采摘時(shí)間對(duì)甘肅慶陽(yáng)產(chǎn)區(qū)酸棗仁品質(zhì)的影響

摘 要：酸棗仁是蓯蓉補(bǔ)腎丸、人參歸脾丸、補(bǔ)腦丸等幾十種中成藥的重要原料，隨著酸棗的市場(chǎng)需求量逐年攀升其收購(gòu)價(jià)也逐年上漲。但酸棗多野生，資源有限，甘肅慶陽(yáng)地區(qū)出現(xiàn)“搶青”采摘、毀柱采摘等現(xiàn)象，不利于酸棗資源的可持續(xù)發(fā)展。為了分析采摘時(shí)間對(duì)酸棗仁品質(zhì)的影響，于2023年9月8日至10月20日收集了甘肅慶陽(yáng)產(chǎn)區(qū)不同采摘時(shí)間的酸棗仁，檢測(cè)了其中油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖成分的含量。結(jié)果表明，“搶青”采摘導(dǎo)致酸棗仁油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖成分的含量都嚴(yán)重偏低，酸棗仁品質(zhì)下降，10月初甘肅慶陽(yáng)產(chǎn)區(qū)的酸棗仁功效成分含量基本穩(wěn)定，建議慶陽(yáng)地區(qū)對(duì)酸棗采收時(shí)間進(jìn)行干預(yù)，將酸棗采收時(shí)間控制在10月左右。

關(guān)鍵詞：酸棗仁；采摘時(shí)間；油脂；總黃酮；總皂苷；粗多糖

Effect of Picking Time on Quality of Ziziphus jujuba var. spinosa in Qingyang Production Area of Gansu Province

ZHANG Runhong1， XIAO Jing2， WANG Guangju1

（1. Lanzhou Petrochemical University of Vocational Technology， Lanzhou 730060， China;

2. Agricultural Technology Extension Center of Qingcheng County， Qingcheng 745100， China）

Abstract： The seed of Ziziphus jujuba var. spinosa is cistanche kidney pills， ginseng spleen pills， brain pills and other dozens of Chinese medicine important raw materials， with the increase of Ziziphus jujuba var. spinosa market demand year by year， the purchase price also rose year by year. But Ziziphus jujuba var. spinosa are more wild， resources are limited， the “earlier-plucking” and destroy the pillar picking appeared in Qingyang area of Gansu province is not conducive to the sustainable development of Ziziphus jujuba var. spinosa resources. In order to analyze the effect of picking time on the quality of the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa， the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa from Qingyang production area of Gansu province at different picking times were collected from September 8 to October 20， 2023， and the contents of oil， total flavonoids， total saponins and crude polysaccharides were detected. The results showed that “earlier-plucking” lead to the content of oil， total flavonoids， total saponins， crude polysaccharide in the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa seriously low， the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa quality decline. Effective component content is basically stable at Qingyang production area of Gansu province in early October， suggested that Qingyang area should intervene the picking time at October.

Keywords： the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa; picking time; oil; total flavonoids; total saponins; crude polysaccharides

酸棗，鼠李科棗屬植物，是棗的變種。多野生，常為灌木，部分為小喬木。樹(shù)勢(shì)較強(qiáng)，枝、葉、花的形態(tài)與普通棗相似，但枝條節(jié)間較短，適應(yīng)性較普通棗強(qiáng)。果皮常呈紅色或紫紅色，果肉較薄、疏松，味酸甜，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，可作為食品[1-2]。酸棗仁是酸棗的成熟干燥種仁，含有脂肪油、黃酮類、皂苷類、生物堿、粗多糖等多種化學(xué)成分。其中所含黃酮類成分具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠和抗氧化活性；所含皂苷類成分具有鎮(zhèn)靜、安神作用；所含粗多糖具有增強(qiáng)免疫功能和抗放射性損傷的作用；所含脂肪油無(wú)毒、無(wú)致突變作用，具有鎮(zhèn)靜安神、抗抑郁、抗腫瘤、降血脂、抗氧化等多重藥理活性。酸棗仁常用于治療失眠多夢(mèng)、體弱盜汗等癥，具有補(bǔ)肝寧心，斂汗安神之功效，是蓯蓉補(bǔ)腎丸、人參歸脾丸、補(bǔ)腦丸等幾十種中成藥的重要原料[3-6]。

