大發(fā)表的化學成分研究

趙建軍，李戰(zhàn)國，丁 茜，李小輝

云南省藥物研究所，云南省中藥和民族藥新藥創(chuàng)制企業(yè)重點實驗室，云南 昆明 650111

大發(fā)表為豆科蝶形花亞科杭子梢屬植物三棱枝杭子梢Campylotropistrigonoclada(Franch.) Schindl.的干燥全株，別名三楞草、骨破草、見水消、黃花馬尿藤、三股筋等[1]。全草具清熱利濕、活血止血、解表止咳之功效，可用于治療腸炎、痢疾、腎炎、風濕痛疼等[2]。白族民間將全草用于治療泌尿系統(tǒng)疾病，對腎炎、前列腺炎和結石等療效顯著[3]。以大發(fā)表提取物制成的舒列安膠囊主治清熱利濕、通淋止痛。用于濕熱蘊結所致淋癥，癥見小便不利，淋瀝澀痛及慢性前列腺炎屬上述證候者[4]。該植物資源豐富，療效較佳，具較好前景。研究者從同屬植物毛杭子梢C.hirtella(Franch.) Schindl.中發(fā)現(xiàn)特征性的異黃酮類化學成分具有較好的免疫抑制活性[5]。目前，對大發(fā)表的化學成分研究極少，僅有付晨等[6]和李逢逢等[7]從大發(fā)表地上部分中分離鑒定了24 個化合物，化合物的結構類型涉及寡糖、甾醇等，藥材提取物少，分離得到的化合物結構類群不集中。

為了更好地闡述大發(fā)表的物質基礎，為其合理開發(fā)利用提供一定的科學依據，本研究對大發(fā)表的化學成分進行了系統(tǒng)的研究，從中分離得到24 個化合物，分別鑒定為 (+)-兒茶酸 [(+)-catechin，1]、蘆?。╮utin，2）、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside，3）、廣寄生苷（avicularin，4）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（quercetin-3-O-glucoside，5）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷（quercetin-3-O-β-D-xylpyranoside，6）、木犀草素-7-O-β-D-龍膽二糖苷（luteolin-7-O-β-gentiobioside，7）、葒草素（orientin，8）、異牧荊素-2″-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（isovitexin-2″-O-β-D-glucopyranoside，9）、voilanthin（10）、染料木素（genistein，11）、bolusanthin III（12）、二羥四氫黃酮 7-O-葡萄糖苷（orobol 7-O-glucoside，13）、白皮杉醇4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（piceatannol 4'-O-β-D-glucopyranoside，14）、(Z)-虎杖苷 [(Z)-polydatin，15]、二氫菜豆酸（dihydrophaseic acid，16）、millettiaspecoside B（17）、七葉內酯（esculetin，18）、交鏈孢酚（alternariol，19）、鄰苯二甲酸二丁酯（dibutylphthalate，20）、鄰苯二甲酸二辛酯 [di(2-ethylhexyl)phthalate，21]、2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯（methyl 2,4-dihydrox-3,6-dimethylbenzoate，22）、3,4-二羥基苯甲醛（3,4-dihydroxybenzaldehyde，23）和沒食子酸乙酯（ethyl gallate，24）。除化合物11 外，其余23個化合物均為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

ZF-20D 型暗箱式紫外分析儀（上海寶山顧村電光儀器廠）；ME204T102 型電子天平 [梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；SKB200HP 型超聲波清洗器（上海科導超聲儀器公司）；Mill-Q 超純水制備器（美國Millipore 有限公司）；Waters e2695 型高效液相色譜儀（Waters 公司）；Agilent 1100 制備液相色譜儀（Agilent 公司）；島津LC-20AR 半制備高效液相色譜儀（日本島津公司）；色譜柱為SHIMADZU Shin-pack GIST 5 μm C18（250 mm×20 mm，5 μm）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠（40～70μm，瑞典 Amersham Pharmacia Biotech AB 公司）；ODS（日本YMC 公司）；HPD-100 型大孔吸附樹脂（滄州寶恩吸附材料科技有限公司）；JKSB-1 型大孔吸附樹脂（滄州寶恩吸附材料科技有限公司）；柱色譜硅膠與GF254薄層色譜硅膠（80～100、100～200、200～300 目，青島海洋化學試劑廠），顯色劑為8%H2SO4的乙醇溶液，噴灑后加熱顯色；Brucker AV III-500 和Brucker AV III-600 型核磁共振儀（Brucker公司），以TMS 作為內標；MS 用Agilent G6200 TOF四級桿質譜儀測定；半制備高效液相所用試劑為色譜純，其他試劑均為分析純。

