快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用

【摘要】 目的 探討快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用。方法 選擇2022年1—12月泉州市第一醫(yī)院病理科180例患者為研究對(duì)象，依據(jù)隨機(jī)抽簽法將研究對(duì)象分為對(duì)照組和研究組，各90例。對(duì)照組予以常規(guī)切片方案，研究組予以快速石蠟切片方案。比較2組檢驗(yàn)方案操作時(shí)間、切片質(zhì)量和技術(shù)診斷結(jié)果。結(jié)果 研究組方案固定操作時(shí)間、第1次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第2次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間均短于對(duì)照組（P＜0.05）。研究組高質(zhì)量切片占比為98.89%，高于對(duì)照組的84.44%（P＜0.05）；研究組技術(shù)診斷正確率為100.00%，高于對(duì)照組的88.89%（P＜0.05）。結(jié)論 快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的效果良好，可縮短各項(xiàng)操作時(shí)間，提升切片質(zhì)量，保證檢驗(yàn)工作質(zhì)量，值得進(jìn)一步推廣。

【關(guān)鍵詞】 快速石蠟切片技術(shù)；常規(guī)切片方案；病理檢驗(yàn)；操作時(shí)間；切片質(zhì)量；技術(shù)診斷結(jié)果

文章編號(hào)：1672-1721（2024）02-0116-03? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ?中國(guó)圖書(shū)分類號(hào)：R446.8

檢驗(yàn)是病理科的日常工作之一。臨床對(duì)病理報(bào)告的要求愈發(fā)高，甚至有些病理報(bào)告實(shí)驗(yàn)室正在試圖縮短報(bào)告周期，但受到種因素（取材、制片等）影響，無(wú)法在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成報(bào)告。我國(guó)多采用傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)進(jìn)行病理學(xué)診斷，但是這種方式操作步驟復(fù)雜，具有一定操作難度，而且對(duì)取材和制片的要求較高?；诖耍焖偈炃衅僮骷夹g(shù)被逐漸應(yīng)用于臨床且受到廣泛關(guān)注?？焖偈炃衅僮骷夹g(shù)花費(fèi)時(shí)間較短，操作便捷易上手，可在短時(shí)間內(nèi)獲取良好的效果[1]。對(duì)快速石蠟切片技術(shù)進(jìn)行深入研究以及探討具有研究?jī)r(jià)值。本研究選擇2022年1—12月泉州市第一醫(yī)院病理科180例患者為研究對(duì)象，探討快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2022年1—12月泉州市第一醫(yī)院病理科180例患者為研究對(duì)象，依據(jù)隨機(jī)抽簽法將其分為對(duì)照組和研究組，各90例。對(duì)照組男性49例，女性41例，年齡25～67歲，平均年齡（49.53±5.49）歲；受檢組織，卵巢14例，宮頸12例，淋巴結(jié)12例，乳腺11例，甲狀腺10例，腮腺9例，膽囊8例，闌尾7例，胃腸鏡活檢5例，支氣管內(nèi)膜活檢2例。研究組男性47例，女性43例，年齡24～69歲，平均（49.49±5.33）歲；受檢組織，卵巢15例，宮頸14例，淋巴結(jié)12例，乳腺11例，甲狀腺9例，腮腺9例，膽囊7例，闌尾6例，胃腸鏡活檢4例，支氣管內(nèi)膜活檢3例。

2組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意且簽署知情同意書(shū)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者配合度高；臨床資料齊全者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重疾病，對(duì)本次研究造成影響者；合并心力衰竭者；中途自行退出或者拒絕參與本次研究者；病情危急、存活時(shí)間少于1個(gè)月者；存在認(rèn)知、行為等異常者。

1.2 方法

儀器及試劑：BMJ-Ⅲ型超聲波快速組織處理儀及程序化控制系統(tǒng)（江蘇常州中威電子儀器廠）、德國(guó)SLEE全自動(dòng)旋轉(zhuǎn)式石蠟切片機(jī)CUT6062、梵緹斯密閉恒溫全自動(dòng)染片機(jī)[蘇寧食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第1410027號(hào)]。

