免疫組化在肺活檢小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌中的應(yīng)用

張偉基

肺癌是肺部支氣管黏膜或腺體的惡性腫瘤, 其早期階段無明顯癥狀, 一般為咳嗽、胸部脹痛、低熱、痰血等。中晚期階段會(huì)出現(xiàn)面頸部水腫、聲音嘶啞和氣促等明顯的臨床癥狀。因肺癌發(fā)病隱匿、起病迅速、預(yù)后極差等特點(diǎn), 導(dǎo)致其發(fā)病率和死亡率逐年遞增［1-4］。據(jù)統(tǒng)計(jì), 全球肺癌新發(fā)病人數(shù)占癌癥總發(fā)病人數(shù)的11.6%, 死亡率為18.4%, 而我國(guó)肺癌新發(fā)病人數(shù)占癌癥總發(fā)病人數(shù)的17.9%, 死亡率為23.8%, 其中男性發(fā)病率和死亡率遠(yuǎn)高于女性, 嚴(yán)重威脅患者的生命健康［5］。大量資料表明, 長(zhǎng)期大量吸煙是導(dǎo)致肺癌發(fā)生的最主要病因之一, 但具體的發(fā)病原因尚不明確。目前, 針對(duì)肺癌的臨床診斷方式主要有影像學(xué)檢查、經(jīng)皮肺穿刺活檢、經(jīng)纖維支氣管鏡肺組織活檢、多種分子標(biāo)記物檢測(cè)等。肺癌的早期診斷對(duì)臨床治療效果及預(yù)后具有重要的參考意義［6］。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是提高肺癌患者生存率的關(guān)鍵, 肺癌中絕大多數(shù)是非小細(xì)胞肺癌, 對(duì)于小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌的鑒別, 肺癌分子標(biāo)記物是診斷肺癌的主要依據(jù), 如CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67 等［7-9］。因此。本研究通過選取2020 年7 月～2023 年3 月在本院診斷的13 例小細(xì)胞肺癌和47 例非小細(xì)胞肺癌患者為研究對(duì)象, 分析肺癌分子標(biāo)記物在患者病理診斷中的重要作用, 旨在為肺癌患者的臨床治療提供重要參考依據(jù), 提高患者的整體生存率及預(yù)后效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年7 月～2023 年3 月在本院診斷的13 例小細(xì)胞肺癌和47 例非小細(xì)胞肺癌患者為研究對(duì)象, 其中男性患者49 例, 女性患者11 例；年齡50～87 歲, 平均年齡(64.68±2.61)歲；非小細(xì)胞肺癌類型包括鱗狀細(xì)胞癌(低分化鱗狀細(xì)胞癌、中分化鱗狀細(xì)胞癌)、腺癌(低分化腺癌、中分化腺癌)、大細(xì)胞癌。納入標(biāo)準(zhǔn)：①意識(shí)清晰, 無精神疾病史或智力障礙；②符合肺癌的臨床篩查標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①不愿配合研究調(diào)查的患者；②術(shù)前已經(jīng)接受過手術(shù)治療或放射治療的患者。

1.2 方法 所有肺癌患者進(jìn)行肺癌類型篩查, 即小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌兩種類型, 臨床上, 相對(duì)成熟的肺癌病灶主要有腺癌、鱗癌和小細(xì)胞癌等, 通常情況下利用光學(xué)電子顯微鏡觀察皮肺穿刺活檢、經(jīng)纖維支氣管鏡肺組織活檢樣本可進(jìn)行以上類型癌細(xì)胞的觀察,但無法準(zhǔn)確有效的進(jìn)行診斷, 需進(jìn)一步檢測(cè)明確診斷結(jié)果。

免疫組化：采用中性福爾馬林溶液(10%)固定標(biāo)本, 然后進(jìn)行石蠟包埋切片, 切片厚度為4 μm, 包埋切片完成后行蘇木精-伊紅染色(HE 染色), 并于光鏡下觀察和記錄結(jié)果。免疫組化采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法, 抗體選用CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67, 所有一抗均為即用型, 設(shè)定陽性對(duì)照組。免疫組化結(jié)果顯示棕黃色為腫瘤細(xì)胞, 若陽性細(xì)胞超過比例的10%則為陽性, 腫瘤細(xì)胞未染色為陰性。

1.3 觀察指標(biāo) 比較非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌患者的肺癌分子標(biāo)記物(CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67)陽性表達(dá)率, 分析肺癌分子標(biāo)記物在小細(xì)胞肺癌(CgA、Syn、CD56、Ki-67)及非小細(xì)胞肺癌(P40、P63、Napsin A)中的診斷效能,包括特異性、敏感性及準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌患者的肺癌分子標(biāo)記物陽性表達(dá)率比較 小細(xì)胞肺癌患者的CgA、Syn、CD56、Ki-67、TTF-1 陽性表達(dá)率均高于非小細(xì)胞肺癌患者, P40、P63、Napsin A 陽性表達(dá)率均低于非小細(xì)胞肺癌患者, 有顯著差異(P＜0.05)；非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌患者的CK7 陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌患者的CK 陽性表達(dá)率均為100.0%。見表1。

表1 非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌患者的肺癌分子標(biāo)記陽性物表率比較［n(%)］

