氣道壓力釋放通氣通過調(diào)控ITGB4相關(guān)通路減輕ARDS肺部炎癥的機制研究

馬愛佳, 魏燦征,2*, 董美玲, 程江麗, 海依爾別克·阿達力, 秦藝瑋,3, 薛 楊,高 慧, 趙利燦, 李建波, 周永方, 王 波, 楊 婧#, 康 焰,4

急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是以肺部炎癥反應(yīng)、肺容積減少、順應(yīng)性降低、通氣血流比例失調(diào)為主要病理生理特征的臨床常見危重癥[1]。迄今為止,ARDS仍缺少有效的藥物治療方法,機械通氣是治療ARDS的最有效方法之一[2-3]。小潮氣量通氣(low tidal volume ventilation,LTV)作為肺保護性通氣策略的核心,面對ARDS患者肺部損傷的“不均一性”,在一定程度上受到氣體交換和氣道壓的限制[4]。而氣道壓力釋放通氣(airway pressure release ventilation,APRV)可通過持續(xù)的氣道高壓使ARDS患者肺泡得到開放,短暫的釋放通氣時間避免了肺泡塌陷,在鍛煉了呼吸肌的同時避免了人機不同步,理論上可以有效保護呼吸機相關(guān)性肺損傷(ventilator-induced lung injury,VILI)[5]。本團隊前期臨床研究顯示,APRV相較于LTV可以增加ARDS患者28 d不帶機時間并縮短患者住院時長[6]。動物研究結(jié)果顯示,APRV機械通氣模式相較于LTV機械通氣模式可以有效改善ARDS后的氧合指數(shù)及肺順應(yīng)性[7-8]。然而,盡管前期結(jié)果APRV機械通氣展現(xiàn)出一定肺保護性優(yōu)勢,但其改善機制目前并不明確。大量研究表明炎癥介質(zhì)釋放在ARDS中發(fā)揮了重要作用[9-12]。因此,本研究通過巴馬小型成年豬ARDS模型的測序數(shù)據(jù)與體外肺上皮細胞牽張模型,探索APRV與LTV周期性牽張刺激引起炎癥反應(yīng)的機制,為ARDS患者VILI的防治提供思路。

1 材料與方法

1.1實驗?zāi)Ｐ图爸饕噭?動物實驗使用巴馬小型豬(n=14,7月齡,體重25～35 kg)。通過生理鹽水灌洗肺構(gòu)建重度ARDS模型,應(yīng)用LTV與APRV機械通氣模式進行48 h機械通氣治療,分為空白對照組(control組,n=3)、疾病對照組(ARDS組,n=3)、LTV機械通氣組(LTV組,n=4)以及APRV機械通氣組(APRV組,n=4)。機械通氣使用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的SV800呼吸機。細胞實驗使用A549細胞系,RPMI 1640細胞培養(yǎng)基(美國Invitrogen Gibco,C11875500BT)及胎牛血清(美國Invitrogen Gibco,CB14808348)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測動物實驗肺泡灌洗液以及細胞上清液中炎癥因子白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白細胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),試劑盒購自上海茁彩生物科技有限公司。Trizol試劑盒購自美國Thermo Fisher Scientific(15596026),一步法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR反應(yīng)試劑盒購自南京諾唯贊生物科技股份有限公司。沉默ITGB4小干擾RNA(siRNA)設(shè)計序列由山東維真生物科技有限公司設(shè)計提供,sense:GGUCACCUCCAAGAUGUUC;antisense:GAACAUCUUGGAGGUGACC。p38抑制劑購自上海碧云天生物技術(shù)股份有限公司(SB203580)。動物實驗獲四川大學華西醫(yī)院動物倫理委員會審批(批號:2018073A)。

