邁瑞CX-9000 全自動凝血分析儀性能評估

郭家權(quán)，韋 炅，李 苗，李坷坷，劉 明

（海南省人民醫(yī)院檢驗科，?？?570311）

0 引言

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)研究的逐漸深入，越來越多的疾病被證實與凝血系統(tǒng)有關(guān)。作為三大常規(guī)檢查之一，凝血常規(guī)能夠為出血與血栓性疾病的臨床診療提供重要依據(jù)，其醫(yī)學(xué)價值也日益凸顯，與此同時臨床對凝血檢驗的質(zhì)量和效率等方面的要求也逐漸提高。為滿足臨床工作的需求，我院于2022 年6 月購置了一臺CX-9000 全自動凝血分析儀。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 22576.1—2018[1]對醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的要求，實驗室應(yīng)在醫(yī)療設(shè)備使用前驗證其能夠達到必要的性能并符合相關(guān)檢驗的標(biāo)準(zhǔn)。本研究對CX-9000全自動凝血分析儀檢測凝血酶原時間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶時間（activated partial thromboplastin time，APTT）、纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB）、凝血酶時間（thrombin time，TT）、D-二聚體5個凝血常規(guī)檢查項目的性能進行驗證，評估該儀器的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、攜帶污染率、參考區(qū)間能否滿足臨床需求，旨在為臨床檢驗?zāi)Ｒ?guī)和相關(guān)醫(yī)療設(shè)備性能驗證提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

采用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的CX-9000 全自動凝血分析儀。

1.1.2 試劑

采用CX-9000 全自動凝血分析儀廠家配套試劑，驗證項目PT、APTT、FIB、TT、D-二聚體的試劑批號分別為0122030111、0222030111、0422030111、0322030111、0522030111。

1.1.3 質(zhì)控品

使用廠家配套質(zhì)控品，其中PT、APTT、FIB、TT的正常、異常質(zhì)控品批號分別為8622030318、8722030 318，D-二聚體的正常、異常質(zhì)控品批號分別為622 2030116、6322030116。

1.1.4 驗證樣本

本研究中的精密度及準(zhǔn)確度驗證樣本分別為廠家配套的2 個水平質(zhì)控品和企業(yè)參考物；線性范圍、攜帶污染率及參考區(qū)間驗證所采用的臨床高、低濃度樣本和健康人群樣本均來源于海南省人民醫(yī)院的門診、住院患者及健康體檢人群，樣本采集自患者空腹靜脈血，使用枸櫞酸鈉抗凝管（0.109 mol/L，枸櫞酸鈉與全血比例為1∶9）抗凝，采集后立刻顛倒混勻，并在1 500g 離心力下離心15 min，排除脂血、黃疸、溶血樣本，所有試驗均需在樣本采集后4 h 內(nèi)完成。

1.1.5 評價依據(jù)

參照國家衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 477—2015[2]、WS/T 406—2012[3]、WS/T 402—2012[4]要求及國家醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 0659—2017[5]要求進行本研究評估驗證。

1.2 方法

本研究驗證過程嚴格遵照檢驗操作規(guī)程，要求如下：（1）該儀器由具備資質(zhì)的廠家工程師安裝調(diào)試并完成校準(zhǔn)；（2）完成FIB、D-二聚體的定標(biāo)程序；（3）進行每日質(zhì)控，于質(zhì)控在控的情況下進行驗證試驗并收集數(shù)據(jù)。

1.2.1 精密度驗證

1.2.1.1 批內(nèi)精密度驗證

參照YY/T 0659—2017 及WS/T 477—2015 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行批內(nèi)精密度驗證。取正常和異常2 個水平質(zhì)控品，分別按常規(guī)方法重復(fù)檢測10 次，計算檢測結(jié)果的變異系數(shù)（coefficient of variation，CV），要求5 個項目2 個水平質(zhì)控品的CV 分別符合以下標(biāo)準(zhǔn)：正常質(zhì)控品PT≤3.0%、APTT≤4.0%、FIB≤8.0%、TT≤10.0%、D-二聚體≤15.0%；異常質(zhì)控品PT≤8.0%、APTT≤8.0%、FIB≤15.0%、TT≤15.0%、D-二聚體≤10.0%。

1.2.1.2 日間精密度驗證

參照WS/T 406—2012 及WS/T 477—2015 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行日間精密度驗證。選擇同一批號內(nèi)正常和異常2 個水平質(zhì)控品，在檢測當(dāng)天進行一次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控數(shù)據(jù)后（失控結(jié)果已得到糾正）按批號或者月份計算在控數(shù)據(jù)的CV，要求2 個水平質(zhì)控品的CV 分別符合以下標(biāo)準(zhǔn)：正常質(zhì)控品PT≤6.5%、APTT≤6.5%、FIB≤9.0%、TT≤6.5%、D-二聚體≤7.5%；異常質(zhì)控品PT≤10.0%、APTT≤10.0%、FIB≤15.0%、TT≤10.0%、D-二聚體≤15.0%。

