補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑菌活性

孫禮雪 關(guān)麗杰 馬曉彤 高潔 張洪雨 商今雨

摘要：探討補(bǔ)骨脂（Psoralea corylifolia L.）種子提取物對(duì)茶餅病菌（Exobasidium vexans Massee）的抑菌活性及田間防治效果。采用孢子萌發(fā)抑制率法和菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定補(bǔ)骨脂種子提取物的抑菌活性，按照農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則在5省5地進(jìn)行茶餅病田間試驗(yàn)。室內(nèi)抑菌活性試驗(yàn)結(jié)果表明，補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，抑制率隨著藥劑濃度的增加而增加，其EC50分別為12.925 mg/L和6.074 mg/L。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.00～2.67 mg/kg時(shí)，其對(duì)茶餅病的防治效果為68.08%～83.78%，其防治效果相當(dāng)或優(yōu)于對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑。

關(guān)鍵詞：生物農(nóng)藥；茶餅病菌（Exobasidium vexans Massee）； 抑菌活性； 田間防治效果； 補(bǔ)骨脂（Psoralea corylifolia L.）種子提取物

中圖分類號(hào)：S432；S435.711???????? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2024）05-0050-06

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.05.009??????????? 開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

The antifungal activity of Psoralea corylifolia seeds extract against Exobasidium vexans

SUN Li-xue1， GUAN Li-jie1， MA Xiao-tong2， GAO Jie1， ZHANG Hong-yu1， SHANG Jin-yu1

（1.School of Pharmaceutical and Bioengineering， Shenyang University of Chemical Technology， Shenyang? 110142，China；

2.Chaoyang Yanwangbizi Reservoir Construction Administration， Chaoyang? 122099，Liaoning，China）

Abstract： The antifungal activity and the field control effects of Psoralea corylifolia seeds extract against Exobasidium vexans were explored. The spore germination inhibition rate method and mycelium growth rate method were used to determine the antifungal activity of Psoralea corylifolia seeds extract， and the field trials of Exobasidium vexans were carried out in five provinces and five places according to the pesticide field efficacy trials guideline. The indoor antifungal activity test showed that Psoralea corylifolia seeds extract had an obvious inhibitory effect on the spore germination and mycelium growth of Exobasidium vexans， and the inhibition rate increased with the increase of drug concentration， with the EC50 of 12.925 mg/L and 6.074 mg/L， respectively. The results of field trials showed that when the dosage of active ingredients of Psoralea corylifolia seeds extract microemulsion was 2.00～2.67 mg/kg， the field control effects of Exobasidium vexans was 68.08%～83.78%， which was equivalent to or better than that of the control agent 3% polyoxin wettable powder.

Key words： biological pesticide； tea cake disease（Exobasidium vexans Massee）； antifungal activity； field control effects； Psoralea corylifolia seeds extract

收稿日期：2023-04-23

基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（SQ2020YFF0411744）；遼寧省教育廳項(xiàng)目（LJKMZ20220787）

作者簡(jiǎn)介：孫禮雪（1997-），女，遼寧大連人，在讀碩士研究生，研究方向?yàn)樯镛r(nóng)藥與生物技術(shù)，（電話）17824252854（電子信箱）

2322911311@qq.com；通信作者，關(guān)麗杰（1968-），女，遼寧沈陽(yáng)人，副教授，博士，主要從事生物農(nóng)藥與生物技術(shù)研究，

（電話）13840081801（電子信箱）guanlijie6868@syuct.edu.cn。

孫禮雪，關(guān)麗杰，馬曉彤，等. 補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑菌活性［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2024，63（5）：50-55．

茶餅病菌（Exobasidium vexans Massee）［1-4］是由外擔(dān)子菌引起的真菌性病害，這種病原菌攻擊茶樹(shù)的嫩葉，導(dǎo)致茶樹(shù)病葉所制成的干茶易碎且滋味異常苦澀、茶葉色澤昏暗，品質(zhì)下降［5，6］。同時(shí)，中國(guó)每年由于茶餅病而導(dǎo)致的減產(chǎn)可達(dá)20%～30%［7］。