1.2ARDS動物模型建立 采用生理鹽水灌洗肺構(gòu)建重度ARDS豬模型。準備37 ℃生理鹽水約3 000 mL,肺泡灌洗從左到右,從上至下,依次灌洗肺段。經(jīng)支氣管鏡快速注射,每個肺段灌注10～50 mL生理鹽水,完成后吸出灌洗液,肺泡灌洗液回收率應(yīng)達到灌入總液體的50%～60%。肺泡灌洗后每30 min進行動脈血氣分析,氧合指數(shù)[氧分壓(partial pressure of oxygen,PaO2)/吸氧濃度(fraction of inspired oxygen,FiO2)]≤100并穩(wěn)定維持30 min,即為造模成功。若氧合指數(shù)未能達到標準,則根據(jù)肺泡灌洗液回收率再次灌注10～50 mL生理鹽水,并在30 min后進行動脈血氣檢測,直至氧合指數(shù)達到標準。

1.3機械通氣初始參數(shù)設(shè)置及調(diào)節(jié) 重度ARDS模型構(gòu)建成功后,LTV組和APRV組分別進行48 h的LTV、APRV機械通氣支持。LTV組應(yīng)用容量控制的輔助/控制(assisted/control-volume control ventilation,A/C-VCV)通氣模式,潮氣量6 mL/kg,呼吸頻率14～16次/min,根據(jù)ARDSnet推薦的higher呼吸末正壓(positive end-expiratory pressure,PEEP)/lower FiO2表格依次調(diào)整PEEP和FiO2[13],維持平臺壓≤30 cmH2O。APRV組根據(jù)A/C-VCV通氣模式時所測得的力學指標進行APRV參數(shù)設(shè)置,若平臺壓≤30 cmH2O,Phigh=平臺壓;若平臺壓>30 cmH2O,Phigh=30 cmH2O,Plow=5 cmH2O,初始釋放頻率為10～14次/min,Tlow=1～1.5倍時間常數(shù)。

1.4差異mRNA篩選及靶基因預(yù)測 ARDS組、LTV組、APRV組經(jīng)肺動脈持續(xù)灌注肺組織后,根據(jù)豬的解剖學結(jié)構(gòu),于右上、中、下肺的前、中、后段隨機取10塊肺組織。鑒于前期研究病理學結(jié)果顯示,右肺下葉肺部損傷嚴重[8],本研究取右肺下葉后段組織進行轉(zhuǎn)錄組高通量測序。測序結(jié)果通過國家生物技術(shù)信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)參考基因組版本GCF_000003025.6_Sscrofa11.1進行比對。使用R軟件“l(fā)imma”包篩選差異基因,差異倍數(shù)絕對值>1.5且P值<0.05,從中篩選出與機械應(yīng)力相關(guān)靶基因。使用R軟件“clusterProfiler”軟件包,對差異基因進行KEGG與GO富集分析,篩選出與機械應(yīng)力相關(guān)基因的通路及生物功能,adjustedP<0.05,Q<0.05的通路被視為顯著富集。

1.5細胞牽張儀LTV樣牽張與APRV樣牽張模式設(shè)定 通過細胞牽張儀模擬建立體外APRV樣牽張及LTV樣牽張模型。將A549細胞接種至細胞牽張膜,LTV樣牽張4 h,牽張幅度為12.5%,牽張回復(fù)時間0.8 s,復(fù)位時間0.8 s;牽張時間0.8 s,牽張維持時間0 s。將A549細胞接種至細胞牽張膜,APRV樣牽張4 h,牽張幅度為12.5%,牽張回復(fù)時間0.8 s,復(fù)位時間0 s;牽張時間0.8 s,牽張維持時間2.15 s。

1.6ELISA檢測炎癥因子IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α含量 將IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α抗體包被于96孔微孔板。制備不同濃度的標準品,將不同濃度的標準品和同一體積的肺泡灌洗液或細胞上清液加入到對照孔和樣本孔中。每孔加入檢測抗體,密封平板并在室溫下孵育1 h。用1×ELISA抗體稀釋液稀釋抗生物素蛋白-HRP連接的熒光二抗,密封平板并在室溫下孵育30 min。每孔加入1×TMB溶液,在室溫下孵育15 min,隨即每孔加入終止液。在450 nm讀取OD值,使用平均OD確定標準曲線方程和計算實驗樣品中蛋白的濃度。