實驗用大發(fā)表藥材樣品由云南省藥物研究所天然藥物化學研究室提供，經云南省藥物研究所天然藥物資源研究室正高級工程師蘇鈦鑒定為豆科蝶形花亞科杭子梢屬植物三棱枝杭子梢C.trigonoclada(Franch.) Schindl.的干燥全株。標本（TH-DFB20220401）保存于云南省藥物研究所天然藥物化學研究室。

2 提取與分離

大發(fā)表藥材干燥全株（300 kg），粉碎后加6 倍量60%乙醇浸提3 次（每次室溫浸泡48 h），提取液合并，減壓回收溶劑至適量，濾過，加于已處理好的JKSB-1 型大孔樹脂柱上，依次用水及乙醇洗脫，收集乙醇液，減壓濃縮至適量，濾過，加于已處理好的HPD-100 型大孔樹脂柱上，依次用水及20%、60%、95%乙醇梯度洗脫，減壓濃縮干燥得浸膏：水部位（156.5 g）、20%乙醇洗脫部位（1.9 kg）、60%乙醇洗脫部位（4.8 kg）和95%乙醇洗脫部位（0.3 kg）。

20%乙醇洗脫段（1.9 kg）樣品經硅膠（石油醚- 丙酮，9∶1→0∶1）柱色譜，TLC 檢測，合并相同組分，得Fr.A～J 共10 個組分。Fr.J（3.0 g）通過Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.J1～J10。Fr.J2 經半制備型高效液相色譜（19%乙腈）純化得到化合物16（7.5 mg，tR＝16.4 min）。

60%乙醇洗脫段（4.8 kg）經硅膠柱（二氯甲烷-甲醇10∶1→0∶1）柱色譜得Fr.A～H 共8 個組分。Fr.D（200.0 g）經ODS 色譜柱色譜劃段（甲醇-水，10%→100%，每10%為1 梯度）梯度洗脫，得Fr.D1～D19 共19 個組分。Fr.D2（800.0 mg）經硅膠（石油醚-丙酮5∶1→0∶1）柱色譜得Fr.D2A～D2F共6個組分。Fr.D2A經半制備型高效液相色譜（80%乙腈）純化得到化合物23（11.0 mg，tR＝11.1 min）。Fr.D3（3.0 g）經硅膠柱（石油醚-丙酮3∶1→0∶1）柱色譜得Fr.D3A～D3F 共6 個組分。Fr.D3A 和Fr.D3F 分別經半制備型高效液相色譜（35%甲醇）純化得到化合物24（7.7 mg，tR＝25.9 min）、18（14.5 mg，tR＝12.9 min）和1（257.5 mg，tR＝8.1 min）。Fr.D6（3.0 g）經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.D6A～D6H 共8 個組分，其中Fr.D6G為14（29.9 mg，tR＝16.9 min）。Fr.D6C 經半制備型高效液相色譜（28%乙腈）純化得到化合物15（9.3 mg，tR＝16.0 min）和13（23.3 mg，tR＝9.7 min）。Fr.D6E（1.5 g）經硅膠（二氯甲烷-甲醇12∶1→0∶1）柱色譜得Fr.D6E1～D6E7 共7 個組分，F(xiàn)r.D6E4經半制備型高效液相色譜（20%乙腈）純化得到化合物17（14.2 mg，tR＝10.5 min）。Fr.D13（5.0 g）經硅膠（二氯甲烷-甲醇15∶1→0∶1）柱色譜得Fr.D13A～D13F 共6 個組分。Fr.D13C 經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.D13C1～C9共9 個組分。Fr.D13C3 經半制備型高效液相色譜（28%乙腈）純化得到化合物3（44.0 mg，tR＝13.2 min）、4（21.8 mg，tR＝12.1 min）和6（12.9 mg，tR＝10.8 min）。Fr.D13C6 經半制備型高效液相色譜（30%乙腈）純化得到化合物5（5.6 mg，tR＝8.1 min）。Fr.D19（1.5 g）經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.D19A～H 共8 個組分。Fr.D19C經半制備型高效液相色譜（98%乙腈）純化得到化合物20（44.0 mg，tR＝3.5 min）和21（21.8 mg，tR＝7.5 min）。Fr.F（150.0 g）經ODS 色譜柱色譜劃段（甲醇-水10%→80%，每10%為1 梯度）梯度洗脫得到Fr.F1～F10 共10 個組分。Fr.F6（1.8 g）經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.F6A～F6F。Fr.F6E 經半制備型高效液相色譜（30%乙腈）純化得到化合物8（60.0 mg，tR＝20.1 min）。Fr.F7（2.5 g）經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得Fr.F7A～F7H。Fr.F7C 經半制備型高效液相色譜（20%乙腈）純化得到化合物2（36.7 mg，tR＝18.3 min）。Fr.F7E 經半制備型高效液相色譜（22%乙腈）純化得到化合物9（64.3 mg，tR＝20.1 min）和10（11.2 mg，tR＝25.3 min）。Fr.F7G 經半制備型高效液相色譜（20%乙腈）純化得到化合物7（19.5 mg，tR＝9.8 min）。

