雞傳染性支氣管炎的診斷及科學(xué)有效的防治措施

李婷婷

DOI： 10.3969/j.issn.1003-1650.2024.18.032

雞傳染性支氣管炎屬于一種急性呼吸道疾病，是由傳染性支氣管炎病毒感染而引起的一種嚴(yán)重、具有高度接觸性的傳染病，在臨床上可以將雞肉分為呼吸型、腎型、腺胃炎型和生殖系統(tǒng)型4種，在這4種類型當(dāng)中，呼吸型和腎型的發(fā)生率是最多的?；疾‰u會有以下癥狀：無法正常呼吸，持續(xù)的咳嗽，氣喘，打噴嚏，流鼻涕，氣管內(nèi)有啰音，氣管內(nèi)有漿液性或卡他性炎癥病變。腎型出現(xiàn)的癥狀是：腎明顯腫脹，表面變得蒼白，并且有很多的尿酸鈉在腎小管和輸尿管內(nèi)堆積。該病通常以起病突然、發(fā)展迅速、死亡率高為特征，一旦暴發(fā)，將對雞的生長與繁殖造成極大的危害。成年期的雞如果被傳染了一般沒有什么癥狀，但會對雞的生產(chǎn)有很大的危害，導(dǎo)致蛋雞的產(chǎn)蛋率明顯降低，雞蛋殼變薄，蛋清淡薄，肉雞生長發(fā)育不良。

傳染性支氣管炎多見于成年期的雞群和30-35日齡的幼雞，其他時期的雞對該種疾病有比較高的抵抗力。在產(chǎn)蛋期，當(dāng)?shù)半u被傳染上傳染病后，其產(chǎn)蛋率會降低10%-50%，甚至下降60%-90%，對養(yǎng)雞業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。根據(jù)目前我國畜禽疫病的發(fā)病和傳播情況，由于缺乏有效的防治措施，導(dǎo)致畜禽疫病的爆發(fā)，給畜禽整體帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。另外，由于雞群中存在著多種細(xì)菌、病毒等疾病，因此，在進(jìn)行雞群傳染病治療的時候，往往會出現(xiàn)一些比較復(fù)雜的病癥，這給雞群的診斷帶來了一定的困難。因此，在進(jìn)行疾病防治的時候，必須強(qiáng)化對雞傳染性支氣管炎流行病學(xué)研究，進(jìn)行詳細(xì)的了解，有效的預(yù)防和治療，在較快的速度下將病情控制住，以免造成更加嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

一、雞流行病學(xué)特征

1、病原特征

雞傳染性支氣管炎是由雞傳染性支氣管炎病毒引起的一種急性、高度傳染性的疾病。該病主要影響呼吸道，但也可以影響雞腎臟和生殖系統(tǒng)，對家禽產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。IBV的血清分型非常復(fù)雜，這是因為病毒具有高度的遺傳多樣性，可導(dǎo)致不同的血清型出現(xiàn)。血清型的劃分基于病毒表面的刺突（S）蛋白，這種蛋白負(fù)責(zé)與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，并且是引起免疫反應(yīng)的主要抗原。傳統(tǒng)上，血清型是通過病毒中和試驗確定的，但這種方法耗時久且需要專門的實驗室條件。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，尤其是序列分析和分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用，現(xiàn)在可以更精確地進(jìn)行血清型鑒定。IBV是冠狀病毒科（Coronaviridae）的成員，其特征是具有俗稱“冠”的棘突（spike）蛋白，這些蛋白從病毒顆粒的表面突出。IBV的病毒顆粒通常是圓形或多形性的，并且直徑約為120-160nm。病毒顆粒包括一層脂質(zhì)包膜，這使得它們對環(huán)境因素（如溶劑和消毒劑）相對敏感。病毒的基因組由單鏈正義RNA組成，大約有27000-32000個核苷酸。病毒對環(huán)境的適應(yīng)性較差。病毒對熱、干燥和紫外線非常敏感，但在冷和濕潤的條件下可以存活較長時間。在室溫下，病毒可能在干燥的表面上存活幾天，在水中或濕度較高的物體表面上可能存活更長時間。環(huán)境中的不同消毒劑，如甲醛、醇類和氯化物，可以有效地滅活該病毒。IBV是一種具有脂質(zhì)包膜的RNA病毒，對溫度和pH的變化敏感。病毒在56℃的溫度下幾分鐘內(nèi)可被滅活，在酸性或堿性條件下也容易失活。病毒對有機(jī)溶劑和去垢劑敏感，因為這些化學(xué)物質(zhì)可以破壞病毒的脂質(zhì)包膜。

