導(dǎo)入25%洛島紅雞血緣對(duì)河南斗雞相關(guān)指標(biāo)的影響

蘇傳琛,焦靜婭,王永帥,羅朋娜,昌興海,黃艷群*

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,鄭州 450046;2.河南省長(zhǎng)興農(nóng)牧有限公司,開(kāi)封 475131)

河南斗雞是我國(guó)珍貴的家禽品種資源,具有較高的食用和觀賞價(jià)值[1-2]。河南斗雞的原產(chǎn)地及中心產(chǎn)區(qū)為開(kāi)封市,另外也有一些分布在洛陽(yáng)、周口和鄭州等地。2009年河南斗雞被列入河南省畜禽遺傳資源保護(hù)名錄[3]。近年來(lái)圍繞河南斗雞種質(zhì)資源,學(xué)者從河南斗雞的組織結(jié)構(gòu)特征[4]、血液生化指標(biāo)[5]、行為學(xué)[6]、染色體組型[7]、蛋品質(zhì)[8]、肉用性能與肉質(zhì)特性[9]、遺傳進(jìn)化[10]等多方面開(kāi)展了研究。國(guó)內(nèi)由于長(zhǎng)期將河南斗雞定義為觀賞品種且長(zhǎng)期散養(yǎng)在民間,因此對(duì)其雜交配套利用研究較少。

相較其它品種,斗雞肌肉更強(qiáng)健、發(fā)達(dá),Ren等[11]通過(guò)基因組結(jié)合轉(zhuǎn)錄組分析揭示了潛在影響斗雞肌肉發(fā)育的基因。Sun等[12]通過(guò)全基因組分析顯示這可能與ISPD基因外顯子2的Arg84Lys 錯(cuò)義突變有關(guān)。Guo等[13]進(jìn)一步的研究表明ISPD基因中Arg84Lys錯(cuò)義突變可促進(jìn)雞肌肉的良好發(fā)育,維持肌纖維穩(wěn)定性。徐廷生等[14-15]的初步研究表明,將河南斗雞和艾維茵二者做雜交,其雜交一代雞肌肉豐滿、肉質(zhì)鮮美。

實(shí)際上,全球范圍內(nèi)已有一些成功利用斗雞進(jìn)行肉雞改良的案例,如科尼什(cornish)是現(xiàn)代的一個(gè)肉用型品種,但事實(shí)上該雞種是通過(guò)用印度的一個(gè)品種(Red Aseels)與英國(guó)的黑胸斗雞雜交培育而成的[16]。日本也在斗雞資源的開(kāi)發(fā)利用上做了不少研究,Iwamoto等[17]對(duì)日本本地斗雞與白洛克雞雜交后代的研究表明,雜交斗雞肌肉特性呈現(xiàn)了較顯著的性別差異,并且在日本用其本地斗雞與洛島紅雞培育的雜交斗雞已被作為一種品牌雞肉成功地進(jìn)行商業(yè)化的推廣與應(yīng)用[18]。

洛島紅雞育成于美國(guó)洛德島州,由紅色馬來(lái)斗雞、褐色來(lái)航雞和九斤黃雞雜交而成,體型中等,屬兼用型優(yōu)質(zhì)雞種,肉質(zhì)鮮美并且抗病能力強(qiáng),常被用作現(xiàn)代高產(chǎn)蛋雞的父系[19]。迄今為止,尚未見(jiàn)河南斗雞與洛島紅雞雜交的研究報(bào)道。

本試驗(yàn)以河南斗雞及洛島紅雞(父本)與河南斗雞(母本)的回交后代為素材,研究導(dǎo)入25%洛島紅雞血緣對(duì)河南斗雞屠體指標(biāo)、肌肉特性、血清生化指標(biāo)及肌纖維發(fā)育和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)的影響,為河南斗雞的新品系選育和配套利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)

從河南省開(kāi)封斗雞保種場(chǎng)選取同一批次飼養(yǎng)的120日齡純種河南斗雞及其雜交雞各10羽,公母各半,共分為4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1只雞。雜交斗雞為純種河南斗雞導(dǎo)入了25%的洛島紅雞血緣的后代,其雜交配套模式如圖1所示。