95%乙醇洗脫段（0.3 kg）經硅膠（石油醚-醋酸乙酯40∶1→0∶1）柱色譜得Fr.A～K 共11 個組分。Fr.D（23.5 g）經ODS 色譜柱色譜（甲醇-水60%→100%，每10%為1 梯度）梯度洗脫得8 個組分Fr.D1～D8。Fr.D3 經半制備型高效液相色譜（60%乙腈）純化得到化合物22（46.9 mg，tR＝16.4 min）。Fr.G（40.0 g）經ODS 色譜柱色譜劃段（甲醇-水50%→100%，每10%為1 梯度）梯度洗脫得Fr.G1～G25 共25 個組分。Fr.G6（3.0 g）經硅膠（二氯甲烷-甲醇60∶1→0∶1）柱色譜得6 個組分Fr.G6A～G6F。Fr.G6C（1.2 g）經Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（80%甲醇）得10 個組分Fr.G6C1～G6C10。Fr.G6C10 經半制備型高效液相色譜（60%乙腈）純化得到化合物12（32.5 mg，tR＝16.8 min）、19（2.7 mg，tR＝19.6 min）和11（188.7 mg，tR＝14.4 min）。

3 結構鑒定

化合物1：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z289 [M－H]?。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 6.85(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 6.76 (1H, dd,J= 8.0, 2.0 Hz, H-5′), 6.71 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6′), 5.96 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 5.89 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 4.59(1H, d,J= 8.0 Hz, H-2), 4.00 (1H, m, H-3), 2.86 (1H,dd,J= 16.0, 6.0 Hz, H-4a), 2.53 (1H, dd,J= 16.0, 8.0 Hz, H-4b)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 82.8(C-2), 68.8 (C-3), 28.4 (C-4), 157.5 (C-5), 96.5 (C-6),157.7 (C-7), 95.7 (C-8), 156.9 (C-9), 101.0 (C-10),132.2 (C-1′), 116.3 (C-2′), 146.2 (C-3′), 146.2 (C-4′),115.4 (C-5′), 120.2 (C-6′)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[8-9]，故鑒定化合物1 為 (+)-兒茶酸。

化合物2：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z633 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.66(1H, d,J= 2.1 Hz, H-2′), 7.62 (1H, dd,J= 8.5, 2.1 Hz, H-6′), 6.87 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.36 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.18 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.10(1H, d,J= 7.6 Hz, H-1″), 3.80 (1H, dd,J= 11.0, 1.2 Hz, H-6a″), 3.38 (1H, dd,J= 11.0, 6.0 Hz, H-6b″),3.46 (1H, dd,J= 8.9, 7.6 Hz, H-2″), 3.40 (1H, t,J=8.9 Hz, H-3″), 3.32 (1H, ddd,J= 8.9, 7.6, 1.2 Hz,H-5″), 3.26 (1H, t,J= 8.9 Hz, H-4″), 4.51 (1H, d,J=1.5 Hz, H-1′″), 3.62 (1H, dd,J= 3.4, 1.5 Hz, H-2′″),3.53 (1H, dd,J= 3.4, 9.5 Hz, H-3′″), 3.44 (1H, d,J=9.5 Hz, H-5′″), 3.27 (1H, t,J= 9.8 Hz, H-4′″), 1.12(1H, d,J= 6.0 Hz, H-6′″)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD)δ: 158.4 (C-2), 135.6 (C-3), 179.3 (C-4),162.9 (C-5), 100.0 (C-6), 166.0 (C-7), 94.8 (C-8),159.3 (C-9), 105.6 (C-10), 123.1 (C-1′), 117.6 (C-2′),145.8 (C-3′), 149.8 (C-4′), 116.0 (C-5′), 123.5 (C-6′),104.6 (C-1″), 75.7 (C-2″), 78.2 (C-3″), 71.4 (C-4″),77.2 (C-5″), 68.6 (C-6″), 102.4 (C-1′″), 72.1 (C-2′″),72.2 (C-3′″), 73.9 (C-4′″), 69.7 (C-5′″), 17.8 (C-6′″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[10]，故鑒定化合物2 為蘆丁。

