格拉司瓊透皮貼劑重復(fù)給予毒性實驗研究

王丹 林鵬 張鵬 劉芳 袁昕蓉 王冬妍

【摘要】目的：本文研究了格拉司瓊透皮貼劑長期給藥對兔產(chǎn)生的毒性反應(yīng)。方法：實驗設(shè)3個劑量組和空白對照組，高、中、低3個劑量分別為17.3 cm2/kg、8.6 cm2/kg、4.3 cm2/kg，分別相當于臨床使用劑量的20倍、10倍和5倍。結(jié)果：在對兔的長期毒性試驗中，其體重及體重增重、血液學、血液生化學、血清電解質(zhì)、臟體比等指標與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。組織病理學檢查中未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變。結(jié)論：格拉司瓊透皮貼劑長期用藥對兔無明顯毒性，臨床擬用劑量使用較為安全。

【關(guān)鍵詞】格拉司瓊透皮貼劑；長期毒性；兔

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.03.001

Study on Long Term Toxicity of Granisetron Patch on Rabbits

WANG Dan1， LIN Peng2， ZHANG Peng1， LIU Fang1， YUAN Xinrong1， WANG Dongyan1

（1.Shenyang Institute for Food and Drug Control， Shenyang 110122， China； 2.Liaoning Institute for Drug Control， Shenyang 110036， China）

Abstract： Objective： The long term toxicity on rabbits were studied. Method： Three sample dose groups and blank control groups were set up in the 4-week long term toxicity test. The high， medium and low doses were 17.3 cm2/kg、8.6 cm2/kg、4.3 cm2/kg， which were 20 times， 10 times and 5 times of the human recommended dose. Result： There was no significant difference between the sample groups and the control group in terms of body weight， weight gain， hematological， blood biochemical and serum electrolytes indexes of rats， and visceral body ratio of rabbits （P>0.05）. No abnormal phenomenon was observed in the histopathological observation of rabbits. Conclution： No obvious toxic reaction was observed in all indexes during long term toxicity test on rabbits， which infered that the dosage in clinic was safe.

Keywords： Granisetron patch； long term toxicity； rabbit

本試驗以兔為試驗對象，通過研究格拉司瓊透皮貼劑（Granisetron Patch，GP）皮膚貼敷給藥28天的毒性來預(yù)測其可能引起的臨床不良反應(yīng)，推測受試物重復(fù)給藥的臨床毒性靶器官或靶組織，預(yù)測臨床試驗的起始劑量和重復(fù)用藥的安全劑量范圍，提示臨床試驗中需重點檢測的指標，為臨床試驗中的解毒或解救措施提供參考信息。

1材料與方法

1.1樣品

樣品由遼寧某醫(yī)藥進出口有限公司提供，每貼給藥面積為52 cm2，每貼含格拉司瓊34.3 mg。本品根據(jù)治療時間的需要至多可持續(xù)給藥7天，每天1貼。賦形劑由遼寧某醫(yī)藥進出口有限公司提供。

1.2主要儀器設(shè)備

電子天平CP124S型；全自動生化分析儀XL-600型；全自動血細胞計數(shù)儀MEK-6318K型；臨床電解質(zhì)分析儀MI-921D型；高清晰度病理圖文分析系統(tǒng)，HPIAS-1000型。

1.3試驗方法

參照《藥物重復(fù)給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》進行兔28天長期毒性試驗。試驗選取32只兔，隨機分成4組（每組8只，雌雄各半），即高劑量組（17.3 cm2/kg，相當臨床使用量的20倍），中劑量組（8.6 cm2/kg，相當臨床使用量的10倍），低劑量組（4.3 cm2/kg，相當臨床使用量的5倍），以及賦形劑對照組。采用貼敷給予樣品，1次貼敷7日，連續(xù)貼敷4次，即28天。試驗過程中，每周記錄動物體重、外觀體征、行為活動、貼敷部位皮膚的局部反應(yīng)等。在給藥28天后、停藥恢復(fù)后14天分別取各劑量組1/2兔，進行血液學和血液生化指標檢查，并肉眼觀察主要臟器，稱重，分別取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、前列腺、睪丸、附睪、甲狀腺、子宮、卵巢、乳腺、胰腺、膽囊、腦、骨髓、直腸、十二指腸、胃、氣管、食管、唾液腺、主動脈、膀胱等器官以及坐骨神經(jīng)、淋巴結(jié)、給藥部位皮膚，進行組織病理學檢查。試驗數(shù)據(jù)以平均值（x）±標準差（s）表示，即x±s。方差分析與統(tǒng)計學檢驗采用SPSS 26統(tǒng)計軟件中的多組均數(shù)分析方法，對試驗數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗：如果方差齊，就采用單因素方差分析進行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異后再進行多個劑量組與一個對照組均數(shù)進行兩兩比較；如果方差不齊，則改用秩和檢驗統(tǒng)計。

2結(jié)果與分析

2.1格拉司瓊透皮貼劑對兔體重及體重增重的影響

試驗期間，隨著時間的增加，雌、雄兔的體重逐漸增加，低、中、高劑量組中兔體重及增重和對照組相比，P>0.05，即差異無統(tǒng)計學意義。試驗結(jié)果表明，格拉司瓊透皮貼劑對兔體重及體重增重無明顯影響。

2.2格拉司瓊透皮貼劑對兔血液學指標的影響

由表1和表2可知，給藥28天后，各劑量組的血液學指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。停藥恢復(fù)14天后，各劑量組血液學指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.3格拉司瓊透皮貼劑對兔血液生化學指標的影響