圖1 雜交模式圖Fig.1 Hybridization pattern diagram

試驗(yàn)雞飼養(yǎng)于半開(kāi)放式雞舍、立體籠養(yǎng),飼養(yǎng)期間雞只的溫度、光照模式參照蛋雞進(jìn)行管理,濕度控制在50%～55%,自由采食、飲水,日糧參照中國(guó)《NY/T 33—2004-雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》中的蛋用雞飼料營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制。試驗(yàn)雞均嚴(yán)格執(zhí)行基礎(chǔ)免疫程序。

1.2 樣品采集

對(duì)選取的試驗(yàn)雞禁食12 h后采取頸動(dòng)脈放血法進(jìn)行屠宰,并測(cè)定相關(guān)屠體指標(biāo)。采集血液,待血液凝固后放入高速冷凍離心機(jī)(德國(guó),5424R),2 000 r·min-1離心15 min,分離血清,并保存在-20 ℃待測(cè)。采集左側(cè)部分胸肌與腿肌放入10%甲醛溶液固定以用于制作常規(guī)石蠟切片,剩余部分經(jīng)液氮冷凍后轉(zhuǎn)到-80 ℃保存以用于后續(xù)RNA的提取;取右側(cè)全部胸肌與腿肌樣品,保存在4 ℃下用于后續(xù)肉品質(zhì)測(cè)定。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 屠宰指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)雞屠宰指標(biāo)的測(cè)定參照《NY/T 823—2020家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法》[20]。測(cè)定指標(biāo)包括宰前活重、屠體重、全凈膛重、器官重、胸肌重和腿肌重,并計(jì)算屠宰率、全凈膛率、器官指數(shù)、胸肌率和腿肌率。

1.3.2 肌肉品質(zhì)測(cè)定 各選取3個(gè)不同位點(diǎn)測(cè)定胸肌、腿肌pH;取胸肌和腿肌樣品,沿肌纖維方向修飾成長(zhǎng)條形(1.5 cm×2.0 cm×3.5 cm)進(jìn)行失水率、剪切力的測(cè)定。失水率的測(cè)定及計(jì)算參照Z(yǔ)hang等[21]方法;剪切力的測(cè)定參照國(guó)家農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《NY/T 1180—2006肉嫩度的測(cè)定 剪切力測(cè)定法》[22]。

1.3.3 肌肉組織學(xué)特性 胸/腿肌采用常規(guī)方法制備石蠟切片(厚度約為2 μm),進(jìn)行蘇木精-伊紅(H.E.)染色,將石蠟切片倒置于10×10全自動(dòng)生物顯微鏡(Motic, BA600-4)進(jìn)行掃描,使用Image-pro Plus(IPP)軟件進(jìn)行圖像分析。每張切片讀取5個(gè)視野,每個(gè)視野選定20根肌纖維,取每根肌纖維長(zhǎng)軸和短軸的平均值作為肌纖維直徑;每張切片另取5個(gè)視野,每個(gè)視野選定5個(gè)面積的肌纖維數(shù)量,從而計(jì)算肌纖維密度。

1.3.4 血清生化指標(biāo) 通過(guò)全自動(dòng)生化分析儀(HITA-CHI Automatic Aralyzer 7600,日本)檢測(cè)血清白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、白蛋白與球蛋白比值(A/G)、膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量。

1.3.5 樣品總RNA提取及cDNA合成 按照TRIZOL試劑說(shuō)明書(shū)(南京諾唯贊)提取各組胸肌和腿肌的總RNA,采用超微量分光光度儀(美國(guó) NanoDrop公司)檢測(cè)總RNA,OD260 nm/OD280 nm比值介于1.8～2.0之間為合格。以 RNA為模板,參照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)(HiScript Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis Kit+gDNA wiper,南京諾唯贊)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,反應(yīng)步驟分為兩步:第一步(除去基因組DNA)反應(yīng)體系:RNase-free ddH2O 16 μL,4 × gDNA wiper Mix 4 μL,RNA 1 μg,在Eppendorf 5331PCR 儀(德國(guó) Eppendorf 公司)中進(jìn)行42 ℃ 2 min的反應(yīng);第二步:第一步反應(yīng)液 16 μL,5 × HiScript III qRT SuperMix 4 μL,在Eppendorf 5331PCR 儀中進(jìn)行37 ℃ 15 min,85 ℃ 5 s的反應(yīng),獲得樣品的cDNA保存在-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