在生產(chǎn)中通過(guò)選育和種植抗病品種［8-10］、強(qiáng)化對(duì)茶園的栽培管理［11，12］以及噴施藥劑等措施防治茶餅病，其中藥劑噴施是最有效的方法之一。梁碧元等［13］進(jìn)行了8種殺菌劑防治茶樹(shù)茶餅病的田間試驗(yàn)，結(jié)果表明8種殺菌劑均可提高對(duì)茶餅病的防治效果，能穩(wěn)定控制病斑，使病葉率下降。其中53.80%氫氧化銅（可殺得）1 100倍稀釋液、25%吡唑嘧菌酯（凱潤(rùn)）1 560倍稀釋液、15%三唑酮1 650倍稀釋液對(duì)茶餅病的防治效果較好，2次施藥后防治效果分別為88.14%、84.75%、83.05%。使用化學(xué)藥劑，農(nóng)藥易殘留、不易降解，對(duì)環(huán)境和茶葉品質(zhì)影響較大，致使茶葉出口困難，故化學(xué)藥劑的使用受到制約［14，15］。生物藥劑由于具有無(wú)污染、無(wú)公害、易降解、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)越來(lái)越受到重視。市面上防治茶餅病的生物藥劑有多抗霉素可濕性粉劑、蛇床子素水乳劑、波爾多液可濕性粉劑、丁子香酚可溶液劑、井崗·蠟芽菌水劑、大黃素甲醚水劑以及氨基寡糖素，其中使用最多的是多抗霉素可濕性粉劑。陳德西等［16］進(jìn)行了6種生物農(nóng)藥的田間試驗(yàn)，結(jié)果表明10%多抗霉素B對(duì)茶餅病的防治效果最好，可達(dá)98.39%。李向陽(yáng)等［17］通過(guò)試驗(yàn)篩選對(duì)高海拔茶樹(shù)茶餅病防治效果較好的生物藥劑，結(jié)果表明10%多抗霉素對(duì)貴州省遵義市湄潭縣和銅仁市德江縣高海拔區(qū)茶餅病的防治效果分別為62.43%、58.17%，與5%氨基寡糖素混配后防治效果顯著提升，分別達(dá)67.30%、72.77%，二者混配后可用于高海拔茶區(qū)茶餅病的防治。

補(bǔ)骨脂（Psoralea corylifolia L.）種子提取物微乳劑［18，19］是一種植物源殺菌劑，其有效成分來(lái)源于豆科植物補(bǔ)骨脂。在農(nóng)業(yè)方面，其可以有效防治多種病害，如蘋果腐爛?。?0］、水稻稻瘟?。?1］、黃瓜細(xì)菌性角斑?。?2］等。本研究通過(guò)室內(nèi)抑菌活性試驗(yàn)測(cè)定了補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑菌活性，按照農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則GB/T 17980.82—2004在廣東省廣州市、安徽省六安市、湖南省張家界市、重慶市合川區(qū)、湖北省利川市開(kāi)展防治茶餅病的田間藥效試驗(yàn)，為其在茶樹(shù)上的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種 茶餅病菌（Exobasidium vexans Massee）分離自福建省政和縣大紅村福安大白。

1.1.2 儀器與試劑

1）儀器。生化培養(yǎng)箱（SPX-250B-Z型）、立式壓力蒸汽滅菌鍋（BXM-30R型），上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；單人凈化工作臺(tái)（SW-CJ-IG型），蘇州凈化儀器有限公司；SCOUT電子天平（SCA210型），臾豪斯國(guó)際貿(mào)易有限公司；振蕩培養(yǎng)箱（TSQ-280型），上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司；生物顯微鏡（CX33型），濟(jì)南來(lái)寶醫(yī)療器械有限公司。