由表3和表4可知，給藥28天后，各劑量組生化指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。停藥恢復(fù)14天后，格拉司瓊透皮貼劑各劑量組生化指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.4格拉司瓊透皮貼劑對兔血清電解質(zhì)指標的影響

由表5和表6可知，給藥28天后，各劑量組電解質(zhì)指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。停藥恢復(fù)14天后，格拉司瓊透皮貼劑各劑量組電解質(zhì)指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.5格拉司瓊透皮貼劑對兔臟體重量的影響

給藥28天后，各劑量組的臟器濕重及臟器系數(shù)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。停藥恢復(fù)14天后，各劑量組各臟器濕重及臟器系數(shù)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.6兔的組織病理學檢查

通過鏡下組織病理學檢查發(fā)現(xiàn)，給藥期低劑量組有1只雄性肺內(nèi)見炎細胞浸潤；中劑量組雌性和雄性各1只可見膽管增生，同時1只雌性動物發(fā)現(xiàn)胰腺脂肪變性以及腸黏膜炎細胞浸潤；高劑量組1只雌性肺臟有細胞增生，有1只雄性肝內(nèi)見炎細胞浸潤；恢復(fù)期低劑量組雌性和雄性各1只見膽管增生及間質(zhì)炎細胞浸潤；中劑量組有1只雄性肝內(nèi)可見肝細胞脂肪變性；高劑量組有1只雌性肝臟膽管增生，有1只雌性肺內(nèi)可見炎細胞浸潤。

3結(jié)論

將格拉司瓊透皮貼劑按高劑量（17.3 cm2/kg）、中劑量（8.6 cm2/kg）、低劑量（4.3 cm2/kg）分別對兔皮膚給藥，每給藥1次貼敷7天，連續(xù)給藥28天，給藥后觀察給藥部位的皮膚未見有紅斑、水腫、色素沉著、出血點等異常情況。停藥后恢復(fù)期內(nèi)兔外觀體征、行為活動未見有異常，皮膚恢復(fù)正常，說明格拉司瓊透皮貼劑對兔皮膚無延遲的毒性作用。結(jié)合組織病理學檢查結(jié)果分析，本品對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、胃腸道、肝臟、腎臟未見有明顯影響。試驗結(jié)果表明，格拉司瓊透皮貼劑對體內(nèi)主要臟器無明顯毒性反應(yīng)，格拉司瓊透皮貼劑按17.3 cm2/kg給藥，相當于20倍臨床劑量，按此劑量及以下劑量在臨床上使用較為安全。

4討論

給藥后一般癥狀觀察：兔在給藥期間活動正常，毛色正常，呼吸系統(tǒng)、運動功能未見異常，糞便也未見異常，給藥部位的皮膚未見有紅斑、水腫、色素沉著、出血點等異常情況，但在給藥貼敷7天后揭去時觀察給藥部位皮膚有發(fā)白的表現(xiàn)，這提示臨床應(yīng)用每次更換貼片時應(yīng)注意改變貼敷部位。連續(xù)給藥28天，皮膚無紅斑水腫產(chǎn)生，說明格拉司瓊透皮貼劑對兔皮膚無局部刺激及過敏反應(yīng)。停藥后恢復(fù)期內(nèi)兔外觀體征、行為活動未見有異常，皮膚恢復(fù)正常，說明格拉司瓊透皮貼劑對兔皮膚無延遲的毒性作用。

經(jīng)組織病理學檢查：本試驗給藥部位完好，未見病理性改變。另外，本試驗選用普通級成年兔，故兔出現(xiàn)肺內(nèi)、腎間質(zhì)以及胃腸道等臟器的不同程度的炎細胞浸潤，可能是自身的炎癥改變，肝臟出現(xiàn)的膽管增生和胰腺的脂肪變性屬于退行性病變，所以不予參與本試驗的結(jié)果評定。

當格拉司瓊透皮貼劑經(jīng)皮膚給藥，一部分局部作用于皮膚，一部分透皮吸收，分布于全身組織及體液中，通過肝腎代謝的含量較高。各劑量組兔肝臟的組織病理學檢查結(jié)果未見藥物引起的病理性改變，同時恢復(fù)期各劑量組肝臟未見藥物引起的病理性改變，結(jié)合各劑量組ALT、AST未見明顯升高，可見給藥后對兔的肝臟無明顯影響。格拉司瓊透皮貼劑對各劑量組兔的CREA、BUN無明顯影響。停藥恢復(fù)14天，CREA、BUN指標的含量在正常范圍內(nèi)，說明格拉司瓊透皮貼劑對上述指標無明顯影響。腎臟的組織病理學檢查結(jié)果顯示，各劑量組的腎臟未見藥物引起的病理性改變，說明藥物對兔的腎臟無明顯影響。

【參考文獻】

[1]權(quán)翔，朱波，葉鐵虎.昂丹司瓊和格拉司瓊對術(shù)后惡心嘔吐高風險患者的預(yù)防作用[J].中國醫(yī)學科學院學報，2011，33（4）：445-448.

[2]馬原，劉杰.帕洛諾司瓊與格拉司瓊聯(lián)合應(yīng)用對化療所致惡心、嘔吐的防治效果觀察[J].山東醫(yī)藥，2016，56（4）：64-66.

【作者簡介】

王丹，女，1978年出生，副主任藥師，研究方向為四品一械檢驗及安全評價。

（編輯：李鈺雙）