中草藥防治畜禽沙門氏菌病研究進(jìn)展

羅芹

貴州省都勻市養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心，貴州都勻 558000

近年來(lái)隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)的不斷大力發(fā)展，高密度養(yǎng)殖規(guī)模下隨之而來(lái)的是細(xì)菌性疾病不斷攀升。其中沙門氏菌作為畜禽養(yǎng)殖業(yè)中一種常見的食源性病原菌，對(duì)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的危害尤為嚴(yán)重。其屬革蘭氏陰性菌，易感多種動(dòng)物，有多種血清型，其中危害畜禽生產(chǎn)的血清型主要是豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和雞白痢沙門氏菌等，給畜禽養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。除此之外，近些年來(lái)沙門氏菌的耐藥也越發(fā)嚴(yán)重，王玉燕等[2]研究發(fā)現(xiàn)37 株沙門氏菌均明顯耐藥，其中對(duì)氨芐西林耐藥率達(dá)到67.57%，對(duì)多西環(huán)素、慶大霉素、四環(huán)素耐藥率也超過(guò)50%，同時(shí)沙門氏菌分離株還存在多重耐藥，多重耐藥率高達(dá)100%。當(dāng)前隨著“禁抗”的實(shí)施，養(yǎng)殖業(yè)迫切需要合適的抗生素替代物緩解耐藥的產(chǎn)生。而使用中草藥作為抗生素替代物緩解耐藥是一種安全、高效的方法。這是由于中草藥富含豐富的活性成分，具有抗菌、抗炎、抗氧化和提高機(jī)體免疫力等作用，此外因其不易產(chǎn)生耐藥性以及綠色、安全的特性一直廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)。因此，本文將在介紹中草藥對(duì)沙門氏菌的作用機(jī)制基礎(chǔ)上，進(jìn)一步闡明中草藥在畜禽沙門氏菌病防治中的應(yīng)用，為中草藥防治沙門氏菌病的應(yīng)用發(fā)展提供一定的參考。

1 中草藥防治沙門氏菌病的作用機(jī)制

1.1 抑 菌

目前大量研究發(fā)現(xiàn)中草藥對(duì)沙門氏菌具有有較好的抑菌效果，王剛等[3]研究發(fā)現(xiàn)黃連、石榴皮、訶子、紅藤、薏苡仁、敗醬草、炒白術(shù)7味中草藥均對(duì)藏豬源沙門氏菌有一定的抑菌效果，其中黃連效果最佳，同時(shí)將其灌喂給感染沙門氏菌的小白鼠后能顯著提高其生存率。朱曉萍等[4]利用瓊脂平板打孔法和稀釋法篩選黃連、金銀花、連翹等在內(nèi)的17味中藥對(duì)腸炎沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)知母、五倍子、黃芩和黃連抑菌效果較好，其中黃連抑菌效果最佳。王斌等[5]以庫(kù)拉索蘆薈的各個(gè)部位為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)庫(kù)拉索蘆薈嫩葉、中葉、老葉均對(duì)腸炎沙門氏菌有一定的抑菌效果，其中抑菌效果最佳的最低抑菌質(zhì)量濃度為0.062 5 g/mL。葛慧芳等[6]研究發(fā)現(xiàn)川芎醇提取物中含有豐富的生物堿川芎嗪和阿魏酸，對(duì)羥自由基的清除效果較好的同時(shí)能顯著抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，其抑菌圈最高能達(dá)到 32.92 mm。史蓉等[7]研究發(fā)現(xiàn)枸杞中主要成分為枸杞多糖、多酚、甜菜堿等，具有一定的抗氧化、抗菌作用和良好的還原能力，對(duì)沙門氏菌也具有較好的抑菌效果。Wang 等[8]研究發(fā)現(xiàn)槲皮素作為一種類黃酮物質(zhì)，具有良好的抗菌效果，通過(guò)體外抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著槲皮素濃度的不斷增加，對(duì)沙門氏菌的抑制效果也不斷增強(qiáng)，同時(shí)給肉雞飼喂42 d 后能顯著降低腸道中沙門氏菌的含量。總之，大量中草藥均能有效抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，在防治沙門氏菌感染方面擁有良好的效果。