慶陽(yáng)市位于甘肅省東部，陜甘寧三省區(qū)的交匯處，兼有山川、平原，系黃河中下游黃土高原溝壑區(qū)，全市年平均氣溫7.4～9.4 ℃，全市年總降水量平均為410～640 mm，其地形、氣候條件非常適合酸棗生長(zhǎng)。近幾年，中成藥發(fā)展勢(shì)頭猛烈，酸棗仁作為多種中成藥的原料，其市場(chǎng)需求量逐年攀升、收購(gòu)價(jià)也逐年上漲。采摘售賣酸棗成為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民的收入來(lái)源之一，每年每戶采摘酸棗的收入少則千元多則上萬(wàn)元，比較可觀。但因酸棗屬野生資源，歸屬權(quán)不明確，在高額利益的誘惑下，慶陽(yáng)市轄區(qū)出現(xiàn)了“搶青”采摘、毀株采摘等掠奪式采收酸棗的現(xiàn)象，損壞、盜伐、濫伐酸棗樹(shù)的問(wèn)題非常嚴(yán)重，致使野生酸棗資源遭受了毀滅性破壞。研究團(tuán)隊(duì)根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)分析，采摘時(shí)間的差異會(huì)影響酸棗仁的品質(zhì)，“搶青”采摘可能會(huì)導(dǎo)致酸棗仁藥效成分含量偏低，臨床療效減弱[7-8]。

本文以甘肅慶陽(yáng)地區(qū)不同采摘時(shí)間的酸棗仁為研究對(duì)象，重點(diǎn)跟蹤酸棗仁油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖成分的含量積累變化情況，確定甘肅慶陽(yáng)產(chǎn)區(qū)酸棗的最佳采收時(shí)間。為當(dāng)?shù)卣侠硪?guī)劃酸棗采摘時(shí)間提供科學(xué)依據(jù)，助力慶陽(yáng)市保護(hù)、發(fā)展和合理利用野生酸棗資源。

1 材料與方法

1.1 試劑

蘆?。ㄊ|香葉苷）對(duì)照品、酸棗仁皂苷A對(duì)照品、無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)于上海源葉生物科技有限公司，HPLC含量≥98%；NaOH、NaNO2、Al（NO3）3、HClO4、H2SO4、冰醋酸、無(wú)水乙醇、甲醇、苯酚、香草醛、石油醚，均為分析純?cè)噭?/p>

1.2 儀器

分析天平（AB-204-N），瑞士Mettler Toledo公司；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（UV-2700），日本島津儀器有限公司；中藥粉碎機(jī)（2500A），山東志高電器有限公司；電熱鼓風(fēng)烘箱（BPG-7082），合肥科晶材料技術(shù)有限公司；超純水機(jī)（WP-UPT-20），四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（R-1001VN），鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司。

1.3 樣品

不同采摘期的實(shí)驗(yàn)樣品產(chǎn)地均為甘肅慶陽(yáng)，共9個(gè)采樣點(diǎn)，其中平原、山地陰坡、山地陽(yáng)坡采樣點(diǎn)各3個(gè)，每個(gè)采樣點(diǎn)均選取生長(zhǎng)茂盛、結(jié)果多的酸棗植株10株。采摘時(shí)間為2023年9月初至10月中旬，間隔1周采樣1次，每次采樣每株采摘果實(shí)60粒，合并5 400粒酸棗果實(shí)為1個(gè)樣品。采摘的樣品果實(shí)晾干去肉去殼后備用。