試劑：100 mL/L AF液（體積分?jǐn)?shù)為950 mL/L的酒精9份，體積分?jǐn)?shù)為400 mL/L的甲醛1份）、石蠟（熔點(diǎn)58～60 ℃）、丙酮等。這些試劑均由北京諾博萊德科技有限公司提供。

對(duì)照組采用常規(guī)切片方案：（1）切片放入蒸餾水浸泡后采取蘇木精水染色；（2）將切片依次浸泡在酸水、氨水中，取出分色；（3）在小注流水下沖洗1 h，實(shí)施蒸餾；（4）采取規(guī)格酒精（規(guī)格70%、90%）做脫水處理；（5）選擇酒精伊紅染色液染色，等待2～3 min；（6）成功染色進(jìn)行酒精脫水后，選擇二甲苯溶液讓切片變透明，隨后滴入樹(shù)膠在透明切片上，固定封好，等待樹(shù)膠變干后，貼標(biāo)簽，做好記錄。

研究組采用快速石蠟切片方案。開(kāi)啟超聲波快速處理儀做好預(yù)熱工作，溫度為72 ℃。在標(biāo)注1號(hào)、2號(hào)的燒杯中倒入50 mL固定液、50 mL丙酮，將50 mL石蠟融入3號(hào)燒杯，備用。用手術(shù)刀將切片切割成1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm大小的組織塊，確保厚度均勻、邊緣整齊。將組織塊取出后，用吸水紙將水分吸干放入2號(hào)燒杯浸泡5 min，鑷子輕輕按壓，便于排出氣泡，加快浸蠟速度，上述操作步驟均在超聲波快速處理儀內(nèi)實(shí)施。熔化預(yù)備好的蠟塊凹槽底，凹槽內(nèi)快速包埋處理好的組織塊，放入冰箱，時(shí)間為120 s。做切片處理，厚度3～5 mm，固定封好后，酒精燈烘烤，融化石蠟，蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，封片。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比2組檢驗(yàn)方案的操作時(shí)間，包括方案固定操作時(shí)間、第1次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第2次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間。

比較2組的切片質(zhì)量（廢片、低質(zhì)量、高質(zhì)量）以及技術(shù)診斷結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用百分比表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用x±s表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比2組檢驗(yàn)方案操作時(shí)間

研究組方案固定操作時(shí)間、第1次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第2次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間均短于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 2組切片質(zhì)量以及技術(shù)診斷結(jié)果比較

研究組高質(zhì)量切片占比為98.89%，高于對(duì)照組的84.44%（P＜0.05）；研究組技術(shù)診斷正確率為100.00%，高于對(duì)照組的88.89%（P＜0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

近年來(lái)，隨著時(shí)代的進(jìn)步及發(fā)展，人們的生活方式發(fā)生轉(zhuǎn)變。在工作壓力加劇以及飲食結(jié)構(gòu)不當(dāng)?shù)榷喾N因素影響下，患上腫瘤疾病的人數(shù)逐年增加，嚴(yán)重影響人們的身心健康及生命安全，也大大降低了人們的生活質(zhì)量。腫瘤是臨床常見(jiàn)病，可分良性病變及惡性病變。其中良性病變對(duì)患者機(jī)體的傷害偏?。欢鴮?duì)于惡性病變，若不盡早采取積極有效的治療措施，可促使病情進(jìn)一步發(fā)展，形成癌變。惡性病變?cè)缙跓o(wú)明顯變化，易被患者忽視，需要到醫(yī)院實(shí)施影像學(xué)、病理學(xué)診斷后才能夠被發(fā)現(xiàn)，但是多數(shù)患者病情被發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)發(fā)展至晚期，大大提高了臨床治療的難度以及患者的死亡率。鑒于此，需要詳細(xì)了解病情嚴(yán)重程度，保障診斷率。早期常規(guī)技術(shù)診斷效果具有局限性，且受到外界各種不良因素影響，使得最后結(jié)果與預(yù)期出現(xiàn)偏差[2]?，F(xiàn)如今隨著臨床診斷技術(shù)的不斷完善，加之對(duì)腫瘤病理的深入研究及探索，發(fā)現(xiàn)選擇快速石蠟切開(kāi)技術(shù)可彌補(bǔ)常規(guī)技術(shù)的不足，從而獲得最佳診斷結(jié)果[3]。