利用Primer5.0設(shè)計(jì)引物,引物信息見(jiàn)表1,引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。以樣品cDNA為模板,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR)(美國(guó) Bio-Rad 公司)檢測(cè)目的基因的表達(dá)量。qRT-PCR采用SYBR Green染料法,反應(yīng)體系為20 μL:2×ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix 10 μL,上、下游引物各0.4 μL,cDNA模板2 μL,RNase-free ddH2O 7.2 μL,在熒光定量PCR儀器上進(jìn)行擴(kuò)增。qRT-PCR反應(yīng)程序:95 ℃ 30 s; 95 ℃ 5 s, 60 ℃ 30 s,共39個(gè)循環(huán)。以β-actin為內(nèi)參,每個(gè)體系均設(shè)置3個(gè)技術(shù)重復(fù)和4個(gè)生物學(xué)重復(fù)。數(shù)據(jù)采用2-ΔΔCt法計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量[23]。

表1 熒光定量PCR引物

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016初步處理后,采用SPSS 23.0生物統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行雙因素方差分析,并用Duncan多重比較進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),分別進(jìn)行同性別不同群體或同群體不同性別的比較分析。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤 (Mean±SEM)”表示。以P<0.05差異顯著,P<0.01差異極顯著為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1 雜交斗雞的配套模式

2.2 雜交斗雞和河南斗雞屠體指標(biāo)的比較

研究表明(圖2),120日齡時(shí)純種河南斗雞的體重顯著高于雜交斗雞(P=0.005),且兩個(gè)群體公雞的體重均顯著高于母雞(P=0.001)。但兩個(gè)群體在全凈膛率、屠宰率、胸肌率、腿肌率、心臟指數(shù)和肝臟指數(shù)上均無(wú)顯著差異(P>0.05,表2)。

不同字母表示差異顯著 (P<0.05);無(wú)字母或含相同字母表示差異不顯著 (P>0.05)。CG.河南斗雞公雞;CM.河南斗雞母雞;ZG.雜交斗雞公雞;ZM.雜交斗雞母雞。n=5。下圖同Different letters indicate significant difference (P<0.05); No letter or the same letter indicates no significant difference (P>0.05). CG. Henan fighting rooster; CM. Henan fighting hen; ZG. Crossbred fighting rooster; ZM. Crossbred fighting hens. n=5. Behind figures follow the same rules

表2 雜交斗雞和河南斗雞的屠體相關(guān)指標(biāo)比較

2.3 雜交雞和河南斗雞的肌肉特性相關(guān)指標(biāo)

數(shù)據(jù)分析表明,在胸肌組織中(表3),肌纖維直徑呈現(xiàn)了顯著的群體效應(yīng)和性別效應(yīng),以母雞的肌纖維直徑顯著高于公雞(P=0.013),純種斗雞的肌纖維直徑顯著高于雜交斗雞(P=0.014)。胸肌肌纖維密度指標(biāo)的性別效應(yīng)顯著(P=0.000),而其群體與性別間的互作效應(yīng)不顯著(P=0.056)。公雞的胸肌肌纖維密度極顯著高于母雞(P=0.000)。雜交公雞的胸肌肌纖維密度極顯著高于純種公雞(P<0.01)。而失水率、剪切力及pH幾個(gè)指標(biāo)在品種間及性別間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 雜交斗雞和純種河南斗雞胸肌肌肉特性相關(guān)指標(biāo)的比較

對(duì)腿肌的肌肉特性(表4)相關(guān)數(shù)據(jù)分析表明,剪切力指標(biāo)的性別效應(yīng)顯著(P=0.02),特別是純種公雞的剪切力顯著高于純種母雞(P<0.05)。腿肌的肌纖維密度呈現(xiàn)了顯著的群體效應(yīng)(P=0.002),以雜交母雞的肌纖維密度顯著高于純種母雞(P<0.05),雜交公雞的肌纖維密度極顯著地高于純種公雞(P<0.01)。此外雜交公雞的腿肌肌纖維密度還顯著高于雜交母雞(P<0.05)。