1.7逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA表達水平 使用Trizol法從肺組織和A549細胞中提取總RNA,采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒一步合成法合成cDNA,逆轉(zhuǎn)錄完成后進行PCR擴增,PCR反應(yīng)體系如下:SYBR Green Supermix 10 μL,無酶核酸水7.2 μL,引物0.8 μL,cDNA 2 μL;將樣本放入實時熒光定量儀上進行反應(yīng)后,導(dǎo)出實驗結(jié)果,以18 s為內(nèi)參,使用2-ct法計算出結(jié)果并在Prism 9.0中進行結(jié)果繪圖。

1.8蛋白免疫印跡實驗(Western blot,WB)檢測肺組織及細胞的ITGB4、FAK、FAK磷酸化(p-FAK)、p38、p38磷酸化(p-p38)、β-tubulin蛋白表達水平 用細胞刮刀收集1×106個細胞。若為組織,則將組織勻漿研磨至粉末,向其中加入含蛋白酶抑制劑的RIPA裂解液,冰上裂解1 h,14 000 r/min、4 ℃離心20 min,取上清液制備蛋白樣品。使用SDS-PAGE膠進行電泳,轉(zhuǎn)膜,封閉后滴加一抗(1∶1 000)4 ℃孵育過夜。將膜置于稀釋的二抗(1∶4 000)中室溫孵育2 h后顯影。

1.9統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。應(yīng)用GraphPad Prism 6.0進行作圖。兩組間比較采用成組t檢驗。多組間比較采用單因素方差分析,以LSD-t檢驗進行組間兩兩比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1APRV相較于LTV顯著改善重度ARDS炎癥

ELISA檢測結(jié)果顯示,在造模前(T0)、造模成功(T1),APRV組與LTV組肺泡灌洗液IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。通氣48 h(T2),APRV組IL-6、IL-8水平顯著低于LTV組(P<0.05),兩組IL-1、TNF-α水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見圖1。與control組比較,ARDS組、LTV組肺組織IL-1、IL-6 mRNA表達水平顯著升高(P<0.05);ARDS組肺組織IL-1、IL-6、IL-8 mRNA表達水平顯著低于LTV組(P<0.05),APRV組肺組織IL-6、IL-8 mRNA表達水平顯著低于LTV組(P<0.05)。control組、ARDS組、LTV組與APRV組肺組織中TNF-α mRNA表達水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見圖2。

圖1 LTV組與APRV組不同時間點肺泡灌洗液炎癥因子表達水平比較圖(*P<0.05)

圖2 四組肺組織炎癥因子mRNA表達水平比較圖(*P<0.05,ns為P>0.05)

2.2機械通氣過程中ITGB4-FAK-p38-MAPK通路顯著激活 選取ARDS組、LTV組及APRV組豬肺組織進行轉(zhuǎn)錄組高通量測序。以差異倍數(shù)2倍以上,P<0.05為界篩選差異基因。對非共同差異基因進行KEGG富集分析,結(jié)果顯示在細胞外基質(zhì)受體交互通路(ECM-receptor interaction)與黏著斑(focal adhesion)信號通路顯著富集(見圖3?)。對非共同差異基因進行GO富集分析,結(jié)果顯示在細胞黏附(cell adhesion)與細胞基質(zhì)黏附(cell-matrix adhesion)過程顯著富集。GO富集分析發(fā)現(xiàn)絲裂原活化蛋白激酶活化過程(activation of MAPK activity)與整合素介導(dǎo)的信號通路(integrin-mediated signaling pathway)顯著富集(見圖3?)。對細胞外基質(zhì)受體交互通路與黏著斑信號通路差異基因作聚類熱圖(見圖3?),ITGB4為顯著差異基因之一。通過WB檢測驗證control組、ARDS組、LTV組、APRV組豬肺組織中ITGB4、FAK、p38、p-FAK、p-p38蛋白表達水平。結(jié)果顯示,ARDS組ITGB4、p-FAK、FAK、p-p38、p38蛋白表達水平均較control組顯著升高(P<0.05)。LTV組ITGB4蛋白表達水平(1.08±0.04)與APRV組(0.74±0.05)存在顯著差異(P<0.05)。APRV組p-FAK蛋白表達水平顯著低于LTV組(P=0.043)。盡管LTV組與APRV組p38蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),但LTV組p-p38蛋白表達水平(1.08±0.10)相較于APRV組(0.80±0.11)顯著升高(P=0.049),見圖4。

