育雛育成期飼糧添加益生菌對(duì)蛋雞生長性能、血清指標(biāo)、腸道健康及后續(xù)生產(chǎn)性能的影響

李 鐵,齊夢(mèng)迪,張克英,王建萍,白世平,曾秋鳳,彭煥偉,玄 月,呂 莉,丁雪梅

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所 教育部動(dòng)物抗病營養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 動(dòng)物抗病營養(yǎng)與飼料農(nóng)業(yè)農(nóng)村部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物抗病營養(yǎng)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,成都 611130)

蛋雞完整的生命周期包括三個(gè)階段,育雛期、育成期和產(chǎn)蛋期,其中育雛期和育成期是最細(xì)致的一個(gè)階段,維持此階段腸道健康對(duì)蛋雞的生長發(fā)育及后續(xù)生產(chǎn)具有重要作用。在飼料端“禁抗”的背景下,益生菌在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用引起了廣泛關(guān)注。枯草芽孢桿菌(BS)屬于革蘭陽性菌,它能夠產(chǎn)生內(nèi)生芽孢,具有優(yōu)異的抗逆性,能夠承受高壓、高溫并且易于儲(chǔ)存,可促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收、增強(qiáng)機(jī)體免疫性能及改善腸道環(huán)境[1-3]。屎腸球菌(EF)也是一種革蘭陽性菌,屬乳酸菌類,具有較強(qiáng)的黏附定植能力及耐藥性和抗菌性,可促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收,改善腸道微生態(tài)及提高機(jī)體免疫能力[4-5]。兩種及以上的復(fù)合菌攝入動(dòng)物體內(nèi),可以豐富畜禽腸道菌群多樣性,促進(jìn)腸道健康,不同的益生菌在宿主腸道內(nèi)定植,可能產(chǎn)生不同益生元及有益物質(zhì),進(jìn)而能提高畜禽生產(chǎn)性能[6]。目前,在肉雞上已有較多關(guān)于益生菌單獨(dú)或聯(lián)合添加的研究,但育雛育成期作為蛋雞腸道微生態(tài)環(huán)境構(gòu)建和完善的關(guān)鍵階段,益生菌的使用對(duì)育雛育成期蛋雞的影響研究較少,且育雛育成期益生菌的使用對(duì)后續(xù)生產(chǎn)性能的影響也尚不清楚。因此,本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞育雛育成期生長性能、血清生化和腸道健康的影響以及育雛育成期飼喂效果對(duì)后續(xù)生產(chǎn)性能的影響,以期為生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

枯草芽孢桿菌(BS)有效活菌數(shù)含量為3×1010CFU·g-1、屎腸球菌(EF)有效活菌數(shù)含量為2×109CFU·g-1,均購自濰坊某生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用2×2因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),飼糧中BS添加量包括兩個(gè)水平(0或200 mg·kg-1),EF添加量包括兩個(gè)水平(0或200 mg·kg-1),共4個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)22只雞,共528只1日齡體重相近的羅曼粉蛋雞。試驗(yàn)期30周,試驗(yàn)育雛育成期1～20周進(jìn)行試驗(yàn)處理,產(chǎn)蛋期21～30周所有組飼喂基礎(chǔ)飼糧,不進(jìn)行益生菌處理。

1.3 基礎(chǔ)飼糧和飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川省雅安市四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)科研基地進(jìn)行。育雛期雛雞采用三層籠養(yǎng)模式,每兩個(gè)相鄰雞籠為1個(gè)重復(fù),各重復(fù)位于不同的籠位,均勻分布于雞舍,育雛舍雞籠長寬為80 cm×50 cm,籠高40 cm。育成階段蛋雞轉(zhuǎn)移至育成舍,采用兩層籠養(yǎng)模式,育成舍雞籠長寬為90 cm×80 cm,籠高40 cm,每兩個(gè)相鄰雞籠為1個(gè)重復(fù),產(chǎn)蛋期轉(zhuǎn)移至蛋雞舍,根據(jù)蛋雞舍管理流程進(jìn)行,飼養(yǎng)期間自由飲水。飼養(yǎng)管理措施依據(jù)羅曼粉蛋雞飼養(yǎng)手冊(cè)(2018)進(jìn)行。依據(jù)羅曼粉蛋雞飼養(yǎng)手冊(cè)(2018)將飼糧劃分為5個(gè)階段:育雛階段(1～8周)飼糧分為幼雛料(1～3周)和中雛料(4～8周);育成期(9～20周)分為育成前期料(9～17周)和開產(chǎn)前料(18～20周)。益生菌直接添加到1～20周基礎(chǔ)飼糧中,添加量根據(jù)公司推薦劑量添加。本試驗(yàn)采用粉料,具體基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 樣品采集

