牛結節(jié)性皮膚病的診斷與有效防控方法總結分析

牛結節(jié)性皮膚病屬于外來傳入性的病毒性疾病，同時也是一種新型的傳染性疾病，該種疾病發(fā)病周期較長，病毒傳播速度較快，并且該種疾病具有較長的潛伏期，發(fā)病初期診斷的癥狀并不是很明顯，很容易造成該種疾病的大范圍傳播流行。在開展牛養(yǎng)殖管理過程中，由于很多養(yǎng)殖戶對結節(jié)性皮膚病造成的危害認知不足，并沒有掌握該類疾病的發(fā)生流行特點，發(fā)病之后不能夠及時將病情上報及時診斷，延誤了病情，給養(yǎng)殖場帶來不可挽回的經(jīng)濟損失，使養(yǎng)殖戶蒙受較為嚴重的經(jīng)濟損失。

牛結節(jié)性皮膚病又被稱為疙瘩病或者結節(jié)性皮炎，是由痘病毒科的牛結節(jié)性皮膚病病毒感染引發(fā)的一種接觸性的全身性感染的疾病，臨床上以體表皮膚出現(xiàn)結節(jié)為主要特征，患病牛發(fā)病之后主要表現(xiàn)為體溫升高，淺表淋巴結顯著腫大，四肢、腹部、會陰處會出現(xiàn)不同程度的水腫現(xiàn)象。當前，隨著牛養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，結節(jié)性皮膚病的風險增強，盡管該類疾病造成的死亡率相對較低，但是由于病毒能夠在多種組織和牛皮當中存在，并且很難被徹底消滅，如果發(fā)生流行將很難徹底清理，會對一個地區(qū)的牛養(yǎng)殖業(yè)造成毀滅性的打擊。為此就需要開展針對有效的診斷，及時淘汰患病牛，加強環(huán)境有效清理，減少環(huán)境中的病毒數(shù)量，切斷病毒傳播渠道，保障牛養(yǎng)殖安全，降低經(jīng)濟損失。

一、流行病學

1、病原特征

牛結節(jié)性皮膚病病毒粒子呈磚狀，直徑約為360-400nm，表面有長約40nm的刺突。病毒粒子內部包含一個雙鏈DNA分子，長約190kbp。牛結節(jié)性皮膚病病毒對環(huán)境適應性較強，能夠在不同溫度和濕度條件下存活。病毒在牛皮膚結節(jié)和淋巴結中以囊泡形式存在，能夠長期存活。此外，病毒在血液、精液和乳汁等動物體內液體中也能存活較長時間。病毒對熱敏感，56℃時需要45min才能使其失活。病毒在4℃條件下能存活數(shù)周，在-20℃條件下能存活數(shù)年。此外，病毒對乙醚、氯仿等有機溶劑敏感，但在脂質雙層膜中穩(wěn)定。牛結節(jié)性皮膚病病毒對紫外線、甲醛和乙醚等消毒劑敏感。一般消毒劑如次氯酸鈉、硫柳汞等可在較短時間內使其失活。

2、致病機理

牛結節(jié)性皮膚病病毒主要通過直接接觸傳播，包括動物間的接觸以及帶毒物品與動物的接觸。病毒進入宿主后，首先在皮膚和黏膜等部位繁殖，導致局部炎癥反應。病毒在感染部位繁殖后，可進入淋巴結和血液循環(huán)系統(tǒng)，進一步擴散到其他組織和器官。病毒感染后，宿主免疫系統(tǒng)會產生免疫應答，包括細胞免疫和體液免疫。免疫細胞識別病毒抗原，并將其清除。然而，在病毒清除過程中，免疫反應可能導致組織損傷和炎癥反應加重。病毒大量復制之后引起皮膚、淋巴結、內臟等組織和器官的病理變化。皮膚病變表現(xiàn)為局部紅腫、結節(jié)、膿皰等；淋巴結腫大、充血；內臟器官如肝臟、腎臟等出現(xiàn)炎癥反應。

3、流行特點

牛結節(jié)性皮膚病患病牛是主要的傳染源，病毒可以在感染牛的皮膚結節(jié)、淋巴結、血液、精液和乳汁等組織中繁殖并排出體外。病毒主要通過直接接觸傳播，包括動物間的接觸以及人與動物的接觸。病毒可以通過損傷的皮膚、黏膜等進入宿主。此外，病毒還可通過精液、乳汁等傳播。各種品種和年齡的牛均易感，但年齡較小的牛更易感染。牛結節(jié)性皮膚病無明顯季節(jié)性，一年四季均可發(fā)生。