現(xiàn)階段，在外科手術(shù)患者病理檢驗(yàn)中，石蠟切片起到至關(guān)重要的作用，可在短時(shí)間內(nèi)準(zhǔn)確判斷疾病，并根據(jù)病情予以針對(duì)性的治療。早期采取冰凍切片、加溫石蠟等方式完成相關(guān)檢查工作，但是操作耗時(shí)較長(zhǎng)。由于一些病理檢查時(shí)間緊迫，越早出結(jié)果越好?？焖偈炃衅夹g(shù)，目前被廣泛應(yīng)用在臨床上，具有操作便捷、染色速度快且質(zhì)量好等特點(diǎn)，能夠?yàn)楹罄m(xù)診斷工作節(jié)省不少時(shí)間[4]。

快速石蠟切開(kāi)技術(shù)是在傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)基礎(chǔ)上延伸出的一種新型病理檢查方案，存在眾多現(xiàn)代化系統(tǒng)，其制片質(zhì)量獲得越來(lái)越多臨床醫(yī)學(xué)者的關(guān)注以及重視。經(jīng)過(guò)多年實(shí)踐得出，這一技術(shù)在使用中有效解決了傳統(tǒng)工藝中存在的不足，為醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展做出了貢獻(xiàn)[5]。目前石蠟技術(shù)被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療事業(yè)中細(xì)胞組織觀察方面，是當(dāng)前病理學(xué)、生物學(xué)研究和觀察的工作重點(diǎn)，也是許多學(xué)科交互研究的核心內(nèi)容。

將快速石蠟切片技術(shù)應(yīng)用在外科手術(shù)患者中實(shí)施病理檢查，可起到良好的診斷效果，便于精準(zhǔn)無(wú)誤且快速地做出判斷，為后續(xù)治療方案的確定提供可靠的參考依據(jù)。開(kāi)啟超聲波快速處理儀做好預(yù)熱工作，固定組織，快速完成脫水、透明等過(guò)程，利于短時(shí)間內(nèi)制成切片。該方法是用于緊急手術(shù)的一種快速診斷方式，能夠?yàn)榕R床醫(yī)生提供及時(shí)的數(shù)據(jù)參考依據(jù)，具有經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、快速便捷、安全可靠等優(yōu)點(diǎn)，能精準(zhǔn)判斷送檢組織的性質(zhì)，可用于臨床診斷參考[6]。當(dāng)前快速石蠟切片技術(shù)可在超聲協(xié)助下完成操作，超聲能夠讓組織內(nèi)部分子在高頻振譜液體中呈現(xiàn)出一種有規(guī)律的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，促進(jìn)分子與組織試劑之間的交換能力，經(jīng)過(guò)水熱加熱，強(qiáng)化組織間液與試劑的分散能力，提高滲透效果，能夠在短時(shí)間內(nèi)完成各個(gè)操作步驟的同時(shí)保留細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性[7]。

本研究顯示，研究組方案固定操作時(shí)間、第1次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第2次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間均短于對(duì)照組（P＜0.05）。經(jīng)過(guò)本次研究發(fā)現(xiàn)，病理檢查時(shí)，如果病理切片技術(shù)選擇錯(cuò)誤，不僅會(huì)延長(zhǎng)檢驗(yàn)時(shí)間，還會(huì)影響檢驗(yàn)質(zhì)量，使得整體檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差，對(duì)此需要高度重視。采用快速石蠟切片技術(shù)可對(duì)患者送檢組織部位的病理情況進(jìn)行快速且針對(duì)性的檢測(cè)，從而提高診斷的精確性。這種檢測(cè)方式不會(huì)受到環(huán)境因素影響，可適應(yīng)惡劣環(huán)境，對(duì)設(shè)備的要求沒(méi)有傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)高，對(duì)相關(guān)人員技術(shù)要求偏低[8]。因此，快速石蠟切片技術(shù)可在臨床上推廣及使用。

