黃精配伍老鷹茶輔助降血脂作用

唐子惟，劉應(yīng)，陶鵬，陳林林，楊聯(lián)堂，彭騰，龍飛

（成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，西南特色中藥資源國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611137）

高脂血癥是現(xiàn)代社會(huì)較高發(fā)的一種慢性疾病，現(xiàn)代社會(huì)生活水平質(zhì)量提高，人們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間伏案工作后傾向于回家“躺平”，從而缺乏鍛煉，加上日常飲食油膩不注重營(yíng)養(yǎng)搭配，長(zhǎng)此以往容易導(dǎo)致體脂增加、體型肥胖、氣血不暢、血脂升高等問(wèn)題。高脂血癥患者雖在身體上不會(huì)感覺(jué)到明顯的不適，但是高血脂會(huì)導(dǎo)致多種并發(fā)癥，如果不及時(shí)采取措施，就有可能導(dǎo)致冠心病、腦梗死、腎功能衰竭等疾病[1]。生活中可通過(guò)運(yùn)動(dòng)、控制飲食、規(guī)律作息及保持良好的心態(tài)等來(lái)預(yù)防高脂血癥。除此之外，可在醫(yī)生的指導(dǎo)下服用相關(guān)藥物，如貝特類、他汀類等，但貝特類藥物存在胃腸道癥狀和骨骼肌癥狀等不良反應(yīng)，他汀類藥物存在肌病和肝臟受損等不良反應(yīng)[2]。因此可在日常飲食中選擇有降血脂作用的食物及健康產(chǎn)品來(lái)預(yù)防高血脂癥。

黃精為百合科植物滇黃精（PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.）、黃精（PolygonatumsibiricumRed.）或多花黃精（PolygonatumcyrtonemaHua）的干燥根莖，是衛(wèi)健委公布的藥食同源藥材之一，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤(rùn)肺、益腎的功效[3]，有研究報(bào)道黃精具有抗炎[4-5]、抗腫瘤[6]、降血糖[7-8]、降血脂[9-11]、增強(qiáng)免疫力[12-13]及肝腎保護(hù)性[14-15]等作用。老鷹茶是以樟科木姜子屬植物毛豹皮樟（LitseacoreanaLevl.var.lanuginosa）的嫩芽、葉或枝葉加工制作而成，在我國(guó)四川、重慶、貴州等地資源較為豐富，它含有豐富的黃酮類、多酚類、多糖、氨基酸等物質(zhì)[16]，是我國(guó)民間長(zhǎng)期飲用的一種茶。老鷹茶不但營(yíng)養(yǎng)豐富，而且生理活性突出，《本草綱目》中記載其有“止咳、祛痰、平喘、消暑解渴”的功效[17]。除此之外，現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示，其具有抑菌抗炎[18-19]、護(hù)肝[20]、抗癌[21]、抗氧化[18，22-23]、降血糖血脂[24-25]等功效，是消食化積、祛暑、利尿、解表的純天然原材料。然而，多年以來(lái)，人們一直自行采摘老鷹茶并將其用于餐飲業(yè)，作為一般的火鍋底料或簡(jiǎn)單的飲用茶，其潛在價(jià)值尚未得到充分開(kāi)發(fā)。為充分開(kāi)發(fā)利用老鷹茶這一地方特色資源，本研究以達(dá)州大竹縣產(chǎn)老鷹茶成熟枝葉為原料，對(duì)黃精與老鷹茶配伍進(jìn)行輔助降血脂作用研究，評(píng)價(jià)其輔助降血脂的功效，以期為老鷹茶資源的開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

無(wú)特定病原體（specific pathogen free，SPF）雄性昆明小鼠[體質(zhì)量（20±2）g，96 只，許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0010]、基礎(chǔ)飼料、高脂飼料（58.6% 基礎(chǔ)飼料+15% 豬油+20% 蔗糖-5% 酪蛋白+1.2% 膽固醇+0.2%膽酸鈉）：斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司。

制黃精（生品黃精來(lái)源于四川達(dá)州，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院龍飛教授鑒定為多花黃精）：成都中醫(yī)藥大學(xué)黃精產(chǎn)業(yè)研究所自制；老鷹茶：四川省達(dá)州市大竹縣；辛伐他?。?0 mg/片）：山東鑫齊藥業(yè)有限公司；羧甲基纖維素鈉溶液（carboxymethylcellulose sodium，CMC-Na）：上海長(zhǎng)光企業(yè)發(fā)展有限公司；血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）測(cè)定試劑盒：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）測(cè)定試劑盒：武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