1.4.1 血清樣品 試驗(yàn)20周結(jié)束時(shí),每個(gè)重復(fù)選取1只接近平均體重的雞,靜脈采血10 mL,分裝于不抗凝的采血管中,3 500 r·min-1、15 min分離血清,將上層血清分裝入無菌EP管中,-20 ℃保存?zhèn)錅y(cè)。

1.4.2 腸道樣品采集 將采血雞處死后,立即分離十二指腸、空腸、回腸腸段,十二指腸、空腸、回腸去除內(nèi)容物稱重并測(cè)量自然長度。取十二指腸、空腸、回腸中部2 cm,用生理鹽水將腸道食糜沖洗干凈,置于4%多聚甲醛溶液中,進(jìn)行腸組織切片制作及觀察。隨后用載玻片輕輕刮取空腸黏膜,置于EP管中,-80 ℃保存,待測(cè)。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能 試驗(yàn)期間,記錄雞只死淘情況并及時(shí)稱重。試驗(yàn)20周結(jié)束時(shí),提前斷食8 h,正常供水,以重復(fù)為單位稱重并記錄耗料量,計(jì)算1～20周蛋雞平均體重(BW)、平均體增重(BWG)、平均采食量(AFI)和料重比(F/G)

1.5.2 血清生化指標(biāo) 使用自動(dòng)生化分析儀(日立3100)測(cè)定蛋雞20周血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量、堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性。

1.5.3 血清生長相關(guān)激素 采用酶免雞用ELISA試劑盒(由江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司提供)結(jié)合酶標(biāo)分析儀(Rayto RT-6 100)測(cè)定蛋雞20周血清生長激素(GH)、生長激素受體(GHR)、胰島素樣生長因子-Ι(IGH-Ι)的水平。

1.5.4 腸道相對(duì)長度及重量 計(jì)算蛋雞20周的十二指腸、空腸、回腸的相對(duì)重量和長度。計(jì)算公式為:相對(duì)重量=絕對(duì)重量/活重(g·kg-1);相對(duì)長度=絕對(duì)長度/活體重(cm·kg-1)。

1.5.5 腸道形態(tài) 十二指腸、空腸和回腸切片進(jìn)行腸組織切片制作及觀察(送檢四川揚(yáng)克斯特科技有限公司)。將用10%中性甲醛溶液固定好的腸段用乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋進(jìn)行切片,然后用蘇木精-伊紅(HE)染色,顯微成像系統(tǒng)進(jìn)行拍照,采用Image Pro Plus 6.0對(duì)組織中10個(gè)完整絨毛高度(VH)及相對(duì)應(yīng)的10個(gè)隱窩深度(CD)進(jìn)行測(cè)量,統(tǒng)計(jì)出平均值并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(VH/CD)。

1.5.6 空腸黏膜屏障基因表達(dá) 測(cè)定空腸黏膜屏障ZO-1、Occludin和Claudin-1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量,具體操作步驟及計(jì)算方法參照本課題組張琦等[7]的方法。反應(yīng)程序?yàn)?95 ℃ 30 s;95 ℃ 5 s,60 ℃ 34 s,40個(gè)循環(huán);95 ℃ 15 s,65 ℃ 1 min,95 ℃ 15 s。目的基因的 mRNA 相對(duì)表達(dá)量采用2-ΔΔCt計(jì)算。引物序列交予成都生工生物工程有限公司合成,引物設(shè)計(jì)見表2。