2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果

熒光定量結(jié)果顯示(圖3),胸肌組織Myosin heavy chain (MyHC)基因的表達(dá)(圖3A)呈現(xiàn)了顯著的性別效應(yīng)(公雞>母雞,P=0.002),雜交公雞MyHC基因的表達(dá)也略高于純種公雞(P=0.057)。Myogenin(MyoG)(圖3B)、Myogenic differentiation 1(MyoD1)基因(圖3C)和Glucose Transporter 12 gene(GLUT12)基因(圖3E)的表達(dá)在兩個(gè)群體和性別間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。而胸肌Glucose Transporter 4(GLUT4)基因的表達(dá)(圖3D)呈現(xiàn)了顯著的互作效應(yīng)(P=0.000)。在同群體不同性別間(圖3D),胸肌GLUT4的表達(dá)水平在純種河南斗雞中以母雞顯著高于公雞(P<0.01),而其表達(dá)在雜交斗雞中則以公雞顯著高于母雞 (P<0.01)。在同性別不同群體中(圖3D),胸肌GLUT4基因的水平在公雞中以雜交公雞顯著高于純種公雞(P<0.01),而在母雞中則以純種母雞顯著高于雜交母雞(P<0.05)。MyHC基因在腿肌(圖4A)中的表達(dá)也呈現(xiàn)了顯著的性別效應(yīng)(公雞>母雞,P=0.023),純種公雞和雜交母雞MyHC基因的表達(dá)量極顯著高于純種母雞(P<0.01)。而MyoG基因(圖4B)、MyoD1基因(圖4C)和GLUT12基因(圖4E)在腿肌中無(wú)顯著的表達(dá)差異(P>0.05)。腿肌GLUT4(圖4D)的表達(dá)也如在胸肌中一樣,呈現(xiàn)了顯著的群體和性別間的交互效應(yīng)(P=0.006),其中雜交母雞腿肌GLUT4的表達(dá)極顯著地高于雜交公雞與純種母雞(P<0.01),而純種公雞腿肌GLUT4的表達(dá)卻略高于純種母雞和雜交公雞(P>0.05)。

圖3 目的基因在雜交斗雞和純種河南斗雞胸肌組織的表達(dá)量Fig.3 The expression level of target genes in pectoral muscles of hybrid chickens and Henan fighting chickens

圖4 目的基因在在雜交斗雞和純種河南斗雞腿肌組織的表達(dá)量Fig.4 The expression level of target genes in leg muscles of hybrid chickens and Henan fighting chickens

2.5 雜交雞和河南斗雞的血清生化指標(biāo)

進(jìn)行雜交斗雞和純種河南斗雞血清指標(biāo)的分析發(fā)現(xiàn)(圖5),ALB在各組間差異不顯著(P>0.05,圖5A)。血清GLO水平呈現(xiàn)極顯著的群體間效應(yīng)(雜交斗雞>河南斗雞,P=0.004), 特別是雜交公雞的血清GLO水平極顯著高于純種公雞(P<0.01,圖5B)。而血清A/G比值呈現(xiàn)了顯著的互作效應(yīng)(P=0.013),其中純種公雞的血清A/G比值顯著高于雜交公雞(P<0.05,圖5C)。血清CHO水平(圖5D)呈現(xiàn)顯著的群體效應(yīng)(雜交斗雞>河南斗雞,P=0.011)和性別效應(yīng)(公雞>母雞,P=0.012),特別是雜交公雞的血清CHO水平極顯著高于雜交母雞和純種公雞(P<0.01)。血清TG水平也呈現(xiàn)了極顯著的性別效應(yīng)(公雞>母雞,P=0.002,圖5E),純種公雞的血清TG水平顯著高于純種母雞(P<0.05),雜交公雞顯著高于雜交母雞(P<0.05)。血清LDL-C顯示了顯著的群體效應(yīng)(雜交斗雞>河南斗雞,P=0.014,圖5F),特別是雜交公雞血清LDL-C顯著地高于純種公雞(P<0.05)。

圖5 雜交雞和河南斗雞血清生化指標(biāo)比較Fig.5 Comparisons of serum biochemistry indexes between hybrid chickens and Henan fighting chickenss

3 討 論

河南斗雞作為珍貴的地方特色品種,為了防止其流失,養(yǎng)殖者極少直接將河南斗雞作為食用資源,這極大地限制了該資源的利用。通過(guò)雜交配套拓展其利用途徑十分必要。通過(guò)地方雞種和高產(chǎn)的洛島紅雞雜交不僅可以提高后代雞只的產(chǎn)蛋性能/繁殖性能;也是培育小型優(yōu)質(zhì)肉雞的有效模式,是實(shí)現(xiàn)后代雞只多用途的有效配套方式。

3.1 雜交雞和河南斗雞屠體指標(biāo)