化合物3：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z433 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ: 7.64(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.50 (1H, dd,J= 8.5, 2.0 Hz, H-6′), 6.83 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.39 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.19 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.26(1H, d,J= 7.5 Hz, H-1″), 3.90 (1H, dd,J= 9.0, 7.5 Hz, H-2″), 3.80 (1H, t,J= 3.5 Hz, H-4″), 3.83 (1H, d,J= 13.0, 4.0 Hz, H-5a″), 3.43 (1H, d,J= 13.0, 3.0 Hz,H-5b″), 3.60 (1H, dd,J= 9.0, 3.0 Hz, H-3″)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6)δ: 156.3 (C-2), 133.4(C-3), 177.5 (C-4), 161.0 (C-5), 98.6 (C-6), 164.2(C-7), 93.5 (C-8), 156.2 (C-9), 103.9 (C-10), 121.0(C-1′), 115.7 (C-2′), 144.8 (C-3′), 148.4 (C-4′), 115.3(C-5′), 122.0 (C-6′), 101.4 (C-1″), 70.7 (C-2″), 71.6(C-3″), 66.1 (C-4″), 64.3 (C-5″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[11]，故鑒定化合物3 為槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。

化合物4：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z433 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.51(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.48 (1H, dd,J= 8.4, 2.0 Hz, H-6′), 6.89 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5′), 6.37 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.46(1H, s, H-1″), 4.33 (1H, dd,J= 3.0, 1.0 Hz, H-2″),3.90 (1H, dd,J= 5.0, 3.0 Hz, H-3″), 3.86 (1H, m,H-4″), 3.50 (2H, m, H-5″)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD)δ: 159.3 (C-2), 134.9 (C-3), 180.0 (C-4),163.1 (C-5), 99.9 (C-6), 166.5 (C-7), 94.8 (C-8), 158.6(C-9), 105.6 (C-10), 123.1 (C-1′), 116.8 (C-2′), 146.3(C-3′), 149.8 (C-4′), 116.4 (C-5′), 122.9 (C-6′), 109.4(C-1″), 83.3 (C-2″), 78.7 (C-3″), 88.0 (C-4″), 62.5(C-5″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[12]，故鑒定化合物4 為廣寄生苷。

化合物5：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z463 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.70(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.59 (1H, dd,J= 8.5, 2.0 Hz, H-6′), 6.87 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.38 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.19 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.25(1H, d,J= 7.5 Hz, H-1″), 3.21～3.71 (6H, m, Glc H-2～6)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 158.5(C-2), 135.6 (C-3), 179.5 (C-4), 163.1 (C-5), 99.9(C-6), 166.3 (C-7), 94.7 (C-8), 159.0 (C-9), 105.6(C-10), 123.2 (C-1′), 116.0 (C-2′), 145.9 (C-3′), 149.9(C-4′), 117.5 (C-5′), 123.1 (C-6′), 104.3 (C-1″), 75.7(C-2″), 78.1 (C-3″), 71.2 (C-4″), 78.4 (C-5″), 62.5(C-6″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[13]，故鑒定化合物5 為槲皮素-3-O-葡萄糖苷。

化合物6：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z457 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.60(1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.58 (1H, dd,J= 8.5, 2.0 Hz, H-6′), 6.85 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.37 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.18 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.18(1H, d,J= 7.5 Hz, H-1″), 3.78 (1H, dd,J= 11.0, 5.0 Hz, H-4″), 3.53 (1H, dd,J= 9.0, 7.5 Hz, H-2″), 3.51(1H, d,J= 8.5 Hz, H-5a″), 3.41 (1H, dd,J= 8.5, 5.0 Hz, H-5b″), 3.10 (1H, dd,J= 11.0, 9.0 Hz, H-3″)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 158.9 (C-2), 135.4(C-3), 179.4 (C-4), 163.0 (C-5), 99.9 (C-6), 166.0(C-7), 94.7 (C-8), 158.4 (C-9), 105.6 (C-10), 123.0(C-1′), 117.2 (C-2′), 146.0 (C-3′), 149.9 (C-4′), 116.0(C-5′), 123.3 (C-6′), 104.6 (C-1″), 75.3 (C-2″), 77.6(C-3″), 71.0 (C-4″), 67.2 (C-5″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[11]，故鑒定化合物6 為槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷。

