14種消毒劑體外抑菌效果評價(jià)

鄧淼汐 蔣清蓉 邱榮斌

基金項(xiàng)目：蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新體系建設(shè)項(xiàng)目（項(xiàng)目編號：2022ZYDF077）

摘? 要：為了篩選體外抑菌效果較好的消毒劑，本文對碘制劑類、季銨鹽類和復(fù)方戊二醛類這三類共14種消毒劑的體外抑菌效果進(jìn)行評價(jià)。采用最小抑菌濃度法對14種消毒劑殺滅大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的效果進(jìn)行對比。結(jié)果顯示：14種消毒劑中，季銨鹽類消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的消毒效果最好，其次是復(fù)方戊二醛類，最后是碘制劑類。其中季銨鹽類消毒劑月芐三甲氯銨對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好，其次是癸甲溴銨，再次是苯扎溴銨。本試驗(yàn)為后續(xù)開展雞場帶雞消毒試驗(yàn)選擇消毒劑提供了參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：消毒劑；體外抑菌；效果

中圖分類號：S859.79 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-0769（2024）02-0030-04

消毒劑是指能夠殺滅傳播媒介中的病原微生物，從而達(dá)到無害化要求的制劑。其主要作用機(jī)理是改變微生物賴以生存的環(huán)境，使微生物的內(nèi)外結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，導(dǎo)致主要代謝機(jī)能出現(xiàn)障礙，生長發(fā)育受阻，從而喪失活性失去致病力[1]。不同類型的消毒劑有不同的消毒效果。消毒劑按其作用水平可分為滅菌劑、高效消毒劑、中效消毒劑、低效消毒劑。近幾年，消毒劑已廣泛應(yīng)用于工業(yè)、醫(yī)療衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)等各個(gè)行業(yè)，人們對消毒劑的應(yīng)用研究有了很大的進(jìn)展[2]。

本試驗(yàn)選用季銨鹽（苯扎溴銨）、復(fù)方戊二醛（戊二醛癸甲溴銨）、碘制劑（聚維酮碘）三類消毒劑。季銨鹽消毒劑是20世紀(jì)Jacobs等首次合成的季銨鹽類化合物，主要產(chǎn)品之一為苯扎溴銨[3]；戊二醛癸甲溴銨可以廣譜、高效殺滅各種細(xì)菌、真菌、病毒、支原體和衣原體。聚維酮碘作為一種優(yōu)良的皮膚黏膜消毒劑和外用藥已被許多國家的藥典收錄[4]。隨著消毒劑的頻繁使用，抗藥菌株不斷出現(xiàn)，有必要定期測定以評價(jià)不同消毒劑的消毒效果。

1? 材料與方法

1.1 菌株

大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（C83907）和金黃色葡萄球菌菌株由鐵騎力士集團(tuán)馮光德實(shí)驗(yàn)室保存。

1.2 消毒劑

14種消毒劑由多個(gè)廠家提供，產(chǎn)品信息如表1。

1.3 試驗(yàn)試劑

營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基購自杭州微生物試劑有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 培養(yǎng)基的制備

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備：稱取營養(yǎng)瓊脂33 g于試劑瓶中，加入1 000 mL水，121 ℃高壓滅菌15 min，在超凈工作臺中倒板，每個(gè)培養(yǎng)皿15～20 mL。

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的制備：稱取營養(yǎng)肉湯1.8 g于試劑瓶中，加入100 mL水，121 ℃高壓滅菌15 min，置于超凈工作臺中備用。

1.4.2 消毒劑的配制

消毒劑按照其產(chǎn)品使用說明進(jìn)行配制，稀釋比例如表2。

1.4.3 細(xì)菌培養(yǎng)

吸取3 μL大腸桿菌菌種保存液，接種于8 mL營養(yǎng)肉湯中，37 ℃恒溫培養(yǎng)器中培養(yǎng)16～18 h進(jìn)行菌種活化及增殖。無菌吸取1 mL活化菌液至9 mL營養(yǎng)肉湯中，充分振蕩搖勻，得到稀釋10-1的菌液，照此方法依次制成稀釋10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7的菌液，每個(gè)稀釋度更換無菌吸管。分別吸取0.1 mL不同稀釋度的菌液到營養(yǎng)瓊脂平板上，將菌液涂布均勻，倒置，放37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～18 h，計(jì)菌落數(shù)。最終配制菌液：大腸桿菌活菌數(shù)為1.5×108 CFU/mL，金黃色葡萄球菌活菌數(shù)為3.6×108 CFU/mL。

1.4.4 最小抑菌濃度測定

將配制好的消毒液分成14組，每組10個(gè)EP管，各組第1個(gè)EP管分別為0.5 mL原液，第2～10個(gè)EP管中加入0.5 mL營養(yǎng)肉湯，從第 1個(gè)EP管開始依次往后稀釋。在稀釋好的各管消毒液中加入3 μL菌液，每管做好標(biāo)記，放37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h，然后每組在? ? ? 2個(gè)營養(yǎng)瓊脂平板上分隔劃線，繼續(xù)放37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16 h，觀察結(jié)果，判斷最小抑菌濃度（minimal inhibit concentration，MIC）。最小抑菌濃度越低，代表消毒劑的抑菌效果越好。

2? 結(jié)果與分析

2.1 消毒劑對大腸桿菌的最小抑菌濃度

3種碘制劑消毒劑（A、B和C）對大腸桿菌的最小抑菌濃度分別為50、50、100 μL/mL，如圖1-圖6。

3? 結(jié)論

消毒是貫徹“預(yù)防為主”方針的一項(xiàng)重要措施，目的是消滅外界環(huán)境中的病原體，以切斷傳播途徑，阻止疫病繼續(xù)蔓延。本試驗(yàn)采用最小抑菌濃度法對14種消毒劑的抑菌效果進(jìn)行了快速有效的評價(jià)。不同種類的消毒劑抑菌效果各不相同，同一類消毒劑的抑菌效果也存在微小差異。對兩種病原菌的抑菌效果來看，碘制劑中的B消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；季銨鹽中的D和E消毒劑對大腸桿菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；F和G消毒劑對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；復(fù)方戊二醛中的K消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好。使用安全高效的消毒劑可以減少病原體傳染的概率，從而增加養(yǎng)殖收益[5]。養(yǎng)殖場在實(shí)際消毒過程中，消毒對象、溫度、濕度、作用時(shí)間、污染程度等因素都會對消毒效果產(chǎn)生一定的影響，因此養(yǎng)殖場選擇消毒劑要根據(jù)消毒對象選擇適當(dāng)類型的消毒劑，并根據(jù)消毒條件調(diào)整消毒劑使用比例，以達(dá)到理想的消毒效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 鄭舉，劉紅云，陳靜，等．消毒劑的作用機(jī)理及在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用[J]．現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2019（8）：14-15.

[2] 王潔瓊，趙玉杰，周薇帆，等．不同消毒劑抑菌效果觀察[J]．河南畜牧獸醫(yī)（綜合版），2017，38（1）：6-7.

[3] 張朝武．應(yīng)用廣泛的季銨鹽類消毒劑[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2006，33（5）：855-857.

[4] 蘇潤雨，聶伯堯，楊百亮．3種消毒劑對金黃色葡萄球菌殺菌作用的研究[J]．天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，23（3）：51-54.

[5] 董雯雯，李峰，張世棟，等．家禽養(yǎng)殖場常用消毒劑及消毒效果評價(jià)方法研究進(jìn)展[J]．家禽科學(xué)，2019（9）：53-56.