水禽細(xì)小病毒病的診斷與防控

近年來，我國水禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，現(xiàn)已成為世界上飼養(yǎng)水禽最多的國家。細(xì)小病毒是引起水禽疫病的重要病原之一，制約我國水禽養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展。做好水禽細(xì)小病毒病的防控，意義重大。本文概述了水禽細(xì)小病毒病的臨床癥狀、診斷方法和防控措施，旨在為該病的診斷及防控等相關(guān)研究提供一定的參考。

1" 病原簡介

水禽細(xì)小病毒（Waterfowl parvovirus，WPVs）為細(xì)小病毒科（Parvoviridae）、細(xì)小病毒亞科（Parvovirinae）、依賴病毒屬（Dependoparvovirus）成員。WPVs病毒粒子無囊膜結(jié)構(gòu)，直徑約為21 nm。WPVs基因組全長約5.1 kb，為單股線性DNA[1]。WPVs包括經(jīng)典鵝細(xì)小病毒（Goose parvovirus，GPV）、新型鵝細(xì)小病毒（Novel goose parvovirus-related virus，NGPV）和番鴨細(xì)小病毒（Muscovy duck parvovirus，MDPV）。GPV為經(jīng)典毒株，可引起雛鵝和番鴨小鵝瘟；NGPV為GPV變異株，引起鴨短喙侏儒綜合征；MDPV僅侵害番鴨，具有致病性，引起“三周病”[2]。

2" 流行病學(xué)

1961年我國學(xué)者首次從雛鵝體內(nèi)分離到GPV，主要感染4周齡以內(nèi)的番鴨和雛鵝；1周齡以內(nèi)的易感雛鵝感染后，死亡率可達(dá)100%；2～3周齡感染的，發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率為10%～60%；3～4周齡感染的，無臨床癥狀，形成亞臨床感染。

2015年在我國大量鴨群中出現(xiàn)鴨短喙侏儒綜合征，主要感染10～40日齡鴨群，該病主要發(fā)生于櫻桃谷鴨和半番鴨。發(fā)病率在10%～30%之間，嚴(yán)重者達(dá)40%。

1980年我國學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)MDPV，3周齡以內(nèi)的番鴨發(fā)病率在27%～62%之間，死亡率為22%～43%不等，20日齡后表現(xiàn)為零星發(fā)病。發(fā)病率與死亡率與免疫狀態(tài)和被感染鴨的日齡密切相關(guān)[3]。

3" 臨床癥狀

3.1" 小鵝瘟

根據(jù)感染病程的發(fā)展過程，該病可以分為：最急性型、急性型和亞急性型。最急性型常發(fā)生于7日齡以內(nèi)的雛鵝，臨床表現(xiàn)為突然發(fā)病，傳播速度和死亡速度快，死亡雛鵝的喙、爪尖發(fā)紺，發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率達(dá)95%以上。急性型多發(fā)生于14日齡以內(nèi)的雛鵝，臨床表現(xiàn)為精神沉郁、食欲廢絕、行動障礙，排黃白色或黃綠色帶有氣泡的稀便；病死前兩腿麻痹和抽搐。15日齡以上的雛鵝感染小鵝瘟后常表現(xiàn)為亞急性型，癥狀較輕，一般表現(xiàn)為食欲不振、消瘦，病程在5～7 d不等。

3.2" 鴨短喙侏儒綜合征

感染鴨在5～6日齡開始發(fā)病。發(fā)病初期，表現(xiàn)為精神萎靡，10日齡左右出現(xiàn)生長發(fā)育受阻，羽毛發(fā)育障礙，俗稱毛刺鴨。短喙，舌頭突出外漏，不靈活，影響采食，影響骨骼發(fā)育。隨后出現(xiàn)機(jī)體消瘦，腿部無力，運(yùn)動障礙等。此疾病，在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)造成淘汰率增加，在加工環(huán)節(jié)影響產(chǎn)品品質(zhì)。

3.3" 番鴨細(xì)小病毒病

番鴨細(xì)小病毒只侵害番鴨，一般感染3周齡以內(nèi)的番鴨，因此該病也叫三周病。該病可根據(jù)病程長短分為：最急性型、急性型和亞急性型。6日齡以內(nèi)的番鴨，常表現(xiàn)為最急性型，病程短，幾小時出現(xiàn)死亡；7～14日齡的，表現(xiàn)為急性型，精神沉郁，運(yùn)動障礙，腹瀉，病程2～4 d不等；2周齡以上的，主要表現(xiàn)為亞急性型，病程一般為5～7 d不等，患病鴨精神委頓，行走遲緩，死亡率低。病愈鴨有脫毛現(xiàn)象，影響生長發(fā)育，成為僵鴨。

