南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛生長性能、血清生化和免疫指標(biāo)及激素水平的影響

張俊麗，侯鵬霞，梁小軍

（寧夏農(nóng)林科學(xué)院動物科學(xué)研究所，寧夏 銀川 750002）

南瓜營養(yǎng)豐富，含有大量的碳水化合物、類胡蘿卜素和VC。我國南瓜的總產(chǎn)量約180 萬t，占世界總產(chǎn)量的30%［1-2］。 南瓜籽是南瓜成熟的種子，含有豐富的蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、必需氨基酸、礦物質(zhì)和生育酚等營養(yǎng)成分， 在醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，也是功能性食品開發(fā)方面的研究熱點(diǎn)［3］，具有治療糖尿病、抗菌、抗氧化、抗膀胱結(jié)石、利尿及調(diào)節(jié)免疫力等多種功效［4-5］。 和繼祖［6］研究表明裸仁南瓜籽含有28 種人體需要的元素， 粗脂肪含量50.07%， 粗蛋白含量34.94%， 氨基酸總量10.13%。經(jīng)常食用南瓜籽可起到保健作用，其含有的氨基酸和微量元素可治療前列腺疾病， 對治療頭發(fā)脫落癥和腎臟疾病以及延緩衰老也有較好的作用。 南瓜籽殼是南瓜籽加工利用過程中的副產(chǎn)物，開發(fā)利用南瓜籽副產(chǎn)品資源，一方面可以拓展食品和飼料加工原料的來源， 另一方面還可以解決農(nóng)產(chǎn)品廢料的處理問題。 南瓜籽殼在功能性食品研發(fā)中有較大用途， 能緩解糖尿病患者和高血壓患者的病情，利于患者治療和康復(fù)［7］。 南瓜籽殼約占南瓜籽的60%， 國內(nèi)學(xué)者對南瓜籽殼作為飼料資源的研究較少， 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)加工中南瓜籽殼多被遺棄，造成資源浪費(fèi)，同時對環(huán)境也帶來一定的影響［7-8］。 本研究將南瓜籽殼作為反芻動物的飼料資源加以利用， 通過在西雜肉牛日糧中添加南瓜籽殼開展飼喂試驗(yàn)， 研究南瓜籽殼對不同生長階段肉牛生產(chǎn)性能、 血清和免疫指標(biāo)及激素水平的影響， 以期為南瓜籽殼保健功能性飼料的開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動物

選用不同生長階段的西門塔爾雜交育肥公牛40 頭，包括體重在300 kg 左右、400 kg 左右、500 kg左右、600 kg 左右和700 kg 左右各8 頭，試驗(yàn)牛只來源于銀川市三鑫綠源肉牛養(yǎng)殖合作社。

1.1.2 試驗(yàn)日糧

南瓜籽殼， 購自中寧縣文茂草源生態(tài)飼料有限公司，經(jīng)實(shí)測其風(fēng)干樣主要營養(yǎng)成分為：干物質(zhì)（DM）92.2 g/100 g、粗蛋白（CP）21.73 g/100 g、粗纖維（CF）73.10 g/100 g、中性洗滌纖維（NDF）82.2 g/100 g、酸性洗滌纖維（ADF）71.8 g/100 g、粗灰分（Ash）2.0 g/100 g、粗脂肪（EE）2.4 g/100 g、鈣1.70 g/kg、全量磷1.90 g/kg。

5%預(yù)混料，購自寧夏蜀佳農(nóng)牧科技有限公司，主 要 成 分 為：VA 40 000 ～330 000 IU/kg、VD310 000～130 000 IU/kg、VE≥600 IU/kg、銅0.1～1.0 g/kg、鐵0.6～25.0 g/kg、鋅0.6～4.0 g/kg、錳0.4～5.0 g/kg、水分≤10%、氯化鈉≥8 g/kg。

30%濃縮料， 購自寧夏蜀佳農(nóng)牧科技有限公司，主要成分為玉米干全酒精糟、豆粕、棉粕等，分析保證值粗蛋白 （CP）≥35%， 粗纖維 （CF）≤20.0%， 粗灰分 （Ash）≤25%， 鈣1.5%～4.0%，總磷≥0.5%。

1.1.3 主要試劑

血清生化指標(biāo)測定試劑盒， 購自北京安圖生物工程有限公司； 血清免疫球蛋白及激素測定試劑盒，購自北京北方生物技術(shù)研究所有限公司。

1.1.4 主要儀器設(shè)備

TBA-FX8 型全自動生化分析儀，佳能醫(yī)療系統(tǒng)（中國）有限公司產(chǎn)品；xh6080 型放免儀，西安核儀器廠產(chǎn)品；Rayto RT-6100 型酶標(biāo)分析儀， 深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組及日糧組成