1.2 對(duì)細(xì)菌結(jié)構(gòu)的影響

中草藥除了能直接抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)外，還能破壞其菌體重要結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞膜和細(xì)胞壁等，導(dǎo)致細(xì)菌發(fā)生死亡。唐志凌等[9]研究發(fā)現(xiàn)草果提取物對(duì)沙門氏菌有較好的抑菌效果，且隨草果提取物濃度的上升而抑菌效果增強(qiáng)。同時(shí)還導(dǎo)致沙門氏菌菌體黏連和斷裂現(xiàn)象，以及出現(xiàn)不同程度的扭曲，表面粗糙和細(xì)胞邊界不明顯，此外部分細(xì)菌還會(huì)破裂成塊狀，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物外泄和其他破裂的細(xì)菌合在一起，出現(xiàn)菌體堆疊等現(xiàn)象，以及胞外AKP 酶的含量出現(xiàn)顯著上升。王虹懿等[10]研究發(fā)現(xiàn)將綠原酸、Helveticin-M 以及將其共同使用均能抑制腸炎沙門氏菌的生長(zhǎng)，同時(shí)兩者復(fù)合使用能顯著增強(qiáng)抑菌效果和殺菌效果，此外還會(huì)導(dǎo)致菌體相互堆疊，出現(xiàn)溶脹、扭曲，細(xì)胞表面粗糙加重、褶痕變多，形態(tài)嚴(yán)重遭到破壞，內(nèi)容物泄漏，以及細(xì)胞膜通透性明顯增加和細(xì)胞膜受到嚴(yán)重?fù)p害。綜上，中草藥中豐富的活性成分，能通過(guò)破壞沙門氏菌的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等重要結(jié)構(gòu)來(lái)防治沙門氏菌感染。

1.3 對(duì)耐藥性的影響

當(dāng)前沙門氏菌耐藥性日趨嚴(yán)重，因此緩解耐藥變得迫在眉睫，中草藥能有效延緩沙門氏菌耐藥的產(chǎn)生?？镄闳A等[11]研究發(fā)現(xiàn)茶樹精油能明顯抑制耐藥的沙門氏菌的生長(zhǎng)，還通過(guò)破壞沙門氏菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使菌體內(nèi)的堿性磷酸酶釋放；此外，還能抑制其細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致其胞外蛋白質(zhì)量濃度增加，對(duì)生物膜產(chǎn)生較強(qiáng)的清除作用和抑制沙門氏菌鞭毛動(dòng)力。師紅萍等[12]研究發(fā)現(xiàn)高耐藥率的沙門氏菌在苦瓜的作用下耐藥率顯著降低，同時(shí)減弱了沙門氏菌的細(xì)菌黏附性和生物膜的形成，導(dǎo)致耐藥譜發(fā)生顯著改變。由此可知，中草藥能有效減緩沙門氏菌耐藥問(wèn)題，但當(dāng)前對(duì)中草藥影響沙門氏菌耐藥機(jī)制的研究較少，未來(lái)還需要不斷深入研究。

2 中草藥在沙門氏菌病防治中的應(yīng)用

2.1 單味中草藥在沙門氏菌相關(guān)疾病中的應(yīng)用

目前單味中草藥對(duì)沙門氏菌的研究較多。馬保臣等[13]通過(guò)體外抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)包括金銀花、蒲公英、連翹、當(dāng)歸、魚腥草、訶子等多味中草藥均能抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，其中以訶子、魚腥草和蒲公英抑菌效果最好。許二學(xué)[14]發(fā)現(xiàn)在20 種單味中草藥中，訶子、黃連、沙棘、醬敗草、苦參、錦燈籠豬、白頭翁等對(duì)沙門氏桿菌的抑菌效果較好，其中訶子、苦參和黃連的抑菌效果最佳。此外，有研究發(fā)現(xiàn)包括黃芪、何首烏、黃連在內(nèi)的8種中草藥中，黃芪、黃連和大黃對(duì)育肥豬腸道沙門氏菌的抑菌效果最顯著[15]。印雙紅等[16]研究發(fā)現(xiàn)天麻的無(wú)水乙醇提取物主要成分有機(jī)酸類、還原糖、氨基酸及油脂類等，對(duì)熱穩(wěn)定性、紫外光和酸堿穩(wěn)定性較好的同時(shí)能明顯抑制乙型副傷寒沙門氏菌的生長(zhǎng)，其最低抑菌質(zhì)量濃度為25 mg/mL。下面分別單獨(dú)介紹金銀花、蒲公英、肉桂、迷迭香在防治沙門氏菌病中的應(yīng)用情況。