2、致病機(jī)理

IBV主要通過呼吸道進(jìn)入宿主體內(nèi)。它的刺突（S）蛋白特別是S1亞基具有與宿主細(xì)胞表面受體結(jié)合的能力，這是病毒侵入細(xì)胞的第一步。病毒與受體結(jié)合后，通過膜融合或受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入宿主細(xì)胞。病毒的RNA基因組在進(jìn)入宿主細(xì)胞后直接作為mRNA使用，通過宿主的翻譯機(jī)制產(chǎn)生病毒蛋白，包括結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。非結(jié)構(gòu)蛋白參與病毒基因組的復(fù)制和亞基因組mRNA的合成。病毒的進(jìn)入和復(fù)制觸發(fā)宿主細(xì)胞內(nèi)的免疫反應(yīng)。宿主細(xì)胞會通過干擾素等抗病毒機(jī)制來抵抗病毒的復(fù)制。然而，IBV病毒具有一定的免疫逃避策略，可能通過抑制干擾素的產(chǎn)生或干擾干擾素信號通路來逃避宿主的抗病毒反應(yīng)。IBV主要感染呼吸道上皮細(xì)胞，但也可以感染腎臟和泌尿生殖道。病毒的復(fù)制和蔓延導(dǎo)致細(xì)胞死亡和組織破壞，引發(fā)炎癥反應(yīng)。這些病理變化導(dǎo)致典型的臨床癥狀，如呼吸困難、咳嗽、打噴嚏、流鼻涕和減少產(chǎn)蛋。病毒致病機(jī)理是一個復(fù)雜的過程，既包括病毒因子也包括宿主的免疫應(yīng)答。由于病毒的高變異性，它能夠逃避宿主的免疫系統(tǒng)并在雞群中快速傳播，導(dǎo)致疾病爆發(fā)和經(jīng)濟(jì)損失。因此，了解病毒的致病機(jī)理對于開發(fā)有效的疫苗和控制措施至關(guān)重要。

3、流行特點(diǎn)

雞傳染性支氣管炎病毒是一種冠狀病毒，天然宿主是雞，各種年齡的雞都有可能被病原感染，尤其是7-18周齡的雞易感性最大，產(chǎn)蛋雞中也容易被病原感染。傳染性支氣管炎病毒的傳播和流行沒有任何季節(jié)的關(guān)系，但是在秋冬季節(jié)的發(fā)生率是最高的，這是由于這兩個季節(jié)存在著很多的應(yīng)激因素，外部的溫度會有很大的波動。如果養(yǎng)殖管理出現(xiàn)了問題，養(yǎng)殖密度過大，圈舍溫度出現(xiàn)了改變，周圍的衛(wèi)生環(huán)境變得很差，飼料營養(yǎng)價值降低，營養(yǎng)嚴(yán)重缺乏，雞群身體抵抗力降低，都可以引發(fā)或者促進(jìn)該種病毒在養(yǎng)殖場內(nèi)的快速傳播蔓延。雞傳染性支氣管炎病毒一般是經(jīng)過胃腸道和帶毒的雞蛋進(jìn)行橫向和縱向的傳播。臨床康復(fù)期和成年期的雞是傳染性支氣管炎病毒的重要感染源，尤其是康復(fù)期的雞能夠長期攜帶傳染性支氣管炎病毒，是導(dǎo)致畜禽養(yǎng)殖中多次暴發(fā)的重要因素。在正常情況下，雞的傳染能力很強(qiáng)，通常會在發(fā)病后1-2d內(nèi)蔓延到全群。

二、臨床表現(xiàn)