二、臨床癥狀

牛結節(jié)性皮膚病的潛伏期通常為2-4周，但也有報道指出潛伏期可長達6周，致死率較低，一般在5%-20%之間。牛結節(jié)性皮膚病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱、皮膚和器官表面結節(jié)、體型消瘦、生長緩慢及產奶量下降等。感染牛體溫升高，可達到39-41℃。皮膚出現(xiàn)紅腫、結節(jié)，結節(jié)逐漸增大，表面呈褐色或黑色，質地堅硬。結節(jié)通常分布于頭部、頸部、胸部、四肢等部位，嚴重時可遍布全身。牛體重下降，食欲減退，精神不振，奶牛產奶量顯著下降。感染牛的淋巴結腫大，尤其是頸部、肩部、腹股溝等部位的淋巴結。部分感染?？赡艹霈F(xiàn)呼吸困難。

三、病理學變化

表皮細胞發(fā)生變性、壞死，局部角質層增厚，角質細胞內水腫。在病變部位，表皮細胞可能出現(xiàn)棘皮增生、銀屑病樣增生、乳頭瘤樣增生等病理變化。真皮內血管擴張、充血，血管周圍炎性細胞浸潤，包括淋巴細胞、單核細胞和漿細胞等。在病變部位，真皮內可能出現(xiàn)水腫、纖維組織增生、膠原纖維溶解等病理變化。淋巴結腫大，淋巴濾泡增生，淋巴細胞數(shù)量增多，周圍有炎性細胞浸潤。嚴重時，淋巴結可能發(fā)生壞死、溶解。肝臟、腎臟等內臟器官可能出現(xiàn)不同程度的炎癥反應，如充血、水腫、炎性細胞浸潤等。肌肉組織可能出現(xiàn)水腫、變性、壞死等病理變化。關節(jié)腔內可能出現(xiàn)漿液性、纖維蛋白性或膿性滲出液，關節(jié)囊壁增厚，纖維蛋白沉積。

四、實驗室診斷

1、酶聯(lián)免疫吸附試驗

準備所需試劑和器材，如ELISA檢測試劑盒、標準品、樣本、洗滌液、酶標儀等，將待檢測的牛血清或組織樣本按照ELISA檢測試劑盒的推薦量加入到對應的孔中。在每個孔中加入適量的酶標抗體，輕輕振蕩混勻，孵育。用洗滌液充分洗滌每個孔，去除未結合的酶標抗體。在每個孔中加入適量的底物溶液，輕輕振蕩混勻，孵育。用酶標儀檢測每個孔的吸光度值。將檢測到的吸光度值與標準曲線進行比較，計算出對應的牛結節(jié)性皮膚病病毒抗體滴度。根據(jù)ELISA檢測試劑盒的說明書，一般以樣品吸光度值大于或等于對照組吸光度值的2.1倍時，判定為陽性結果。也可以采用臨界值法，即將樣品的吸光度值與陰性對照組吸光度值的比值與臨界值進行比較。當比值大于或等于臨界值時，判定為陽性結果。

2、熒光聚合酶鏈式反應

準備所需試劑和器材，如F-PCR檢測試劑盒、核酸提取試劑盒、熒光定量PCR儀、核酸提取儀等。從牛的血液、組織或其他樣本中提取核酸，可以使用核酸提取試劑盒進行提取，根據(jù)牛結節(jié)性皮膚病病毒的基因序列設計引物，用于F-PCR擴增。配置F-PCR反應體系，包括引物、dNTPs、Taq酶、熒光探針等。將提取的核酸作為模板，進行F-PCR擴增反應。使用熒光定量PCR儀檢測擴增產物的熒光信號，記錄Ct值。將檢測到的Ct值與陽性對照組Ct值進行比較，計算出對應的牛結節(jié)性皮膚病病毒核酸濃度。根據(jù)F-PCR檢測試劑盒的說明書，一般以樣品的Ct值小于或等于陽性對照組Ct值時，判定為陽性結果。也可以采用閾值法，即將樣品的Ct值與陰性對照組Ct值的差值與閾值進行比較。當差值小于或等于閾值時，判定為陽性結果。

五、疫情處理

對于牛結節(jié)性皮膚病在疫情防控過程中，應該按照動物防疫法規(guī)和農業(yè)農村部的相關規(guī)定，對該種疾病實行快速報告制度，任何單位個人發(fā)現(xiàn)疑似患病牛之后應該立即向所在地的畜牧獸醫(yī)主管部門或動物衛(wèi)生監(jiān)督機構或者動物疫病防控機構報告。有關單位在接到報告之后應該立即按照規(guī)定開展疫病防控，主要按照可疑病例、疑似病情、確診病情的程序認定疫情。