研究組高質(zhì)量切片占比為98.89%，高于對(duì)照組的84.44%（P＜0.05）；研究組技術(shù)診斷正確率為100.00%，高于對(duì)照組的88.89%（P＜0.05）。以往臨床上采取傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)，操作過(guò)程中存在不少問(wèn)題以及缺陷，不能夠作為臨床首選診斷方式?？焖偈炃衅夹g(shù)與特殊染色、電鏡觀察方面相似，是被廣泛應(yīng)用于臨床的輔助技術(shù)，通過(guò)染色、觀察切片結(jié)果等方式完成各項(xiàng)步驟，并且借助最終結(jié)果選擇合適的治療方案[9]?？焖偈炃衅夹g(shù)可通過(guò)顯微鏡進(jìn)行觀察，清晰地看到組織的結(jié)構(gòu)以及完整的細(xì)胞形態(tài)，在很大程度上提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確度和工作效率，節(jié)省了人力以及時(shí)間。將超聲波快速處理儀溫度控制在72 ℃，同時(shí)注意取材時(shí)不要破壞組織邊緣，注意觀察病變組織邊緣，在病變及相關(guān)組織交界處，要求切除適當(dāng)大小的組織塊，厚度不得超過(guò)1.5 cm。利用超聲波快速處理儀完成各種操作步驟，如固定、浸蠟、脫水等，延長(zhǎng)石蠟保存時(shí)間，避免發(fā)生物理、化學(xué)反應(yīng)[10]。由此可以看出，采取快速石蠟切片技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)效果更佳，耗時(shí)短且準(zhǔn)確率很高，值得臨床積極推廣應(yīng)用。

快速石蠟切片技術(shù)依舊存在部分局限性，對(duì)石蠟切片質(zhì)量的影響包括如下方面。（1）冷卻攪拌時(shí)間較短，水解過(guò)分，無(wú)法形成組織膨脹脆性；若攪拌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則會(huì)降低組織脫水效果，影響切片質(zhì)量，可能影響整體病理診斷效果。（2）若切片刀片銳利度不夠，難以出現(xiàn)刀痕，切片質(zhì)量差。（3）若染色濃度較低或者時(shí)間短，其組織染色較淺，反之則顏色較深，染料溶液之中的微粒溶解在組織上，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)偽影等，可能影響顯微觀測(cè)與診斷結(jié)果[11]。

在實(shí)施快速石蠟切片技術(shù)時(shí)需要注意以下事項(xiàng)?？焖偈炃衅枰僮髡呖焖偾揖珳?zhǔn)地取材，尤其典型病變必須展開(kāi)精確取樣，以便體現(xiàn)病變程度?？焖偈炃衅Y(jié)果會(huì)被作為確定后續(xù)治療方案的可靠參考依據(jù)，與臨床治療存在緊密的聯(lián)系，需要操作者細(xì)心觀測(cè)，細(xì)心確診。通過(guò)顯微鏡觀察，明確分辨腫瘤細(xì)胞及凋亡、變性以及水腫細(xì)胞。加強(qiáng)檢驗(yàn)人員與臨床醫(yī)生之間的溝通和交流，明確病理診斷的具體要求，及時(shí)為醫(yī)生提供可靠的臨床診斷結(jié)果，便于后續(xù)治療工作順利進(jìn)行[12]?？焖偈炃衅苽浞椒ㄝ^為直觀，容易被基層醫(yī)院接納與采用，具備臨床應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果顯著，能夠縮短各項(xiàng)操作時(shí)間，提升切片質(zhì)量，確保檢驗(yàn)工作質(zhì)量，值得進(jìn)一步推廣。

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（編輯：張興亞）

作者簡(jiǎn)介：林斯燕，女，本科，主管技師。