不同年齡雞之間感染傳染性支氣管炎病毒后，臨床表現(xiàn)也各不相同。在這些類型中，1-4周齡的雛雞對病毒的易感性最強(qiáng)，會表現(xiàn)為突然發(fā)病。在發(fā)病后，多數(shù)患病病例會表現(xiàn)為：精神狀態(tài)變差，生長發(fā)育受到了嚴(yán)重的影響，羽毛雜亂，雙翅下垂，首先會出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸道癥狀，呼吸極其困難，不停地伸頸張嘴呼吸，有些患病的雞還會表現(xiàn)出咳嗽。發(fā)病2-3d后，可在氣管內(nèi)聽到病雞呼出的啰音。大部分患病雞的體溫都在40℃以上，持續(xù)高燒，懼怕寒冷，聚在一起取暖，晚上可以聽見雞從呼吸道中傳來的如同拉風(fēng)箱般的喘息聲。年齡較大的雞臨床癥狀比較溫和，但會嚴(yán)重影響機(jī)體的生長發(fā)育，一般表現(xiàn)為生長遲緩，甚至停止生長，導(dǎo)致養(yǎng)殖場的淘汰率不斷提高。此外，病毒還會對輸卵管產(chǎn)生嚴(yán)重的影響，危害到輸卵管的正常發(fā)育，成年期的雞感染病毒后的臨床癥狀比較輕微，但會明顯降低成年蛋雞的生產(chǎn)性能，產(chǎn)蛋率下降50%以上，許多病雞排出的雞蛋不成型，還有一些不帶雞蛋殼的畸形蛋。也有個別患病雞出現(xiàn)比較嚴(yán)重的腹瀉，大便呈灰白色，呈水樣，大便中含有大量的灰白色的尿酸鹽。經(jīng)過一段時間的感染，雞會變得非常虛弱，皮膚變得蒼白，沒有彈性，變得干癟，雞冠、肉髯發(fā)紫，最后倒地死去。

三、病理改變

對死亡的患病雞進(jìn)行了進(jìn)一步的解剖，可以看到大部分患病雞的呼吸道和腎臟都發(fā)生了變化。許多病死雞在鼻腔、喉頭、氣管、支氣管粘膜上都會有一層黃白色的膿性分泌物。如果是長期的病死病例，則會導(dǎo)致喉頭嚴(yán)重堵塞，清除堵塞物后，可以看到喉頭黏膜表面有糜爛水腫出血。老齡雞病死解剖后，會發(fā)現(xiàn)輸卵管有很大的損傷，輸卵管非常的充血、水腫，而且在輸卵管里面會有很多透明的蛋液，卵泡充血，而且會有各種的變形，有時候會有一些已經(jīng)成熟的卵子會掉落進(jìn)腹腔，引起卵黃性腹膜炎。除了呼吸道的病變外，大部分病死雞還會出現(xiàn)腎臟的嚴(yán)重病變，腎臟明顯腫脹，表面呈蒼白色，剖開腎臟可有沙沙的觸感。腎盂、輸尿管、腎小管內(nèi)有大量尿酸鹽沉積，呈白色，導(dǎo)致腎小管、尿道明顯擴(kuò)張，腎臟呈花斑狀，即花斑腎。通過以上幾種典型的病理學(xué)改變，可以對傳染性支氣管炎做出初步診斷。為了進(jìn)一步明確診斷，需要從病雞中提取鮮血，用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定病原。