化合物7：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z609 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.43(1H, dd,J= 8.0, 2.0 Hz, H-6′), 7.40 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 6.88 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.77 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.67 (1H, s, H-3), 6.54 (1H, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.01 (1H, d,J= 6.8 Hz, H-1″), 3.75 (1H,m, H-5″), 3.68 (2H, m, H-6″), 3.31 (1H, s, H-2″), 3.30(1H, s, H-4″), 3.15～3.28 (1H, m, H-3″), 4.28 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-1′″), 3.40 (1H, m, H-5′″), 4.12～4.18(2H, m, H-6″), 3.10 (1H, s, H-2′″), 3.17～3.27 (2H, s,H-3′″, 4′″)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 164.7(C-2), 103.4 (C-3), 183.0 (C-4), 159.9 (C-5), 101.1(C-6), 163.0 (C-7), 96.2 (C-8), 156.9 (C-9), 105.6(C-10), 121.6 (C-1′), 113.7 (C-2′), 145.7 (C-3′), 150.1(C-4′), 116.3 (C-5′), 119.3 (C-6′), 97.6 (C-1″), 74.7(C-2″), 77.6 (C-3″), 70.1 (C-4″), 76.6 (C-5″), 70.2(C-6″), 103.6 (C-1′″), 74.3 (C-2′″), 77.0 (C-3′″), 70.2(C-4′″), 76.0 (C-5′″), 62.4 (C-6′″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[14]，故鑒定化合物7 為木犀草素-7-O-β-龍膽二糖苷。

化合物8：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z447 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ:13.17 (1H, HO-5), 7.52 (1H, dd,J= 2.4, 8.4 Hz,H-6′), 7.46 (1H, d,J= 1.8 Hz, H-2′), 6.85 (1H, d,J=8.4 Hz, H-5′), 6.62 (1H, s, H-3), 6.23 (1H, s, H-6),4.68 (1H, d,J= 9.0 Hz, H-1″), 3.25～3.85 (6H, m,H-glucosyl)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6)δ: 164.0(C-2), 102.3 (C-3), 181.9 (C-4), 160.4 (C-5), 98.3(C-6), 163.1 (C-7), 104.6 (C-8), 156.0 (C-9), 103.8(C-10), 122.8 (C-1′), 113.9 (C-2′), 145.9 (C-3′), 150.0(C-4′), 115.7 (C-5′), 119.4 (C-6′), 73.4 (C-1″), 70.8(C-2″), 78.8 (C-3″), 70.7 (C-4″), 82.0 (C-5″), 61.7(C-6″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[15]，故鑒定化合物8 為葒草素。

化合物9：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z593 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.76(2H, s, H-2′, 6′), 6.89 (2H, s, H-3′, 5′), 6.54 (1H, s,H-3), 6.45 (1H, s, H-8), 4.89 (1H, s, H-1″), 4.38 (1H,s, H-1′″), 2.89～3.89 (12H, m, H-2″～6″, 2′″～6′″)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 166.1 (C-2), 103.8(C-3), 184.0 (C-4), 162.7 (C-5), 109.1 (C-6), 165.1(C-7), 95.3 (C-8), 158.7 (C-9), 105.1 (C-10), 123.0(C-1′), 129.5 (C-2′), 117.1 (C-3′), 162.7 (C-4′), 117.1(C-5′), 129.5 (C-6′), 73.4 (C-1″), 81.7 (C-2″), 79.9(C-3″), 71.6 (C-4″), 82.5 (C-5″), 62.8 (C-6″), 105.2(C-1′″), 75.7 (C-2′″), 77.4 (C-3′″), 71.2 (C-4′″), 77.8(C-5′″), 62.4 (C-6′″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[16]，故鑒定化合物9 為異牧荊素-2″-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物10：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z601 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.83 (2H, d,J= 8.0 Hz, H-2′, 6′), 6.92 (2H, d,J= 8.0 Hz, H-3′, 5′), 6.60 (1H, s, H-3), 4.89 (1H, d,J= 9.8 Hz, H-1″), 4.55 (1H, m, H-2″), 4.00 (1H, d,J= 2.5 Hz, H-4″), 3.76 (1H, m, H-6a″), 3.74 (1H, m, H-6b″),3.65 (1H, t,J= 2.5 Hz, H-5″), 3.59 (1H, dd,J= 9.5,2.5 Hz, H-3″), 5.32 (1H, s, H-1′″), 4.09 (1H, s, H-2′″),3.70 (1H, d,J= 9.0 Hz, H-3′″), 3.61 (1H, t,J= 9.0 Hz, H-4′″), 3.54 (1H, dq,J= 8.8, 6.0 Hz, H-5′″), 1.42(3H, d,J= 6.0 Hz, H-6′″)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD)δ: 165.5 (C-2), 103.5 (C-3), 184.0 (C-4),161.0 (C-5), 109.8 (C-6), 166.5 (C-7), 104.7 (C-8),156.0 (C-9), 104.4 (C-10), 123.1 (C-1′), 129.5 (C-2′),117.0 (C-3′), 163.1 (C-4′), 117.0 (C-5′), 129.5 (C-6′),75.3 (C-1″), 69.9 (C-2″), 78.2 (C-3″), 71.9 (C-4″),80.5 (C-5″), 62.2 (C-6″), 77.3 (C-1′″), 73.6 (C-2′″),77.0 (C-3′″), 73.2 (C-4′″), 80.2 (C-5′″), 18.0 (C-6′″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[17-18]，故鑒定化合物10 為violanthin。