1.2.2 準(zhǔn)確度驗證

參照YY/T 0659—2017 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行準(zhǔn)確度驗證。使用廠家提供的2 個水平企業(yè)參考物，分別測定3 次，結(jié)果記為Xi，與預(yù)定靶值比較，分別計算相對偏差B，如3 次驗證結(jié)果均符合評價標(biāo)準(zhǔn)，即判為合格。如果≥2 次的結(jié)果不符合評價標(biāo)準(zhǔn)，即判為不合格。如有1 次結(jié)果不符合評價標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新連續(xù)測定20 次，并重新計算相對偏差B，如≥19 次的驗證結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)，則準(zhǔn)確度評價合格。相關(guān)評價標(biāo)準(zhǔn)要求FIB 的相對偏差應(yīng)在±10%以內(nèi)。

1.2.3 線性范圍驗證

參照YY/T 0659—2017 及WS/T 477—2015 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行線性范圍驗證。取1 份接近線性范圍上限（H）和1 份接近線性范圍下限（L）的樣本血漿，配制6份稀釋濃度的樣本（5L、4L+H、3L+2H、2L+3H、L+4H、5H）。每個稀釋濃度重復(fù)測定3 次，計算均值，用實測值（Y）與理論值（X）進行線性回歸分析，根據(jù)回歸方程得出相關(guān)系數(shù)（r）和斜率（k），評價要求k 在1.00±0.05 范圍內(nèi)，r≥0.975。

1.2.4 攜帶污染率驗證

參照YY/T 0659—2017 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行攜帶污染率驗證，包含樣品濃度攜帶污染率（CR1）驗證和項目攜帶污染率（CR2）驗證，具體步驟如下：（1）CR1驗證：取1 份高濃度的臨床樣本（H），混合均勻后連續(xù)測定3 次（H1、H2、H3），再取1 份低濃度的臨床樣本（L），混合均勻后連續(xù)測定3 次，按公式CR1=|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%計算CR1。（2）CR2驗證：連續(xù)測定臨床樣本的PT 或APTT 3 次（j1、j2、j3）后，立即連續(xù)測定FIB 或TT 3 次，再測定PT 或APTT 1 次（j4），按公式CR2=[（j1+j2+j3）/3-j4]/[（j1+j2+j3）/3]×100%計算CR2。評價要求CR1及CR2均應(yīng)≤10%。

1.2.5 參考區(qū)間驗證

參照WS/T 402—2012 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行參考區(qū)間驗證。選取20 份健康人群樣本（男性女性各15 份，年齡為20～60 歲，無服藥史、無出血史及其他影響本試驗的疾病），分別測定PT、APTT、FIB、TT、D-二聚體5 個項目，驗證廠家提供的參考區(qū)間，按公式R=檢測值在應(yīng)用參考區(qū)間的參考個體數(shù)/總的參考個體數(shù)計算R 值，評價要求R≥90%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

所有檢測數(shù)據(jù)均通過Microsoft Excel 2019 版軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 批內(nèi)精密度驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀檢測PT、APTT、FIB、TT、D-二聚體5 個凝血常規(guī)檢查項目的批內(nèi)精密度CV 均＜3%（詳見表1），表明該儀器的批內(nèi)精密度符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證合格。

表1 批內(nèi)精密度驗證結(jié)果

2.2 日間精密度驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀檢測PT、APTT、FIB、TT、D-二聚體5 個項目的日間精密度CV 均＜5%（詳見表2），表明該儀器的日間精密度符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證合格。

表2 日間精密度驗證結(jié)果

2.3 準(zhǔn)確度驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀檢測2 個水平企業(yè)參考物的準(zhǔn)確度結(jié)果（詳見表3），將3 次結(jié)果與廠家提供的預(yù)定靶值比較，相對偏差B 均在±10%以內(nèi)，表明該儀器的準(zhǔn)確度符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證合格。

表3 準(zhǔn)確度驗證結(jié)果

2.4 線性范圍驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀的FIB 及D-二聚體線性范圍驗證結(jié)果詳見表4。FIB 的線性回歸方程為y=1.006 0x-0.074 7，k 為1.006 0，r 為0.999 3（如圖1 所示）；D-二聚體的線性回歸方程為y=1.013 2x+0.123 9，k 為1.013 2，r 為0.997 5（如圖2 所示），表明該儀器線性良好，符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證合格。

圖1 FIB 線性回歸散點圖

圖2 D-二聚體線性回歸圖

表4 線性范圍驗證結(jié)果

2.5 攜帶污染率驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀的攜帶污染率驗證結(jié)果詳見表5。CR1為4.60%，CR2均＜2%，結(jié)果表明該儀器符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證合格。

