50%啶蟲脒水分散粒劑在蘋果上的殘留試驗

秦蘭香 丁明海 李秉衡

啶蟲脒又稱莫比郎、金世紀(jì)、吡蟲清、乙蟲脒，為氯化煙堿吡啶類化合物，是一種新型廣譜低毒殺蟲劑，常用于防治果樹、蔬菜、瓜類、小麥、水稻的蚜蟲、粉虱、菜蛾等病蟲害，具有藥效快、用量少、持效期長的特點。《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2021）中規(guī)定，蘋果中啶蟲脒的最大殘留限量為0.8mg/kg。長期食用啶蟲脒超標(biāo)的食物，對人體健康有一定危害。本文研究了50%啶蟲脒水分散粒劑在蘋果上的殘留情況，以期為該產(chǎn)品的安全使用提供科學(xué)參考。

一、材料與設(shè)備

DJB-20背負(fù)式噴霧器、DEM6輕便三杯風(fēng)向風(fēng)速表、VICTOR231工業(yè)級溫濕度表、PS-1003計時秒表、高精度GPS面積測量儀、安捷倫1290Ultivo型超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀、KJYQ-500B超聲波清洗器、SL-2000A多功能粉碎機、XW-80A微型旋渦混合儀、Scout百分之一電子天平、移液槍及各種玻璃儀器。

乙腈、水、甲酸，均為HPLC級；NaCl，為分析純；Florisil選擇性吸附劑、甲醇中啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)品（1000±20）μg/mL，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

蘋果樣品，日照市高新區(qū)河山鎮(zhèn)草坡村。

二、試驗與方法

1.田間試驗。（1）實驗地點。山東省日照市高新區(qū)河山鎮(zhèn)草坡村（最終殘留量試驗）。

試驗地點土壤類型：棕壤；氣候條件：暖溫帶季風(fēng)氣候，降水集中，雨熱同季，春秋短暫，冬夏較長，年均氣溫11℃-14℃，年降水量一般在550-950mm，年光照時數(shù)為2290-2890h。前茬作物、農(nóng)藥使用歷史：無前茬作物，未曾施用過與50%啶蟲脒水分散粒劑性質(zhì)相似的農(nóng)藥。

（2）供試作物及品種。蘋果樹，品種為美國8號。

（3）施藥方法和器具。選擇背負(fù)式電動噴霧器施藥，每畝兌水20L，3000倍液，進行葉面、葉背均勻噴霧處理。試驗均在風(fēng)速小于3m/s、氣溫小于40℃、施藥后2h內(nèi)無降雨的情況下開展。施藥前對噴霧器具徹底清洗，校準(zhǔn)后使用。

（4）田間管理。試驗期間，對供試作物在灌溉、施肥方面進行常規(guī)化管理，必要時可進行疏花、疏果、耕作等操作。為確保供試作物的正常生長而必須使用其他農(nóng)藥時，應(yīng)在病蟲害發(fā)生的同時在對照小區(qū)和處理小區(qū)使用相同劑量的同種農(nóng)藥，且該農(nóng)藥不能對被試農(nóng)藥造成分析干擾。觀察作物用藥后的生長情況，若有藥害產(chǎn)生，需評估該次施藥對試驗項目的影響。

（5）最終殘留量試驗。試驗小區(qū)：各試驗地均設(shè)計1個處理小區(qū)、1個對照小區(qū)。日照市試驗點處理小區(qū)和對照小區(qū)各有蘋果樹16棵，小區(qū)之間隔離帶為5m。試驗地的施藥情況見表1。

田間樣品采樣：試驗點在最后一次施藥后間隔14d、21d，在處理小區(qū)分別采集2個蘋果樣品。小區(qū)邊行和每行兩邊0.5m不采樣，從不少于4株果樹上采集至少12個果實，至少3kg，裝入自封袋。將采集的樣品獨立分開裝入自封袋中，加貼標(biāo)簽，標(biāo)簽內(nèi)容包括：項目編號、樣品編號、試驗地點、樣品名稱、采收間隔期、采收日期、田間試驗單位和采樣人員。