對確定為牛結節(jié)性皮膚病感染的養(yǎng)殖場實施嚴格的隔離監(jiān)視，禁止牛只和相關產品物品的轉移，并注重做好吸血昆蟲的消殺工作，推薦使用2.5%的高效氯氰菊酯乳油5000倍液，對隔離場內外部環(huán)境進行嚴格的衛(wèi)生消毒，堅持每天上午和下午各使用一次，推薦使用2%-5%的氫氧化鈉溶液和10%的生石灰乳。

對相對獨立的規(guī)?；B(yǎng)殖場以患病牛所在養(yǎng)殖場為役點，散養(yǎng)牛主要以患病牛所在的自然村為役點，役點邊緣向外延伸3km作為疫區(qū)，疫區(qū)向外延伸10km作為受威脅地區(qū)。根據(jù)疫情的發(fā)病嚴重程度實行封鎖隔離。撲殺并銷毀役點當中的所有患病牛和病原學檢測為陽性的牛群，并對所有的病死牛撲殺牛和相關產品進行深埋或者焚燒處理，同群病原學檢測為陰性的牛群應該隔離養(yǎng)殖，采取防范吸血昆蟲叮咬的措施，并鼓勵提前出欄屠宰。在疫情防控期間，應該大力實施吸血昆蟲的控制措施，消殺養(yǎng)殖場當中的吸血昆蟲和幼蟲清除滋生環(huán)境。

對牛的排泄物、病原污染物以及可能被病原污染的飼料、墊料、污水進行無害化處置。對病毒污染或者可能被病毒污染的各種物品如養(yǎng)殖管理用具，交通用具建設的器具和場地都需要執(zhí)行嚴格的衛(wèi)生消毒，推薦使用2%的來蘇爾溶液，2%-5%的氫氧化鈉溶液，每天上午下午各消毒一次。疫區(qū)和受威脅地區(qū)的牛群禁止牛只的出入，同樣實施吸血昆蟲消殺措施，殺滅吸血昆蟲的滋生環(huán)境，并且在疫區(qū)和受威脅區(qū)域周圍設立警示標志，出入疫區(qū)的交通路口，設置臨時檢查站，執(zhí)行臨時檢查任務。受威脅地區(qū)以內的養(yǎng)殖場和所有牛群，按照國家批準的山羊痘疫苗5倍劑量，對牛群進行緊急免疫接種。撲殺30d內禁止疫情所在的活牛調出各個地區(qū)的檢疫監(jiān)督過程中，應該加強對結節(jié)性皮膚病的臨床檢驗。同時對疫情發(fā)生30d以內引入役點的所有牛群，進行進一步的溯源調查，明確疫情的來源和源頭。地點和疫區(qū)當中的最后一頭牛撲殺按照規(guī)定進行嚴格的消毒無害化處理，30d以后經(jīng)過疫情發(fā)生所在地的上一級畜牧獸醫(yī)主管部門的檢驗合格，由所在地的畜牧獸醫(yī)主管部門向發(fā)布封鎖命令的人民政府申請解除封鎖，由人民政府發(fā)布解鎖命令，并在解除封鎖之后，持續(xù)加強疫情的監(jiān)測。

六、預防措施

1、減少環(huán)境的吸血昆蟲

引起牛結節(jié)性皮膚病的吸血昆蟲種類多種多樣，常見的包括了蒼蠅蚊子和蜱蟲，針對這些吸血性昆蟲，一定要注重做好養(yǎng)殖環(huán)境的有效消殺，殺滅環(huán)境當中存在的多種病原微生物，切斷病毒的傳播渠道。牛舍內部一定要保持清潔和干燥，定期清理垃圾和糞便，減少吸血昆蟲的滋生地?？梢允褂脤ｉT針對吸血昆蟲的殺蟲劑進行噴灑。但需要注意的是，使用殺蟲劑時要按照說明書上的劑量和方法使用，并避免對人體造成傷害。例如推薦使用2.5%的高效氯氰菊酯乳油3000-5000倍液，1%的敵百蟲溶液噴灑。也可以在牛舍和入口處安裝防蚊網(wǎng)，防止蚊子和其他吸血昆蟲進入。堅持封閉化的養(yǎng)殖管理方式，避免在養(yǎng)殖場當中混合養(yǎng)殖其他牲畜類動物，減少牛群與其他生畜類動物接觸的頻率。進入夏秋季節(jié)之后，應該制定完善的吸血昆蟲消殺方案，明確消殺的時間、地點、方法等，并嚴格執(zhí)行。對所有員工進行培訓，讓他們了解吸血昆蟲的危害和如何進行消殺。定期檢查消殺的效果，如果發(fā)現(xiàn)有吸血昆蟲的存在，應及時進行補救。在使用殺蟲劑時，要注意環(huán)保，選擇無害或低毒的產品，并在使用后妥善處理廢棄物。