表5 攜帶污染率驗證結(jié)果

2.6 參考區(qū)間驗證結(jié)果

CX-9000 全自動凝血分析儀的參考區(qū)間驗證結(jié)果詳見表6?？梢娝袠颖居? 個檢測項目的R 值均為100%，表明該儀器所提供的參考區(qū)間適用于本實驗室，驗證合格。

3 討論

CX-9000 全自動凝血分析儀是深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的新一代凝血檢測設(shè)備，其具備高恒速（450 個/h 測試）、超長試劑在機穩(wěn)定期（2周）以及7 步全自動化（APTT 糾正實驗）等諸多優(yōu)點，能夠提升實驗室對樣本的檢驗轉(zhuǎn)化時間管理效率，同時該儀器配備了全液體聯(lián)杯試劑盒，可有效減少傳統(tǒng)凝血分析儀干粉試劑復(fù)溶操作可能帶來的結(jié)果誤差問題，其不停機加載耗材和空試劑盒自動丟棄的功能在凝血設(shè)備行業(yè)內(nèi)為突破性的變革。

檢測系統(tǒng)是完成一個檢測項目所需的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、操作人員等的組合[6]。雖然儀器制造商已經(jīng)為實驗室新增的檢測系統(tǒng)提供了儀器性能的初步參數(shù)，但由于地區(qū)和實驗室的差異，各實驗室應(yīng)在儀器正式投入使用并用于報告患者檢測結(jié)果之前重新進行性能評估，以確保儀器的分析性能能夠滿足檢測和臨床要求，保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠[7]。本實驗室依照國家衛(wèi)生健康委員會及原國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的相關(guān)衛(wèi)生及醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對該儀器進行了較為全面的性能評估。

精密度是評價醫(yī)學(xué)實驗室儀器性能的一個重要指標(biāo)，是在規(guī)定條件下對同一或相似被測對象重復(fù)測量得到的測量示值或測得量值間的一致程度[5]，是其他性能指標(biāo)的基礎(chǔ)[8]。本研究以批內(nèi)精密度和日間精密度來評估CX-9000 全自動凝血分析儀，5 個項目批內(nèi)精密度的CV 均＜3%，日間精密度的CV均＜5%，表明該儀器具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

準(zhǔn)確度是一個測得量值與被測量的一個真量值間的一致程度[5]，本研究采用廠家配套的2 個水平企業(yè)參考物進行準(zhǔn)確度驗證[9]，結(jié)果顯示FIB 項目2 個水平企業(yè)參考物的相對偏差均在±10%以內(nèi)，表明該儀器符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，可為患者提供準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果。

在線性范圍的驗證中，由于CX-9000 全自動凝血分析儀對PT、APTT 和TT 項目檢測采用的是凝固法，使用時間單位報告結(jié)果，故不宜進行線性分析[10]，本研究根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求僅對FIB 和D-二聚體2 個項目進行評估。從線性回歸方程數(shù)據(jù)顯示，2 個項目的線性斜率k 和相關(guān)系數(shù)r 均符合標(biāo)準(zhǔn)要求，說明該儀器線性良好且范圍寬，可有效降低樣本重測率。

攜帶污染率的具體量化指標(biāo)反映了一個樣本對下一個樣本表現(xiàn)量的影響大小[5]，如攜帶污染率未達到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，將會給實驗室異常結(jié)果排查帶來困難。通過驗證，可見CX-9000 全自動凝血分析儀的濃度及項目攜帶污染率均符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，說明該儀器樣本或試劑間的交叉污染率低。

各檢查項目的參考區(qū)間可能因人群而異，故在使用廠家聲明的參考區(qū)間之前需要驗證其是否適合本實驗室[11]。本實驗采用“小樣本驗證[4]”方法進行參考區(qū)間驗證，結(jié)果顯示5 個項目檢測值在應(yīng)用參考區(qū)間的參考個體數(shù)占總個體數(shù)的比例均達到100%，說明本實驗室可使用廠家提供的參考區(qū)間。

根據(jù)中國合格評定國家認可委員會頒布的CNAS-CL02-A001：2018《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準(zhǔn)則在臨床血液學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明》文件對儀器結(jié)果比對的要求，考慮CX-9000 全自動凝血分析儀為上市后全國首臺裝機設(shè)備，同時與本實驗室在用凝血分析儀所開展項目的生物參考區(qū)間存在差異，因此未進行實驗室內(nèi)、外部結(jié)果比對驗證，僅對醫(yī)療安全風(fēng)險進行評估，上述為本研究驗證的不足之處，在日后工作中仍需進一步完善。

綜上所述，CX-9000 全自動凝血分析儀的主要分析性能符合臨床檢測需求，同時也符合標(biāo)準(zhǔn)化實驗室質(zhì)量管理的要求，是一款精密度好、準(zhǔn)確度高、線性范圍寬、攜帶污染率低的檢測儀器。