2）試劑。補(bǔ)骨脂種子提取物（含2%苯丙烯菌酮），補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑（含0.2%苯丙烯菌酮），沈陽(yáng)同祥生物農(nóng)藥有限公司；多抗霉素原藥（31.5%）、3%多抗霉素可濕性粉劑，山東魯抗生物農(nóng)藥有限責(zé)任公司。

1.2 方法

1.2.1 孢子萌發(fā)試驗(yàn) 從茶餅病菌平板上切取菌餅，用接種針將菌塊移植于PDA平板中央，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。25 ℃條件下培養(yǎng)30 d后，向茶餅病菌平板中加入無(wú)菌葡萄糖水（含2%的葡萄糖）?? 5 mL，用毛刷沿著同一方向輕輕刷洗茶餅病菌平板表面，再經(jīng)4層紗布過(guò)濾，得到濃度為1×105～1×106個(gè)/mL的孢子懸浮液。

用溶劑丙酮將補(bǔ)骨脂種子提取物溶解，配制成濃度為10、30、90、270、810 mg/L的溶液，分別取上述藥液10 μL和孢子懸浮液190 μL置于24微孔板中，致使藥劑終濃度分別為0.5、1.5、4.5、13.5、40.5 mg/L，每處理重復(fù)3次，以CK與多抗霉素原藥作為對(duì)照。將上述處理置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以萌發(fā)芽管長(zhǎng)度為茶餅病菌孢子直徑的1/2時(shí)視為萌發(fā)。當(dāng)空白組的孢子萌發(fā)率達(dá)90%以上時(shí)，每處理隨機(jī)選取200個(gè)孢子，統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)數(shù)目并計(jì)算萌發(fā)抑制率。

孢子萌發(fā)抑制率=[對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率對(duì)照孢子萌發(fā)率×]100%?????? ? （1）

1.2.2 抑菌活性試驗(yàn) 用丙酮將補(bǔ)骨脂種子提取物完全溶解后，取適量加入PDA培養(yǎng)基中，充分搖勻，配制成終濃度為10、30、90、270、810 mg/L的含藥培養(yǎng)基，以無(wú)菌水、多抗霉素原藥加入培養(yǎng)基中作為對(duì)照，然后倒入玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)冷卻、凝固，備用。

用打孔器從長(zhǎng)勢(shì)良好的茶餅病菌平板上切取菌餅，并轉(zhuǎn)接于各處理、對(duì)照平板中央，每個(gè)處理重復(fù)5次，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5～7 d，用直尺測(cè)量菌落直徑。采用相交垂直線法測(cè)量菌落直徑，以其均值減去菌餅直徑即得菌落生長(zhǎng)的凈直徑。

抑制率=[對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑對(duì)照菌落直徑]×100%

（2）

1.2.3 田間防治效果試驗(yàn)

1）供試作物位置及環(huán)境條件。廣東省廣州市試驗(yàn)地位于增城區(qū)寧西鎮(zhèn)馮村華南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)基地茶園，土質(zhì)壤土，有機(jī)質(zhì)含量高。試驗(yàn)地栽培條件均勻一致，管理水平高，長(zhǎng)勢(shì)較好。

安徽省六安市試驗(yàn)地位于霍山縣漫水河鎮(zhèn)平田村，在山地地區(qū)，茶樹(shù)樹(shù)齡10年，土質(zhì)沙壤土，肥力中等。茶園雨量充沛，排水方便。2021年3月24日施尿素240 kg/hm2作為春茶肥，2021年7月10日施復(fù)合肥180 kg/hm2，定期進(jìn)行人工除草。

湖南省張家界市試驗(yàn)地位于桑植縣八大公山鎮(zhèn)馬龍山村，試驗(yàn)田面積為667 m2，土質(zhì)為黃壤土，土壤pH為6.2，土壤有機(jī)質(zhì)含量為3.5%。