?KEGG信號通路富集氣泡圖;?GO生物過程富集氣泡圖;?細胞外基質(zhì)受體交互通路與黏著斑信號通路差異基因聚類熱圖

?control組、ARDS組、LTV組和APRV組肺組織蛋白表達灰度圖;?～?ITGB4、p-FAK、FAK、p-p38、p38蛋白表達統(tǒng)計圖。*P<0.05

2.3體外模擬LTV與APRV模式牽張對肺上皮細胞炎癥的影響 ELISA檢測A549細胞經(jīng)APRV與LTV樣牽張后細胞上清液中IL-6、IL-8水平結(jié)果顯示,三組IL-6水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而APRV組IL-8表達水平[(68.94±5.84)pg/mL]顯著低于LTV組[(107.4±3.16)pg/mL](P<0.001),見圖5??。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,與control組(1.00±0.09)相比,LTV組(1.25±0.34)與APRV組(1.26±0.34)IL-6 mRNA表達水平稍有升高,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。LTV組(1.95±0.22)、APRV組(1.55±0.16)IL-8 mRNA表達水平顯著高于control組(1.00±0.05),APRV組顯著低于LTV組(P=0.049),見圖5??。

??A549細胞牽張6 h后細胞上清液IL-6和IL-8表達水平;??A549細胞牽張6 h后細胞IL-6和IL-8 mRNA表達水平。*P<0.05,ns為P>0.05

2.4體外模擬LTV與APRV模式牽張對ITGB4-FAK-p38-MAPK通路的影響 WB檢測control組、LTV樣牽張、APRV樣牽張對A549細胞ITGB4、FAK、p38、p-FAK、p-p38蛋白表達水平的影響。LTV組(0.95±0.07)ITGB4蛋白表達水平顯著高于control組(0.25±0.16)(P<0.001)與APRV組(0.62±0.07)(P=0.024)。APRV組(0.73±0.09)p-FAK蛋白表達水平顯著低于LTV組(1.04±0.06)(P=0.046)。APRV組與LTV組的FAK和p38蛋白表達水平差異不顯著(P>0.05)。LTV組(1.09±0.11)p-p38蛋白表達水平顯著高于control組(0.34±0.09)(P<0.001)及APRV組(0.62±0.13)(P=0.046),見圖6。

?蛋白表達灰度圖;?～?ITGB4、p-FAK、FAK、p-p38、p38蛋白表達統(tǒng)計圖。每組樣本量n=3。*P<0.05

2.5ITGB4沉默對ITGB4-FAK-p38-MAPK-IL-8通路的影響 使用siRNA沉默ITGB4的表達,實驗分組為細胞未牽張對照組(control組)、細胞未牽張并使用siRNA干擾組(control+siRNA組)、細胞LTV樣牽張組(LTV組)、細胞APRV樣牽張組(APRV組)、細胞LTV樣牽張并使用siRNA干擾組(LTV+siRNA組)、細胞APRV樣牽張并使用siRNA干擾組(APRV+siRNA組)。WB檢測各組ITGB4、FAK、p38、p-FAK、p-p38蛋白表達水平。結(jié)果顯示,沉默ITGB4可顯著下調(diào)LTV+siRNA組p-FAK和p-p38蛋白表達水平(P<0.05),FAK蛋白與p38蛋白在ITGB4沉默后無明顯差異(P>0.05)。盡管ITGB4沉默降低LTV+siRNA組ITGB4相關(guān)通路的磷酸化水平,但仍高于APRV+siRNA組。沉默ITGB4后,APRV+siRNA組ITGB4相關(guān)通路磷酸化水平降至control組水平,見圖7?～?。ELISA檢測細胞上清液中IL-8水平,結(jié)果顯示,沉默ITGB4可顯著降低LTV+siRNA組及APRV+siRNA組細胞上清液IL-8水平(P<0.05)。鑒于LTV組樣牽張后IL-8水平上調(diào)明顯,沉默ITGB4下調(diào)IL-8水平尤為顯著。APRV+siRNA組在ITGB4沉默后,IL-8水平降至control組水平。APRV+siRNA與LTV+siRNA組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見圖7?。

