食品及飼料脂肪檢測(cè)方法的優(yōu)化開(kāi)發(fā)

苗蕾 辛雨霏 李春玲 鄧麗 王鶴亭

摘 要：對(duì)食品、飼料、蛋及蛋制品中脂肪檢測(cè)方法進(jìn)行探討，并提出一種改進(jìn)后新的脂肪測(cè)定方法，以酸水解-索氏抽提法為基礎(chǔ)，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行改進(jìn)后，新方法能夠同時(shí)滿足食品、飼料、蛋及蛋制品中脂肪的測(cè)定。通過(guò)數(shù)據(jù)比較，新方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.81%～3.76%。與不同產(chǎn)品脂肪檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法相比，相對(duì)誤差平均值在0.77%～1.75%。新方法的提出，為實(shí)驗(yàn)室及日常檢驗(yàn)檢測(cè)工作提供了一個(gè)實(shí)驗(yàn)更加便捷、準(zhǔn)確度更好、污染更小、試劑回收率更好的檢測(cè)方法。

關(guān)鍵詞：脂肪；食品；飼料；蛋及蛋制品；酸水解；索氏抽提

Abstract： Discussion on fat detection methods in food， feed， eggs and egg products， and propose a new improved fat determination method. Based on the acid hydrolysis-Soxhlet extraction method， and improving the experimental conditions， the new method can meet the requirements for the determination of fat in food， feed， eggs and egg products. Through data comparison， the average relative deviation of the new method is 0.81%～3.76%. Compared with the national standard method for fat detection of different products， the average relative error is 0.77%～1.75%. The proposal of the new method provides a detection method with more convenient experiment， better accuracy， less pollution and better recovery rate of reagents for laboratory and daily inspection and detection work.

Keywords： fat; food; feed; eggs and egg products; acid hydrolysis; soxhlet extraction

隨著生活質(zhì)量的提高，人們?cè)絹?lái)越關(guān)注不同食品中的脂肪含量。目前，食品中脂肪的檢測(cè)方法多采用《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》（GB 5009.6—2016）[1]；特殊食品，如雞蛋則采用《蛋與蛋制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》（GB/T 5009.47—2003）[2]進(jìn)行檢測(cè)；飼料等寵物食品采用《飼料中粗脂肪的測(cè)定》（GB/T 6433—2006）[3]。不同產(chǎn)品類(lèi)型檢測(cè)方法的條件不同，需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行選擇。不同產(chǎn)品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法比較見(jiàn)表1。

除了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法外，國(guó)內(nèi)外也提出了很多新型脂肪檢測(cè)方法，如近紅外光譜法[4]、超臨界萃取法[5]等，于曉英等[6]提出直接采用乳脂計(jì)對(duì)方便面食品中的脂肪進(jìn)行測(cè)定，取得了較好的數(shù)據(jù)。本文通過(guò)對(duì)酸水解脂肪檢測(cè)方法進(jìn)行優(yōu)化及開(kāi)發(fā)，對(duì)普通食品、禽蛋產(chǎn)品、飼料中脂肪測(cè)定進(jìn)行數(shù)據(jù)比較，開(kāi)發(fā)出一種更適用于日常檢驗(yàn)檢測(cè)、精確度更好、檢測(cè)效率更高、更加節(jié)約成本的檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鹽酸溶液（1+1）、石油醚（沸程30～60 ℃），均為分析純，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；實(shí)驗(yàn)用樣品均為日常抽檢及委托樣品。

1.2 儀器與設(shè)備

分析天平（BSA224S），梅特勒托利多公司；脂肪提取儀（Soxtectm8000），BUCHI瑞士步琦有限公司；鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9055A），上海一恒科技有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品制備

分析樣品選用實(shí)驗(yàn)室日常檢驗(yàn)用具有代表性的樣品，如有必要需進(jìn)行四分法取樣，取樣后充分混勻，粉碎后裝入自封袋內(nèi)備用。對(duì)于液體樣品搖勻備用。

1.3.2 試樣稱(chēng)量及水解

稱(chēng)取試樣3～4 g于50 mL具塞比色管中，水分含量較低的固體樣品，加入5 mL水?dāng)嚢杈鶆蚝?，加?+1鹽酸溶液10 mL，振蕩分散樣品；對(duì)于半固態(tài)及液態(tài)樣品，直接加入鹽酸溶液（1+1）10 mL，振蕩分散樣。將分散后的樣品管置于80 ℃水浴鍋中水解2 h（視樣品情況而定，至水解完全），水解期間至少振蕩試樣管2～3次，以促進(jìn)樣品分散及水解。

水解完成后，將水解液轉(zhuǎn)移至濾紙上過(guò)濾，并反復(fù)用熱水洗滌濾紙3～4次，直至濾液為中性（藍(lán)色石蕊試紙檢驗(yàn)不變色），每次洗滌時(shí)熱水不要過(guò)量，以防止水解產(chǎn)物損失，影響最終的檢測(cè)結(jié)果。連同漏斗將濾紙及其水解產(chǎn)物放入105 ℃干燥箱內(nèi)干燥1 h后取出，備用。