2.2 肺癌分子標(biāo)記物在小細(xì)胞肺癌中的診斷效能CgA、Syn、CD56、Ki-67 診斷小細(xì)胞肺癌的敏感性分別為0.923、0.923、1.000、0.923, 特異性分別為0.957、0.979、0.957、0.936, 準(zhǔn)確率分別為0.950、0.967、0.967、0.933。見表2。

表2 CgA、Syn、CD56、Ki-67 在小細(xì)胞肺癌中的診斷效能

2.3 肺癌分子標(biāo)記物在非小細(xì)胞肺癌中的診斷效能P63、P40 和Napsin A 在非小細(xì)胞肺癌中呈現(xiàn)高陽性率,P40、P63 和Napsin A 診斷非小細(xì)胞肺癌的敏感性分別為0.596、0.553、0.255, 特異性分別為1.000、1.000、1.000, 準(zhǔn)確率分別為0.683、0.650、0.417。見表3。

表3 P40、P63、Napsin A 在非小細(xì)胞肺癌中的診斷效能

3 討論

肺癌為臨床上常見的惡性腫瘤疾病類型, 早期肺癌的診斷較為困難, 因其發(fā)病隱匿, 臨床癥狀不明顯,導(dǎo)致大多數(shù)患者早期的重視程度較低, 而進(jìn)展到晚期后, 往往預(yù)后較差, 導(dǎo)致肺癌的致死率大幅上升。隨著肺癌的疾病進(jìn)展, 患者的病情及治療信心將會(huì)進(jìn)一步惡化, 最終威脅患者的生命健康［10］。腫瘤分子標(biāo)記物是臨床及科研機(jī)構(gòu)常用的疾病診斷與治療的研究方向,腫瘤分子標(biāo)記物是惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中腫瘤細(xì)胞相關(guān)基因的差異表達(dá)產(chǎn)生的基因或蛋白, 分子標(biāo)記物在腫瘤的篩查、輔助診斷、療效監(jiān)測(cè)、預(yù)后判斷等臨床應(yīng)用方面都具有重要的價(jià)值, 檢測(cè)這些基因或蛋白在腫瘤中差異表達(dá)有助于疾病的篩查及診斷。作為腫瘤分子標(biāo)記物必須具備特異性好、敏感性高及檢測(cè)便捷等特點(diǎn)［11］。我國(guó)醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)肺癌的檢查手段較為單一, 同時(shí)醫(yī)師取材中存在許多不規(guī)范的操作方式, 導(dǎo)致肺癌診斷中出現(xiàn)難以鑒別的情形, 影響患者的后期治療與預(yù)后, 增加患者的醫(yī)療成本與時(shí)間。而免疫組化在肺癌類型的鑒別中具有重要的作用, 但免疫組化檢測(cè)小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌的分子標(biāo)記物診斷組合尚未明確, 仍需進(jìn)一步探索。肺癌相關(guān)的分子標(biāo)記物主 要 有CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67, 也是肺癌中應(yīng)用最廣的分子標(biāo)記物。研究表明, 分子標(biāo)記物早期檢測(cè)對(duì)疾病的診斷和治療具有重要的應(yīng)用價(jià)值［12-14］。因此, 本研究通過免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺癌患者中的分子標(biāo)記物表達(dá)水平、指標(biāo)靈敏性及特異性, 旨在分析其在非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌診斷中的應(yīng)用效果及價(jià)值。

王斌等［15］通過支氣管動(dòng)脈灌注化療聯(lián)合栓塞術(shù)治療肺癌患者結(jié)果發(fā)現(xiàn), 經(jīng)治療后, 肺癌患者臨床治療有效率顯著升高。白冰等［16］通過免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺癌患者體內(nèi)分子標(biāo)記物表達(dá)量同樣發(fā)現(xiàn), 癌細(xì)胞特異性和敏感性均在80%以上, 且臨床總有效率高達(dá)70%。本研究結(jié)果顯示, Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67 在非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌患者中的表達(dá)水平具有差異性, P63、P40 和Napsin A 在非小細(xì)胞肺癌中呈現(xiàn)高陽性率, 且指標(biāo)的敏感性和特異性較高。CgA、Syn、CD56、Ki-67 在診斷小細(xì)胞肺癌中的敏感性與特異性較高。結(jié)果提示,非小細(xì)胞肺癌的免疫組織化學(xué)檢查指標(biāo)為P63、P40和Napsin A, 小細(xì)胞肺癌的免疫組織化學(xué)檢查指標(biāo)為CgA、Syn、CD56、Ki-67, 分子標(biāo)記物的免疫組織化學(xué)檢測(cè)能夠?yàn)榉伟┑呐R床診療提供重要的參考價(jià)值。

綜上所述, 肺癌分子標(biāo)記物的病理診斷對(duì)肺癌患者的臨床診療具有重要的參考意義及價(jià)值, 可提高肺癌患者的臨床治療效果, 縮短臨床治療周期。本研究中的不足之處在于樣本量較少, 且使用的分子標(biāo)記物均為傳統(tǒng)的肺癌分子標(biāo)記物, 臨床工作中可能會(huì)有無法鑒別的肺癌類型, 因此需進(jìn)一步增加研究樣本量, 增加分子標(biāo)記物檢測(cè)指標(biāo)。但就目前而言, 本研究結(jié)果對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)病理科肺癌的病理診斷仍具有重要的意義。