分析天平（BSA124S-CW）：賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)（TDZ5-WS）：湘儀離心機(jī)有限公司；渦旋混合器（MX-S）、數(shù)控?fù)u床（SLK-O3000-S）、臺(tái)式高速微量離心機(jī)（D3024）、臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（D3024R）：美國(guó)SCILOGEX 公司；優(yōu)普系列超純水器（UPR-II-10T）：四川優(yōu)普超純科技有限公司；數(shù)顯氣浴恒溫振蕩器（THZ-82A）：常熟朗越儀器制造有限公司；高速低溫組織研磨儀（KZ-III-F）：武漢賽維爾生物科技有限公司；全自動(dòng)生化分析儀（BS360S）：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；酶標(biāo)檢測(cè)儀（Epoch）：美國(guó)伯騰儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 藥液制備

1）制黃精：參照文獻(xiàn)[26]的方法制備四蒸四曬黃精。

2）藥液的制備：取一定量的黃精和老鷹茶，分別加10 倍量的水煎煮3 次，每次1 h，濾過(guò)濃縮得到黃精及老鷹茶提取液。黃精配伍老鷹茶的提取液，按黃精和老鷹茶5∶3（質(zhì)量比）混合后，同上煎煮方法制得。

3）辛伐他汀溶液：辛伐他汀片研成粉末，準(zhǔn)確稱取20 mg，加入0.5% CMC-Na 溶液，配制成濃度為1 mg/mL的藥液。

1.3.2 動(dòng)物分組及給藥

在22～25 ℃的環(huán)境中，將96 只小鼠，每8 只為一組飼養(yǎng)于鼠盒中，飼喂普通飼料、純凈水，適應(yīng)性自由飲食一周。實(shí)驗(yàn)時(shí)按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組（NC）、模型組（MC）、陽(yáng)性對(duì)照組（PC）、黃精老鷹茶低（HLD）、中（HLZ）、高（HLG）劑量組、黃精低（HD）、中（HZ）、高（HG）劑量組、老鷹茶低（LD）、中（LZ）、高（LG）劑量組，每組8 只?？瞻讓?duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料，其余各組均給予高脂飼料。高脂飲食一周后，給予低、中、高3 個(gè)劑量組，分別按人體給藥量的9、18、36 倍給藥，即黃精老鷹茶低、中、高劑量組，黃精低、中、高劑量組及老鷹茶低、中、高劑量組分別為193、386、772 mg/kg，依據(jù)小鼠體質(zhì)量，每天相同時(shí)間按10 mL/kg 的體積灌胃一次，空白對(duì)照組和模型組灌胃等體積0.5% CMCNa 溶液；陽(yáng)性對(duì)照組采用同樣的方法灌胃等體積辛伐他汀溶液（10 mg/kg），持續(xù)8 周。第8 周結(jié)束后，獲取實(shí)驗(yàn)材料用于后續(xù)分析。

1.3.3 小鼠一般情況及體質(zhì)量變化監(jiān)測(cè)

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每日觀察和記錄小鼠的飲食、飲水、活動(dòng)和毛色等。每周稱重一次，記錄并觀察，再根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整給藥量，一直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束為止。

1.3.4 指標(biāo)測(cè)定

第8 周結(jié)束后，所有的小鼠均在12 h 內(nèi)禁食不禁水，摘眼球取血至離心管，離心（3 000 r/min，4 ℃），分離血清，并根據(jù)試劑盒的檢測(cè)要求，測(cè)定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C 的含量，以及AST 和ALT 的酶活性。取血后，解剖各組小鼠，迅速摘取各組小鼠的肝臟并稱重，計(jì)算肝臟指數(shù)后，錫箔紙包好保存于-80 ℃低溫冰箱備用。測(cè)定時(shí)，取一定量的組織，用9 倍勻漿介質(zhì)研磨，然后將研磨液3 000～4 000 r/min離心10 min，取上清制備成10% 的組織勻漿，測(cè)定肝組織中SOD 和GSH-Px 活性及MDA 含量。肝臟指數(shù)計(jì)算公式如下。

I=Ml/Mm× 100

式中：I為肝臟指數(shù)，%；Ml為小鼠肝臟質(zhì)量，g；Mm為最后一次稱得的小鼠體質(zhì)量，g。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用SPSS 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多組間使用單因素方差分析（analysis of variance，ANOVA）進(jìn)行對(duì)比，用最小顯著性差異法（least significant difference，LSD）對(duì)兩組間實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05 表示有顯著性差異，P＜0.01 表示有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠一般情況分析

