潰瘍性結(jié)腸炎患者黏膜組織中HIF-1α、COX-2表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系

高興 王瑜

(1.寶雞市眉縣中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)三科,陜西 寶雞 722300;2.渭南市富平縣醫(yī)院病理科,陜西 渭南 711700)

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)當(dāng)前在臨床上比較常見(jiàn),也為一種慢性非特異性腸道炎癥,在中老人中的發(fā)病率比較高[1]。當(dāng)前UC的病因尚不十分清楚,也是經(jīng)歷了多因素、多階段、多步驟的過(guò)程,涉及的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜。環(huán)氧化酶-2(COX-2)又稱前列腺素過(guò)氧化物合成酶,主要分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表達(dá),在正常人體中的表達(dá)水平比較低,可促進(jìn)前列腺素合成[2]。但是當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥性病變時(shí)與腫瘤時(shí),COX-2表達(dá)水平會(huì)顯著提高,可阻礙宿主特異性抗原提呈細(xì)胞成熟,可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng),可使得機(jī)體逃避免疫反應(yīng),導(dǎo)致患者病情惡化[3]。低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)的高表達(dá)可促進(jìn)炎癥因子的表達(dá),可增加新生血管的形成,調(diào)控腫瘤細(xì)胞對(duì)缺氧的適應(yīng)[4]。本文旨在探討UC患者黏膜組織中HIF-1α,COX-2表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2020年2月至2022年2月在我院診治的UC患者120例,其中男68例,女52例;年齡(51.58±3.20)歲;體質(zhì)量指數(shù)(23.58±1.11)kg/m2;病程(3.29±0.14)年;心率(78.13±5.92)次/分;收縮壓(125.59±10.14)mmHg;舒張壓(74.59±5.39)mmHg;病變位置:左半結(jié)腸67例,直腸乙狀結(jié)腸33例,全結(jié)腸20例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合UC的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)年齡30～75歲;(3)無(wú)腹部手術(shù)史;(4)入院前1個(gè)月未使用促動(dòng)力藥物、止瀉藥物治療;(5)臨床資料完整;(6)具有手術(shù)病理檢查的指征;(7)無(wú)腹部手術(shù)史的患者。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)妊娠與哺乳期婦女;(2)合并嚴(yán)重心肝腎異常的患者;(3)依從性不佳的患者;(4)患者為隨機(jī)選擇,無(wú)血緣關(guān)系;(5)存在化療史、放療史的患者。

1.2 方法

1.2.1 黏膜組織HIF-1α、COX-2表達(dá)檢測(cè)取手術(shù)患者的病灶黏膜組織(黏膜組)與健康組織(健康組,距離病灶組織至少≥1 cm),免疫組織檢測(cè)試劑盒購(gòu)自福建邁新技術(shù)開(kāi)發(fā)公司,抗HIF-1α抗體、抗COX-2抗體購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。將上述標(biāo)本經(jīng)10.0%福爾馬林固定,脫水、浸蠟、包埋后制作4 μm切片,采用3.0%的過(guò)氧化氫室溫孵育10 min左右,去除內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶,高溫抗原修復(fù)10 min左右,二甲苯脫蠟后進(jìn)行免疫組化染色,滴加HIF-1α抗體、抗COX-2抗體(抗體稀釋度分別為1∶200、1∶500),陰性對(duì)照以磷酸鹽緩沖液代替一抗,封片鏡檢。HIF-1α、COX-2都以細(xì)胞核內(nèi)存在棕黃色顆粒為陽(yáng)性,根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)個(gè)數(shù)占比進(jìn)行判定,陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)個(gè)數(shù)比≤5.0%陰性(-),6.0%～25.0%弱陽(yáng)性(+),26.0%～50.0%中度陽(yáng)性(++),>50.0%強(qiáng)陽(yáng)性(+++),(+)～(+++)判斷為陽(yáng)性。

1.2.2 調(diào)查資料記錄所有患者的性別、年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)、病變位置、收縮壓、舒張壓、心率等指標(biāo)。所有患者隨訪到2023年4月1日,記錄所有患者的預(yù)后情況,判定預(yù)后有效情況,有效判斷標(biāo)準(zhǔn):臨床癥狀明顯改善,無(wú)復(fù)發(fā)情況發(fā)生。

2 結(jié) 果

2.1 不同組別患者的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比黏膜組的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率為72.5%(87/120)、76.7%(92/120),健康組為18.3%(22/120)、20.8%(25/120)。黏膜組與健康組對(duì)比,HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率明顯提高(χ2=71.013、74.863,P<0.05)。