重慶市合川區(qū)試驗(yàn)地位于鹽井鎮(zhèn)，土質(zhì)壤土，pH為6.1。水分充足，肥力均勻，常年修剪。茶園管理較好，栽培規(guī)范，密度合理，雜草拔除及時(shí)。

湖北省利川市試驗(yàn)地位于涼霧村，海拔800 m左右，多霧天氣多，歷年茶樹(shù)茶餅病發(fā)生較重。土質(zhì)為黃壤土，土壤pH為7.1，有機(jī)質(zhì)含量為1.6%。

上述各試驗(yàn)點(diǎn)施藥前經(jīng)隨機(jī)調(diào)查無(wú)其他病害或明顯蟲害。試驗(yàn)開(kāi)始至試驗(yàn)結(jié)束，未施用其他防治茶餅病藥劑。按照茶樹(shù)生產(chǎn)相關(guān)規(guī)定進(jìn)行管理，各地處理一致，茶樹(shù)長(zhǎng)勢(shì)一致。

2）供試藥劑及處理。共設(shè)4個(gè)處理，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑（1.33、2.00、2.67 mg/kg），3%多抗霉素可濕性粉劑（100.00 mg/kg），以清水為對(duì)照（CK），具體藥劑用量見(jiàn)表1。

3）小區(qū)安排。分別在廣東省廣州市、安徽省六安市、重慶市合川區(qū)、湖北省利川市試驗(yàn)地劃分4個(gè)區(qū)組，共20個(gè)小區(qū)，每小區(qū)20 m2，隨機(jī)區(qū)組排列。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)4次重復(fù)。湖南省張家界市試驗(yàn)地劃分為4個(gè)區(qū)組，共20個(gè)小區(qū)，每小區(qū)15 m2，隨機(jī)區(qū)組排列。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)4次重復(fù)。小區(qū)間設(shè)隔離區(qū)，試驗(yàn)田四周設(shè)保護(hù)行。

4）施藥方法。對(duì)水噴霧，使用背負(fù)式噴霧器進(jìn)行藥物噴施。于茶樹(shù)茶餅病發(fā)生初期進(jìn)行第一次施藥，共施藥3次，施藥間隔為7～10 d，試驗(yàn)藥劑用水量900 L/hm2。按照試驗(yàn)劑量，以試驗(yàn)小區(qū)為單位配制藥液、施藥。從小區(qū)一側(cè)開(kāi)始施藥，由低濃度到高濃度向小區(qū)勻速噴霧，不重噴、漏噴，保持噴幅及噴灑高度一致，以葉片藥液不滴落為宜。

5）調(diào)查方法。參考農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則GB/T 17980.82—2004《殺菌劑防治茶餅病》。每小區(qū)隨機(jī)選取新梢下第3片葉，調(diào)查50～100片葉，記錄調(diào)查的總?cè)~數(shù)、各級(jí)病葉數(shù)。

分級(jí)方法：0級(jí)，無(wú)病斑；1級(jí)，每片葉有病斑5個(gè)以下；3級(jí)，每片葉有病斑6～10個(gè)；5級(jí)，每片葉有病斑11～15個(gè)；7級(jí)，每片葉有病斑16～20個(gè)；9級(jí)，每片葉有病斑21個(gè)以上。

6）藥效計(jì)算方法。采用Excel軟件和鄧肯法（DMRT）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并用SPSS軟件協(xié)助完成統(tǒng)計(jì)分析。病情指數(shù)按式（3）計(jì)算。

病情指數(shù)=[各級(jí)病葉數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值調(diào)查總?cè)~數(shù)×9×100]

（3）

防治效果按式（4）計(jì)算。

防治效果=[1-CK0×PT1CK1×PT0×]100%?? ????? ???????（4）

式中，CK0為空白對(duì)照區(qū)施藥前病情指數(shù)；CK1為空白對(duì)照區(qū)施藥后病情指數(shù)；PT0為藥劑處理區(qū)施藥前病情指數(shù)；PT1為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)茶餅病菌孢子萌發(fā)的抑制活性