1.4 方法

1.4.1 樣品預(yù)處理

將酸棗仁放入烘箱中在60 ℃下干燥6 h，粉碎，過(guò)40目篩，密封備用。

1.4.2 油脂提取方法

準(zhǔn)確稱取酸棗仁粉末10 g，用濾紙卷包裹嚴(yán)實(shí)以防外漏，隨后置于索氏提取器中，加石油醚75 ℃回流脫脂3次，每次2 h。最后合并3次石油醚提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾得到油脂[9-10]。油脂含量計(jì)算方法為

式中：c油為酸棗仁油脂含量，mg·g-1；m油為提取油脂質(zhì)量，g；m仁為酸棗仁粉末質(zhì)量，g。

1.4.3 酸棗仁脫脂粉制備方法

將提取油脂后的酸棗仁粉渣揮干石油醚，置

50 ℃烘箱中干燥4 h，移至干燥器中冷卻至室溫，制得酸棗仁脫脂粉。

1.4.4 總黃酮、總皂苷、粗多糖提取方法

準(zhǔn)確稱取1 g酸棗仁的脫脂粉，置于100 mL圓底燒瓶中，加入60%乙醇溶液30 mL，70 ℃回流提取175 min。冷卻后過(guò)濾提取液，棄殘?jiān)?，濾液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶，用60%乙醇溶液定容，搖勻，作為供試品溶液。

1.4.5 總黃酮含量測(cè)定

以蘆丁為對(duì)照品，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定酸棗仁總黃酮的含量[11]。

（1）蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立。精密稱取10 mg恒重的蘆丁對(duì)照品，用70%的乙醇溶液溶解并定容于50 mL容量瓶中，搖勻。精準(zhǔn)移取蘆丁對(duì)照品溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL及7.0 mL，分別置于25 mL容量瓶中，依次加入2.0 mL 5%的NaNO2溶液，搖勻后靜置6 min，再加入2.0 mL 10%的Al（NO3）3溶液，混勻后靜置6 min，再加入10.0 mL 5%的NaOH溶液，用70%的乙醇溶液定容，搖勻，顯色15 min，與隨行試劑空白于510 nm處測(cè)定溶液的吸光值。以溶液的吸光度（A1）為橫坐標(biāo)，蘆丁的質(zhì)量（m1，mg）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程為m1=2.112 6A1+0.021 2，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9，蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好（圖1）。

（2）總黃酮含量的測(cè)定方法。精準(zhǔn)移取5 mL酸棗仁供試品溶液至25 mL容量瓶中，按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線建立的測(cè)量方法測(cè)定溶液的吸光度值，最后根據(jù)線性回歸方程和稀釋倍數(shù)計(jì)算各樣品中總黃酮的含量。

1.4.6 總皂苷含量的測(cè)定

以酸棗仁皂苷A為對(duì)照品，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定酸棗仁總皂苷的含量[12]。

（1）酸棗仁皂苷A標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立。精密稱取12 mg恒重的酸棗仁皂苷A對(duì)照品，甲醇超聲溶解并定容于25 mL容量瓶中，搖勻。分別精準(zhǔn)移取酸棗仁皂苷A對(duì)照品溶液100 μL、200 μL、300 μL、400 μL、500 μL、600 μL及700 μL于10 mL玻璃具塞試管中，45 ℃烘箱中將甲醇揮盡，依次精準(zhǔn)加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，密封，搖勻，置60 ℃水浴中加熱20 min，隨即置冰水浴中冷卻2 min，再精準(zhǔn)加入冰醋酸5.0 mL，搖勻，與隨行試劑空白于480 nm波長(zhǎng)處測(cè)其吸光度。以溶液的吸光度（A2）為橫坐標(biāo)，以酸棗仁皂苷A的質(zhì)量（m2，mg）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程為m2=0.431 2A2+0.007，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 6，酸棗仁皂苷A標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好（圖2）。