2.2 預(yù)后情況所有患者隨訪到2023年4月1日,預(yù)后有效108例,有效率為90.0%。

2.3 不同預(yù)后患者的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比預(yù)后有效患者的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率為70.4%(76/108)、74.1%(80/108),預(yù)后無(wú)效患者為100.0%(12/12)、100.0%(12/12)。預(yù)后有效患者與預(yù)后無(wú)效患者對(duì)比,HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率明顯降低(χ2=4.848、4.058,P<0.05)。

2.4 相關(guān)性分析在120例患者中,Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示HIF-1α、COX-2表達(dá)水平與患者預(yù)后存在相關(guān)性(r=0.766、0.697,P<0.05)。

3 討 論

現(xiàn)代研究[5]表明,UC的發(fā)病機(jī)制涉及腸黏膜屏障功能異常、免疫異常、遺傳異常、環(huán)境異常等,且有一定的癌變傾向,為此加強(qiáng)早期診治具有重要價(jià)值。HIF-1α是低氧誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子,也是氧平衡調(diào)控的重要因子,可促使缺氧的組織細(xì)胞能保持耐受缺氧狀態(tài)、氧穩(wěn)態(tài)。HIF-1α可在腎臟、肝臟、肺臟、腦部等組織中廣泛表達(dá),其表達(dá)水平上升可促使血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá),可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)缺氧缺血性損傷。HIF-1α的高表達(dá)還可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖,增加腫瘤代謝,可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)。COX-2可以刺激腫瘤細(xì)胞釋放前列腺素,可誘導(dǎo)血管生成,可促使內(nèi)皮細(xì)胞遷移、細(xì)胞生長(zhǎng),誘導(dǎo)腫瘤血管形成[6]。本文結(jié)果顯示,黏膜組的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率較健康組明顯提高(P<0.05),表明UC患者黏膜組織中可呈現(xiàn)HIF-1α、COX-2高表達(dá)狀況。當(dāng)前有研究表明表明HIF-1α可抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng),在新生血管和轉(zhuǎn)移灶的血管上也有表達(dá)。COX-2的高表達(dá)可為UC的發(fā)生提供調(diào)節(jié)作用,使遠(yuǎn)離血管間質(zhì)的腫瘤細(xì)胞得以存活,從而參與UC的發(fā)生與發(fā)展[7]。

UC的病變位置主要位于大腸的黏膜與黏膜下層,由于UC的病情反復(fù)發(fā)作、遷延不愈,早期判斷患者的預(yù)后具有重要價(jià)值[8]。本文結(jié)果顯示,所有患者隨訪到2023年4月1日,預(yù)后有效108例,有效率為90.0%;預(yù)后有效患者的HIF-1α、COX-2表達(dá)陽(yáng)性率與預(yù)后無(wú)效患者對(duì)比明顯降低(P<0.05);Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示,UC患者的黏膜組織HIF-1α、COX-2表達(dá)水平與患者預(yù)后存在相關(guān)性(P<0.05)。從機(jī)制上分析,HIF-1α在正常組織中呈現(xiàn)廣泛性低表達(dá)表達(dá),但是在UC呈現(xiàn)高表達(dá)狀況。HIF-1α刺激內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖,可促進(jìn)炎癥因子的表達(dá)與血小板聚集,還參與血管重塑,導(dǎo)致患者預(yù)后惡化[9]。COX-2的高表達(dá)與受體結(jié)合后,可使核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子發(fā)生磷酸化,促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂,共同加快病情的發(fā)展,還可增加腫瘤的侵襲和腫瘤轉(zhuǎn)移,可影響患者的預(yù)后[10]。

綜上所述,UC患者黏膜組織中可呈現(xiàn)HIF-1α、COX-2高表達(dá)狀況,預(yù)后相對(duì)比較好,HIF-1α、COX-2表達(dá)水平與患者預(yù)后存在相關(guān)性。由于本次研究調(diào)查沒(méi)有納入健康人群,調(diào)查人數(shù)比較少,預(yù)后判定的指標(biāo)比較少,沒(méi)有進(jìn)行多因素分析,將在后續(xù)研究中探討。

利益沖突說(shuō)明/Conflict of Intetests

所有作者聲明不存在利益沖突。

倫理批準(zhǔn)及知情同意/Ethics Approval and Patient Consent

本研究通過(guò)寶雞市眉縣中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),患者均知情同意。