2.樣品運輸、制備與儲藏。（1）田間農(nóng)殘樣品運輸。采集的田間樣品在8h內(nèi)運回實驗室進行樣品制備。田間農(nóng)殘樣品制備方法如下：將樣品沿縱向均勻地切成4瓣，取不相鄰的兩瓣，切成1-2cm碎塊，混合均勻后，四分法縮分樣品，取2份各150-250g樣品貼好樣品標(biāo)簽，A樣用于檢測，B樣用于留樣。制備好的農(nóng)殘樣品在低于-18℃冰箱中冷凍保存，并且連續(xù)監(jiān)控溫度。試驗結(jié)束后，B樣在低于-18℃條件下至少保存半年。

（2）殘留物檢測。根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2021）規(guī)定，測定殘留物啶蟲脒。

第一步：標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。分別以乙腈、空白蘋果基質(zhì)溶液為定容介質(zhì)，配制一系列濃度梯度為0.005、0.010、0.020、0.050、0.100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，對標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測定，每個濃度采集3個平行，以5個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制1條標(biāo)準(zhǔn)曲線。

第二步：樣品的提取和凈化。取待測樣品（基質(zhì)），放入破壁機制成勻漿，稱取勻漿試樣（5.00±0.10）g（質(zhì)量記作M）于具塞試管中，添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)30min后（樣品空白不需要添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)），加入50.0mL乙腈提取劑（提取劑加入體積記作V），超聲提取15min，加入2.00g氯化鈉，渦旋混合30s，靜置后吸取5.0mL上清液。加入0.20g Florisil選擇性吸附劑和0.10g石墨化碳黑，渦旋混合30s，靜置后取1.0mL上清液，根據(jù)實際情況稀釋（提取液稀釋倍數(shù)記作f），取適量稀釋液過0.22μm有機微膜，測試。

質(zhì)控樣品的提取和凈化步驟同上。

（3）儀器測定。儀器設(shè)備：安捷倫1290Ultivo型超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；色譜柱型號：Eclipse Plus C18（1.8μm，2.1*50mm）；柱溫箱溫度：40.0℃；測試進樣量：3.00μL；流動相預(yù)處理：超聲脫氣；流動相A：0.1%甲酸緩沖液；流動相B：乙腈（梯度洗脫條件見表2）；離子源：AJS-ESI；掃描方式：MRM模式；鞘氣溫度：250℃；鞘氣流速：11.0L/min；氣體溫度：300℃；氣體流速：7.0L/min；MS2加熱器：65℃；MS1加熱器：65℃；噴霧：15.0psi，MRM質(zhì)譜條件見表3。

三、結(jié)果與討論

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣品結(jié)果。本試驗采用外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，對空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測定，每個濃度采集3個平行，以5個濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，蘋果基質(zhì)得到標(biāo)準(zhǔn)曲線y=349567.862638*x+161.299020，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性良好，r為0.999；質(zhì)控樣品啶蟲脒回收率在100%、110%。標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性和質(zhì)控樣品的回收率均滿足《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗準(zhǔn)則》（NY/T 788-2018）對殘留檢測方法的相關(guān)要求。

2.最終殘留量試驗結(jié)果。采用50%啶蟲脒水分散粒劑推薦劑量的最高值3000倍液，以葉面、葉背均勻噴霧的方式施藥1次，安全間隔期14d，用于防治蘋果樹蚜蟲。最終殘留樣品采收間隔期14d、21d，試驗點蘋果中啶蟲脒平均殘留量為0.15mg/kg、0.35mg/kg，低于國標(biāo)要求的0.8mg/kg。

作者簡介：秦蘭香（1978-），女，山東日照人，高級工程師，大學(xué)本科，研究方向為林業(yè)。