、DY2、YS、HZ和YK2群體中共享）、Hap4（在DY1、DY2、HZ、HUZ和YK1群體中共享）和Hap8（在YS和YK1群體中共享），其余4個單倍型在不同群體中獨有，Hap5和Hap9為YS群體獨有，Hap6和Hap7為HUZ群體獨有。

2. 5 黃緣閉殼龜群體單倍型系統(tǒng)發(fā)育

基于線粒體COI基因序列的9個單倍型，以三線閉殼龜（C. trifasciata）和潘氏閉殼龜（C. pani）為外群，構(gòu)建NJ系統(tǒng)進化樹。結(jié)果顯示，8個黃緣閉殼龜群體單倍型整體分為兩個大分支，其中，Hap1、Hap5、Hap8 和Hap7 與黃緣閉殼龜（C. flavomarginata，KJ680321）線粒體基因組中的COI 基因聚為一支；Hap3、Hap9、Hap6 與NCBI 數(shù)據(jù)庫中的黃緣閉殼龜（C. flavomarginata，EU708434. 1）線粒體基因聚為一支（圖2）。不同群體的單倍型混雜分布，并未呈現(xiàn)一定的地理規(guī)律。8 個群體的單倍型遺傳距離為0. 001～0. 011，其中Hap5和Hap9之間的遺傳距離最大，為0. 011（表5）。

2. 6 黃緣閉殼龜種群歷史動態(tài)

所有黃緣閉殼龜?shù)乩砣后w的中性檢驗（Tajiam’sD 和Fu’ FS）結(jié)果見表6。Tajiam’s D 檢測中，除DY1、DY2和HZ群體外，其余群體的檢測結(jié)果均為負值（pgt;0. 10），且并未檢測到種群擴張（pgt;0. 05）；Fu’ FS檢測中，除DY1、DY2、YK1和HZ群體外，其余群體檢測結(jié)果均為負值（pgt;0. 05）。核酸不匹配分布圖（圖3）顯示，基于COI基因，8個浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜群體的錯配分布曲線除DY1、DY2和YK2外，均未呈現(xiàn)明顯的單峰模式，與中性檢驗結(jié)果大致吻合，表明檢驗結(jié)果偏離了中性模式，但并不顯著（pgt;0. 05）。總體上說，黃緣閉殼龜群體在歷史上比較穩(wěn)定，均未經(jīng)歷過種群擴張。

3 討論

3. 1 黃緣閉殼龜線粒體DNA COI序列組成

本研究基于線粒體COI 序列對浙江省8個黃緣閉殼龜群體的遺傳多樣性進行分析。在44條序列堿基組成中，A+T堿基含量為57. 9%，G+C堿基含量為42. 1%，表現(xiàn)出明顯的AT堿基偏倚性，結(jié)果與王玨［22］和張艷云等［10］的研究相似，而這也與大部分脊椎動物線粒體基因的編碼模式［23］一致。經(jīng)本研究發(fā)現(xiàn)，黃緣閉殼龜線粒體基因中的A、T、C、G分布呈現(xiàn)不均一性，并且具有高含量A+T堿基的線粒體基因，這也使得黃緣閉殼龜在進化中更具有優(yōu)勢［24］。

3. 2 黃緣閉殼龜群體遺傳多樣性分析

遺傳多樣性是物種進化和適應(yīng)環(huán)境變化的基礎(chǔ)，遺傳多樣性水平越高，種群對環(huán)境的適應(yīng)能力越強，種群則會有更好的發(fā)展［25?26］。線粒體DNA的核苷酸多樣性和單倍型多樣性是衡量群體遺傳多樣性和遺傳分化的重要指標［27］，共同影響著種群進化歷史。通過Grant等［28］的研究可知，Hd和Pi的臨界值分別為0. 5和0. 005，數(shù)值越大，表明一個群體的遺傳多樣性水平越高，同時，平均核苷酸差異數(shù)（K）越大，遺傳多樣性也越豐富［29］。本研究中，8個群體的平均單倍型多樣性和核苷酸多樣性分別為（0. 799 00±0. 210 00）和（0. 002 09±0. 001 47），表明8個群體的遺傳多樣性水平處于中等。YS群體的Hd和Pi分別為（0. 833 00±0. 127 00）和（0. 004 25±0. 001 21），在所有群體中K 值最大，為4. 388 89；其次為YW群體，其Hd和Pi分別為（1. 000 00±0. 126 00）和（0. 003 85±0. 001 37），K 值為4. 000 00。由此可知，YS 群體的遺傳變異程度和遺傳多樣性水平在黃緣閉殼龜群體中最高，YW群體次之。根據(jù)Grant等［28］提出的關(guān)于單倍型多樣性和核苷酸多樣性的4種模式可知，本研究中的HZ群體的Hd為（0. 429 00±0. 169 00），Pi為（0. 000 42±0. 000 16），屬于低Hd低Pi模式，由此可推知，在HZ群體中可能發(fā)生了瓶頸效應(yīng)或奠基者事件。除HZ群體，本研究的其余群體均屬于高Hd低Pi模式，但在此7 個群體中，均未呈現(xiàn)明顯的種群擴張，意味著7個群體目前極有可能均處于瓶頸期。