采用孢子萌發(fā)抑制率法測(cè)定不同濃度補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌孢子萌發(fā)的抑制活性。由表2可知，隨著補(bǔ)骨脂種子提取物濃度的增加，對(duì)茶餅病菌孢子萌發(fā)的抑制活性逐漸增加。當(dāng)藥物濃度為0.5、1.5、4.5、13.5、40.5 mg/L時(shí)，抑制率分別為47.37%、76.84%、85.26%、90.00%、93.16%，EC50為6.074 mg/L。當(dāng)多抗霉素原藥濃度為5.0 mg/L時(shí)，抑制率為37.37%，說(shuō)明補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制作用。

2.2 不同藥劑對(duì)茶餅病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制活性

采用菌絲生長(zhǎng)速率法，測(cè)定補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑制活性。由表3可知，當(dāng)藥物濃度為10、30、90、270、810 mg/L時(shí)，對(duì)茶餅病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率分別為50.25%、53.40%、66.67%、71.97%、81.09%。補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑菌率隨著藥劑濃度的增加而增加，EC50為12.925 mg/L。當(dāng)多抗霉素原藥濃度為100 mg/L時(shí)，抑制率為55.89%，由此可知補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌具有很好的抑制作用。

2.3 不同藥劑對(duì)茶餅病的田間防治效果

2.3.1 田間試驗(yàn)結(jié)果 廣東省廣州市的試驗(yàn)結(jié)果（表4）表明，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為67.74%、74.79%、79.81%，藥劑防治效果隨施藥次數(shù)的增加而提高；當(dāng)有效成分用量為2.00 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為63.61%、67.56%、74.27%；當(dāng)有效成分用量為1.33 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為59.36%、64.13%、66.74%；對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑3次施藥后防治效果分別為63.01%、67.35%、74.64%。

差異顯著性結(jié)果表明，第三次施藥后7 d，不同濃度的補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑處理間的防治效果差異顯著。補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67 mg/kg處理的防治效果顯著優(yōu)于對(duì)照藥劑；補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.00 mg/kg處理的防治效果與對(duì)照藥劑相當(dāng)，二者之間無(wú)顯著差異。故供試藥劑有效成分用量為2.00～2.67 mg/kg時(shí)對(duì)茶餅病的防治效果較好。

安徽省六安市的田間試驗(yàn)結(jié)果（表5）表明，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為74.90%、76.84%、80.78%；當(dāng)有效成分用量為2.00 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為70.92%、73.54%、75.54%；當(dāng)有效成分用量為1.33 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為64.49%、68.17%、71.21%；對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑3次施藥后防治效果分別為70.14%、73.86%、76.50%。

差異顯著性結(jié)果表明，第三次施藥后14 d，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67 mg/kg處理的防治效果顯著優(yōu)于有效成分用量2.00 mg/kg。與對(duì)照藥劑相比，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67mg/kg處理的防治效果優(yōu)于對(duì)照藥劑，但二者之間無(wú)顯著差異。補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.00 mg/kg處理的防治效果與對(duì)照藥劑相當(dāng)，二者之間無(wú)顯著差異。故供試藥劑有效成分用量為2.00～2.67 mg/kg時(shí)對(duì)茶餅病的防治效果較好。

湖南省張家界市的田間試驗(yàn)結(jié)果（表6）表明，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為25.00%、61.49%、72.61%；當(dāng)有效成分用量為2.00 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為18.98%、51.60%、66.58%；當(dāng)有效成分用量為1.33 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為13.64%、43.74%、60.22%；對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑3次施藥后防治效果分別為21.90%、54.46%、70.33%。

差異顯著性結(jié)果表明，第三次施藥后7 d，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑不同濃度處理間的防治效果差異顯著。與對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑相比，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67 mg/kg處理的防治效果優(yōu)于對(duì)照藥劑，但二者在第一次、第三次施藥后無(wú)顯著差異。補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.00 mg/kg處理的防治效果低于對(duì)照藥劑，且差異顯著。表明當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)對(duì)茶餅病的防效較好。