（2）總皂苷含量的測(cè)定方法。準(zhǔn)確移取0.25 mL酸棗仁供試品溶液至10 mL具塞試管中，按照酸棗仁皂苷A標(biāo)準(zhǔn)曲線建立的測(cè)量方法測(cè)定溶液的吸光度值，最后根據(jù)線性回歸方程和稀釋倍數(shù)計(jì)算各樣品中總皂苷的含量。

1.4.7 粗多糖含量的測(cè)定

采用紫外-可見(jiàn)分光光度法，以無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照品，測(cè)定酸棗仁粗多糖的含量[13-16]。

（1）無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立。精密稱量無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品13 mg，蒸餾水溶解后定容于50 mL容量瓶中，搖勻。分別精準(zhǔn)移取無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液100 μL、200 μL、300 μL、400 μL、500 μL、600 μL及700 μL置于10 mL玻璃具塞試管中，精準(zhǔn)補(bǔ)水至2.0 mL，繼續(xù)精準(zhǔn)加入1.0 mL 5%苯酚溶液，搖勻，迅速精準(zhǔn)加入濃硫酸5 mL，搖勻，放置10 min，置于40 ℃水浴中保溫15 min后用流水迅速冷卻至室溫，與隨行試劑空白于490 nm波長(zhǎng)處測(cè)其吸光度。以溶液的吸光度（A3）為橫坐標(biāo)，以無(wú)水葡萄糖的質(zhì)量（m3，mg）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程為m3=0.132 7A3+0.000 4，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 4，無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好（圖3）。

（2）粗多糖含量的測(cè)定方法。準(zhǔn)確移取0.2 mL酸棗仁供試品溶液至10 mL具塞試管中，按照無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線建立的測(cè)量方法測(cè)定溶液的吸光度值，最后根據(jù)線性回歸方程和稀釋倍數(shù)計(jì)算各樣品中粗多糖的含量。

2 結(jié)果與分析

經(jīng)過(guò)測(cè)定，不同采摘時(shí)間酸棗仁中油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖含量的變化如圖4所示。結(jié)果表明，不同采摘時(shí)間酸棗仁功效成分油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖的積累量不同，9月29日前變化較大，其含量整體隨著時(shí)間的延后而逐漸增加，10月6日后穩(wěn)定；即9月29日前是酸棗仁生長(zhǎng)的關(guān)鍵時(shí)期，10月6日后酸棗仁發(fā)育成熟，甘肅慶陽(yáng)地區(qū)產(chǎn)酸棗仁2023年的最佳采收時(shí)間是10月6日。據(jù)此，甘肅慶陽(yáng)地區(qū)酸棗仁采收時(shí)間在10月上旬左右，具體應(yīng)根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果及時(shí)調(diào)整。

3 結(jié)論

經(jīng)過(guò)對(duì)甘肅慶陽(yáng)產(chǎn)區(qū)不同采摘時(shí)間酸棗仁中油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖成分的含量積累變化情況跟蹤分析，“搶青”采摘會(huì)導(dǎo)致酸棗仁中油脂、總黃酮、總皂苷、粗多糖成分的含量偏低，10月初甘肅慶陽(yáng)地區(qū)酸棗仁功效成分積累量趨于穩(wěn)定。如果放任農(nóng)民“搶青”的行為，不僅會(huì)破壞當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境，不利于持續(xù)創(chuàng)收，而且會(huì)嚴(yán)重影響酸棗仁的品質(zhì)。為保證酸棗仁的品質(zhì)，應(yīng)嚴(yán)格管控酸棗采收時(shí)間，建議甘肅慶陽(yáng)相關(guān)部門采取一定的干預(yù)措施，并在編制酸棗采收的技術(shù)規(guī)范和地方標(biāo)準(zhǔn)時(shí)將采收時(shí)間控制在10月左右。

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