1）金銀花。金銀花屬忍冬科忍冬屬，廣泛分布于中國(guó)大部分地區(qū)。金銀花中富含豐富的抗菌成分，其中主要抗菌成分為綠原酸。研究發(fā)現(xiàn)金銀花具有良好的抗氧化性，能較好地清除自由基，同時(shí)對(duì)沙門氏菌具有良好的抑菌效果，能顯著抑制沙門氏菌的增殖[17]。金銀花醇提液對(duì)沙門氏菌抑制作用明顯，其中對(duì)沙門氏菌的抑菌率為9.8%[18]。魏宇超等[19]通過(guò)牛津杯法和稀釋法測(cè)定綠原酸對(duì)沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)綠原酸對(duì)沙門氏菌具有良好的抑菌效果，最低抑菌質(zhì)量濃度為2.50 g/L。Sun等[20]發(fā)現(xiàn)綠原酸對(duì)冷凍鮮雞食源性病菌腸炎沙門氏菌具有較強(qiáng)的抑制效果，它通過(guò)抑制蘋果酸脫氫酶和琥珀酸脫氫酶的活性，誘導(dǎo)腸炎沙門氏菌的細(xì)胞包膜損傷，進(jìn)而通過(guò)細(xì)胞膜內(nèi)和外膜的損傷破壞細(xì)胞代謝最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。Yang 等[21]也有同樣發(fā)現(xiàn)，綠原酸對(duì)沙門氏菌有較好的抑菌效果，最低抑菌質(zhì)量濃度為6.25 mg/L，在綠原酸的作用下，沙門氏菌的滲透性和可溶性蛋白釋放明顯增強(qiáng)，膜的流動(dòng)性增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞變形萎縮和完整性受損。還有研究發(fā)現(xiàn)綠原酸能減輕小鼠感染沙門氏菌后引起的病理?yè)p傷，改善了腸道細(xì)胞因子的分泌障礙，降低了小鼠的死亡率[22]，同時(shí)在綠原酸治療后小鼠后腸道GAS5表達(dá)上調(diào)，LncRNA GAS5競(jìng)爭(zhēng)性地與miR-23a 結(jié)合，上調(diào)PTEN 并抑制p38 MAPK 通路，表明綠原酸通過(guò)lncRNA GAS5/miR-23a/PTEN軸調(diào)控p38 MAPK 通路，促進(jìn)沙門氏菌感染中的自噬，緩解沙門氏菌的感染。綜上所述，目前金銀花及主要成分綠原酸對(duì)沙門氏菌的體內(nèi)外影響研究皆比較深入豐富，證明金銀花和綠原酸是良好的防治沙門氏菌病的替抗劑。

2）蒲公英。蒲公英，別名地丁，屬于菊科蒲公英屬多年生草本植物，目前有許多研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)沙門氏菌抑菌效果較好。王新等[23]研究發(fā)現(xiàn)蒲公英對(duì)沙門氏菌具有一定的抑菌效果，且隨著濃度的增加，抑菌效果也不斷增加。張強(qiáng)等[24]研究發(fā)現(xiàn)蒲公英提取物對(duì)沙門氏菌具有明顯的抑菌效果，最低抑菌濃度為0.031 25 g/mL。宋曉勇等[25]進(jìn)一步通過(guò)超聲波法有效提取出蒲公英多糖成分，再使用紙片法和瓊脂稀釋法測(cè)定蒲公英多糖對(duì)沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)蒲公英多糖能有效抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，最低抑菌濃度為20 mg/mL。齊仁立等[26]使用常溫水提、醇提法和煎煮水提進(jìn)行提取蒲公英后測(cè)定對(duì)沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)不同的蒲公英提取物均能有效抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，其中最低抑菌質(zhì)量濃度為0.031 25 g/mL。李云祥等[27]通過(guò)索氏提取法來(lái)提取蒲公英脂溶性成分，再通過(guò)紙片抑菌法來(lái)探究蒲公英脂溶性成分對(duì)常見食源性致病菌沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)蒲公英脂溶性提取物對(duì)沙門氏菌的最低抑菌濃度為8 mg/mL，還能通過(guò)破壞沙門氏菌細(xì)胞膜增加其通透性，導(dǎo)致胞內(nèi)核酸物質(zhì)流出，細(xì)胞出現(xiàn)破損嚴(yán)重?？傊?，蒲公英作為物美價(jià)廉的中草藥，防治沙門氏菌擁有廣闊前景，未來(lái)還需更多研究蒲公英在機(jī)體內(nèi)的應(yīng)用機(jī)制。