表2 相關(guān)基因與引物信息

1.5.7 生產(chǎn)性能 在21～30周產(chǎn)蛋期每天16:00揀蛋,記錄每個(gè)重復(fù)的產(chǎn)蛋個(gè)數(shù)、總蛋重、大小蛋、破蛋數(shù)、軟蛋數(shù)、臟蛋數(shù)、合格蛋數(shù)[ 除去沙殼蛋、軟蛋、破蛋、畸形蛋、臟蛋、大蛋(> 75 g)、 小 蛋(<40 g)]、合格蛋重以及死淘情況,記錄每周的耗料量。參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計(jì)方法》(NY/T 823—2004)計(jì)算平均日采食量(ADFI)、產(chǎn)蛋率、合格蛋率、平均蛋重和料蛋比。計(jì)算公式如下:

產(chǎn)蛋率(%)=(產(chǎn)蛋數(shù)/雞只數(shù))×100;

合格蛋率(%)=(合格蛋數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù))×100;

平均蛋重(g)= 總蛋重/產(chǎn)蛋數(shù);

料蛋比= 采食量/總蛋重;

平均日采食量(g·只-1)= 耗料量(g)/
實(shí)際飼養(yǎng)日蛋雞只數(shù)的累加只數(shù)。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)采用EXCEL 2010初步整理,隨后采用SAS 9.0軟件GLM程序進(jìn)行雙因素分析,模型主效應(yīng)包括枯草芽孢桿菌和屎腸球菌及交互作用,當(dāng)方差分析顯著時(shí),采用Duncan’s方法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)以平均值和SEM進(jìn)行表示,P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞生長性能的影響

由表3可知,添加BS和EF對(duì)蛋雞BW、BWG、AFI、F/G均無顯著影響(P>0.05)。BS和EF對(duì)蛋雞F/G存在極顯著交互作用,聯(lián)合添加顯著提高了F/G(P<0.01)。

表3 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞生長性能的影響

2.2 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞血清生化的影響

由表4可知,添加BS有降低血清ALT含量的趨勢(shì)(P=0.067);添加EF對(duì)蛋雞血清生化無顯著性影響(P>0.05)。根據(jù)交互效應(yīng)結(jié)果可知,聯(lián)合添加顯著降低了蛋雞血清TP、HDL-C、TC的含量(P<0.05)。

表4 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞血清生化的影響

2.3 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞血清生長激素的影響

由表5可知,添加BS對(duì)蛋雞血清GH、GHR和IGF-Ⅰ無顯著影響(P>0.05);添加EF有提高血清GH的趨勢(shì)(P=0.078)。添加BS和EF對(duì)蛋雞生長激素?zé)o顯著交互作用(P>0.05)。

表5 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞生長激素的影響

2.4 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道相對(duì)長度及重量的影響

由表6可知,添加BS和EF均顯著提高了回腸的相對(duì)長度(P<0.05)。添加BS和EF對(duì)腸道相對(duì)長度和重量無顯著交互作用(P>0.05)。

表6 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道生長發(fā)育的影響

2.5 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道形態(tài)的影響

由表7可知,添加BS有提高空腸絨毛高度(P=0.051)和提高隱窩深(P=0.069)的趨勢(shì);添加EF顯著提高了空腸絨毛高度(P<0.05),有提高空腸CD的趨勢(shì)(P=0.072)。添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道形態(tài)無顯著交互作用(P>0.05)。

2.6 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道屏障基因相對(duì)表達(dá)的影響

由表8可知,添加BS顯著提高了空腸黏膜Occludin基因的相對(duì)mRNA表達(dá)量(P<0.05),有提高Claudin-1基因相對(duì)mRNA表達(dá)量的趨勢(shì)(P=0.081);添加EF對(duì)空腸黏膜屏障基因相對(duì)mRNA表達(dá)無顯著影響(P>0.05)。添加BS和EF對(duì)腸道屏障基因表達(dá)無顯著交互作用(P>0.05)。