屠宰性能是衡量產(chǎn)肉性能經(jīng)濟(jì)價(jià)值的重要指標(biāo),也是養(yǎng)殖者追求的經(jīng)濟(jì)指標(biāo)。屠宰率越高,表明畜禽的產(chǎn)肉能力越大。肉質(zhì)性能良好的雞群表現(xiàn)為屠宰率在80%以上,全凈膛率在60%以上[24]。吳信生[25]對(duì)河南斗雞屠宰研究發(fā)現(xiàn),河南斗雞屠宰率在90%左右,全凈膛率在65%左右。本試驗(yàn)研究表明,引入25%的洛島紅血緣的雜交斗雞群體在屠宰相關(guān)指標(biāo)上與純種河南斗雞上沒(méi)有顯著的差異,其胸肌率和腿肌率在兩個(gè)雞種間也沒(méi)有顯著差異,說(shuō)明各組的產(chǎn)肉性能總體較好,雜交后維持了原品種的良好優(yōu)勢(shì)。

3.2 雜交雞和河南斗雞肌肉品質(zhì)特性

常規(guī)肉品質(zhì)指標(biāo)包括pH、剪切力、失水率等幾個(gè)重要指標(biāo)。肌肉pH會(huì)影響到肉的質(zhì)量。剪切力常用來(lái)反映肌肉嫩度的高低[26],剪切力越大,嫩度越差。而失水率是評(píng)價(jià)肌肉保水性的一項(xiàng)重要指標(biāo),失水率越大,保水性越差[27],該指標(biāo)的高低可以直接影響到肉的嫩度、多汁性等特性。本研究發(fā)現(xiàn),總體來(lái)說(shuō)導(dǎo)入25%洛島紅血緣對(duì)河南斗雞pH、失水率和剪切力指標(biāo)沒(méi)有顯著影響,但其腿肌剪切力在公母雞均呈現(xiàn)以純種斗雞高于雜交斗雞的趨勢(shì),這與人們反映河南斗雞的肌肉更有嚼勁的說(shuō)法相一致。

本研究發(fā)現(xiàn),導(dǎo)入25%洛島紅血緣顯著影響了斗雞的肌纖維組織特性。胸肌肌纖維直徑(純種斗雞>雜交雞)和胸/腿肌肌纖維密度(純種斗雞<雜交雞)均在兩個(gè)群體間呈現(xiàn)了顯著差異,表明25%洛島紅血緣的導(dǎo)入進(jìn)一步提升了河南斗雞的肉質(zhì)指標(biāo)。肌纖維特性指標(biāo)在群體和性別間的顯著差異,除了反映了不同群體和性別在肉品質(zhì)上的差異外,也應(yīng)該與河南斗雞經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的戰(zhàn)斗力選育有關(guān)。肌肉是力量的主要源泉,而河南斗雞是我國(guó)著名的斗雞品種,具有戰(zhàn)斗雞的稱(chēng)號(hào),其打斗時(shí)通常是速戰(zhàn)速?zèng)Q。雞的胸肌富含白肌纖維,而腿肌則為混合型(含白肌纖維和紅肌纖維),而白肌纖維也稱(chēng)為快肌,與肌肉的爆發(fā)力緊密相關(guān),有研究表明,快肌纖維較慢肌纖維直徑大[28],密度小,快肌纖維含有較多的收縮蛋白,并且由較大的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元支配,神經(jīng)纖維較粗,傳導(dǎo)速度較快,力量較慢肌纖維強(qiáng)[29]。此外,還觀察到純種河南斗雞公雞的肌纖維密度僅僅略高于母雞,而導(dǎo)入25%洛島紅血緣后進(jìn)一步加大了胸、腿肌的肌纖維密度指標(biāo)在性別間的差異(雜交公雞>雜交母雞,P<0.01)。