3. 3 黃緣閉殼龜群體遺傳結(jié)構(gòu)分析

基于線粒體DNA COI 基因序列分析了浙江省內(nèi)黃緣閉殼龜群體間的遺傳距離和遺傳分化。遺傳距離在一定程度上影響著種群的遺傳分化程度，遺傳距離大，彼此親緣關(guān)系遠，遺傳分化程度就高［30］。本研究中的8個黃緣閉殼龜群體中，群體間遺傳距離為0～0. 003，而群體內(nèi)的遺傳距離為0～0. 004，此結(jié)果意味著在不同的黃緣閉殼龜群體內(nèi)部或已出現(xiàn)種的分化。其中，YS群體內(nèi)部的遺傳距離最大，為0. 004，推測在YS黃緣閉殼龜群體內(nèi)已經(jīng)分化出黃緣閉殼龜浙江種。遺傳分化系數(shù)FST作為群體遺傳分化程度的重要衡量指標，在群體遺傳學中起到極為重要的作用，F(xiàn)ST 可表示群體間分化程度［31］，以0. 05、0. 15 作為分化程度的標準，本研究中的AMOVA分析結(jié)果表明，8個黃緣閉殼龜群體間的FST為0. 149 39，小于0. 150 00，為中等水平的遺傳分化；群體間變異僅占14. 94%，而群體內(nèi)變異為85. 06%，即黃緣閉殼龜遺傳變異主要來源于群體內(nèi)部。此外，本研究中的8個黃緣閉殼龜群體的FST指數(shù)為-0. 347 52～0. 822 22，其中YS群體與HUZ群體間存在較大遺傳分化（FST=0. 168 78），與HZ 群體（FST=0. 062 40）和YK2群體（FST=0. 005 41）間遺傳分化較小，同時該群體與其他4個群體的FST值均小于0，表明YS群體內(nèi)部個體間的遺傳分化大于與其他群體間的遺傳分化。

單倍型系統(tǒng)發(fā)育分析顯示，8個黃緣閉殼龜群體并沒有明顯的地理聚群和譜系結(jié)構(gòu)，推測各群體內(nèi)部存在廣泛的基因交流，沒有形成明顯的種群遺傳結(jié)構(gòu)?；跇颖緲?gòu)建的NJ單倍型系統(tǒng)發(fā)育樹（圖2）和單倍型遺傳距離（表5）顯示，安徽黃緣閉殼龜（GenBank登錄號：EU708434. 1）與臺灣黃緣閉殼龜（GenBank 登錄號：KJ680321）之間的單倍型遺傳距離為0. 001，這與2014年潘冬冬［32］的研究結(jié)果一致，同時根據(jù)該研究可知，雖然兩者之間在遺傳距離上并未產(chǎn)生顯著分化，但在形態(tài)上已有顯著差異，因此，極小的遺傳距離可明確區(qū)分安徽黃緣閉殼龜與臺灣黃緣閉殼龜。通過對黃緣閉殼龜種群進行Mantel 相關(guān)性檢驗后，發(fā)現(xiàn)其R 值小于0. 700 0（pgt;0. 05），說明黃緣閉殼龜種群間的遺傳分化并未有顯著的地理隔離效應(yīng)［33］。