表8 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道屏障基因表達(dá)的影響

2.7 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋期生產(chǎn)性能的影響

由表9可知,添加BS有提高21～30周平均蛋重的趨勢(shì)(P=0.077),而添加EF對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響(P>0.05)。添加BS和EF對(duì)蛋雞21～30周生產(chǎn)性能無顯著交互作用(P>0.05)。

表9 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞21～30周生產(chǎn)性能的影響

3 討 論

3.1 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞生長性能的影響

蛋雞開產(chǎn)前的體重對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋期生產(chǎn)性能的發(fā)揮具有重要決定作用,目前益生菌對(duì)動(dòng)物生長性能的影響研究較多,但結(jié)果不盡一致。孫玲玲等[8]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加BS顯著提高了五龍鵝雛鵝28 d BWG,降低了F/G;張雪等[9]研究發(fā)現(xiàn),添加BS可顯著降低肉雞21～42 d和1～42 d F/G;袁文菊等[10]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加BS顯著降低了1日齡肉雞1～21 d和1～35 d的F/G。本研究發(fā)現(xiàn),添加BS對(duì)蛋雞生長性能無顯著影響,但與其他組相比,添加BS組有較低的F/G,以及較高的BW和BWG。這與前人研究結(jié)果類似,說明BS可以促進(jìn)的蛋雞的生長性能,原因可能是BS進(jìn)入畜禽腸道后,在腸道進(jìn)行定植,消耗腸道內(nèi)多余的游離氧,改善腸道微生態(tài),促進(jìn)腸道有益菌增殖,減少有害菌定植,并且BS本體及其在腸道內(nèi)的代謝產(chǎn)物可以產(chǎn)生與消化有關(guān)的酶類,例如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等,從而提高飼料轉(zhuǎn)化效率,提高生長性能。BS組在本試驗(yàn)中相較于其他組,具有較高的開產(chǎn)前BW,差異不顯著,在開產(chǎn)后同樣具有較高的產(chǎn)蛋率,差異不顯著。說明開產(chǎn)前BW也會(huì)影響蛋雞開產(chǎn)后產(chǎn)蛋性能。前人關(guān)于EF在家禽生長性能的研究上得到了不同的結(jié)果,燕磊等[11]研究發(fā)現(xiàn),EF對(duì)1～41 d肉雞BW、ADG、F/G及平均日采食量無顯著影響,但都有所提高。韓鵬敏等[12]在乳鴿上的研究發(fā)現(xiàn),EF單獨(dú)添加可以提高乳鴿12～28 d平均日增重,BS和EF混合添加對(duì)平均日增重?zé)o顯著影響。彭眾等[13]發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,添加EF或抗生素試驗(yàn)組肉雞ADFI、ADG及FCR均無顯著差異。本研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加EF對(duì)蛋雞生長性能無顯著影響,與前人研究結(jié)果類似,EF對(duì)畜禽生長性能的影響結(jié)果不同可能與試驗(yàn)動(dòng)物差異、菌株差異以及添加量有關(guān)。本研究BS和EF聯(lián)合使用顯著增加了料肉比。李修宇[14]研究發(fā)現(xiàn),在靈山土雞飼糧中添加2.56×105CFU·kg-1丁梭酸菌,其21 d平均體重相較于添加復(fù)合菌(2.56×105CFU·kg-1丁梭酸菌;6.44×106CFU·kg-1枯草芽孢桿菌)和空白對(duì)照組,提高了0.4%和0.3%,單獨(dú)添加的效果好于兩種菌聯(lián)用。同樣地,韋區(qū)[15]研究發(fā)現(xiàn),在籠養(yǎng)模式下,與復(fù)合益生菌組相比,單獨(dú)添加益生菌提高了50 d三黃雞末體重2.57%。其原因可能是BS和EF均定植于后腸道,兩者聯(lián)用添加量導(dǎo)致某一段腸道內(nèi)含有過多的活性菌從而導(dǎo)致腸道菌群結(jié)構(gòu)失衡,并且大量活性菌繁殖,額外消耗了腸道部分營養(yǎng)物質(zhì),從而導(dǎo)致仔雞生長性能較差[16]。