實(shí)驗(yàn)期間，空白對(duì)照組小鼠攝食、飲水、排泄等各方面狀況良好，毛色有光澤；模型組小鼠開(kāi)始兩周同正常組相似，未見(jiàn)明顯異常，隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，其毛色逐漸發(fā)黃，光澤度較差；其余組各方面狀況良好，毛色略有光澤。

2.2 黃精老鷹茶對(duì)小鼠體質(zhì)量及肝臟指數(shù)的影響

黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠體質(zhì)量及肝臟指數(shù)的影響如表1 所示。

表1 黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠體質(zhì)量及肝臟指數(shù)的影響Table 1 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the weight and the liver index of hyperlipidemia mice

由表1 可以看出，模型組肝臟指數(shù)極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），且其它組與模型組比較，肝臟指數(shù)均有所降低，其中黃精老鷹茶高劑量組肝指數(shù)顯著降低（P＜0.05）。此外，各劑量組的肝臟指數(shù)與劑量呈負(fù)相關(guān)，即給藥劑量越高，肝臟指數(shù)越低。表明黃精和老鷹茶均能降低高脂血癥小鼠的肝臟質(zhì)量。

模型組小鼠在第4 周后的體質(zhì)量極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01）；黃精老鷹茶高、中、低劑量組分別在第4、5、7 周后，體質(zhì)量顯著低于模型組（P＜0.05）；黃精中、高劑量組及老鷹茶中、高劑量組的體質(zhì)量均在7 周后顯著低于模型組（P＜0.05），黃精低劑量和老鷹茶低劑量組在飼養(yǎng)全程與模型組均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)果顯示，給藥最后一周（第8 周）黃精老鷹茶高劑量組的體質(zhì)量與空白對(duì)照組差異較小，并低于陽(yáng)性對(duì)照組，表明其可減少小鼠因高脂飲食導(dǎo)致的體質(zhì)量增加。

2.3 黃精老鷹茶對(duì)小鼠血脂水平及相關(guān)酶活性的影響

對(duì)小鼠的血脂及相關(guān)酶活性進(jìn)行檢測(cè)，TC、TG、HDL-C、LDL-C、AST 及ALT 的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2、表3。

表2 黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠血脂水平的影響Table 2 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the blood lipid level in hyperlipidemia mice

表3 黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠相關(guān)酶活性的影響Table 3 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on related enzyme activities in hyperlipidemia mice

從表2 中可以看出，與空白對(duì)照組相比，模型組小鼠血清TC、TG、LDL-C 極顯著升高（P＜0.01），HDL-C極顯著降低（P＜0.01），說(shuō)明模型組小鼠的血脂代謝異常，造模成功。與模型組比較，高劑量的黃精老鷹茶能極顯著降低血清中TC、TG、LDL-C 水平且能升高HDL-C 水平（P＜0.01）；且隨著黃精老鷹茶劑量降低，其降脂效果也減弱，呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，即黃精老鷹茶劑量越高，TC、TG、LDL-C 的濃度越低，HDL-C 的濃度越高。而對(duì)于黃精各劑量組及老鷹茶各劑量組而言，各指標(biāo)濃度雖也呈一定的劑量相關(guān)性，但與模型組相比，僅有黃精高劑量組及老鷹茶高劑量組具有顯著的差異（P＜0.05）。由此可以看出，在相同劑量組下，黃精老鷹茶組效果更好，表明黃精和老鷹茶在一定的劑量下可調(diào)節(jié)小鼠血脂代謝，起到輔助降血脂的作用，且兩者合用效果優(yōu)于單獨(dú)使用。

由表3 可知，模型組小鼠血清中AST 和ALT 的活性與空白對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明模型組小鼠肝損傷。與模型組比較，黃精高劑量組及老鷹茶高劑量組可顯著降低AST 的活性（P＜0.05），老鷹茶高劑量組可顯著降低ALT 的活性（P＜0.05），黃精低劑量組也對(duì)這兩種酶活性具有一定程度的降低作用；黃精老鷹茶中、高劑量組的AST 及ALT 的活性均顯著低于模型組（P＜0.05 或P＜0.01），其余各劑量組與模型組相比無(wú)顯著性差異。在同劑量組的對(duì)比下，黃精老鷹茶組效果更好。以上結(jié)果說(shuō)明，黃精和老鷹茶均可輔助緩解高脂飲食對(duì)小鼠肝臟的損傷，兩者配伍使用效果更佳。