化合物11：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z269 [M－H]–。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 8.06(1H, s, H-2), 7.37 (2H, d,J= 8.2 Hz, H-2′, 6′), 6.83(2H, d,J= 8.2 Hz, H-3′, 5′), 6.34 (1H, s, H-8), 6.21(1H, s, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 155.0(C-2), 124.9 (C-3), 182.4 (C-4), 164.0 (C-5), 100.3(C-6), 166.2 (C-7), 94.9 (C-8), 159.9 (C-9), 106.4(C-10), 123.5 (C-1′), 131.5 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′),159.0 (C-4′)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[19]，故鑒定化合物11 為染料木素。

化合物12：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z269 [M－H]–。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.10(1H, dd,J= 8.5, 2.0 Hz, H-5′), 6.87 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5), 6.42 (2H, m, H-3′, 6′), 6.37 (1H, dd,J= 8.1,2.0 Hz, H-6), 6.34 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.26 (1H,s, H-4), 4.89 (2H, s, H-2), 3.76 (3H, s, MeO-4′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 69.6 (C-2), 130.4(C-3), 121.8 (C-4), 128.7 (C-5), 109.7 (C-6), 159.9(C-7), 103.7 (C-8), 156.2 (C-9), 117.8 (C-10), 120.8(C-1′), 159.3 (C-2′), 100.3 (C-3′), 159.9 (C-4′), 130.4(C-5′), 107.6 (C-6′), 55.9 (MeO-4′)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[20]，故鑒定化合物12 為bolusanthin III。

化合物13：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z447 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ:8.37 (1H, s, H-2), 7.01 (1H, s, H-2′), 6.82 (2H, s, H-5′,6′), 6.76 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.46 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.06 (1H, d,J= 7.0 Hz, H-1″), 3.15～3.70(5H, m, Glu-H-2～6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6)δ: 154.6 (C-2), 122.7 (C-3), 180.6 (C-4), 163.0 (C-5),99.6 (C-6), 161.7 (C-7), 94.5 (C-8), 157.2 (C-9), 106.1(C-10), 121.5 (C-1′), 116.6 (C-2′), 145.0 (C-3′), 145.6(C-4′), 115.4 (C-5′), 120.0 (C-6′), 99.9 (C-1″), 73.1(C-2″), 76.4 (C-3″), 69.6 (C-4″), 77.2 (C-5″), 60.6(C-6″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[21]，故鑒定化合物13 為二羥四氫黃酮-7-O-葡萄糖苷。

化合物14：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z405 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.16 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 7.11 (1H, d,J= 2.0 Hz,H-2′), 6.94 (1H, dd,J= 2.0, 8.0 Hz, H-6′), 6.93, 7.02(各1H, d,J= 16.0 Hz, olefinic-H), 6.45 (2H, d,J=2.0 Hz, H-2, 6), 6.17 (1H, t,J= 2.0 Hz, H-4), 4.78(1H, d,J= 7.0 Hz, anomeric-H), 3.30～3.91 (6H, m,sugar-H)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 140.9(C-1), 106.0 (C-2), 159.7 (C-3), 103.0 (C-4), 129.0(C-α, β), 134.7 (C-1′), 114.5 (C-2′), 146.5 (C-3′),148.5 (C-4′), 119.8 (C-5′), 118.7 (C-6′), 103.0 (C-1″),74.9 (C-2″), 78.3 (C-3″), 71.3 (C-4″), 77.6 (C-5″),62.4 (C-6″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[22]，故鑒定化合物14 為白皮杉醇4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物15：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z389 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.08 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.65 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 6.38 (1H, s, H-6), 6.64 (1H, d,J= 12.0 Hz, H-8), 6.51 (1H, s, H-2), 6.39 (1H, s, H-4), 6.35(1H, d,J= 12.1 Hz, H-7), 4.69 (1H, d,J= 7.2 Hz,H-1″)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 141.4 (C-1),109.2 (C-2), 160.5 (C-3), 104.1 (C-4), 159.6 (C-5),111.2 (C-6), 128.9 (C-7), 131.3 (C-8), 128.9 (C-1′),131.4 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′), 158.5 (C-4′), 102.3(C-1″), 74.9 (C-2″), 78.2 (C-3″), 71.5 (C-4″), 77.9(C-5″), 62.6 (C-6″)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[23-24]，故鑒定化合物15 為 (Z)-虎杖苷。