1.3.3 水解產(chǎn)物的抽提

將冷卻后濾紙定量轉(zhuǎn)移至脂肪提取儀紙筒內(nèi)，以30～60 ℃石油醚為提取溶劑，按照設(shè)定的浸提程序進(jìn)行索氏抽提。

對(duì)于脂肪含量不同的產(chǎn)品，采用1次抽提（脂肪低于15%采用1次抽提即可達(dá)到提取效果）或2次抽提（脂肪含量高于15%的樣品，進(jìn)行1次抽提后，更換接收罐進(jìn)行2次抽提可達(dá)到提取效果）以達(dá)到充分淋洗的目的。1次抽提程序設(shè)定為沸騰20 min、淋洗40 min、回收20 min；二次抽提程序的設(shè)定為沸騰15 min、淋洗30 min、回收15 min。

1.3.4 油脂稱(chēng)量

抽提完成后取出接收器（接收器提前于105 ℃干燥箱中干燥1 h后冷卻稱(chēng)重，待用），置于105 ℃烘箱中干燥1 h后取出置于干燥器內(nèi)，室溫放置30 min后稱(chēng)量。重復(fù)以上操作直至恒重（需要根據(jù)樣品脂肪含量調(diào)整浸提程序及次數(shù)，以達(dá)到充分浸提的效果）。

1.4 脂肪含量的計(jì)算

脂肪含量計(jì)算公式為

2 結(jié)果與分析

2.1 精密度實(shí)驗(yàn)

選取6種具有代表性的樣品進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)，平行測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表2。6種樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD）為0.81%～3.76%，平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.97%，表明方法重復(fù)性良好。

2.2 食品中脂肪含量結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法比對(duì)數(shù)據(jù)

分別采用實(shí)驗(yàn)室方法與《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》（GB 5009.6—2016）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，對(duì)18批次食品類(lèi)樣品進(jìn)行脂肪檢測(cè)，相對(duì)誤差0%～4.55%，平均相對(duì)誤差1.75%，見(jiàn)表3。

2.3 飼料中脂肪含量結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法比對(duì)數(shù)據(jù)

《飼料中粗脂肪的測(cè)定》（GB/T 6433—2006）指出，在檢測(cè)B類(lèi)產(chǎn)品中脂肪的過(guò)程中，鹽酸水解過(guò)程中需要不斷振搖，否則樣品極易黏附在錐形瓶壁上造成檢測(cè)結(jié)果偏低的現(xiàn)象，且在后續(xù)抽提過(guò)程中，需要連續(xù)抽提至少6 h才能保證樣品脂肪提取完全，此過(guò)程大大降低了檢測(cè)效率。使用本實(shí)驗(yàn)方法后，檢測(cè)效率提升，避免了由于微沸回流水解可能導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果偏低的現(xiàn)象，且水解更加完全，整個(gè)抽提程序僅需要1.5 h即可完成。分別采用本實(shí)驗(yàn)方法與《飼料中粗脂肪的測(cè)定》（GB/T 6433—2006）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，對(duì)飼料類(lèi)（含寵物食品）樣品進(jìn)行脂肪檢測(cè)，相對(duì)誤差為0%～2.70%，平均相對(duì)誤差為0.77%，見(jiàn)表4。

2.4 蛋與蛋制品中脂肪含量結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法比對(duì)數(shù)據(jù)

《蛋與蛋制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)分析方法》（GB/T 5009.47—2003）中，脂肪采用三氯甲烷冷浸法進(jìn)行提取測(cè)定，但三氯甲烷毒性較大，且在浸提過(guò)程中，需要至少洗滌浸提管10次才能達(dá)到浸提效果，否則脂肪檢測(cè)數(shù)據(jù)偏低，不能達(dá)到提取效果，本方法能將蛋制品脂肪檢測(cè)統(tǒng)一到普通食品脂肪檢測(cè)中，使檢測(cè)效率及準(zhǔn)確度都得到顯著提升。分別采用本方法與《蛋與蛋制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)分析方法》（GB/T 5009.47—2003）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，對(duì)蛋及蛋制品進(jìn)行脂肪檢測(cè)，相對(duì)誤差為0%～2.11%，平均相對(duì)誤差為0.88%，見(jiàn)表5。

3 結(jié)論

作為四大核心營(yíng)養(yǎng)素之一，脂肪的測(cè)定一直是檢測(cè)機(jī)構(gòu)的重點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目。通過(guò)對(duì)現(xiàn)有不同產(chǎn)品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法的整合及改進(jìn)，新的檢測(cè)方法不但能夠同時(shí)滿足不同基質(zhì)產(chǎn)品中脂肪含量的測(cè)定，在檢測(cè)效率、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度及操作適用性等方面都有顯著提升。本方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.81%～3.76%，平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.97%。針對(duì)食品、飼料、蛋及蛋制品進(jìn)行分類(lèi)數(shù)據(jù)比對(duì)，其結(jié)果相對(duì)誤差分別為1.75%、0.77%、0.88%，結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)10%、5%以及3%，方法適用性強(qiáng)。利用索氏抽提對(duì)水解后的脂肪進(jìn)行提取，還可以對(duì)提取溶劑進(jìn)行回收利用，也可以避免脂肪水解提取液在轉(zhuǎn)移過(guò)程中的損失。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局，國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定：GB 5009.6—2016[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.蛋與蛋制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法：GB/T 5009.47—2003[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

[3]國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)，國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.飼料中粗脂肪的測(cè)定GB/T 6433—2006[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006.

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作者簡(jiǎn)介：苗蕾（1987—），女，遼寧錦州人，碩士，高級(jí)工程師。研究方向：食品及化工產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測(cè)。