?蛋白表達灰度圖;?～?ITGB4、p-FAK、FAK、p-p38、p38蛋白表達統(tǒng)計圖;?ELISA檢測細胞上清液IL-8水平。每組樣本量n=3。*P<0.05,ns為P>0.05

2.6p38抑制劑對LTV和APRV樣牽張后炎癥因子的影響 為驗證p-p38與不同機械通氣模式IL-8表達水平的關(guān)系,對不同牽張模式下A549細胞使用p38抑制劑(SB203580),觀察其炎癥因子改變。實驗分組為細胞未牽張對照組(control組)、細胞未牽張并使用SB203580組(control+SB203580組)、細胞LTV樣牽張組(LTV組)、細胞APRV樣牽張組(APRV組)、細胞LTV樣牽張并使用SB203580組(LTV+SB203580組)、細胞APRV樣牽張并使用SB203580組(APRV+SB203580組)。使用p38抑制劑后,LTV+SB203580組和APRV+SB203580組p38水平相較于LTV組和APRV組均無顯著差異(P>0.05)。使用p38抑制劑后,APRV+SB203580組p-p38蛋白表達水平相較于LTV+SB203580組顯著下調(diào)(P=0.032),見圖8?～?。ELISA檢測各組細胞培養(yǎng)液中IL-8水平,應(yīng)用p38抑制劑后,APRV+SB203580組和LTV+SB203580組中IL-8水平相較于LTV組和APRV組顯著降低(P<0.05)。鑒于LTV組樣牽張分泌更高的IL-8水平,LTV+SB203580組IL-8水平降低更為明顯,APRV+SB203580組和LTV+SB203580組差異無統(tǒng)計學意義(P=0.973),見圖8?。RT-PCR檢測各組A549細胞IL-8 mRNA表達水平,其結(jié)果與ELISA檢測結(jié)果一致,見圖8?。

?蛋白表達灰度圖;??p-p38、p38蛋白表達統(tǒng)計圖;??p38抑制劑對細胞培養(yǎng)液中IL-8水平及細胞內(nèi)IL-8 mRNA表達水平的影響。每組樣本量n=3。*P<0.05,ns為P>0.05

3 討論

3.1本研究使用大型動物豬構(gòu)建重度ARDS實驗?zāi)Ｐ?并隨機分組維持48 h的APRV或LTV機械通氣。相較于LTV組,APRV組肺泡灌洗液IL-6、IL-8水平以及ITGB4、p-FAK、p-p38蛋白表達水平顯著降低。另外,研究構(gòu)建了A549細胞體外LTV樣及APRV樣牽張模型。結(jié)果顯示,與LTV樣牽張相比,APRV樣牽張通過p38-MAPK信號通路下調(diào)ITGB4,減少IL-8分泌。在ARDS的機械通氣支持過程中,靶向ITGB4-p38-MAPK信號通路可能是一種有前景的治療策略。

3.2機械通氣對于維持ARDS患者氧合及機體穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。APRV在持續(xù)氣道正壓的基礎(chǔ)上,通過高壓與低壓之間形成壓力差以周期性地釋放進行肺通氣,并允許自主呼吸的存在。其持續(xù)的氣道高壓給予塌陷肺泡以支持,使得肺泡充分開放。動脈血氧分壓是機械通氣治療的重要指標,其對應(yīng)的氧合指數(shù)是ARDS的診斷標準及嚴重程度的分級標準。本課題組前期研究結(jié)果顯示,APRV機械通氣模式相較于LTV機械通氣模式能更好地改善氧合、肺順應(yīng)性以及肺通透性,從而減少肺部損傷[6-8]。Roy等[14-16]的多個動物實驗以及近期的3項臨床試驗薈萃分析[17-19]都得到了相同的結(jié)論。