2、強化檢疫檢驗

對進口牛只及其產品進行嚴格的檢疫，確保無病毒感染。對國內牛場進行定期監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)疫情及時上報和處理。對引進的牛只及其產品進行嚴格的審批，確保符合國家檢疫標準。建立詳細的檢疫檔案，包括產地、運輸工具、檢疫證明等信息。引種的牛只在指定地點進行隔離觀察，觀察期間進行健康監(jiān)測，確保無異常情況。重點加強牛結節(jié)性皮膚病病毒的血清學檢測，確保抗體水平達到要求。經(jīng)過嚴格的檢疫檢驗，確保牛安全之后才能夠和原有的牛群進行混合養(yǎng)殖。

3、加強疫苗免疫接種

可以使用相對應的疫苗進行免疫接種，提高牛群身體內免疫力。推薦使用山羊痘疫苗5倍劑量，對牛群進行緊急免疫接種。但要注意疫苗接種后，抗體產生需要一定時間，因此，在疫苗接種后1個月內，牛只仍可能攜帶病毒。所以在疫苗免疫接種后的14-21d進行持續(xù)性的抗體檢測，對于抗體不達標的牛群，應該及時查明改進，避免帶毒牛在養(yǎng)殖場中存在，影響到免疫接種效果，導致該種疾病在養(yǎng)殖場中周期性傳播蔓延。

4、加強環(huán)境消毒

注重牛場、牛舍、用具的定期消毒，保持清潔。對牛只進行清潔護理，避免皮膚損傷。一般情況下應該每天清理牛舍內部和外部的垃圾和雜物，保持環(huán)境衛(wèi)生整潔，保持牛舍內的空氣流通，避免潮濕和異味，根據(jù)牛的需求控制牛舍的溫度和濕度，以保證牛的健康和舒適。定期檢查和維護設備，確保其正常運行，防止污染和故障。在選擇消毒劑時，應根據(jù)牛舍的具體情況來確定。一般情況下，可以選擇具有廣譜殺菌效果的消毒劑，如次氯酸鈉、漂白粉、過氧化氫、氧化鋅等。消毒劑的使用濃度應該根據(jù)牛舍的具體情況來確定。對于大規(guī)模的牛舍，可以使用較低的濃度，如0.1%-0.5%；而對于小規(guī)模的牛舍，可以使用較高的濃度，如1%-2%。消毒劑的使用周期應根據(jù)牛舍的具體情況來確定。一般來說，對于頻繁進出的牛舍，應每周進行1-2次的全面消毒；而對于較少進出的牛舍，可以每周進行一次全面消毒。消毒計算使用過程中應考慮消毒廣譜、有效濃度低、作用快、效果好、對人畜無害、性質穩(wěn)定、易溶于水、不易受有機物和其他理化因素影響、使用方便、價格便宜、推廣方便、無味、無臭、不損壞消毒物等因素。根據(jù)消毒藥物的濃度和作用時間進行使用，確保達到有效的消毒效果，使用時注意個人防護，避免直接接觸皮膚和眼睛，消毒結束后，用清水將飼槽等設施沖洗干凈，以防對牛產生刺激。另外，也可以選擇使用紫外線消毒、臭氧消毒等方法。紫外線消毒需確保照射時間充足，照射強度適宜，臭氧消毒應注意安全防護，避免人畜暴露在臭氧環(huán)境中。

5、加強養(yǎng)殖管理

提供充足的營養(yǎng)，增強牛只的抵抗力。保持牛舍通風良好，避免擁擠和潮濕環(huán)境。對養(yǎng)殖戶和獸醫(yī)進行牛結節(jié)性皮膚病相關知識的培訓和宣傳，提高其防控意識和能力。針對牛結節(jié)性皮膚病疫情，制定應急預案，確保疫情得到及時、有效的控制。加強對牛結節(jié)性皮膚病病毒的研究，開發(fā)更有效的疫苗和診斷方法，為防控工作提供科學支持。

綜上所述，牛結節(jié)性皮膚病在臨床上主要以體表組織出現(xiàn)結節(jié)病變?yōu)橹饕卣鳎∏榧又刂髸l(fā)牛群出現(xiàn)全身性的感染，同時很容易繼發(fā)感染其他細菌性疾病和病毒性疾病。由于牛結節(jié)性皮膚病病毒對整個養(yǎng)殖業(yè)造成的危害嚴重，所以就需要明確該種疾病的流行特點，加強結節(jié)性皮膚病防控知識的有力宣傳，保障養(yǎng)殖戶能夠切實掌握，并提高養(yǎng)殖戶對該種病毒性傳染性疾病的重視程度，加強對疾病的有效防控，及時發(fā)現(xiàn)，及時處理，降低病毒的傳染范圍，保證牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

（作者單位：814499 青海省果洛州久治縣門堂鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)工作站）