四、實驗室診斷

1、瓊脂擴(kuò)散試驗

雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）的瓊脂擴(kuò)散試驗是一種用于檢測IBV特異性抗體的血清學(xué)方法。準(zhǔn)備試驗材料包括IBV病毒、瓊脂平板、待檢血清、抗原-抗體復(fù)合物等。將瓊脂平板劃分為多個小區(qū)，每個小區(qū)的面積約為5mm×5mm。在每個小區(qū)中加入50μL的IBV病毒液。將加樣后的瓊脂平板放在酒精燈上加熱，使樣品凝固。在每個小區(qū)中加入50μL的待檢血清，輕輕振蕩混勻。將加樣后的瓊脂平板放在酒精燈上加熱，使樣品凝固。將瓊脂平板放在37℃水浴鍋中，孵育1-2h。用PBS緩沖液洗滌每個小區(qū)5次，每次洗滌50μL。在每個小區(qū)中加入50μL的抗原-抗體復(fù)合物，輕輕振蕩混勻。將瓊脂平板放在37℃水浴鍋中，孵育1小時。用PBS緩沖液洗滌每個小區(qū)5次，每次洗滌50μL。在每個小區(qū)中加入50μL底物溶液，輕輕振蕩混勻。在30s內(nèi)觀察每個小區(qū)的顏色變化，判斷結(jié)果。對照組病毒對照孔和IgG對照孔出現(xiàn)明顯的紅色沉淀。試驗組待檢血清孔出現(xiàn)紅色沉淀，表示待檢血清中含有IBV特異性抗體。根據(jù)待檢血清中的顏色變化與對照組相比，判斷血清的抗體效價。

2、血凝抑制試驗

準(zhǔn)備試驗材料包括IBV病毒、96孔板、紅細(xì)胞懸液、待檢血清等。將IBV病毒用PBS緩沖液稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛?。將洗滌過的紅細(xì)胞用PBS緩沖液稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛取⑾♂尯蟮牟《疽汉图t細(xì)胞懸液分別加入96孔板中，每孔加樣量為50μL。在每個孔中加入50μL的待檢血清，輕輕振蕩混勻。將96孔板置于37℃水浴鍋中，孵育1-2h。用PBS緩沖液洗滌每個孔5次，每次洗滌50μL。在每個孔中加入50μL豚鼠抗雞IgG，輕輕振蕩混勻。將96孔板置于37℃水浴鍋中，孵育1h。用PBS緩沖液洗滌每個孔5次，每次洗滌50μL。在每個孔中加入50μL底物溶液，輕輕振蕩混勻。在30s內(nèi)觀察每個孔的顏色變化，判斷結(jié)果。病毒對照孔和IgG對照孔出現(xiàn)明顯的紅色沉淀，表示待檢血清中含有IBV特異性抗體。根據(jù)待檢血清孔的顏色變化與對照組相比，判斷血清的HI抗體效價。

3、病毒中和試驗

準(zhǔn)備試驗材料包括IBV病毒、細(xì)胞培養(yǎng)液、待檢血清、病毒稀釋液等。將細(xì)胞培養(yǎng)液配制成適當(dāng)?shù)臐舛?，并調(diào)整pH值。將IBV病毒用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛?。將稀釋后的病毒液和待檢血清分別加入細(xì)胞培養(yǎng)液中，輕輕振蕩混勻。將細(xì)胞培養(yǎng)液放在37℃水浴鍋中，孵育1-2h。將細(xì)胞培養(yǎng)液接種到適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)板中，輕輕振蕩混勻。細(xì)胞培養(yǎng)板放在37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中，孵育1-2d。觀察細(xì)胞培養(yǎng)板中的細(xì)胞病變情況，判斷結(jié)果。對照組病毒對照孔和IgG對照孔出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變。試驗組待檢血清孔出現(xiàn)較輕的細(xì)胞病變，表示待檢血清中含有IBV特異性抗體。根據(jù)待檢血清孔的細(xì)胞病變情況與對照組相比，判斷血清的中和抗體效價。

4、反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

從IBV感染的雞組織或細(xì)胞中提取病毒核酸。根據(jù)IBV基因序列設(shè)計引物，用于PCR反應(yīng)。將提取的病毒核酸反轉(zhuǎn)錄成cDNA，反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板，進(jìn)行PCR反應(yīng)。將PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測，觀察結(jié)果。試驗后對照組陽性對照孔出現(xiàn)明顯的擴(kuò)增帶，陰性對照孔無擴(kuò)增帶。試驗組待檢樣本孔出現(xiàn)擴(kuò)增帶，表示樣本中含有IBV核酸。根據(jù)待檢樣本孔的擴(kuò)增帶與對照組相比，判斷樣本中IBV核酸的存在。