4" 剖檢病變

4.1" 小鵝瘟

小鵝瘟的特征性病變?yōu)榧毙钥ㄋ?纖維素性壞死性腸炎。急性型病例一般表現(xiàn)為全身敗血性變化，全身脫水，心肌蒼白，肝臟腫大。

4.2" 鴨短喙侏儒綜合征

剖檢可見鴨舌腫脹，變形；肝臟出血；胰腺可見針尖大小的白色壞死點(diǎn)；胸腺腫大，出血；腸粘膜出血；骨密度降低，骨質(zhì)疏松。

4.3" 番鴨細(xì)小病毒病

全身敗血性病變，心肌松弛，心臟變圓。特征性病變主要表現(xiàn)在空腸中，后段明顯膨脹，剖開腸管可見腸管內(nèi)有大量的炎性滲出物、脫落的腸粘膜和腸內(nèi)容物。十二指腸和直腸等部分腸黏膜有不同程度的充出血。

5" 診斷方法

根據(jù)水禽細(xì)小病毒臨床癥狀和剖檢病變進(jìn)行初步診斷，確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，包括病原的分離與鑒定、血清學(xué)診斷及分子生物學(xué)診斷等方法。血清學(xué)診斷方法包括中和試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。目前使用較多的是分子生物學(xué)診斷方法，包括LAMP、PCR和熒光定量PCR等。PCR檢測方法可通過軟件設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，擴(kuò)增出目的條帶，對條帶進(jìn)行測序比對分析，以確定病原。

6" 防控措施

加強(qiáng)衛(wèi)生消毒和飼養(yǎng)管理，減少水禽應(yīng)激，提高水禽抵抗力是防控水禽細(xì)小病毒病的有效方法。加強(qiáng)疫苗免疫是防控該病的有效措施，目前防控該病的疫苗有減毒活疫苗、滅活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗和病毒活載體疫苗。

國內(nèi)外最早用來預(yù)防WPVs的疫苗為減毒活疫苗。減毒活疫苗主要是通過接種鵝胚或細(xì)胞進(jìn)行傳代獲得低毒力的毒株。我國學(xué)者于1962年研制出針對種鵝的小鵝瘟活疫苗，隨后又相繼研制出針對雛鵝、雛番鴨、番鴨等的弱毒疫苗。減毒活疫苗的作用機(jī)制主要在VP1蛋白，該結(jié)構(gòu)蛋白受體結(jié)合位點(diǎn)附近的序列發(fā)生變化，可能是毒株毒力減弱的原因。

滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)為安全性高、生產(chǎn)工藝簡單且不存在病毒擴(kuò)散的風(fēng)險，臨床上常常用作加強(qiáng)免疫。國內(nèi)外有很多學(xué)者將毒株滅活制備滅活疫苗，接種鴨、鵝，均能獲得抗體保護(hù)。

亞單位疫苗只含有致病源的一部分，無致病性，不存在擴(kuò)散病毒的風(fēng)險，安全性更高。國內(nèi)外學(xué)者通過構(gòu)建重組質(zhì)粒進(jìn)行原核、真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)出目的蛋白，可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高水平的抗體。

核酸疫苗是一種新型疫苗，其優(yōu)點(diǎn)為制造簡單，無需冷藏常溫下即可穩(wěn)定存在。當(dāng)接種核酸疫苗后，重組質(zhì)粒進(jìn)入機(jī)體細(xì)胞核中，在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄翻譯構(gòu)建抗原，表達(dá)的抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的免疫應(yīng)答，包括體液免疫和細(xì)胞免疫，具有很好的免疫原性。有學(xué)者研究表明，基因疫苗誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫均優(yōu)于弱毒疫苗，今后在市場上具有廣闊的應(yīng)用前景。

病毒活載體疫苗接種機(jī)體后不僅對載體產(chǎn)生免疫保護(hù)，也對插入基因的相應(yīng)病原產(chǎn)生免疫保護(hù)。已有學(xué)者將鵝副黏病毒作為載體表達(dá)GPV的VP3蛋白，免疫雛鵝后產(chǎn)生了中和GPV和鵝副黏病毒的中和抗體。活載體疫苗為構(gòu)建多聯(lián)多價疫苗提供了便利。在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中，我們可根據(jù)自己的實(shí)際情況選擇相適應(yīng)的疫苗[4]。對于已經(jīng)感染的水禽可注射相應(yīng)的抗體來進(jìn)行治療[5]。

參考文獻(xiàn)：

[1]" 馬瑤，羅青平，張蓉蓉，曾哲，溫國元，商雨，汪宏才.水禽細(xì)小病毒病流行病學(xué)及防控研究進(jìn)展[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2023（16）：24-28.

[2]" 何信群，蘇敬良，徐玉，李來旭，李閣，劉哲君，明月月.鴨源新型鵝細(xì)小病毒YJDS-19-16株的分離鑒定及VP3基因序列分析[J].中國動物檢疫，2023，40（07）：17-23.

[3]" 張帥.新型鵝細(xì)小病毒感染抑制鴨骨骼發(fā)育的分子機(jī)制研究[D].博士學(xué)位論文.泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2023.

[4]" 汪宏才，馬瑤，商雨，曾哲，張蓉蓉，溫國元，羅青平.水禽細(xì)小病毒疫苗研究進(jìn)展[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，61（S1）：20-24.

[5]" 賀大林，唐熠，刁有祥.當(dāng)前肉鵝主要疫病的流行情況及防控對策[J].中國禽業(yè)導(dǎo)刊，2022，39（09）：38-41.