3.3炎癥因子在ARDS發(fā)生發(fā)展過程中極其重要,是VILI的關(guān)鍵節(jié)點。與LTV相比,APRV對炎癥因子的作用尚存在爭議,本研究結(jié)果為此提供了新的證據(jù)。本實驗中,IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平在造模成功后顯著升高。APRV的機械通氣模式相較于LTV機械通氣模式可以有效控制早期肺泡灌洗液及肺組織IL-1、IL-6、IL-8水平。IL-8是中性粒細胞的激活和趨化因子,增強中性粒細胞和單核細胞向肺的募集[20],導(dǎo)致持續(xù)炎癥反應(yīng)。隆云等[21]研究發(fā)現(xiàn)LTV通氣后第3天至第7天血漿IL-8水平顯著升高,于第3天達到高峰。與大潮氣量通氣或常規(guī)潮氣量通氣相比,LTV可降低IL-6、IL-8水平,且患者預(yù)后更好[22-23],提示IL-6、IL-8是與VILI密切相關(guān)的炎癥因子。而與LTV相比,Roy等[16]的研究發(fā)現(xiàn)APRV顯著降低肺泡灌洗液IL-6水平。Kubiak等[24]的研究發(fā)現(xiàn)APRV顯著降低肺泡灌洗液IL-8水平,這與本研究結(jié)果一致,提示APRV可以比LTV更好地保護肺臟。

3.4機械通氣對肺泡上皮細胞產(chǎn)生周期性機械牽張刺激,導(dǎo)致細胞內(nèi)信號通路活化,引起細胞因子合成和釋放,促進肺部炎癥反應(yīng),是ARDS機械通氣所致肺炎癥損傷的重要環(huán)節(jié)[25]。氣道上皮細胞通過緊密的細胞間連接和在基底膜上的黏附形成對環(huán)境有害刺激的屏障。整合素在上皮細胞的黏附、組織修復(fù)和維持細胞穩(wěn)態(tài)等功能上起著重要作用,其表達水平在多種疾病中具有指導(dǎo)預(yù)后的臨床意義[26-27]。在上皮細胞與基底膜的黏附中,ITGB4尤其重要,這種整合素具有獨特的長細胞質(zhì)尾巴,可促進細胞核內(nèi)小體的裝配[28]。機械損傷肺上皮細胞后ITGB4的表達增加,ITGB4的上調(diào)促進了肺泡上皮細胞創(chuàng)傷修復(fù)能力和抗氧化能力[29]。周期性過度牽張肺泡內(nèi)皮細胞可通過ITGB4促進IL-6、IL-8表達。在心肌細胞中,機械牽張引起p-FAK,激活p38-MAPK,促進炎癥反應(yīng)。在人類正常胸腺上皮細胞中,ITGB4-p38-MAPK信號通路可調(diào)節(jié)IL-6表達[12]。抑制小鼠肺p38-MAPK表達在大潮氣量機械通氣中具有肺保護作用[30]。周期性牽張可誘導(dǎo)氣道上皮細胞p38-MAPK磷酸化,并增加IL-8的分泌[31]。在本研究中,ITGB4、p-FAK、p-p38蛋白表達水平在ARDS造模后顯著增加,且LTV組的增加更為明顯,高于ARDS組和APRV組。本研究結(jié)果及多項研究證實,LTV組比APRV組有更重的病理損傷,機體可能通過代償機制上調(diào)ITGB4來對抗損傷,修復(fù)肺組織。上調(diào)的ITGB4又將細胞外基質(zhì)與細胞間的機械信號轉(zhuǎn)導(dǎo)至細胞內(nèi),引起p-FAK,激活p38-MAPK信號通路,增加了IL-6、IL-8的分泌,加重了LTV組的炎癥反應(yīng)。

綜上所述,APRV機械通氣模式通過ITGB4-p38-MAPK通路顯著改善重度ARDS后炎癥因子IL-8的分泌,可能為ARDS治療提供潛在的干預(yù)靶點。