試驗(yàn)于2023 年7—9 月在銀川市三鑫綠源肉牛養(yǎng)殖合作社開展。 選用不同生長階段的西雜肉牛40 頭，根據(jù)體重分為5 組，即試驗(yàn)1 組（體重300 kg 左右）、試驗(yàn)2 組（體重400 kg 左右）、試驗(yàn)3 組（體重500 kg 左右）、試驗(yàn)4 組（體重600 kg 左右）、試驗(yàn)5 組（體重700 kg 左右），每組8 頭，分欄飼養(yǎng)。 各組牛只飼喂的粗飼料以及基礎(chǔ)日糧組成和比例一致，日糧中均添加10%南瓜籽殼粉，與其他飼草料攪拌制成全混合日糧（total mixed ration，TMR）。 日糧精粗比為40∶60。 TMR 日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.2.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)牛分圈散養(yǎng)，試驗(yàn)期為90 d，其中，預(yù)試期20 d、正試期70 d。從預(yù)試期開始，每日6：00 和18：00 分別飼喂1 次， 投喂量由少量過渡到試驗(yàn)設(shè)計(jì)飼喂量。依據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)的日糧比例和重量，準(zhǔn)確稱量后， 用小型立式日糧攪拌機(jī)按照先粗后精的順序混合均勻后飼喂，牛只自由飲水，牛舍環(huán)境條件及飼養(yǎng)管理均保持一致，由專人飼養(yǎng)。

1.2.3 測定指標(biāo)及方法

1.2.3.1 生長性能測定

分別于預(yù)試期開始、 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早晨空腹稱量試驗(yàn)牛體重，每月定期連續(xù)3 d 抽測飼喂量、剩料量，根據(jù)體重和平均采食量數(shù)據(jù)，參考張俊麗等［9］報道的計(jì)算公式，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.2.3.2 血清生化、免疫指標(biāo)及激素水平測定

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天， 試驗(yàn)?？崭刮哺裳? mL，室溫靜置2～3 h 后， 帶回實(shí)驗(yàn)室，3 000 r/min 常溫離心10 min，用移液槍取上清液移入1.5 mL 封存管中，編號記錄，放入-20 ℃冰柜冷凍保存，待測。測定的血清生化指標(biāo)包括總蛋白 （TP）、 白蛋白（ALB）、球 蛋 白（GLB）、尿 素 氮（BUN）、葡 萄 糖（GLU）含量，以及天冬門氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性。

測定的血清免疫指標(biāo)包括免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）含量。

測定的血清激素水平指標(biāo)包括尿酸（UA）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、皮質(zhì)醇（COR）、促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）和降鈣素（CT）含量。

1.3 數(shù)據(jù)整理與分析

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行方差分析，利用Duncan′s 法進(jìn)行組間多重比較。 試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示，P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛生產(chǎn)性能的影響

由表2 可知，隨著肉牛體重的增加，平均日采食量逐漸增加， 試驗(yàn)4 組和5 組的平均日采食量顯著（P<0.05）高于其他組，試驗(yàn)2 組和3 組的平均日采食量顯著（P<0.05）高于試驗(yàn)1 組；試驗(yàn)1組料重比最低，顯著（P<0.05）低于其他組；不同組別的平均日增重差異不顯著（P>0.05）。

表2 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛生產(chǎn)性能的影響

2.2 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清生化指標(biāo)的影響

由表3 可知，試驗(yàn)4 組血清總蛋白（TP）和尿素氮（BUN） 含量顯著高于試驗(yàn)1 組和3 組 （P<0.05）。 不同組別其他血清生化指標(biāo)差異均不顯著（P>0.05）。

表3 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清生化指標(biāo)的影響

2.3 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清免疫指標(biāo)的影響

由表4 可知， 試驗(yàn)2 組的血清免疫球蛋白M（IgM）含量顯著（P<0.05）高于其他組。 不同組別血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）含量無顯著（P>0.05）差異。

表4 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清免疫指標(biāo)的影響 單位：μg/mL

2.4 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清激素水平的影響

由表5 可知， 試驗(yàn)1 組和2 組血清皮質(zhì)醇（COR）水平顯著（P<0.05）高于試驗(yàn)3 組、4 組、5組，試驗(yàn)5 組血清降鈣素（CT）水平顯著（P<0.05）高于其他組， 試驗(yàn)4 組、5 組血清C 反應(yīng)蛋白（CRP）水平顯著（P<0.05）高于試驗(yàn)1 組，試驗(yàn)1 組血清尿酸（UA）水平顯著（P<0.05）高于試驗(yàn)4 組。不同組別血清促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）水平無顯著（P>0.05）差異。