3.2 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞血清生化的影響

血清生化指標(biāo)可以反映動(dòng)物新陳代謝的具體情況。血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)可以反映出肝的損傷情況,當(dāng)肝受到損傷時(shí),血液中ALT和AST含量會(huì)顯著升高。本研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加BS有降低ALT的趨勢(shì)。史燕云等[17]在蛋雞上的研究表明,添加BS顯著降低了蛋雞血清堿性磷酸酶(ALP)和ALT活性。李安東等[18]研究發(fā)現(xiàn),添加BS、丁酸梭菌及其組合與對(duì)照組相比可以顯著降低血清ALT、AST的含量。本研究與前人結(jié)果基本一致,其原因可能是,在本試驗(yàn)中BS可以通過提高血清中TP的濃度,提高機(jī)體免疫水平,從而提高肝細(xì)胞的解毒功能,對(duì)肝組織起到了保護(hù)作用[19]。

血漿TG、TC、HDL和LDL的含量可以直觀反映出動(dòng)物機(jī)體的脂代謝情況,本研究中,聯(lián)合添加顯著降低了血清TC的水平。Capcarova等[20]指出,在ISA棕雞飼糧中添加EF顯著降低了血清TC含量。Kurtoglu等[21]研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,添加BS顯著降低了血清TC和蛋黃TC的水平。本研究與前人研究一致,說明益生菌兩者聯(lián)合具有促進(jìn)機(jī)體脂質(zhì)代謝的作用,益生菌可能抑制TC合成過程中的關(guān)鍵酶羥甲基戊二酸單酰輔酶A的活性來抑制TC沉積[22]。本研究發(fā)現(xiàn),聯(lián)合添加益生菌,降低了血清HDL-C的含量。彭眾等[13]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加EF顯著提高了肉雞血清HDL-C,降低了LDL-C。任躍昌等[23]研究發(fā)現(xiàn),添加BS顯著降低了蛋雞血清HDL-C。前人關(guān)于益生菌對(duì)血清HDL-C的影響得到了不同的結(jié)果,造成差異的原因可能與動(dòng)物品種、微生態(tài)制劑及使用量不同有關(guān),這也可能是本研究中兩種益生菌聯(lián)合添加生長性能較差的原因。

血漿TP和ALB的含量能夠反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收和代謝水平及機(jī)體免疫情況。本研究發(fā)現(xiàn),兩種益生菌聯(lián)合添加降低了血清TP的含量,而添加BS和EF對(duì)血清TP含量有一定程度提高,差異不顯著。丁浩等[24]研究發(fā)現(xiàn),BS可以提高保育豬生長性能,并且顯著增加了血漿TP含量。申杰等[25]研究發(fā)現(xiàn),EF可以顯著提高42 d肉仔雞血清TP、ALB和球蛋白含量。葉枝林[26]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加EF著提高了42 d肉鴨血清TP和ALB水平。本研究與前人結(jié)果類似,提示飼糧中添加益生菌可以促進(jìn)機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)消化吸收的能力,改善機(jī)體營養(yǎng)水平及提高免疫力[27]。而本研究兩種益生菌聯(lián)用降低了血清TP含量,這說明兩者聯(lián)用可能降低機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收情況及代謝水平,這可能也是本試驗(yàn)中兩種菌聯(lián)合添加,其BW、BWG劣于不添加益生菌及兩種菌單獨(dú)添加的原因。