3）肉桂。肉桂作為中草藥中常見的藥材之一，在國(guó)內(nèi)廣泛種植，其主要成分肉桂醛具有較好的抗菌效果。胡心怡等[28]采用微量稀釋法發(fā)現(xiàn)肉桂醛對(duì)沙門氏菌有較好的抑菌效果，MIC為0.25 mg/mL，同時(shí)隨著濃度提高，抑菌效果更強(qiáng)。此外，它還能夠破壞沙門氏菌的細(xì)胞膜，導(dǎo)致形態(tài)出現(xiàn)黏連、皺縮、塌陷以及表面輪廓不完整現(xiàn)象，而部分還出現(xiàn)折斷現(xiàn)象導(dǎo)致菌體變形更加嚴(yán)重，可以顯著抑制鹽焗雞表面微生物生長(zhǎng)繁殖，從而達(dá)到保鮮效果。吳貴富[29]研究發(fā)現(xiàn)包括迷迭香精油、檸檬精油、桉葉精油、牛至油等17種精油中對(duì)沙門氏菌抑菌效果最強(qiáng)的是肉桂醛。Alibi 等[30]研究發(fā)現(xiàn)肉桂精油對(duì)腸炎沙門氏菌具有較強(qiáng)的抑菌效果，能顯著減少生物膜的形成和抗粘附作用，同時(shí)對(duì)群體感應(yīng)的抑制作用明顯。王康莉等[31]采用牛津杯法和試管二倍稀釋法研究肉桂醛、百里香酚、香蘭素三者對(duì)沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)3 種藥物均顯著抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)，其中肉桂醛效果最佳。綜上可知，肉桂醛對(duì)沙門氏菌具有較好的抑菌效果，機(jī)制研究也比較清晰，但對(duì)畜禽防治沙門氏菌的應(yīng)用還需一定的深入探究。

4）迷迭香。迷迭香是一種芳香的藥用植物，屬于唇形科，在大多數(shù)地中海國(guó)家生長(zhǎng)。迷迭香的抗氧化和抗菌活性主要?dú)w因于其酚類化合物，包括迷迭香酸、紅酸、玫瑰醇、紅醇等。Weerakkody 等[32]研究發(fā)現(xiàn)迷迭香提取物主要成分為醇類，包括1，8-桉葉醇、薄荷-1-烯-8-醇、芳樟醇等對(duì)鼠傷寒沙門氏菌有較好的抑菌效果。此外，也有研究發(fā)現(xiàn)迷迭香提取物中所含的成分同樣為醇類，具有顯著的抗氧化能力和清除自由基能力，同時(shí)對(duì)沙門氏菌具有較好的抑菌作用，而且用迷迭香處理冷藏期間的食物后導(dǎo)致食源性病原菌沙門氏菌顯著減少[33]。Bozin等[34]發(fā)現(xiàn)迷迭香精油能明顯抑制傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌的生長(zhǎng)，能表現(xiàn)出顯著的抗真菌活性，能在半抑制濃度下（3.82 μg/mL）還能顯著降低自由基形成，且呈劑量依賴性。覃蘭遷等[35]研究發(fā)現(xiàn)迷迭香水提物對(duì)沙門氏菌感染小鼠后的肝臟、腎臟和脾臟都具有保護(hù)作用，它可減弱由沙門氏菌引起的上皮細(xì)胞脫落，腸絨毛結(jié)構(gòu)破壞，對(duì)小鼠腸道有一定的保護(hù)作用；同時(shí)它還能導(dǎo)致小鼠感染沙門氏菌血清中的腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6 和白細(xì)胞介素-1β 含量顯著降低，減弱炎癥反應(yīng)。由上可知，迷迭香精油作為體外良好的抗菌劑，在體內(nèi)也能有效防治沙門氏菌引起的感染，是一種潛在的防治沙門氏菌病的替抗物。