五、科學(xué)預(yù)防和控制

1、疾病治療

當(dāng)前雞傳染性支氣管炎還沒有特效藥，總體的藥物治療效果并不理想。而且，由于臨床康復(fù)雞能夠長期攜帶病毒，所以，在養(yǎng)殖基地中一旦出現(xiàn)了這種病，一般都是不需要進(jìn)行治療，而是將發(fā)病的雞進(jìn)行單獨(dú)的宰殺，然后進(jìn)行無害化處理。在養(yǎng)殖場中假設(shè)沒有臨床癥狀的健康雞，可選用咳喘康，100g配水2000mL，煮沸30min后加涼開水25kg連續(xù)飲水1周。同時，每噸飼料加入黃芪多糖粉劑1000g，再加入100g的白頭翁散藥物，連續(xù)飼喂1周。1周后，再無新的病例出現(xiàn)。在疾病得到控制后，養(yǎng)殖人員會分批收集雞群的鮮血，進(jìn)行抗原測試，一旦發(fā)現(xiàn)有帶毒的病雞，就會立刻將其淘汰，并進(jìn)行有效的凈化。

2、防范措施

防止該種疾病的發(fā)生流行，重點(diǎn)是要強(qiáng)化養(yǎng)殖管理，要盡可能選擇營養(yǎng)價值全面的飼料，確保飼料中的營養(yǎng)價值平衡。維生素、礦物質(zhì)和必要的氨基酸添加必須要合理。飼料要定時定量投喂，不能給雞投喂發(fā)霉變質(zhì)的飼料。秋冬季節(jié)正是雞傳染性支氣管炎發(fā)病的高峰期，在此期間要做好雞舍的防寒保暖工作，增強(qiáng)通風(fēng)協(xié)作，控制好飼養(yǎng)密度，避免同一個雞舍養(yǎng)殖不同年齡的雞，減少雞群之間的接觸，禁止擁擠。平時給雞喂食時，要注意動作要輕一點(diǎn)，以免引起雞的應(yīng)激反應(yīng)。結(jié)合傳染病的流行特點(diǎn)，有針對性地對農(nóng)戶進(jìn)行免疫。1-3日齡的雛雞，可以用新傳支二聯(lián)活疫苗來點(diǎn)眼，也可以用來滴鼻。在5-7d的時候，可以選擇滴眼、滴鼻等方式進(jìn)行接種。20-25日齡，按以上方法進(jìn)行第二次加強(qiáng)免疫。在70-80日齡時，選用新城疫四系疫苗和呼吸型傳支二聯(lián)活疫苗點(diǎn)眼和滴鼻。在此基礎(chǔ)上，選用新支二聯(lián)油佐劑滅活疫苗0.5mL進(jìn)行肌肉注射。在開產(chǎn)前，選用新城疫四系疫苗及呼吸型傳支二聯(lián)活疫苗點(diǎn)眼和滴鼻，各2羽份。同時選用新支二聯(lián)油佐劑滅活疫苗0.5mL進(jìn)行肌肉注射。

總之，在大型禽業(yè)養(yǎng)殖中，雞傳染性支氣管炎是一種比較常見的病毒傳染病。這種病毒出現(xiàn)的很突然，并且擴(kuò)散的速度也很快，在很短時間里可以引起一大批的雞都出現(xiàn)癥狀，給養(yǎng)殖人員的生活和工作帶來了很大的困難，經(jīng)常會導(dǎo)致大規(guī)模的感染和死亡，給整個禽類養(yǎng)殖業(yè)都帶來了很大的經(jīng)濟(jì)損失。在雞群區(qū)內(nèi)，畜牧獸醫(yī)和養(yǎng)殖管理人員應(yīng)當(dāng)對傳染性支氣管炎所帶來的巨大危害進(jìn)行全面的了解和分析，重視對傳染病的流行病學(xué)研究，對該種傳染病的發(fā)生、流行情況進(jìn)行全面了解，并與農(nóng)戶展開深入、詳細(xì)的溝通，指導(dǎo)農(nóng)戶重視對傳染病的檢查、診斷以及對傳染病的有效預(yù)防，切實做到早發(fā)現(xiàn)、早處置，將疫情遏制在萌芽狀態(tài)，防止病原進(jìn)一步的擴(kuò)散、蔓延導(dǎo)致更加嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

（作者單位：812100 青海省西寧市湟源縣畜牧獸醫(yī)站）