3.3 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞血清生長激素的影響

動(dòng)物的生長受生長軸的調(diào)控,生長軸包含“下丘腦-垂體-靶器官”,生長激素釋放激素、生長激素、類胰島素生長因子都能影響動(dòng)物的內(nèi)分泌系統(tǒng),從而影響動(dòng)物生長。在本試驗(yàn)中,飼糧中添加EF有提高血清GH的趨勢(shì)。王尚榮[28]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加BS、乳酸桿菌、雙歧桿菌、光合菌及復(fù)合菌都能顯著提高血清生長激素、胰島素、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)的含量。王寶維等[29]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加BS和鋅能夠協(xié)同促進(jìn)肉鵝15周的生長激素水平。前人結(jié)果與本研究基本一致,結(jié)合生長性能可以發(fā)現(xiàn),蛋雞GH的作用較為復(fù)雜,動(dòng)物實(shí)際的生長速度和體重發(fā)育情況并不與血清GH水平相對(duì)應(yīng)。賀淹才等[30]在泰和雞上的研究發(fā)現(xiàn),1和35 d泰和雞血清GH水平顯著高于同日齡的白羽肉雞,但兩者的體重差異正好相反?？赡茉蚴怯捎谶^高的GH抑制了機(jī)體的生長,比如,生長速度緩慢的伴性侏儒雞血清GH顯著高于正常雞,而這種規(guī)律在蛋雞中也有所發(fā)現(xiàn),趙茹茜等[31]研究發(fā)現(xiàn),生長慢的蛋雞血清GH含量顯著高于生長快的肉雞。根據(jù)本研究不能得出益生菌促進(jìn)蛋雞生長是否與血清GH含量有關(guān)的結(jié)論,益生菌與生長激素及生長性能之間的作用關(guān)系仍需進(jìn)一步探討。

3.4 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞腸道健康的影響

家禽對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收主要依靠小腸,小腸吸收面積越大對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用越有利。小腸長度和體增重之間存在一定聯(lián)系,本研究發(fā)現(xiàn),添加BS和EF可以顯著提高回腸長度。關(guān)于益生菌在蛋雞腸道長度重量方面的研究較少,張愛武等[32]研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,飼糧添加BS有提高鵪鶉回腸和十二指腸長度的趨勢(shì)。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究基本一致,其原因可能是益生菌到達(dá)腸道后,消耗腸道多余的氧氣,促進(jìn)有益菌增殖,維持了腸道健康,從而提高了蛋雞腸道發(fā)育。

動(dòng)物腸道形態(tài)的改變會(huì)影響對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,從而影響動(dòng)物表觀的生產(chǎn)性能,腸道的消化吸收能力與腸道絨毛高度、隱窩深度和絨隱比有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加BS和EF均提高了空腸VH。鐘光等[33]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加BS能顯著降低肉仔雞空腸CD。李雪媛[34]在0～16周的蛋雞上研究發(fā)現(xiàn),BS可以顯著降低十二指腸CD,且VH/CD有升高趨勢(shì),此外0～3周的混合添加對(duì)12周的空腸仍具有改善作用。本研究與前人研究基本一致,表明飼糧中添加益生菌對(duì)蛋雞腸道形態(tài)具有一定改善作用,這可能是由于益生菌在腸道中的代謝產(chǎn)物短鏈脂肪酸如:乙酸、丙酸和丁酸等,例如丁酸可以為腸道上皮提供營養(yǎng),促進(jìn)腸黏膜細(xì)胞分化,改善腸道形態(tài)[35]。