化合物16：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z281 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.97(1H, d,J= 15.8 Hz, H-8), 6.50 (1H, d,J= 15.8 Hz,H-7), 5.77 (1H, s, H-10), 4.11 (1H, m, H-3), 3.80 (1H,d,J= 7.5 Hz, H-12a), 3.71 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-12b),2.08 (3H, s, H-15), 2.03 (1H, dd,J= 13.5, 7.5 Hz,H-4a), 1.74 (1H, dd,J= 13.5, 3.0 Hz, H-4b), 1.85(1H, dd,J= 12.3, 7.0 Hz, H-1a), 1.66 (1H, dd,J=12.3, 2.0 Hz, H-2b), 1.15 (3H, s, H-14), 0.93 (3H, s,H-13；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 49.5 (C-1),44.5 (C-2), 66.0 (C-3), 46.0 (C-4), 87.8 (C-5), 83.2(C-6), 134.7 (C-7), 131.9 (C-8), 150.5 (C-9), 120.1(C-10), 170.6 (C-11), 77.3 (C-12), 16.4 (C-13), 19.6(C-14), 21.2 (C-15)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[25]，故鑒定化合物16 為二氫菜豆酸。

化合物17：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z613 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.17 (2H, s, H-2′″, 6′″), 6.80 (1H, d,J= 9.0 Hz, H-6),6.28 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-3), 6.15 (1H, dd,J= 2.5,8.5 Hz, H-5), 4.71 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-1′), 4.22 (1H,d,J= 10.0 Hz, H-4″a), 3.72 (1H, d,J= 10.0 Hz,H-4″b), 4.18 (1H, s, H-5″), 3.89 (1H, s, H-2″), 3.77(2H, s, 3′″, 5′″-OMe), 3.65 (1H, m, H-6′a), 3.41 (1H,m, H-6′b), 3.60 (3H, s, 2-OMe), 3.49 (1H, t,J= 8.0 Hz, H-2′), 3.43 (1H, t,J= 8.0 Hz, H-3′), 3.20 (1H, m,H-5′), 3.15 (1H, t,J= 9.0 Hz, H-4′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 139.2 (C-1), 149.1 (C-2), 101.7(C-3), 152.3 (C-4), 105.9 (C-5), 115.9 (C-6), 99.7(C-1′), 75.5 (C-2′), 77.4 (C-3′), 70.3 (C-4′), 76.9(C-5′), 60.7 (C-6′), 108.4 (C-1″), 77.1 (C-2″), 77.8(C-3″), 74.2 (C-4″), 67.8 (C-5″), 119.6 (C-1′″), 107.3(C-2′″), 147.6 (C-3′″), 141.0 (C-4′″), 147.6 (C-5′″),107.6 (C-6′″), 165.6 (C=O), 55.4 (MeO-2), 56.2 (3′″,5′″-OMe)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[26]，故鑒定化合物17 為millettiaspecoside B。

化合物18：白色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z177 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.77 (1H, s, H-4), 6.92 (1H, s, H-5), 6.74 (1H, s, H-8),6.16 (1H, s, H-3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ:164.3 (C-2), 112.8 (C-3), 146.1 (C-4), 113.0 (C-5),144.6 (C-6), 152.1 (C-7), 103.6 (C-8), 150.5 (C-9),112.6 (C-10)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[27]，故鑒定化合物18 為七葉內酯。

化合物19：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z257 [M－H]–。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.26(1H, d,J= 1.9 Hz, H-6), 6.69 (1H, d,J= 2.5 Hz,H-5′), 6.60 (1H, d,J= 2.5 Hz, H-4′), 6.37 (1H, d,J=2.0 Hz, H-4), 2.76 (3H, s, 6′-Me)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 140.0 (C-1), 99.2 (C-2), 166.4 (C-3),102.1 (C-4), 167.0 (C-5), 105.7 (C-6), 167.1 (C-7), 111.1(C-1′), 154.6 (C-2′), 102.9 (C-3′), 160.0 (C-4′), 118.7(C-5′), 140.2 (C-6′), 26.0 (6′-Me)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[28]，故鑒定化合物19 為交鏈孢酚。

