外周血miR-4465和miR-6089在亞臨床糖尿病性心肌病診斷中的價(jià)值

曹麗慧, 孟憲杰, 李會(huì)

唐山市人民醫(yī)院,河北唐山063000

糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)發(fā)生于無(wú)癥狀的糖尿病人群中為DCM,其發(fā)病率占DCM 50%～70%[1]。迄今為止,DCM仍然沒有特異性的診斷方法,其診斷主要依靠超聲心動(dòng)圖和靈敏度、特異度不足的血清生物學(xué)標(biāo)志物[2]。研究表明,糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)升高是糖尿病患者一系列并發(fā)癥的主要風(fēng)險(xiǎn)因素,但其特異度不足[3-7]。因此,尋找靈敏度及特異度較強(qiáng)的生物學(xué)標(biāo)志物,以輔助DCM診斷有重要意義。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類內(nèi)源性非編碼單鏈RNA分子,與許多疾病病理生理過(guò)程有關(guān)[8]。miR-4465和miR-6089可預(yù)防DCM誘導(dǎo)的心室舒張功能障礙[9]。本研究評(píng)估外周血miR-4465和miR-6089在DCM中的診斷價(jià)值,旨在為臨床診療提供參考。

1 資料和方法

1.1 病例選擇

本研究共選擇2021年6月—2022年1月在本院內(nèi)分泌科門診就診的266例亞臨床Ⅱ型糖尿病受試者。納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡>18歲;②確診為亞臨床糖尿病[10];③自愿參與本研究并出具了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①患者存在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、心臟瓣膜疾病、心房顫動(dòng)、高血壓或任何其他心臟疾病或相關(guān)心衰;②患者存在糖尿病性大血管或微血管并發(fā)癥,包括視網(wǎng)膜病變、糖尿病性腎病、糖尿病性周圍神經(jīng)病變、糖尿病性周圍血管疾病和腦卒中等;③妊娠期哺乳期女性;④其他重要的合并癥,包括腫瘤、甲狀腺功能障礙、肝腎功能障礙、免疫和風(fēng)濕性疾病,或嚴(yán)重的精神疾病。所有受試者均簽署書面知情同意書。本研究得到了本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審查和批準(zhǔn)。

1.2 病例資料收集及分組

糖尿病患者在入組時(shí)均采集了完整的病史,從中收集基本信息,如性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)和糖尿病病程等。所有患者均接受了全面的體格檢查和輔助檢查,包括心電圖、超聲心動(dòng)圖和門控心肌灌注成像等。入組第2天清晨禁食至少8 h后采集外周靜脈血?；颊哂凶笮氖沂鎻埞δ苷系K的證據(jù)但射血分?jǐn)?shù)保持不變,并且沒有明顯的隱匿性冠狀動(dòng)脈疾病確診為DCM[11]。266例患者中確診DCM患者49例(DCM組),余下的隨機(jī)選取49例非DMC患者為對(duì)照組。

1.3 外周血miR-4465和miR-6089水平檢測(cè)

采用mirVana PARIS提取試劑盒(Ambion,Austin,TX,美國(guó))從200 μL血漿中提取總RNA。采用50 pmol/L Caenorhabditis elegans miR-39 (cel-miR-39)作為參照校正血漿miRNA水平。使用ABI 7900HT實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)系統(tǒng)(Applied Biosystems,CA,美國(guó))檢測(cè)miR-4465和miR-6089水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用IBM SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用組間t檢驗(yàn)分析;計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn);以多因素Logistic回歸分析DCM的危險(xiǎn)因素;ROC判斷miR-4465和miR-6089對(duì)DCM的診斷價(jià)值;采用Pearson相關(guān)性分析miR-4465、miR-6089的相關(guān)性。P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的比較

DCM組的糖尿病病程和HbA1c高于對(duì)照組(P<0.05),外周血miR-4465和miR-6089水平低于對(duì)照組(P<0.05;表1)。

表1 兩組患者一般資料和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的比較

2.2 多因素Logistic回歸分析影響DCM發(fā)生的危險(xiǎn)因素

以發(fā)生DCM為因變量(發(fā)生=1,未發(fā)生=0),以上指標(biāo)中將有差異的因素為自變量(糖尿病病程、HbA1c、miR-4465及miR-6089)納入Logistic回歸分析,結(jié)果顯示糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089為DCM發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05;表2)。

表2 影響DCM發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.3 外周血miR-4465和miR-6089對(duì)DCM的診斷價(jià)值分析

外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM具有良好的價(jià)值(圖1和表3)。

圖1 外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM的ROC曲線圖

表3 外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM的價(jià)值

2.4 外周血miR-4465和miR-6089與糖尿病病程、HbA1c的相關(guān)性分析

糖尿病病程和HbA1c均與外周血miR-4465和miR-6089呈負(fù)相關(guān)[對(duì)照組:糖尿病病程(r=-0.283,-0.345,P<0.05);HbA1c(r=-0.230,-0.271,P<0.05);DCM組:糖尿病病程(r=-0.428,-0.355,P<0.05);HbA1c(r=-0.275,-0.463,P<0.05)]。

3 討 論

DCM目前尚無(wú)診斷的金標(biāo)準(zhǔn),其分子機(jī)制也尚未完全闡明,且并無(wú)特異度的臨床癥狀[12]。目前臨床上普遍采用超聲心動(dòng)圖來(lái)評(píng)估糖尿病患者可能存在的心臟功能障礙嚴(yán)重程度[13]。超聲心動(dòng)圖檢查和特定的血漿生物學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)相結(jié)合是目前診斷早期DCM的最佳策略。與正常健康人群相比較,糖尿病患者人群的外周血miR-4465和miR-6089水平顯著下調(diào)[14]。外周血miR-4465和miR-6089水平也被確定為糖尿病的預(yù)測(cè)因子[15]。本研究結(jié)果顯示,DCM患者的外周血miR-4465和miR-6089水平低于對(duì)照組患者,且糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089為糖尿病患者發(fā)生DCM的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究中所有血液樣本都是從無(wú)癥狀的DCM患者和相應(yīng)對(duì)照組人群中收集,在評(píng)估外周血miR-4465和miR-6089水平在DCM早期診斷中的價(jià)值結(jié)果顯示,外周血miR-4465和miR-6089的AUC分別為0.882和0.909,具有較好的診斷學(xué)價(jià)值。

糖尿病患者的左心室舒張功能障礙、主動(dòng)脈硬化、心肌纖維化和心力衰竭的發(fā)生發(fā)展與高血糖水平相關(guān)[16-17]。因此,HbA1c被確定為糖尿病患者發(fā)生心血管疾病的重要風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子。此外,除了血糖的水平和控制情況,糖尿病的持續(xù)時(shí)間也是糖尿病患者發(fā)生心血管疾病以及心衰的重要預(yù)測(cè)因素[18]。本研究結(jié)果顯示,糖尿病病程和HbA1c均與外周血miR-4465和miR-6089呈負(fù)相關(guān),提示外周血miR-4465和miR-6089可能參與糖尿病的進(jìn)展,且與單獨(dú)的參數(shù)相比,HbA1c、糖尿病病程和外周血miR-4465、miR-6089水平的組合在早期DCM診斷中可能具有更高的診斷價(jià)值。

綜上所述,本研究結(jié)果顯示,外周血miR-4465和miR-6089對(duì)于糖尿病患者DCM具有較好的診斷價(jià)值。