2.4 黃精老鷹茶對(duì)小鼠肝臟抗氧化水平（GSH-Px、MDA、SOD）的影響

黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠肝臟抗氧化水平的影響如表4 所示。

表4 黃精老鷹茶對(duì)高脂血癥小鼠肝臟抗氧化水平的影響Table 4 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the liver antioxidant level in hyperlipidemia mice

由表4 可知，與空白對(duì)照組相比，模型組小鼠肝臟MDA 含量極顯著升高（P＜0.01），GSH-Px 和SOD 的活性顯著降低（P＜0.05），表明長(zhǎng)期飲食高脂飼料對(duì)小鼠肝臟有損害，且抗氧化能力下降。與模型組相比，黃精老鷹茶中、高劑量組的MDA 含量顯著降低（P＜0.05），黃精老鷹茶高劑量組的GSH-Px、SOD 活性顯著升高（P＜0.05）；黃精高劑量組、老鷹茶高劑量組的MDA 含量顯著降低（P＜0.05），老鷹茶高劑量組的GSH-Px 活性顯著升高（P＜0.05）。表明以上各劑量組在一定程度上能幫助小鼠肝臟恢復(fù)抗氧化能力，且同劑量組相比，黃精老鷹茶組效果最好，老鷹茶組次之。

3 討論與結(jié)論

研究結(jié)果表明，長(zhǎng)期食用高脂飼料會(huì)使小鼠血脂水平異常，并對(duì)小鼠肝臟造成一定的損傷，使其抗氧化能力降低，但若給予等劑量的黃精、老鷹茶，可使其血脂水平趨于正常，緩解肝臟損傷，恢復(fù)一定的抗氧化作用。這說(shuō)明黃精、老鷹茶均具有輔助降血脂的作用，并都能起到一定的保護(hù)肝臟的作用，但根據(jù)各劑量組結(jié)果顯示，黃精老鷹茶組配伍效果更好，說(shuō)明兩者合用效果優(yōu)于單獨(dú)使用。

研究發(fā)現(xiàn)黃精多糖能明顯提高肝組織中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（peroxisome proliferator-activated receptor-alpha，PPAR-α）、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體β（peroxisome proliferator-activated receptor-beta，PPAR-β）信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid，mRNA）及蛋白的表達(dá)，降低肝組織中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體β（peroxisome proliferator-activated receptor-gamma，PPAR-γ）、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（sterol regulatory element binding protein-1c，SREBP-1c）、白介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosing factor-alpha，TNF-α）mRNA 的表達(dá)，能有效地控制肝脂質(zhì)的氧化，調(diào)控脂類代謝相關(guān)基因及蛋白質(zhì)的表達(dá)，從而達(dá)到防治高血脂的目的[27]；老鷹茶水提物可通過(guò)影響肥胖小鼠體內(nèi)膽汁酸代謝、AMPK/ACC 信號(hào)通路和腸道菌群結(jié)構(gòu)來(lái)降低小鼠體質(zhì)量及內(nèi)臟脂肪、改善血脂及轉(zhuǎn)氨酶，保護(hù)肝臟功能[24]。老鷹茶總黃酮可通過(guò)抑制TLR4 介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來(lái)改善大鼠非酒精性脂肪性肝炎[28]。

中醫(yī)認(rèn)為，脾失運(yùn)化是高脂血癥的主要病機(jī)，而由于脾虛及肝脾功能紊亂引起的痰濕，則是高脂血癥的病因[29]。黃精具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾的功效，老鷹茶具有祛痰平喘的功效。通過(guò)黃精來(lái)補(bǔ)虛扶正，調(diào)理脾氣，使脾運(yùn)化有常，再兼用老鷹茶祛痰，則痰淤自消，起到輔助降血脂的作用。老鷹茶性涼，配伍補(bǔ)益藥制黃精，能夠制約茶的涼性，而黃精性平、味甘，久服易滋膩，配伍老鷹茶可緩解其滋膩性。兩者合用可互補(bǔ)其不足，并且二者均具有輔助降血脂的作用，可能與多糖、皂苷、黃酮、多酚等活性成分相輔相成，協(xié)同發(fā)揮輔助降血脂作用有關(guān)，其作用機(jī)理尚需進(jìn)一步探討。