在本研究中，Hap1 與Hap5、Hap1 與Hap8 之間的單倍型遺傳距離均小于0. 002，表明這3個單倍型個體間親緣關(guān)系較近；Hap1、Hap5、Hap8與Hap7、臺灣黃緣閉殼龜（KJ680321）聚為一支，而Hap7與臺灣黃緣閉殼龜單倍型間的遺傳距離小且僅為0. 001，即二者親緣關(guān)系較近，由此推測具有Hap1、Hap5 和Hap8這3個單倍型之一的黃緣閉殼龜為臺灣黃緣閉殼龜種群。Hap6與安徽黃緣閉殼龜（EU708434. 1）聚為一支，且二者之間的單倍型遺傳距離為0. 001，即享有該單倍型的個體在很大程度上是來自安徽本地的黃緣閉殼龜。Hap9為YS群體的獨有單倍型，且被YS群體中的1只個體獨享，Hap9與Hap1、Hap5的單倍型遺傳距離分別為0. 010、0. 011，同時，Hap9與安徽黃緣閉殼龜和臺灣黃緣閉殼龜之間的單倍型遺傳距離分別為0. 003和0. 004，均大于安徽黃緣閉殼龜與臺灣黃緣閉殼龜之間的單倍型遺傳距離，雖未達到根井正利［34］所得出的亞種之間的遺傳距離（0. 02～0. 20），但Hap9并未與其他單倍型聚為一支，且與其他單倍型的距離均較遠，推測獨享單倍型Hap9 的YS 黃緣閉殼龜為黃緣閉殼龜浙江種。此外，Hap3與Hap9聚為一小支，二者之間的遺傳距離為0. 002，且Hap3與Hap1、Hap5的遺傳距離分別為0. 008、0. 009，由此表明單倍型為Hap3的黃緣閉殼龜群體可能為安徽黃緣閉殼龜與浙江黃緣閉殼龜?shù)碾s交種。

3. 4 黃緣閉殼龜種群動態(tài)分析

核苷酸配對差異分析及中性檢驗是研究種群歷史動態(tài)的有效檢驗方法［35］，可通過Tajima’ D 和Fu’sFS檢驗檢測群體是否發(fā)生擴張，若檢測結(jié)果為顯著負值且核苷酸錯配分布曲線呈單峰時，表明群體發(fā)生過擴張；若為雙峰或多峰時，則表明群體一直保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)，未經(jīng)歷過擴張［26］。本研究基于COI序列的分析結(jié)果顯示，黃緣閉殼龜8個群體中有5個群體的Tajima’ D 和4個群體的Fu’s FS為負值，但沒有顯著性差異（pgt;0. 05），同時，除DY1、DY2和YK2外，核苷酸錯配分布圖顯示均為雙峰或多峰形，DY2和HZ均為正值，DY1的Tajima’ D 和Fu’s FS均為0，上述研究結(jié)果表明，浙江省內(nèi)8個黃緣閉殼龜群體沒有經(jīng)歷過擴張，而是保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)。

3. 5 黃緣閉殼龜種質(zhì)資源保護

黃緣閉殼龜具有較高的經(jīng)濟價值，近年來被大肆捕殺，導致野生種群數(shù)量急劇下降，黃斌等［36］的研究結(jié)果顯示，安徽省境內(nèi)的野生黃緣閉殼龜分布面積日漸縮小，只在安徽大別山區(qū)存在少量野生個體。此外，由于黃緣閉殼龜繁殖力較低，同時對繁殖產(chǎn)卵的環(huán)境要求極高，隨著山區(qū)旅游業(yè)和經(jīng)濟的發(fā)展，導致黃緣閉殼龜沒有合適的繁衍環(huán)境，從根源上減少了野生黃緣閉殼龜?shù)臄?shù)量。目前，河南信陽已于2005年建立了黃緣閉殼龜救護中心，安徽省的黃緣閉殼龜繁育也已經(jīng)形成較為成熟的生態(tài)技術(shù)模式［32］。在本研究中，針對浙江省部分養(yǎng)殖場的黃緣閉殼龜群體和野生群體進行了遺傳多樣性調(diào)查，結(jié)果顯示，黃緣閉殼龜整體遺傳多樣性較高，但部分群體遺傳多樣性仍舊較低，應(yīng)更大力度加強對野生黃緣閉殼龜?shù)谋Ｗo。由于分布在不同地區(qū)的黃緣閉殼龜存在差異，所以應(yīng)對不同地區(qū)的黃緣閉殼龜劃分保護單元，防止種質(zhì)混雜，對于野生黃緣閉殼龜可以進行棲息地保護，對種質(zhì)資源進行合理利用，為黃緣閉殼龜?shù)酿B(yǎng)殖及人工繁育提供理論指導。

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基金項目：浙江省省級重點研發(fā)計劃項目（2021C02044）