2.2 復(fù)方中草藥在沙門氏菌相關(guān)疾病中的應(yīng)用

復(fù)方中草藥富含多種豐富的活性成分，通過(guò)不同的作用機(jī)制抑制沙門氏菌生長(zhǎng)的同時(shí)更加不易產(chǎn)生耐藥性。李萌等[36]采用牛津杯法、二倍稀釋法發(fā)現(xiàn)百里香酚和植酸對(duì)豬沙門氏菌均有一定的抑菌效果，其中百里香酚對(duì)沙門氏菌的最低抑菌濃度為1.56 mg/mL，植酸對(duì)沙門氏菌的最低抑菌濃度為2.18%。陳希文等[37]采用紙片擴(kuò)散法和平板稀釋法測(cè)定包括金銀花、石榴皮、馬齒莧在內(nèi)的24 味中草藥對(duì)豬沙門氏菌的抑菌效果測(cè)定，發(fā)現(xiàn)金銀花、黃芩、訶子抑制效果最明顯，此外以黃芩、黃連、黃柏組成的復(fù)方抑菌效果良好。王冠男等[38]通過(guò)二倍稀釋法來(lái)測(cè)定黃連、五味子、石榴皮、連翹、黃芩等37 種中草藥對(duì)雞沙門氏菌的抑菌效果，發(fā)現(xiàn)石榴皮、黃芩、五味子、黃連、板藍(lán)根、菊花、丁香、連翹等抑菌效果較好，而其中五味子、石榴皮、玫瑰茄效果最佳，在進(jìn)行復(fù)方測(cè)定后發(fā)現(xiàn)玫瑰茄和石榴皮以及玫瑰茄和五味子的復(fù)方抑菌效果最好。王寶剛等[39]采用水煎煮法和乳酸菌發(fā)酵法探究蒲公英、金銀花、菊花及復(fù)方對(duì)甲型副傷寒沙門氏菌抑菌效果，發(fā)現(xiàn)水煎煮法導(dǎo)致蒲公英對(duì)甲型副傷寒沙門氏菌的抑菌效果最顯著，其次是蒲公英、金銀花、菊花組成的復(fù)方；此外，金銀花和菊花均對(duì)甲型副傷寒沙門氏菌抑制效果明顯，采用乳酸菌發(fā)酵后發(fā)現(xiàn)抑菌效果顯著的則是蒲公英、金銀花、菊花組成的復(fù)方以及蒲公英組?？傊?，復(fù)方中草藥擁有更加豐富的抗菌成分，抗菌效果也更加顯著，但不同的提取方法對(duì)其抑菌的效果有一定的差異，而抗菌機(jī)制更加復(fù)雜，難以明確，未來(lái)還需繼續(xù)挖掘。

2.3 中西結(jié)合治療在沙門氏菌相關(guān)疾病中的應(yīng)用

當(dāng)前除了采用復(fù)方中草藥防治沙門氏菌的同時(shí)還可以聯(lián)合抗生素以及其他技術(shù)抑制沙門氏菌的增殖。Sun 等[40]研究發(fā)現(xiàn)超聲聯(lián)合綠原酸處理腸炎沙門氏菌后對(duì)生物膜和浮游細(xì)胞的抑制具有協(xié)同作用，顯著增加了腸炎沙門氏菌細(xì)胞膜的通透性。同時(shí)還能迅速破壞腸炎沙門氏菌細(xì)胞膜的完整性，導(dǎo)致呼吸鏈脫氫酶活性急劇降低，此外，還導(dǎo)致腸炎沙門氏菌生物膜中的多糖含量顯著減少。王新等[41]研究發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方和甲氧芐啶對(duì)沙門氏菌具有一定的抑菌效果，當(dāng)將中藥復(fù)方與甲氧芐啶聯(lián)用時(shí)能顯著增強(qiáng)對(duì)沙門氏菌的抑制效果，且隨著劑量的不斷升高而逐漸增強(qiáng)。由上可知，中西結(jié)合治療在抑制沙門氏菌生長(zhǎng)的同時(shí)能有效緩解抗生素的耐藥，是一種有效防治沙門氏菌病的方法。

3 結(jié) 語(yǔ)

當(dāng)前，隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；陌l(fā)展，抗生素使用的不規(guī)范及濫用導(dǎo)致沙門氏菌的耐藥日趨嚴(yán)重，給畜禽養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)威脅著人類的食品安全。中草藥具有良好的抗菌效果的同時(shí)不易產(chǎn)生抗性，還可以作為飼料添加劑添加到畜禽飼料中，是一種很好的替抗物。大量的中草藥均能有效防治沙門氏菌感染，其中黃連、訶子、金銀花、蒲公英、肉桂、迷迭香對(duì)沙門氏菌具有更好的抗菌效果。但目前中草藥在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用也存在一些問(wèn)題：中草藥成分復(fù)雜且難提取，主要抗菌成分及機(jī)制難以明確；單一中草藥藥效不佳；中草藥緩解耐藥機(jī)制研究較少。因此，未來(lái)還需要深入探究中草藥中的主要抗菌成分，明確其抗菌機(jī)制；面對(duì)單一藥效不佳時(shí)可采用復(fù)方制劑進(jìn)行治療和中西結(jié)合進(jìn)行治療；同時(shí)還需加大對(duì)中草藥緩解耐藥的機(jī)制進(jìn)行深入探究?？偠灾?，中草藥在防治畜禽沙門氏菌病方面擁有廣闊的前景。