表5 南瓜籽殼對不同生長階段西雜肉牛血清激素水平的影響

3 討論

3.1 日糧添加南瓜籽殼對西雜育肥牛生產(chǎn)性能的影響

我國擁有豐富的南瓜種植資源， 南瓜籽資源也很充裕［8］。 飼草料價格上漲、飼養(yǎng)成本不斷增加是制約我國肉牛產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的關(guān)鍵問題，開發(fā)利用非競爭性粗飼料資源顯得尤為重要。 經(jīng)測定分析， 本研究南瓜籽殼中CP 含量較高， 同時CF、NDF 和ADF 含量均較高， 表明南瓜籽殼可以作為粗飼料資源使用。研究結(jié)果表明，在不同生長階段西雜肉牛基礎(chǔ)日糧中添加相同比例（10%）的南瓜籽殼，隨著肉牛體重的增加，日采食量逐漸增加，體重在600、700 kg 左右的肉牛，其平均日采食量顯著增加， 而體重在500 kg 左右的肉牛平均日增重雖與體重較輕的肉牛相比有提高趨勢， 但未達(dá)到顯著水平。 這可能與南瓜籽殼中ADF 含量較高有關(guān)，從而影響了肉牛的增重，也可能與試驗(yàn)時間為7—9 月，飼養(yǎng)環(huán)境溫度較高，肉牛易受熱應(yīng)激導(dǎo)致能量消耗大有關(guān)。

3.2 日糧添加南瓜籽殼對西雜育肥牛血清生化指標(biāo)的影響

血液生化指標(biāo)的變化可以反映機(jī)體組織器官代謝功能的變化。 血清蛋白質(zhì)水平可以反映機(jī)體蛋白質(zhì)攝入情況及代謝程度［10］，可以間接反映機(jī)體的營養(yǎng)健康狀況［11］。 血清中的TP 主要由ALB與GLB 組成，TP 和ALB 含量高代表代謝旺盛，反之代謝減弱［12］。本研究中試驗(yàn)牛的血清TP 含量為66.44～78.28 g/L，處于正常標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)，體重在500、600、700 kg 左右的肉牛血清TP 含量高于體重在300、400 kg 左右的肉牛， 試驗(yàn)結(jié)果表明日糧添加南瓜籽殼不會對肉牛的蛋白代謝產(chǎn)生負(fù)面影響，且隨著肉牛體重的增加，蛋白代謝水平越高。

血清BUN 含量可反映機(jī)體對含氮物的利用水平，與飼糧中蛋白質(zhì)的攝入以及蛋白質(zhì)在消化道的降解效率有關(guān)［13］，是反映腎功能的重要指標(biāo)［14］，肝臟發(fā)生炎癥時，BUN 含量也會降低。 本研究中，試驗(yàn)4 組、5 組肉牛的血清BUN 含量在文獻(xiàn)報道［15-16］的正常范圍內(nèi)，表明試驗(yàn)牛蛋白質(zhì)代謝正常。

3.3 日糧添加南瓜籽殼對西雜育肥牛血清免疫指標(biāo)的影響

IgG、IgA 和IgM 是動物體內(nèi)重要的免疫球蛋白［9，17］。本研究表明，在試驗(yàn)結(jié)束時，日糧添加南瓜籽殼顯著提高了體重400 kg 左右肉牛的血清IgM含量。 這是否與南瓜籽殼中含有較高含量的蛋白質(zhì)、 生育酚等功能性成分而具有免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)，具體作用機(jī)理還需要進(jìn)一步研究。

3.4 日糧添加南瓜籽殼對西雜育肥牛血清激素水平的影響

COR 是下丘腦-垂體-腎上腺軸分泌的激素，當(dāng)機(jī)體有創(chuàng)傷時，其水平會升高［18］。CRP 是一種由肝臟分泌的急性炎性反應(yīng)蛋白， 其水平與炎癥發(fā)生具有密切聯(lián)系［19-20］。 CT 水平與機(jī)體感染的嚴(yán)重程度有關(guān)［21］。UA 具有清除氧自由基和抗氧化的作用，其水平異常會引起高尿酸血癥和腎病等［22］。本研究中， 體重在500、600、700 kg 左右的育肥牛血清中COR 含量顯著降低， 說明隨著體重增加，采食量增加， 添加南瓜籽殼對腎臟代謝水平有積極影響。

4 結(jié)論

西雜肉牛日糧中添加南瓜籽殼，可增加采食量，提高機(jī)體蛋白質(zhì)利用率，對增強(qiáng)動物免疫力具有一定作用， 可作為一種粗飼料資源進(jìn)行開發(fā)利用。