化合物20：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z279 [M＋H]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.70(2H, m, H-3, 6), 7.58 (2H, m, H-4, 5), 4.27 (4H, t,J=6.7 Hz, H-3′, 3″), 1.69 (4H, m, H-4′, 4″), 1.43 (4H, m,H-5′, 5″), 0.95 (6H, m, H-6, 6″)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD)δ: 132.3 (C-1), 129.9 (C-3), 133.6 (C-4),169.2 (C-1′), 66.6 (C-3′), 31.7 (C-4′), 20.3 (C-5′), 14.1(C-6′)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[29]，故鑒定化合物20 為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物21：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z391 [M＋H]+。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 7.70(2H, m, H-3, 6), 7.58 (2H, m, H-4, 5), 1.66 (2H, m,H-4′, 4″), 1.42 (4H, m, H-9′, 9″), 1.30～1.30 (12H, m,H-5′, 6′, 7′, 5″, 6″, 7″), 0.93 (6H, t,J= 7.5 Hz, H-10′,10″), 0.92 (6H, t,J= 7.3 Hz, H-8′, 8″)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 132.4 (C-1), 129.9 (C-3), 133.6(C-4), 169.2 (C-1′), 68.1 (C-3′), 40.2 (C-4′), 31.6 (C-5′),30.2 (C-6′), 24.1 (C-7′), 14.5 (C-8′), 25.0 (C-9′), 11.5(C-10′)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[30]，故鑒定化合物21 為鄰苯二甲酸二辛酯。

化合物22：白色針狀結晶（甲醇）。ESI-MSm/z195 [M－H]–。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 6.19(1H, s, H-5), 4.89 (1H, s, 4-OH), 3.87 (1H, s, H-10),2.39 (3H, s, H-9), 2.00 (3H, s, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 105.1 (C-1), 164.4 (C-2), 111.7(C-3), 16.6 (C-4), 110.0 (C-5), 141.1 (C-6), 174.1(C-7), 8.1 (C-8), 24.5 (C-9), 52.2 (C-10)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[31]，故鑒定化合物22為2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯。

化合物23：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z137 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ: 9.67(1H, s, H-7), 7.30 (1H, dd,J= 1.5, 7.5 Hz, H-6), 7.29(1H, d,J= 1.8 Hz, H-5), 6.90 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-2)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)δ: 130.8 (C-1), 115.3(C-2), 147.2 (C-3), 153.7 (C-4), 116.2 (C-5), 126.4 (C-6),193.1 (C-7)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[32-34]，故鑒定化合物23 為3,4-二羥基苯甲醛。

化合物24：黃色無定型粉末（甲醇）。ESI-MSm/z197 [M－H]–。1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ:7.04 (1H, s, H-2, 6), 4.26 (2H, q,J= 7.3 Hz, -CH2),1.33 (3H, t,J= 7.3 Hz, -CH3)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD)δ: 121.8 (C-1), 110.0 (C-2, 6), 146.5(C-3, 5),139.8 (C-4), 168.6 (C=O), 61.6 (-CH2), 14.6 (-CH3)。以上波譜數據與文獻報道對照基本一致[35]，故鑒定化合物24 為沒食子酸乙酯。

4 討論

大發(fā)表全草具清熱利濕、活血止血、解表止咳之功效。民間用于治療泌尿系統(tǒng)疾病，對腎炎、前列腺炎和結石等療效顯著。本研究從大發(fā)表全草中分離純化鑒定了24 個化合物，除化合物11 外，其余23 個化合物均為首次從該屬植物中分離得到?；衔锝Y構類型以黃酮類化合物（1～13）為主，還涉及二苯乙烯苷（14、15）、倍半萜（16）、苯酚苷（17）、香豆素類化合物（18）和其他芳香化合物（19～24）。13 個黃酮類化學成分中，有簡單的黃酮醇類、異黃酮類，還包括5 個黃酮醇氧苷、3 個黃酮碳苷、1個黃酮氧苷和1 個異黃酮氧苷。本研究豐富了大發(fā)表化學成分的結構多樣性，為舒列安膠囊的科學應用和二次開發(fā)提供了一定的科學參考，增加了對大發(fā)表所含物質基礎的認知。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突