3.3 目的基因的變化特性

肌纖維特性(肌纖維直徑和密度等)與肌肉品質(zhì)密切相關(guān)[30-31],對(duì)肌纖維直徑/密度與肉品質(zhì)關(guān)系的研究表明,肌纖維直徑越小,密度越大,肉品質(zhì)越好[32-33]。針對(duì)觀察到純種斗雞和雜交斗雞在肌纖維特性上的顯著差異,本研究采用熒光定量PCR進(jìn)一步檢測(cè)了與肌肉發(fā)育和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)緊密相關(guān)基因的表達(dá)。MyHC基因家族又稱(chēng)肌球蛋白重鏈基因家族,是肌肉收縮的主要功能蛋白,該基因已經(jīng)成為肌肉纖維類(lèi)型劃分的主要分子標(biāo)記[34],MyHC基因具有4種異構(gòu)體,即MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx[35],其中本試驗(yàn)選用的雞MyHC基因又稱(chēng)MyH1D,屬快速型肌纖維,MyHC基因的表達(dá)量與肉質(zhì)呈正相關(guān)[36]。MyoG和MyoD1基因都是生肌調(diào)節(jié)因子(MRFs)家族的成員,主要參與調(diào)控肌肉生長(zhǎng)發(fā)育[37-38]。

選擇性掃描分析發(fā)現(xiàn),肉雞經(jīng)過(guò)幾世代高強(qiáng)度的選擇,其MyHC基因家族中的MyH1A、MyH1B和MyH1D基因受到顯著影響[39]。本試驗(yàn)通過(guò)熒光定量PCR發(fā)現(xiàn),MyHC基因在雞胸肌和腿肌中的表達(dá)均以雄性高于雌性,而在雞胸肌中不同群體間MyHC基因的表達(dá)均無(wú)顯著差異。而MyoG及MyoD1基因的表達(dá)在群體和性別間均無(wú)顯著差異。骨骼肌是攝取和利用葡萄糖的主要部位,GLUT4在促進(jìn)骨骼肌葡萄糖吸收、維持整個(gè)機(jī)體血糖動(dòng)態(tài)平衡中發(fā)揮著核心調(diào)控作用[40-41],另有研究表明,GLUT12可以促進(jìn)多種己糖的轉(zhuǎn)運(yùn)[42]。在本試驗(yàn)中,GLUT12基因表達(dá)無(wú)顯著差異,而雞GLUT4基因在腿肌和腿肌的表達(dá)均呈現(xiàn)了顯著的群體和性別的互作效應(yīng),且在胸肌和腿肌的表達(dá)模式完全不同。這顯示25%洛島紅血緣的導(dǎo)入在改變斗雞的肌纖維特性的同時(shí),也進(jìn)一步改變了葡萄糖攝取與利用模式,相關(guān)的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

3.4 雜交雞和河南斗雞血清生化指標(biāo)

血清生化指標(biāo)是衡量動(dòng)物健康狀況、氧化代謝、生理機(jī)能等的重要指標(biāo)[43]。機(jī)體血清ALB水平能反映動(dòng)物蛋白質(zhì)合成代謝的情況[44]。血清GLO可以一定程度上反映機(jī)體內(nèi)參與免疫反應(yīng)的血清球蛋白水平,其含量的高低是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫水平特別是體液免疫水平的重要指標(biāo)[45]。A/G參數(shù)反映ALB/GLO的比值,該指標(biāo)不僅能反映脾的功能狀況,而且能作為衡量機(jī)體免疫機(jī)能的一項(xiàng)指標(biāo),在雜交雞中A/G值減小,反映了機(jī)體特異性免疫應(yīng)答水平的增強(qiáng),提高了抗病能力[46]。本研究發(fā)現(xiàn),25%洛島紅血緣的導(dǎo)入顯著提高了機(jī)體血清球蛋白水平,降低了公雞A/G比值,這與雜交可以提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、生活力相一致[19,47]。血清中CHO、TG和LDL-C的含量是反映機(jī)體中脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵指標(biāo)[48],LDL-C是機(jī)體轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)的脂蛋白顆粒,負(fù)責(zé)將肝合成的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至血液[49],對(duì)促進(jìn)機(jī)體脂類(lèi)代謝的平衡具有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn),這3個(gè)指標(biāo)均以雄性顯著高于雌性,表明25%洛島紅血緣的導(dǎo)入顯著提高了河南斗雞血清CHO和LDL-C的水平,特別是對(duì)雄性雞的影響更大,其相關(guān)調(diào)控的分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

通過(guò)雜交斗雞與純種河南斗雞的比較表明,導(dǎo)入25%洛島紅雞血緣后對(duì)河南斗雞的多項(xiàng)屠宰指標(biāo)無(wú)顯著影響,但是顯著提升了雞只的血脂水平,提高了公雞骨骼肌的肌纖維密度,顯著影響了GLUT4的表達(dá)模式。