緊密連接蛋白的形成對(duì)防止細(xì)菌和抗原細(xì)胞旁擴(kuò)散具有重要意義,一些重要的上皮細(xì)胞緊密連接蛋白,如ZO-1、Occludin和Claudin,有助于維持腸上皮屏障的完整性,對(duì)于腸黏膜損傷的修復(fù)和腸道健康至關(guān)重要[36]。本研究發(fā)現(xiàn)添加BS顯著提高了空腸黏膜Occludin基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量,有提高Claudin-1基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量的趨勢(shì)。陳志永等[37]研究發(fā)現(xiàn),BS可以顯著提高66 d黃羽肉雞空腸緊密連接蛋白Nectin-1以及Occludin-7基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量。潘雪[38]研究發(fā)現(xiàn),BS顯著提高了35 d肉雞腸道ZO-1、Occludin基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量。本研究與前人研究一致,說明BS可促進(jìn)可調(diào)節(jié)腸道屏障功能,其原因可能是BS代謝產(chǎn)物可以通過激活過氧化物酶體增殖物激活受體來上調(diào)緊密連接蛋白表達(dá),從而改善腸道屏障功能,降低腸道通透性,有利于維持腸道健康[39]。本研究中,添加EF對(duì)蛋雞空腸黏膜屏障基因mRNA相對(duì)表達(dá)量無顯著影響。崔百磊等[40]研究發(fā)現(xiàn),EF對(duì)21 d仔豬空腸、回腸Occludin和ZO-1基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量均無顯著影響。本研究與前人研究結(jié)果相似。但董正林[41]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加微囊化糞腸球菌顯著增加 21、42 d肉雞回腸黏膜閉Occludin、Claudin-1 mRNA表達(dá)水平。焦宇洲等[42]研究發(fā)現(xiàn),添加不同劑量的EF均對(duì)感染球蟲病肉雞腸道ZO-1基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量無顯著影響,低劑量對(duì)腸道Occludin基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量無影響,但高劑量可以促進(jìn)Occludin的表達(dá)量。造成以上結(jié)果差異的原因可能與動(dòng)物種類、菌株品種及添加劑量有關(guān),兩種益生菌聯(lián)合添加對(duì)空腸黏膜屏障基因相對(duì)mRNA表達(dá)量無顯著影響可能與添加劑量過大,活菌數(shù)較多,從而影響了腸道微生態(tài)平衡有關(guān)。

3.5 育雛育成期飼糧添加BS和EF對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋期生產(chǎn)性能的影響

在集約化養(yǎng)殖的背景下,產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋率下降,蛋品質(zhì)質(zhì)量差,一直是蛋雞養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問題,本研究發(fā)現(xiàn),育雛育成期添加BS有提高21～30周平均蛋重的趨勢(shì),并且產(chǎn)蛋率相較于不添加益生菌、添加EF組和聯(lián)合添加組均有所提高,但差異不顯著。前人在研究BS對(duì)生產(chǎn)性能的影響上均取得了較好的效果,賀軍等[43]研究發(fā)現(xiàn),BS對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響主要體現(xiàn)在產(chǎn)蛋率上升和平均蛋重增加上,飼糧中添加2×104、4×104、6×104CFU·g-1BS與對(duì)照組相比產(chǎn)蛋率分別提高了1.03%、2.42%、2.12%,差異顯著;平均蛋重分別提高了1.93、2.75、2.78 g,且差異顯著。趙姝嫻等[44]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加BS與對(duì)照組相比,雞蛋重量顯著提高了1.6～3.8 g,料蛋比顯著降低,平均日采食量無顯著差異。本研究與前人研究一致,本研究中育雛育成期添加BS對(duì)產(chǎn)蛋期生產(chǎn)性能的提高,可能原因是本試驗(yàn)BS育雛育成期添加,其菌體進(jìn)入胃腸道后,改善了腸道菌群結(jié)構(gòu),提高了空腸屏障基因Occludin、Claudin-1基因相對(duì)mRNA表達(dá)量,進(jìn)而促進(jìn)了腸道健康,并且育雛期育成期添加BS的效果可以持續(xù)到產(chǎn)蛋期,對(duì)產(chǎn)蛋期腸道健康產(chǎn)生積極影響,另外本試驗(yàn)BS在育成期結(jié)束時(shí)具有較高的BW,也可能是產(chǎn)蛋期具有較高生產(chǎn)性能的原因。本研究中添加EF和兩種菌聯(lián)合添加對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響,可能原因是添加EF和兩種菌聯(lián)合添加對(duì)蛋雞育成期結(jié)束BW無顯著影響,此外對(duì)蛋雞空腸屏障功能改善較少,對(duì)蛋雞腸道健康無明顯促進(jìn),進(jìn)而對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響,本研究進(jìn)一步說明開產(chǎn)前體重對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能至關(guān)重要。

4 結(jié) 論

育雛育成期飼糧添加BS(6×106CFU·g-1)可以提高蛋雞生長性能,改善血清生化指標(biāo),促進(jìn)腸道健康,育雛育成期飼喂效果可以持續(xù)到產(chǎn)蛋期并提高產(chǎn)蛋期生產(chǎn)性能,其效果優(yōu)于EF和兩種益生菌聯(lián)用。