重慶市合川區(qū)的田間試驗(yàn)結(jié)果（表7）表明，當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為68.60%、78.06%、83.78%；當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.00 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為61.58%、70.70%、78.34%；當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為1.33 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為58.19%、66.29%、74.06%；對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑3次施藥后防治效果分別為61.79%、71.73%、77.41%。

差異顯著性結(jié)果表明，第三次施藥后10 d，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑不同濃度處理間的防治效果差異顯著。與對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑相比，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67 mg/kg處理的防治效果顯著優(yōu)于對(duì)照藥劑，有效成分用量2 mg/kg處理的防治效果與對(duì)照藥劑相當(dāng)，無(wú)顯著差異。故當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.00～2.67mg/kg時(shí)對(duì)茶餅病的防治效果較好。

湖北省利川市的田間試驗(yàn)結(jié)果（表8）表明，當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.67 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為49.14%、57.12%、68.08%；當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.00 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為45.87%、54.73%、62.27%；當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為1.33 mg/kg時(shí)，3次施藥后防治效果分別為41.24%、50.40%、56.79%；對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑3次施藥后防治效果分別為46.57%、56.46%、65.81%。

差異顯著性結(jié)果表明，第三次施藥后10 d，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.67 mg/kg處理的防治效果優(yōu)于對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑，但二者之間無(wú)顯著差異；補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量2.00 mg/kg處理的防治效果與對(duì)照藥劑相當(dāng)，且二者之間無(wú)顯著差異。故當(dāng)補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑有效成分用量為2.00～2.67 mg/kg時(shí)對(duì)茶餅病的防治效果較好。

2.3.2 安全性調(diào)查 補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑在推薦使用劑量范圍內(nèi)施用，茶樹(shù)植株、葉片未見(jiàn)明顯畸形或黃化等現(xiàn)象，說(shuō)明補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑對(duì)茶樹(shù)沒(méi)有產(chǎn)生藥害，試驗(yàn)期間也未發(fā)現(xiàn)該藥劑對(duì)其他生物有明顯的影響。

3 小結(jié)與討論

茶餅病是茶樹(shù)的嚴(yán)重病害之一，常用防治茶餅病的方法大多以化學(xué)藥劑為主，使用化學(xué)藥劑農(nóng)藥易殘留、不易降解、對(duì)環(huán)境和人畜影響較大、易產(chǎn)生藥害等。而植物源農(nóng)藥由于具有無(wú)污染、無(wú)公害、易降解、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)越來(lái)越受到重視。本試驗(yàn)采用室內(nèi)抑菌活性試驗(yàn)，測(cè)定補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌的抑菌活性，并通過(guò)田間試驗(yàn)驗(yàn)證防治效果。

茶餅病菌室內(nèi)抑菌活性試驗(yàn)表明，補(bǔ)骨脂種子提取物對(duì)茶餅病菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制作用。在一定濃度范圍（10～810 mg/L）內(nèi)，其抑制率隨著藥物濃度的增加而增加，EC50分別為12.925 mg/L和6.074 mg/L。

田間試驗(yàn)結(jié)果表明，補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑可以有效防治茶樹(shù)茶餅病。補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑推薦有效成分用量為2.00～2.67 mg/kg，對(duì)茶樹(shù)茶餅病的防治效果相當(dāng)或優(yōu)于對(duì)照藥劑3%多抗霉素可濕性粉劑，防治效果可達(dá)68.08%～83.78%。補(bǔ)骨脂種子提取物微乳劑在制劑用量范圍（10～810 mg/L）內(nèi)對(duì)茶樹(shù)安全，于茶樹(shù)茶餅病發(fā)病初期開(kāi)始施藥，共施藥3次，間隔7～14 d。此外，對(duì)于施藥次數(shù)和間隔天數(shù)可視茶餅病發(fā)生時(shí)期和發(fā)展程度等具體情況靈活調(diào)整。

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